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人alpha防御素1真核表达载体的构建及其对A549细胞增殖的影响

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郑州大学学报（医学版） 2008年第2期43卷 248-252页

作者：徐宁王永生文艳君生物治疗国家重点实验室四川大学华西医院肿瘤中心成都610041

目的:观察重组人alpha防御素1(HNP1)真核表达质粒对体外培养人肺腺癌细胞A549增殖的影响。方法:从人外周血白细胞中提取总RNA,通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)得到人HNP1成熟肽基因片断。构建pSecTag-HNP1重组质粒,转染A549细胞,并设... 详细信息

目的:观察重组人alpha防御素1(HNP1)真核表达质粒对体外培养人肺腺癌细胞A549增殖的影响。方法:从人外周血白细胞中提取总RNA,通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)得到人HNP1成熟肽基因片断。构建pSecTag-HNP1重组质粒,转染A549细胞,并设pSecTag转染组、脂质体转染组和未转染组作为对照。RT-PCR验证HNP1的表达,MTT法检测肿瘤细胞的生长情况,流式细胞仪及PI染色检测细胞凋亡情况。结果:构建了重组质粒pSecTag-HNP1,测序正确。转染A549细胞后,RT-PCR成功扩增出HNP1片断。与其他3组相比,HNP1转染A549细胞48h后细胞的生存率降低,差异有统计学意义(P均<0.05)。流式细胞仪及PI染色结果显示pSecTag-HNP1转染后的细胞凋亡增多(P<0.05)。结论:转染pSecTag-HNP1后,重组HNP1能够在A549细胞中表达并有效地抑制A549细胞的增殖,促进细胞凋亡。

关键词：人alpha防御素1 A549细胞细胞凋亡

VEGF对大鼠胰岛瘤细胞增殖、凋亡及胰岛素分泌功能的影响

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四川大学学报（医学版） 2016年第1期47卷 33-38页

作者：邓浩丁振宇王椿李双庆何訸梁立波四川大学华西医院全科医学科成都610041 四川大学华西医院肿瘤中心胸部肿瘤科生物治疗国家重点实验室成都610041 四川大学华西医院内分泌科成都610041 四川大学华西医院检验科成都610041

目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对大鼠胰岛瘤细胞(INS-1)增殖、凋亡、胰岛素分泌以及相关基因表达的影响。方法用不同浓度(0、40、80、160ng/mL)VEGF对大鼠INS-1细胞进行处理,采用CCK-8试剂盒检测I... 详细信息

目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对大鼠胰岛瘤细胞(INS-1)增殖、凋亡、胰岛素分泌以及相关基因表达的影响。方法用不同浓度(0、40、80、160ng/mL)VEGF对大鼠INS-1细胞进行处理,采用CCK-8试剂盒检测INS-1细胞增殖,用AnnexinⅤ及碘化丙啶(PI)双染试剂检测细胞凋亡;INS-1细胞经VEGF处理后做标准葡萄糖刺激的胰岛素分泌实验,ELISA法检测胰岛素,实时定量PCR技术检测胰岛分泌过程中相关基因表达,Western blot检测VEGF对Insulin蛋白表达的影响。结果不同浓度VEGF对INS-1细胞作用24h、48h、72h,其细胞活性均无明显变化(P>0.05)。但当VEGF浓度为80ng/mL和160ng/mL时对细胞凋亡具有抑制作用(P<0.01)。高糖状态下当VEGF浓度为40ng/mL时,VEGF对胰岛素的分泌具有抑制作用。不同浓度VEGF作用于INS-1细胞后,磺酰脲类受体基因(sulfonylurea receptor,Sur)、内向整流性钾离子通道基因(inwardly rectifying potassium channel 6.2,Kir6.2)的表达随VEGF浓度增高呈下降趋势,葡萄糖激酶基因(glucokinase,GCK)的表达先降低后升高,葡萄糖转运蛋白基因2(glucose transporter 2,Glut2)表达呈先升高后降低趋势,Insulin蛋白的表达量随VEGF浓度增高呈逐渐下降趋势。结论 VEGF在高糖状态下对细胞凋亡和胰岛素分泌有抑制作用,为探索VEGF在糖代谢中的作用提供了新的线索。

关键词：血管内皮生长因子葡萄糖依赖胰岛素释放试验胰岛素

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氧化还原信号调控与肿瘤代谢

四川大学学报（医学版） 2021年第1期52卷 57-63页

作者：王魁明慧左静田海隆黄灿华四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室生物治疗协同创新中心成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院成都610041

代谢异常是肿瘤细胞的十大特征之一,肿瘤细胞能够通过代谢重编程满足其快速增殖的物质和能量需求。肿瘤代谢重编程伴随活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生以及抗氧化体系的激活。ROS含量过高会导致氧化损伤甚至细胞死亡,而适量... 详细信息

