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LGG@LPM微球的制备及其对溃疡性结肠炎小鼠的防治作用

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食品科学 2024年第15期45卷 127-138页

作者：顾忆张婷张朝文李小龙黄梓君魏晨曦邹元锋四川农业大学动物医学院天然药物研究中心四川成都611130

目的:研究柠檬果胶包埋鼠李糖乳杆菌微球对DSS诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的防治作用。方法:首先将柠檬果胶与鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus GG,LGG)制成微球(LGG@LPM),并对其进行表征。对小鼠灌胃LGG@LPM... 详细信息

目的:研究柠檬果胶包埋鼠李糖乳杆菌微球对DSS诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的防治作用。方法:首先将柠檬果胶与鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus GG,LGG)制成微球(LGG@LPM),并对其进行表征。对小鼠灌胃LGG@LPM并对其进行生理生化等检测。结果:LGG@LPM微球具有良好的稳定性,给药可以显著缓解DSS诱导小鼠结肠炎的病理进程,恢复其体质量、结肠长度,降低组织学活动指数评分和疾病活动指数评分。同时,LGG@LPM给药改善了DSS导致的小鼠结肠促炎因子水平升高和抗氧化酶活性降低、血清LPS水平升高以及短链脂肪酸水平的变化。16S RNA测序表明,LGG@LPM恢复了UC小鼠的肠道菌群,提高Lactobacillus、Mucispirillum等相对丰度,并且菌群的改变与相关环境因子有显著的相关性。结论:LGG@LPM可以通过改善肠道菌群从而延缓UC的病理进程,并且这种防治作用比单用柠檬果胶或LGG的效果好。

关键词：柠檬果胶鼠李糖乳杆菌溃疡性结肠炎肠道菌群

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肝癌外泌体在肿瘤微环境细胞间通讯中的作用

四川大学学报（医学版） 2024年第1期55卷 6-12页

作者：冯唐杨欣蕊王琦为刘肖珩四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室成都610041

肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上最致命的癌症之一。由于HCC发病隐匿、进展迅速且缺乏有效的治疗方法,预后极差,其5年平均生存率低于10%。肿瘤微环境是HCC发生发展所处的内环境,可调节HCC的起源、发展、侵袭和转移。... 详细信息

肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上最致命的癌症之一。由于HCC发病隐匿、进展迅速且缺乏有效的治疗方法,预后极差,其5年平均生存率低于10%。肿瘤微环境是HCC发生发展所处的内环境,可调节HCC的起源、发展、侵袭和转移。肝癌细胞在癌症进展过程中可以通过释放含有特异信号的外泌体调控肿瘤微环境中的肿瘤细胞、癌相关成纤维细胞、癌相关免疫细胞等不同细胞的生物学行为,进而促进癌症进展。然而,外泌体在这些过程中对具体细胞调控的确切分子机制和作用仍不清楚。本综述首先介绍了HCC微环境的组成和肿瘤微环境中外泌体的来源和特征以及力学因素对外泌体的影响。其次,本综述重点讨论了HCC外泌体对微环境中不同类型细胞的作用。我们看到,在包括肝癌在内的临床癌症治疗中使用外泌体作为载体仍然有许多必须克服的困难。首先,外泌体的同质性很难得到保证。其次,外泌体主要通过皮下注射给药,虽然这种方法简单易行,但吸收效率并不理想。第三,外泌体提取方法有限且效率低,因此难以大量制备外泌体。特别是对于外泌体介导的肿瘤免疫治疗,确保使用的外泌体数量足以引发有效的肿瘤免疫反应非常重要。随着鉴定、分离和纯化技术的改进,外泌体有望成功运用于早期HCC的临床诊断和肝癌的临床治疗中。

关键词：外泌体肿瘤微环境肝细胞肝癌细胞间通讯综述

细胞外基质硬度通过AMPK调控干细胞线粒体的形态异质性

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四川大学学报（医学版） 2024年第1期55卷 47-52页

作者：段沛言刘艺林心怡任洁何佳刘肖珩谢静四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室成都610041

目的探讨人间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)中线粒体形态对细胞外基质硬度的力学响应以及腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)对线粒体力学响应的调控作用。方法首先,通过改变丙烯酰和甲叉双丙烯... 详细信息

