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PINK1基因对缺氧缺血性脑损伤新生小鼠细胞凋亡及自噬的影响

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中国当代儿科杂志 2016年第3期18卷 263-269页

作者：黄阳陈洪菊朱将虎赵凤艳屈艺母得志四川大学华西第二医院儿科/出生缺陷相关妇儿疾病教育部重点实验室四川成都610041

目的研究PINK1基因对缺氧缺血性脑损伤新生小鼠细胞凋亡及细胞自噬的影响。方法将野生型和PINK1基因敲除型新生小鼠各72只分为野生型假手术组(SWT)、野生型模型组(MWT)、基因敲除假手术组(SKO)及基因敲除模型组(MKO)。模型组小鼠行右侧... 详细信息

目的研究PINK1基因对缺氧缺血性脑损伤新生小鼠细胞凋亡及细胞自噬的影响。方法将野生型和PINK1基因敲除型新生小鼠各72只分为野生型假手术组(SWT)、野生型模型组(MWT)、基因敲除假手术组(SKO)及基因敲除模型组(MKO)。模型组小鼠行右侧颈总动脉结扎后置于低氧舱中(含8%氧气和92%氮气)2.5h,假手术组不予结扎和低氧处理。缺氧缺血处理后24h,采用TTC染色法检测各组新生小鼠脑梗死程度;采用免疫组化法检测各组脑组织中活化型半胱天冬酶-3(CC3)的表达;采用TUNEL法检测细胞凋亡;采用免疫荧光法及Westernblot法检测细胞自噬相关蛋白LC3的表达。结果 MKO组小鼠脑组织梗死程度较MWT组小鼠明显减轻(P相关蛋白LC3表达较MWT组减少,进一步检测证实自噬指标LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值较MWT组降低(P<0.05)。结论敲除PINK1基因对新生鼠缺血缺氧脑损伤具有神经保护作用。

关键词： PINK1基因基因敲除缺氧缺血脑损伤细胞凋亡细胞自噬新生小鼠

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PINK1与相关疾病

中国当代儿科杂志 2016年第8期18卷 781-786页

作者：黄阳母得志四川大学华西第二医院儿科/出生缺陷相关妇儿疾病教育部重点实验室四川成都610041

PINK1作为一种线粒体膜蛋白,具有蛋白激酶活性。PINK1参与了许多生物代谢过程。自发现PINK1蛋白与帕金森病相关以来,研究者一直在探究其生物学功能。PINK1位于线粒体外膜,可以通过磷酸化细胞中多种蛋白,调节细胞功能。同时PINK1与线粒... 详细信息

PINK1作为一种线粒体膜蛋白,具有蛋白激酶活性。PINK1参与了许多生物代谢过程。自发现PINK1蛋白与帕金森病相关以来,研究者一直在探究其生物学功能。PINK1位于线粒体外膜,可以通过磷酸化细胞中多种蛋白,调节细胞功能。同时PINK1与线粒体关系密切,可通过多条通路调控线粒体的形态、功能及自噬,但具体的调控方式尚未完全阐明。由于PINK1表达广泛,特别是在高能耗组织中高表达,具有多种生物学活性,因此其可能参与了多种疾病的发生发展及调控。最初发现其基因型的突变与常染色体隐性遗传性帕金森疾病的发生密切相关,近期发现其可能还与新生儿缺氧缺血性脑病、肿瘤、糖尿病等疾病的发生发展相关。深入研究PINK1的功能将有助于揭示其生物学功能,为寻找干预PINK1相关疾病的靶点奠定基础。该文就近年来PINK1生物学功能及与其相关疾病的研究进展作一综述。

关键词：磷酸酶张力蛋白诱导的激酶1 线粒体自噬帕金森病缺氧缺血性脑病肿瘤

2012—2022年产前超声诊断先天性肾脏和尿路畸形

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中国医学影像技术 2023年第12期39卷 1764-1769页

作者：高倩倩罗红四川大学华西第二医院超声科出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室四川成都610041

目的对比2012—2022年我国二孩、三孩政策实施前、后产前超声诊断胎儿先天性肾脏和尿路畸形(CAKUT)的准确率及妊娠结局。方法回顾性分析政策前组53857名单胎妊娠孕妇(含158胎CAKUT)及政策后组167627名单胎孕妇(含521胎CAKUT),观察组间胎... 详细信息