代谢异常是肿瘤细胞的十大特征之一,肿瘤细胞能够通过代谢重编程满足其快速增殖的物质和能量需求。肿瘤代谢重编程伴随活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生以及抗氧化体系的激活。ROS含量过高会导致氧化损伤甚至细胞死亡,而适量水平的ROS可作为第二信使参与调控多种信号通路。近年来,随着对氧化应激研究的不断深入,发现ROS可直接介导蛋白质发生氧化还原修饰(redox modifications),从而造成蛋白质构象或功能的改变。然而,目前仅报道了3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)等个别代谢酶的氧化还原修饰,其他代谢酶是否受到氧化还原修饰调控并发挥重要功能尚不清楚,靶向代谢酶氧化还原修饰的时空特异性和代偿适应性也是目前的重点和难点。本文将从肿瘤代谢的角度出发,综述近年来报道的有关代谢酶的氧化还原修饰模式、调控机制及其在肿瘤发生发展中的作用,探讨和展望靶向代谢酶氧化还原修饰的肿瘤治疗策略。

关键词：肿瘤代谢活性氧氧化应激氧化还原修饰肿瘤治疗

非小细胞肺癌的肿瘤干细胞与非肿瘤干细胞中表皮生长因子受体基因异质性的研究

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第三军医大学学报 2012年第20期34卷 2039-2042页

作者：蒋娟易亭伍张瑜兰洁卢铀四川大学华西医院肿瘤中心胸部肿瘤科成都610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室成都610041

目的研究非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的肿瘤干细胞和非肿瘤干细胞中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因状态。方法收集2010年6月至2011年8月四川省肿瘤医院及四川大学华西医院胸外科NSCL... 详细信息

目的研究非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的肿瘤干细胞和非肿瘤干细胞中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因状态。方法收集2010年6月至2011年8月四川省肿瘤医院及四川大学华西医院胸外科NSCLC新鲜手术标本35例,流式细胞术分选出CD133+细胞和CD133-细胞,采用扩增阻滞突变系统(amplification refractory mutation system,ARMS)分别检测EGFR基因突变,观察其有无差异。结果 35例NSCLC样本中均检测到CD133的表达。35例CD133+细胞中EGFR基因突变检出率为28.6%,腺癌突变率高于鳞癌(P0.05);CD133-细胞中EGFR基因突变检出率为42.9%,腺癌、无或少吸烟史者突变率高(P0.05)。11例患者标本的CD133+/-细胞存在EGFR基因异质性,占31.4%(11/35)。24例患者标本CD133+/-细胞的EGFR基因状态相同(18例患者中CD133+和CD133-细胞EGFR基因均为野生型,6例患者中CD133+和CD133-细胞EGFR基因为相同的敏感性突变)。结论NSCLC患者中CD133+细胞和CD133-细胞中存在EGFR基因异质性。

关键词：非小细胞肺癌受体,表皮生长因子突变干细胞 CD133 异质性

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肺部肿瘤的精确放射治疗研究进展

中国肺癌杂志 2011年第11期14卷 894-899页

作者：王辛许峰魏于全四川大学华西医院肿瘤中心放疗科成都610041 四川大学华西医院肿瘤中心国家生物治疗重点实验室成都6140041

目前肺部肿瘤的放射治疗已进入精确放疗时代。实施精确放疗的具体方法主要包括:调强放疗(intensity modulated radiotherapy,IMRT)、图像引导放射治疗(image-guided radiotherapy,IGRT)和体部立体定向放射治疗(stereotactic body radiotherapy,SBRT)。在实施精确放疗过程中,对于以下问题:患者体位固定、肺部肿瘤运动的控制、影像技术的使用、PTV边界、剂量的处方和报道、射野的安排、剂量体积的控制和治疗的实施等,应给予充分的考虑和注意,以确保精确放疗能够精确执行。

关键词：肺肿瘤放射治疗治疗

人热休克蛋白90β-cDNA基因克隆及其真核表达载体的构建

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生物医学工程学杂志 2006年第6期23卷 1289-1293页

作者：刘涛赵菊梅田聆魏于全梁传余四川大学华西医院耳鼻喉科成都610041 四川大学华西医院肿瘤生物治疗研究中心.人类疾病生物治疗教育部重点实验室成都610041

本研究旨在克隆人热休克蛋白90β(HSP90β)基因,构建其真核表达载体pcDNA3.1(+)-hHSP90β,为研究hHSP90β的基因治疗奠定实验基础。按Invitrogen公司操作说明用TRIzolReagent提取鼻咽癌总RNA,并经RT-PCR获得hHSP90βcDNA。用纯化的hHSP90βcDNA与PGEMEasyTVector连接,挑选白色菌落进行鉴定,结果为重组质粒,命名为PGEM-hHSP90β。将PGEM-hHSP90β及pcDNA3.1(+)质粒经AflII和Xbal双酶切、胶回收纯化酶切片段后,体外连接酶切片段,使其定向重组,再将重组DNA转化XL1-blue,经复苏后,在含Ampr的LB固体培养基上筛选出阳性克隆。挑取的LB固体培养基上的单菌落经酶切及测序鉴定,证实为阳性克隆,即hHSP90β与pcDNA3.1(+)体外重组成功,命名为pcDNA3.1(+)-hHSP90β。采用体外重组技术,成功地将人HSP90β插入了真核表达载体pcDNA3.1(+)中。