目的探讨人间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)中线粒体形态对细胞外基质硬度的力学响应以及腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)对线粒体力学响应的调控作用。方法首先,通过改变丙烯酰和甲叉双丙烯酰胺的单体浓度,制备杨氏模量为1 kPa(软)和20 kPa(硬)两种硬度的聚丙烯酰胺水凝胶;随后,将hMSCs培养在不同硬度水凝胶上,通过激光共聚焦显微镜和Western blot检测线粒体的形态变化和线粒体稳态相关蛋白AMPK的激活情况;最后,分别利用AMPK激活剂A-769662和抑制剂Compound C改变软硬基底上细胞AMPK的激活,观察线粒体的形态变化。结果hMSCs中线粒体的形态随水凝胶硬度变化呈现异质性,在1 kPa软基质上,线粒体融合,有74%的线粒体呈现出致密的长纤维网络状结构,而在20 kPa硬基质上高达63.3%线粒体为疏松的短片段化或者点状形貌。Western blot结果显示,硬基质上p-AMPK/AMPK的比例是软基质上的1.6倍,免疫荧光染色结果显示在硬的基质p-AMPK的表达升高,并且呈现出核定位,证明随着细胞外基质硬度的提高,细胞内AMPK的激活程度也不断上升。当在软基质上添加AMPK激活剂A-769662后,线粒体形态由纤维网络状向片段化转变,纤维化程度由74%下降到9.5%,同时AMPK抑制剂Compound C可以促进硬基质上线粒体融合,降低点状线粒体占比。结论细胞外基质硬度通过AMPK的激活调控hMSCs中线粒体的形态。硬基质会促进AMPK激活,导致线粒体分裂,形成大量片段化的短线粒体。这种基质硬度对线粒体形态的影响可以通过改变AMPK的磷酸化水平进行逆转。

关键词：细胞外基质硬度干细胞 AMPK激活线粒体形态分裂和融合

流体剪切力调控血脑屏障的力学生物学机制研究

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四川大学学报（医学版） 2024年第1期55卷 74-80页

作者：杜聆语许博闻程琳岳红燕张怀奕沈阳四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室成都610041

目的血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)主要由脑微血管内皮细胞组成。本研究以大鼠脑微血管内皮细胞(rat brain microvascular endothelial cells,rBMECs)为模式细胞,探索正常生理、缺血低灌注和术后高灌注条件下的流体剪切力(flow she... 详细信息

目的血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)主要由脑微血管内皮细胞组成。本研究以大鼠脑微血管内皮细胞(rat brain microvascular endothelial cells,rBMECs)为模式细胞,探索正常生理、缺血低灌注和术后高灌注条件下的流体剪切力(flow shear force,FSF)对BBB结构功能的保护、损伤和破坏的力学生物学机制。方法以1×10^(5)细胞/cm^(2)的密度接种rBMECs培养48 h,对rBMECs分别施加0.5、2和20 dyn/cm2的FSF,模拟脑血管狭窄的低灌注、正常生理和搭桥术后高剪切力作用下BBB结构的受力情况;同时设置静态培养组rBMECs作为对照(不施加力)。光学显微镜、扫描电子显微镜(SEM)以及激光共聚焦显微镜(LSCM)观察细胞形态和骨架的变化。透射电子显微镜(TEM)观察细胞紧密连接,免疫荧光染色检测紧密连接相关蛋白(claudin-5、occludin、ZO-1)、黏着连接相关蛋白(VE-cadherin、PECAM-1)分布的变化。Western blot检测不同强度FSF下紧密连接相关蛋白(claudin-5、ZO-1、JAM4),黏着连接相关蛋白(VE-cadherin)和Rho GTPases信号关键蛋白(Rac1、Cdc42、RhoA)的表达。结果镜下观察发现:静态培养和低剪切作用(0.5 dyn/cm2)下细胞骨架排列紊乱,取向无规律;正常生理剪切作用(2 dyn/cm^(2))下,细胞骨架顺应FSF方向重排,胞间观察到有效的紧密连接结构;高剪切作用(20 dyn/cm^(2))下,细胞间间隙增大,未观察到有效的紧密连接结构。免疫荧光染色发现低剪切作用时,细胞间距减小,但胞间连接处紧密连接相关蛋白和黏着连接相关蛋白分布较少;正常生理条件下细胞连接紧密,大部分紧密连接相关蛋白的分布集中在胞间连接处;高剪切作用时,胞间距离显著增大,连接紧密和黏着连接的结构被破坏。Western blot结果发现:低剪切作用下,claudin-5、ZO-1和VE-cadherin与对照组相比均上调(P<0.05);正常生理剪切作用下,claudin-5、ZO-1、JAM4以及VE-cadherin与对照组相比均呈现高表达(P<0.05);高剪切作用下,claudin-5、ZO-1、JAM4以及VEcadherin的表达与正常生理剪切作用组比较下调(P<0.05);生理条件下胞内的Rho GTPases(Rac1、Cdc42、RhoA)表达上调,高于其他实验组(P<0.05),而低剪切和高剪切作用下的Rho GTPases表达均较正常生理剪切作用组下调(P<0.05)。结论正常生理条件下的FSF有助于维持BBB结构的完整性,而低剪切或高剪切均会损伤或破坏血脑屏障的结构,FSF对BBB的调控与紧密连接相关蛋白和黏着连接相关蛋白的表达和分布密切相关。

