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盐酸胍法构建骨肉瘤细胞适配体ssDNA文库可行性

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北华大学学报（自然科学版） 2025年第1期26卷 49-54页

作者：魏唐文魏兵黄丹菊梁昭珺张宇飞王秀娟傅桂莲梁骥桂林医学院医学检验学院广西桂林541004 桂林医学院公共卫生学院广西桂林541004 北华大学医学技术检验学院吉林吉林132013

目的探讨链霉亲和素-生物素(Streptavidin-Biotin,STV-Biotin)系统偶联盐酸胍(Guanidine hydrochloride,G-HCl)法构建骨肉瘤细胞适配体文库的可行性。方法将备选寡核苷酸文库与目标细胞(骨肉瘤细胞U2-OS)进行选择性结合,应用PCR法将... 详细信息

目的探讨链霉亲和素-生物素(Streptavidin-Biotin,STV-Biotin)系统偶联盐酸胍(Guanidine hydrochloride,G-HCl)法构建骨肉瘤细胞适配体文库的可行性。方法将备选寡核苷酸文库与目标细胞(骨肉瘤细胞U2-OS)进行选择性结合,应用PCR法将与细胞结合的寡核苷酸扩增成双链DNA(Double stranded DNA,dsDNA);dsDNA被生物素标记后与Streptavidin Sepharose(S.S)亲和层析介质结合,应用G-HCl法解离并纯化,制备目标单链寡核苷酸(Single stranded DNA,ssDNA)文库,以经典NaOH法为对照;将两种方法制备的单链文库分别与U2-OS结合,进行亲和性、回收率比较。结果 G-HCl方法获得的筛选文库ssDNA与U2-OS亲和性及ssDNA回收率高于经典NaOH法。结论 STV-Biotin系统偶联G-HCl成功制备了用于骨肉瘤细胞的适配体,为肿瘤适配体ssDNA文库构建提供了新的思路与方法。

关键词：适配体骨肉瘤细胞盐酸胍 PCR 单链寡核苷酸

多响应曲面优化-毛细管电泳-激光诱导荧光快速检测食源性致病菌

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高等学校化学学报 2009年第6期30卷 1121-1127页

作者：渠凌丽黎源倩郑波何成艳何玲李永新四川大学华西公共卫生学院卫生检验教研室成都610041

建立了食品中常见致病菌:沙门菌的invA基因、大肠杆菌O157∶H7的rfbO157基因、志贺菌的ipaH基因及副溶血性弧菌Vpara(16S-23S rDNA IGS)基因的多重PCR产物-毛细管电泳快速检测方法.根据沙门菌、大肠杆菌O157∶H7、志贺菌及副溶血性弧菌... 详细信息

建立了食品中常见致病菌:沙门菌的invA基因、大肠杆菌O157∶H7的rfbO157基因、志贺菌的ipaH基因及副溶血性弧菌Vpara(16S-23S rDNA IGS)基因的多重PCR产物-毛细管电泳快速检测方法.根据沙门菌、大肠杆菌O157∶H7、志贺菌及副溶血性弧菌的特异性基因保守序列设计出多重PCR引物,优化PCR扩增反应体系.采用多响应曲面法优化毛细管电泳的分离条件,以含有DNA荧光染料SYBR GreenⅠ的1.0%甲基纤维素为筛分介质,通过毛细管电泳-激光诱导荧光同时检测4种常见致病菌的PCR扩增产物.在优化的多重PCR反应体系和毛细管筛分电泳条件下,此方法可以同时检测出沙门菌的invA基因、大肠杆菌O157∶H7的rfbO157基因、志贺菌的ipaH基因及副溶血性弧菌Vpara(16S-23S rDNA IGS)基因的多重PCR扩增产物,25 min内即可完成检测.迁移时间的日内相对标准偏差为0.92%～1.58%.通过多响应曲面的优化,有效改善了毛细管电泳对DNA分子的分离能力.

关键词：多响应曲面优化毛细管电泳激光诱导荧光检测食源性致病菌多重PCR

毛细管电泳-激光诱导荧光检测肌腱和肌腱细胞中的羟脯氨酸

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分析化学 2006年第10期34卷 1441-1444页

作者：邹晓莉周春艳黎源倩曾红燕四川大学华西公共卫生学院卫生检验教研室四川大学华西公共卫生学院卫生检验教研室成都610041

建立毛细管电泳-激光诱导荧光检测（CE-LIF）分析羟脯氨酸的方法。肌腱和肌腱细胞中的胶原蛋白碱水解生成氨基酸,经异硫氰酸荧光素（FITC）衍生,采用LIF-CE分离测定胶原蛋白特异性氨基酸-羟脯氨酸。羟脯氨酸在0.5μg/L;×103μg/L浓度... 详细信息

