微流控芯片-激光诱导荧光快速检测4种食源性致病菌
Microfluidic Chip Electrophoresis with Laser-Induced Fluorescence Detection for Rapid Analysis of Four Foodborne Pathogenic Bacteria作者机构：四川大学华西公共卫生学院卫生检验教研室
出 版 物：《分析化学》 (Chinese Journal of Analytical Chemistry)
年 卷 期：2008年第36卷第12期
页 面：1667-1671页
核心收录：
学科分类：09[农学] 0903[农学-农业资源与环境]
基 金：国家自然科学基金(No.30571622) 教育部博士基金(No.20030610029)资助项目
主 题：微流控芯片 激光诱导荧光检测 食源性致病菌 多重聚合酶链反应
摘 要：建立了食品中4种常见食源性致病菌的微流控芯片快速检测方法。根据副溶血弧菌的Vpara(16S-23S rDNA IGS)基因、沙门菌的invA基因、大肠杆菌O157:H7的rfbO157基因和志贺菌的ipaH基因序列设计了4对特异性引物,对上述致病菌进行四重PCR扩增,采用微流控芯片-激光诱导荧光检测食品中4种常见致病菌的多重PCR扩增产物。优化了多重PCR扩增和微流控芯片电泳分离的实验条件。当芯片电泳的筛分介质HPMC-50浓度为2.2%、溴乙锭(EB)含量为3.75μmol/L、电场强度为120 V/cm时,pUC Mix DNAMarker-8和待测致病菌的多重PCR扩增产物可以实现基线分离,600 s内即可完成上述4种致病菌的同时检测,迁移时间的日内相对标准偏差为0.74%~2.09%。本方法能够检出1×102cfu/mL的副溶血弧菌、沙门菌、大肠杆菌O157:H7和志贺菌。方法特异性高,所设计的引物在10种非目的菌株体系中均未见扩增的片段。将本法应用于食品中上述致病菌的测定,获得了满意的结果,为常见食源性致病菌的快速检测提供了一种新的可靠分析手段,对保障食品安全具有重要的现实意义。
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