目的对比2012—2022年我国二孩、三孩政策实施前、后产前超声诊断胎儿先天性肾脏和尿路畸形(CAKUT)的准确率及妊娠结局。方法回顾性分析政策前组53857名单胎妊娠孕妇(含158胎CAKUT)及政策后组167627名单胎孕妇(含521胎CAKUT),观察组间胎儿CAKUT发病率、产前超声诊断CAKUT准确率及胎儿出生率的差异。结果政策后组CAKUT发病率0.31%(521/167627),政策前组为0.29%(158/53857),前者高于后者(P>0.05)。政策后组CAKUT孕妇年龄大于政策前组[(29.2±4.6)岁vs.(27.0±4.3)岁,P相关异常、下尿路相关异常及单纯CAKUT准确率差异均无统计学意义(P均>0.05)。2组胎儿CAKUT均以肾外泌尿系统异常占比最高。产前超声诊断政策后组合并其他系统异常胎儿CAKUT准确率(92.54%vs.84.29%)及后尿道瓣膜形成准确率均高于政策前组(100%vs.50.00%,P均部679胎CAKUT胎儿中,143胎终止妊娠,536胎继续妊娠。组间CAKUT胎儿出生率,以及上尿路相关异常、下尿路相关异常及合并其他系统异常CAKUT胎儿出生率差异均无统计学意义(P均>0.05);政策后组单纯CAKUT胎儿出生率高于政策前组(97.61%vs.93.18%,P二孩、三孩政策后,我国产前超声诊断CAKUT孕周提前、准确率提高,单纯CAKUT胎儿出生率增加。

关键词：胎儿泌尿系疾病超声检查,产前

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3.0 T无对比剂冠状动脉MR血管成像在川崎病儿童的应用价值

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中华放射学杂志 2022年第10期56卷 1058-1063页

作者：文凌仪周忠琴伏川阿折十干莫郭应坤四川大学华西第二医院放射科出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室成都610041

目的探讨3.0 T无对比剂冠状动脉MR血管成像(CMRA)技术评估川崎病(KD)患儿冠状动脉瘤(CAA)的诊断准确度和应用价值。方法收集2019年5月2日至2022年1月19日在四川大学华西第二医院诊断为KD的75例患儿,所有患儿在1周内均同时进行无对比剂C... 详细信息

目的探讨3.0 T无对比剂冠状动脉MR血管成像(CMRA)技术评估川崎病(KD)患儿冠状动脉瘤(CAA)的诊断准确度和应用价值。方法收集2019年5月2日至2022年1月19日在四川大学华西第二医院诊断为KD的75例患儿,所有患儿在1周内均同时进行无对比剂CMRA和经胸超声心动图(TTE)检查,其中26例患儿在两周内同时进行了冠状动脉CT血管成像(CCTA)或冠状动脉造影(ICA)检查。以CCTA或ICA为金标准,分别统计MRCA和TTE在每例患儿、每支冠状动脉、冠状动脉近段和中远段显示CAA的灵敏度和特异度,并采用配对卡方检验进行对比。比较MRCA和TTE对KD患儿冠状动脉病变检出的差异。结果本研究所有患儿成功完成CMRA。其中同时做了CCTA或ICA的26例患儿中,按每支冠状动脉为单位,MRCA显示CAA的灵敏度高于TTE[MRCA组97.7%(43/44)、TTE组84.1%(37/44);χ^(2)=4.17,P<0.05],且CMRA在近段[MRCA组96.2%(50/52)、TTE组71.2%(37/52);χ^(2)=10.08,P<0.05]和中远段[MRCA组100%(21/21)、TTE组52.4%(11/21);χ^(2)=7.11,P<0.05]显示CAA的灵敏度均高于TTE。在75例患儿中,总共有115个CAA被CMRA发现,但其中只有75.7%(87/115)的CAA被TTE观察到。TTE未观察到的CAA中,在右冠状动脉(RCA)、左冠状动脉主干(LMCA)、左冠状脉前降支(LAD)和左冠状动脉回旋支(LCX)占比分别为57.1%(16/28)、7.1%(2/28)、25.0%(7/28)和10.7%(3/28);与CMRA对比,TTE在LMCA、RCA、LAD和LCX近段未观察到的CAA占比39.3%(11/28),在LAD、RCA和LCX中远段未观察到的CAA占比60.7%(17/28)。在75例KD患儿中,CMRA总共发现8例患儿有血栓形成,但其中62.5%(5/8)未被TTE观察到。结论3.0 T无对比剂CMRA无创、无辐射,对CAA诊断性能高,适用于KD患儿的冠状动脉血管成像,尤其是对KD患儿RCA和冠状动脉中远段的病灶有良好的诊断价值。