建立毛细管电泳-激光诱导荧光检测（CE-LIF）分析羟脯氨酸的方法。肌腱和肌腱细胞中的胶原蛋白碱水解生成氨基酸,经异硫氰酸荧光素（FITC）衍生,采用LIF-CE分离测定胶原蛋白特异性氨基酸-羟脯氨酸。羟脯氨酸在0.5μg/L;×103μg/L浓度范围内线性关系良好;检出限为0.5μg/L。相对迁移率和相对峰高的相对标准偏差（RSD）分别为5.0%和6.1%。测定了60份肌腱和9份细胞样品,加标回收率为95%;10%。将所建立的毛细管电泳方法与高效液相色谱法（HPLC）进行比较,两者测定结果相对误差为-1.9%;.0%。本法仅需一次荧光标记,操作简单、快速灵敏,12min内完成一个分析周期,适于测定肌腱和细胞样品。

关键词：羟脯氨酸激光诱导荧光检测毛细管电泳肌腱细胞

大理市售梅产品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠的分析与评价

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现代预防医学 2015年第1期42卷 44-46页

作者：杨弋星张态杨新华大理学院公共卫生学院卫生检验学教研室

目的了解大理市售梅产品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠的使用情况。方法采用高效液相色谱法,对随机选取的大理市售梅产品5大类、22种不同口味类型的66个梅子样本,分别检测山梨酸、苯甲酸和糖精钠含量并进行结果分析。结果苯甲酸、山梨酸和... 详细信息

目的了解大理市售梅产品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠的使用情况。方法采用高效液相色谱法,对随机选取的大理市售梅产品5大类、22种不同口味类型的66个梅子样本,分别检测山梨酸、苯甲酸和糖精钠含量并进行结果分析。结果苯甲酸、山梨酸和糖精钠检出最高检出含量值分别为298.1mg/kg、254.0 mg/kg和774.7 mg/kg,均未超出国家卫生标准最大使用量。结论本次采集的大理市售梅子产品山梨酸、苯甲酸和糖精钠的最高检出含量未超出国家卫生标准最大使用量,但不同品牌和种类梅产品中均检出了所测食品添加剂,应该加强梅产品的抽查和监督力度,保障食品安全。

关键词：梅产品食品添加剂检测

非螯合物浊点萃取-石墨炉原子吸收法测定水中痕量铊Ⅲ

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分析化学 2007年第11期35卷 1654-1656页

作者：肖宇郑波张克荣四川大学华西公共卫生学院卫生检验学教研室成都610041 四川大学华西公共卫生学院卫生检验学教研室

建立不需形成螯合物的浊点萃取-石墨炉原子吸收法测定水中铊Ⅲ的新方法。用浊点萃取技术富集水中铊Ⅲ,石墨炉原子吸收法测定。经考察,浊点萃取环境水体中铊Ⅲ的最优条件为pH12,90℃水浴2h,Triton X-114浓度2.0g/L;在优化后实验条件下,... 详细信息

建立不需形成螯合物的浊点萃取-石墨炉原子吸收法测定水中铊Ⅲ的新方法。用浊点萃取技术富集水中铊Ⅲ,石墨炉原子吸收法测定。经考察,浊点萃取环境水体中铊Ⅲ的最优条件为pH12,90℃水浴2h,Triton X-114浓度2.0g/L;在优化后实验条件下,方法测定铊Ⅲ的检出限为0.018μg/L;相对标准偏差为8.89%~13.7%(C=0.1μg/L及1.0μg/L,n=7);加标回收率为98.0%~101%。本法适于水中痕量铊Ⅲ的测定。

关键词：浊点萃取石墨炉原子吸收法铊

微流控芯片-激光诱导荧光快速检测4种食源性致病菌

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分析化学 2008年第12期36卷 1667-1671页

作者：李永新黎源倩渠凌丽何成艳四川大学华西公共卫生学院卫生检验教研室

建立了食品中4种常见食源性致病菌的微流控芯片快速检测方法。根据副溶血弧菌的Vpara(16S-23S rDNA IGS)基因、沙门菌的invA基因、大肠杆菌O157:H7的rfbO157基因和志贺菌的ipaH基因序列设计了4对特异性引物,对上述致病菌进行四重PCR扩增... 详细信息

建立了食品中4种常见食源性致病菌的微流控芯片快速检测方法。根据副溶血弧菌的Vpara(16S-23S rDNA IGS)基因、沙门菌的invA基因、大肠杆菌O157:H7的rfbO157基因和志贺菌的ipaH基因序列设计了4对特异性引物,对上述致病菌进行四重PCR扩增,采用微流控芯片-激光诱导荧光检测食品中4种常见致病菌的多重PCR扩增产物。优化了多重PCR扩增和微流控芯片电泳分离的实验条件。当芯片电泳的筛分介质HPMC-50浓度为2.2%、溴乙锭(EB)含量为3.75μmol/L、电场强度为120 V/cm时,pUC Mix DNAMarker-8和待测致病菌的多重PCR扩增产物可以实现基线分离,600 s内即可完成上述4种致病菌的同时检测,迁移时间的日内相对标准偏差为0.74%~2.09%。本方法能够检出1×102cfu/mL的副溶血弧菌、沙门菌、大肠杆菌O157:H7和志贺菌。方法特异性高,所设计的引物在10种非目的菌株体系中均未见扩增的片段。将本法应用于食品中上述致病菌的测定,获得了满意的结果,为常见食源性致病菌的快速检测提供了一种新的可靠分析手段,对保障食品安全具有重要的现实意义。