关键词：热休克蛋白90β(HsP90β)真核表达载体质粒pcDNA3.1(+)

一种新型CT模拟机定位床的改进设计及验收测试

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中国医疗器械杂志 2021年第2期45卷 231-236页

作者：肖青李光俊柏森四川大学华西医院肿瘤中心生物治疗国家重点实验室放疗科成都市610041

精确的CT模拟定位是精准放疗的关键环节,而CT模拟机定位床的性能直接影响放疗精度。随着精准放疗的迅速发展,常规大孔径放疗专用CT模拟机难以满足精准放疗定位需求,因此大多放疗中心选择将高性能诊断CT机配置放疗专用平板床后用于放疗... 详细信息

精确的CT模拟定位是精准放疗的关键环节,而CT模拟机定位床的性能直接影响放疗精度。随着精准放疗的迅速发展,常规大孔径放疗专用CT模拟机难以满足精准放疗定位需求,因此大多放疗中心选择将高性能诊断CT机配置放疗专用平板床后用于放疗定位。但在临床工作中,CT模拟机定位床的性能检测容易被忽视,且将诊断CT机弧形凹面床改造为放疗专用平板床普遍存在精度不够等问题。就四川大学华西医院引进的全国第一台放疗专用GE Revolution CT模拟机定位床的改进设计及性能测试进行深入阐述,以供同行参考。改进后,定位床各项验收测试均符合标准,且性能满足本中心不同体重患者的高精度放疗定位需求。

关键词： CT模拟机定位床验收测试质量保证改进设计

瓦里安2300CD加速器电离室隐性故障一例分析

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中华放射肿瘤学杂志 2017年第12期26卷 1449-1450页

作者：唐志全谢源贵曾勇苏善宁四川大学华西医院肿瘤中心生物治疗国家重点实验室放射物理技术中心成都610041 广西玉林市红十字会医院肿瘤科 537000

电离室是电子直线加速器剂量监测与控制系统的监测器件，其功能是将加速器输出的脉冲辐射转换为脉冲值约10-8A（10μA）、平均值约10μA（0．01μA）的微电流，以监测照射野的强度和位置。瓦里安加速器采用密封充高压He气方式，选择He... 详细信息

电离室是电子直线加速器剂量监测与控制系统的监测器件，其功能是将加速器输出的脉冲辐射转换为脉冲值约10-8A（10μA）、平均值约10μA（0．01μA）的微电流，以监测照射野的强度和位置。瓦里安加速器采用密封充高压He气方式，选择He气的原因，是因为在相同的充气压力下，He气的饱和电压最低并可获得比同体积空气更高的电离率[3]。本文所见故障现象，也曾在一些单位的C型机上出现过，更换电离室均可消除故障，但未见有过报道。希望通过本文的深入分析，能对同道有所裨益。

关键词：电子直线加速器故障现象电离室隐性剂量监测瓦里安加速器脉冲辐射控制系统

老年晚期非小细胞肺癌化疗不良反应与预后的关系

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现代预防医学 2012年第11期39卷 2883-2886+2889页

作者：刘桂红邹雪林丁振宇四川大学华西医院肿瘤中心四川大学生物治疗国家重点实验室

目的探索老年晚期非小细胞肺癌(NSCLC)化疗引起的不良反应程度与治疗疗效的关系。方法纳入自2007年1月到2009年3月经组织学或细胞学诊断证实的老年NSCLC病人,采用单药或含铂二联化疗方案进行化疗。结果共纳入65例老年肺癌病人,化疗后发... 详细信息

目的探索老年晚期非小细胞肺癌(NSCLC)化疗引起的不良反应程度与治疗疗效的关系。方法纳入自2007年1月到2009年3月经组织学或细胞学诊断证实的老年NSCLC病人,采用单药或含铂二联化疗方案进行化疗。结果共纳入65例老年肺癌病人,化疗后发生3～4度不良反应(重反应组)有24例,无3～4度不良反应(轻反应组)有41例,两组基线情况平衡。全组均未出现完全缓解。部分缓解分别为16.7%和7.3%,稳定分别为50.0%和36.6%。两组分别有33.3%和56.1%出现进展。两组的疾病控制率分别为66.7%和43.9%,差异有达到统计学意义的趋势(P=0.076)。两组的中位进展时间分别为74 d(95%CI:24～123 d)和58 d(95%CI:39～76 d),两组差异有统计学意义(P=0.032)。两组的中位生存时间分别为17.4个月(95%CI:5.4～29.5个月)和7.2个月(95%CI:4.1～10.2个月),虽存在较大差异,但差异未能达到统计学意义(P=0.068)。结论老年晚期非小细胞肺癌化疗中出现3～4度不良反应可能提示预后好。

关键词：非小细胞肺癌老年化学治疗