关键词：磁共振成像冠状动脉川崎病经胸超声心动图

外源性端粒酶逆转录酶基因转染对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的神经保护作用

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中国当代儿科杂志 2016年第12期18卷 1296-1301页

作者：赵凤艳屈艺张莉黄兰刘海婷李姣母得志四川大学华西第二医院儿科/出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室四川成都610041

目的探讨端粒酶逆转录酶(TERT)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后细胞凋亡的影响。方法将72只新生大鼠分为假手术组、空质粒组、HIBD组和TERT组。用改良Rice法制备新生大鼠HIBD模型。采用苏木精-伊红染色法观察脑组织病理改变。空质... 详细信息

目的探讨端粒酶逆转录酶(TERT)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后细胞凋亡的影响。方法将72只新生大鼠分为假手术组、空质粒组、HIBD组和TERT组。用改良Rice法制备新生大鼠HIBD模型。采用苏木精-伊红染色法观察脑组织病理改变。空质粒组和TERT组分别于术后0.5 h,经侧脑室注射pc DNA3.1空质粒或TERT真核表达质粒pc DNA3.1-TERT。采用Western blot法检测各组大鼠脑组织TERT、凋亡诱导因子(AIF)和活化型半胱氨酸蛋白酶3(CC3)的蛋白表达水平;采用TUNEL法检测各组神经细胞凋亡情况。结果与假手术组相比,HIBD组、空质粒组和TERT组大脑皮层中TERT蛋白表达增加(P<0.01);与空质粒组和HIBD组相比,TERT组TERT蛋白表达明显增加(P<0.01)。与假手术组相比,空质粒组和HIBD组AIF和CC3蛋白表达、细胞凋亡指数均显著增加(P<0.01);与空质粒组和HIBD组相比,TERT组AIF和CC3蛋白表达、细胞凋亡指数均明显减少(P<0.01)。结论 TERT可抑制缺氧缺血诱导的神经细胞凋亡,在新生大鼠HIBD中具有一定的神经保护作用。

关键词：缺氧缺血性脑损伤端粒酶逆转录酶细胞凋亡新生大鼠

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不明原因不孕妇女的阴道微生态异常与治疗

中华预防医学杂志 2023年第11期57卷 1813-1819页

作者：黄佳铃王霞于凡李明远唐袁婷四川大学华西第二医院检验科出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室成都610041

阴道微生态是一个复杂而动态的环境,在女性的健康生殖中起着重要作用。不明原因不孕症的发生机制尚不明确,阴道微生态失调和低稳定性可能与不明原因不孕有关,服用益生菌复合制剂恢复正常阴道微生态可能是治疗不明原因不孕症的一种安全... 详细信息

阴道微生态是一个复杂而动态的环境,在女性的健康生殖中起着重要作用。不明原因不孕症的发生机制尚不明确,阴道微生态失调和低稳定性可能与不明原因不孕有关,服用益生菌复合制剂恢复正常阴道微生态可能是治疗不明原因不孕症的一种安全且天然的方法。本文就国内外治疗不明原因不孕使用的益生菌复合制剂包含菌种的分离部位、复合制剂的使用方式、疗程以及最后的治疗效果进行综述,旨在为益生菌复合制剂治疗不明原因不孕在临床上的应用提供依据。

关键词：女性不孕生态学微生态益生菌治疗

组蛋白去乙酰化酶在小鼠神经元发育中的作用与机制研究

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中国当代儿科杂志 2021年第3期23卷 294-299页

作者：白雨薇关梦龙郑涛李世平屈艺母得志四川大学华西第二医院儿科/出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室四川成都610041

目的探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)1和HDAC2在小鼠神经元发育中的作用及机制。方法将具有突触蛋白1启动子Cre重组酶(Synapsin1-Cre)的小鼠与HDAC1&2flox/flox小鼠杂交,得到在神经元中特异性敲除HDAC1&2的小鼠纳入敲除组,同窝出生的未敲除H... 详细信息