关键词：微流控芯片激光诱导荧光检测食源性致病菌多重聚合酶链反应

氨基功能化磁性纳米吸附剂固相萃取水中多环芳烃

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分析化学 2022年第7期50卷 1093-1112页

作者：吴越王丽王晓南阎小青山西医科大学公共卫生学院卫生检验教研室

采用溶剂热法制备了氨基功能化磁性纳米吸附剂(MNPs-NH),并将其用于水介质中多环芳烃(PAHs)的磁固相萃取(MSPE),实验结果表明，此吸附剂可选择性地吸附具有4～6个苯环的高分子量PAHs。分子模拟计算以及与其它吸附剂的对比实验结果表明... 详细信息

采用溶剂热法制备了氨基功能化磁性纳米吸附剂(MNPs-NH),并将其用于水介质中多环芳烃(PAHs)的磁固相萃取(MSPE),实验结果表明，此吸附剂可选择性地吸附具有4～6个苯环的高分子量PAHs。分子模拟计算以及与其它吸附剂的对比实验结果表明，此吸附剂表面的氨基不仅可促进吸附剂在水中良好分散，而且可通过氢键作用增强对PAHs的吸附。优化了影响萃取效率的各项MSPE参数，建立了水中高分子量PAHs的磁固相萃取-高效液相色谱-荧光检测(MSPE-HPLC-FLD)方法。本方法在0.008～20 ng/mL范围内线性关系良好，检出限为0.002～0.02 ng/mL,定量限为0.004～0.12 ng/mL,高分子量PAHs在两个浓度加标水平(1和10 ng/mL)下的回收率为59.7%～99.0%,相对标准偏差为1.7%～9.0%。本方法可用于环境水样中高分子量PAHs的检测。

关键词：氨基功能化磁固相萃取多环芳烃氢键

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卫生检验专业课程改革的调查报告

中国卫生检验杂志 2014年第4期24卷 602-603页

作者：杨弋星张态何作顺大理学院公共卫生学院卫生检验学教研室云南大理671000

卫生检验是一门实践性很强的学科，学生专业课程的设置涉及到毕业生的培养质量。目前国内卫生检验专业的专业课程主要涉及理化检验和微生物检验两部分，其中理化检验方面主要包括《空气理化检验》、《水质理化检验》、《食品理化检验》... 详细信息

卫生检验是一门实践性很强的学科，学生专业课程的设置涉及到毕业生的培养质量。目前国内卫生检验专业的专业课程主要涉及理化检验和微生物检验两部分，其中理化检验方面主要包括《空气理化检验》、《水质理化检验》、《食品理化检验》和《生物材料检验》四门课程。毕业生今后从事检验工作的基本知识、基本操作、基本技术以及常规仪器的使用主要通过这四门理化检验课程的学习获得，所以理论和实验教学的开展对学生专业技术学习尤为重要。大理学院2005年开始招收卫生检验专业学生，至今已有4届毕业生走向了卫生系统的工作岗位。为提高在校学生的培养质量和毕业生适应工作岗位的需要，探索新的教学模式和教学规律，在教学中开展与时俱进的课程改革，对2005级-2008级完成毕业实习返校的学生进行了调查。

关键词：卫生检验理化检验课程教学改革

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加强卫生检验专业本科毕业论文指导

中国卫生检验杂志 2014年第12期24卷 1814-1815页

作者：杨弋星张态何作顺大理学院公共卫生学院卫生检验学教研室云南大理671000

毕业论文是对学生在校期间基础知识、专业技能及知识综合运用能力的检验,也是本科毕业生申请学士学位的必需环节,同时也是衡量教学水平、学生毕业与学位资格的重要依据[1-3]。本院于2005年独立开办了卫生检验专业,至今已有4届毕业生走... 详细信息

毕业论文是对学生在校期间基础知识、专业技能及知识综合运用能力的检验,也是本科毕业生申请学士学位的必需环节,同时也是衡量教学水平、学生毕业与学位资格的重要依据[1-3]。本院于2005年独立开办了卫生检验专业,至今已有4届毕业生走向工作岗位,在教学中不断摸索适合卫生检验人才的培养模式[3]。本文结合本院实际,通过对2010届-2013届卫生检验专业本科毕业论文的选题设计、数据收集、

关键词：卫生检验本科毕业生毕业论文质量措施