目的探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)1和HDAC2在小鼠神经元发育中的作用及机制。方法将具有突触蛋白1启动子Cre重组酶(Synapsin1-Cre)的小鼠与HDAC1&2flox/flox小鼠杂交,得到在神经元中特异性敲除HDAC1&2的小鼠纳入敲除组,同窝出生的未敲除HDAC1&2的小鼠纳入对照组。观察小鼠一般状态,绘制生存曲线。收集生后14 d敲除组和对照组小鼠脑组织,采用Western blot法及免疫组化法检测神经元发育标记物神经元核抗原(NeuN)、轴突标记物非磷酸化神经丝蛋白重链(np-NF200)、磷酸化神经丝蛋白重链(p-NF200)及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路下游磷酸化核糖体S6(p-S6)蛋白表达水平。结果HDAC1&2敲除小鼠通常于1个月内死亡,体型和脑组织明显小于对照组,表现出震颤及紧抱后肢等运动功能异常。敲除组小鼠NeuN、np-NF200、p-NF200、p-S6蛋白表达量均较对照组明显减少(P<0.05,n=3)。结论缺失HDAC1和HDAC2导致小鼠神经元成熟障碍,轴突发育不良。推测这种变化与mTOR信号通路有关。

关键词：神经元发育组蛋白去乙酰化酶哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路小鼠

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MicroRNA在癫癎中的研究进展

中国当代儿科杂志 2015年第2期17卷 201-206页

作者：甘靖蔡浅云母得志四川大学华西第二医院儿科/出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室四川成都610041

微小核糖核酸(MicroRNA,miRNA)是一类短链非编码RNA,主要通过控制信使RNA的翻译起到转录后水平的调节作用。癫癎是一种严重的、慢性的神经系统疾病,大多在儿童期发病。大脑在病理的情况下会表达独特的miRNA,并与癫癎的发生有关。miRNA... 详细信息

微小核糖核酸(MicroRNA,miRNA)是一类短链非编码RNA,主要通过控制信使RNA的翻译起到转录后水平的调节作用。癫癎是一种严重的、慢性的神经系统疾病,大多在儿童期发病。大脑在病理的情况下会表达独特的miRNA,并与癫癎的发生有关。miRNA拓展了研究者对于癫癎发生机制的认识,使其成为新的治疗靶点和有效的抗癫癎新药。该文介绍了与癫癎发生密切相关的几种miRNA在癫癎发生、发展中的作用。

关键词：微小核糖核酸癫癎发病机制

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CK2β促进PINK1S自我磷酸化

生物医学工程学杂志 2015年第5期32卷 1056-1060页

作者：秦思月姜长安四川大学华西第二医院出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室成都610041

本研究旨在探究PTEN诱导激酶1短亚型(PINK1S)在细胞质中激酶活性调节机制。首先,通过免疫共沉淀筛选的方法证明PINK1S能够和酪蛋白激酶2(CK2)蛋白复合体中的β亚基(CK2β)相互结合,但不与其他两个催化亚基α1(CK2α1)和α2(CK2α2)结合... 详细信息

本研究旨在探究PTEN诱导激酶1短亚型(PINK1S)在细胞质中激酶活性调节机制。首先,通过免疫共沉淀筛选的方法证明PINK1S能够和酪蛋白激酶2(CK2)蛋白复合体中的β亚基(CK2β)相互结合,但不与其他两个催化亚基α1(CK2α1)和α2(CK2α2)结合。其次,同时过表达CK2β和PINK1S,利用免疫共沉淀的方法纯化PINK1S,将得到的PINK1S用生物素标记的磷酸化蛋白检测标签(Phos-tagTM Biotin)检测其磷酸化水平,发现CK2β能够促进PINK1S的自我磷酸化。最后,利用RNA干扰技术,建立干扰CK2β的细胞株;在对照组和干扰CK2β的实验组细胞内表达PINK1S,发现缺少CK2β表达导致PINK1S的磷酸化水平降低。本文研究表明:CK2β作为胞质PINK1S自我磷酸化的辅助亚基,对其活性起到正调节作用。

关键词：帕金森氏病 PTEN诱导激酶1短亚型酪蛋白激酶2 β亚基自我磷酸化