关键词：血脑屏障流体剪切力大鼠脑微血管内皮细胞紧密连接相关蛋白黏着连接相关蛋白

矩形水凝胶微凹槽的空间约束调控人脐静脉内皮细胞的形态和排列

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四川大学学报（医学版） 2024年第1期55卷 87-94页

作者：江文丽钟健欧阳智沈钧怡邱艳曾烨四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室成都610041

目的本研究拟构建微米级矩形水凝胶凹槽,探究人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)在三维空间约束条件下的形态和排列规律。方法使用四臂-聚乙二醇-丙烯酸酯水凝胶制备宽度为60μm、100μm、140μm的矩形... 详细信息

目的本研究拟构建微米级矩形水凝胶凹槽,探究人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)在三维空间约束条件下的形态和排列规律。方法使用四臂-聚乙二醇-丙烯酸酯水凝胶制备宽度为60μm、100μm、140μm的矩形微凹槽,检测其尺寸和纤连蛋白(fibronectin,FN)黏附情况;在FN包被的微凹槽中接种HUVECs,培养48 h后检测细胞的形态和取向,利用鬼笔环肽标记细胞骨架和激光共聚焦显微镜观察水凝胶微凹槽中HUVECs细胞骨架取向,以无微图案平面为对照。结果构建的水凝胶微凹槽形态均一、结构完整,边缘清晰,宽度误差研究血管内皮细胞的独特生理功能提供了更符合生理条件的实验模型,但三维空间约束影响血管内皮细胞形态和组装的分子机制有待进一步研究。

关键词：微图案血管内皮细胞细胞形态细胞取向细胞骨架

模拟虚拟技术在外科医师腹腔镜培训中的实践经验

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中华消化外科杂志 2024年第4期23卷 561-565页

作者：胡建昆刘凯彭柏强四川大学华西医院普外科胃癌中心&胃癌研究室成都610041 四川大学华西临床医学院成都610041

随着微创外科的发展和普及应用,腹腔镜技术已成为当代外科医师不可或缺的核心技能之一.随着人工智能和医工融合技术的发展、创新,基于模拟和虚拟现实技术的外科模拟医学亦得到迅速推广和应用,同时也为腹腔镜外科医师的培训提供全新、有... 详细信息

随着微创外科的发展和普及应用,腹腔镜技术已成为当代外科医师不可或缺的核心技能之一.随着人工智能和医工融合技术的发展、创新,基于模拟和虚拟现实技术的外科模拟医学亦得到迅速推广和应用,同时也为腹腔镜外科医师的培训提供全新、有效的手段和平台.笔者单位前期系统性整合腹腔镜模拟虚拟技术,牵头开展腹腔镜虚拟模拟技术在专科医师实践技能考试中应用的实证研究,制定腹腔镜培训理论和操作实践课程、常态化开展基于模拟虚拟系统的腹腔镜培训,制定并构建腹腔镜外科医师分阶段渐进式的培训体系.笔者查阅相关文献,并结合团队实践,介绍和论述腹腔镜模拟虚拟系统在外科住院医师培训中的探索与实践,以期推动我国腹腔镜培训的标准化、规范化和同质化.

关键词：模拟技术虚拟技术培训考核规范化腹腔镜检查

腹腔镜与开腹根治性切除术治疗肝门部胆管癌疗效比较的Meta 分析

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中国普通外科杂志 2024年第8期33卷 1206-1219页

作者：吴建林王伦镔余峰李钊汪杰赵敬兵周国俊冷政伟川北医学院附属医院肝胆外二科四川南充637000 川北医学院附属医院肿瘤干细胞研究中心四川南充637000

背景与目的:肝门部胆管癌(HCCA)是临床中常见的胆道恶性肿瘤,其解剖位置特殊,侵袭性强,手术难度极大。近年来,随着腹腔镜技术和微创外科理念的发展,腹腔镜HCCA根治性切除术已在一些大型肝胆胰脾疾病医学中心开展,其较传统开腹HCCA根治... 详细信息

背景与目的:肝门部胆管癌(HCCA)是临床中常见的胆道恶性肿瘤,其解剖位置特殊,侵袭性强,手术难度极大。近年来,随着腹腔镜技术和微创外科理念的发展,腹腔镜HCCA根治性切除术已在一些大型肝胆胰脾疾病医学中心开展,其较传统开腹HCCA根治性切除术具有一定的优势,但两种手术方式的选择仍存在一定的争议。本研究通过Meta分析的方法比较腹腔镜与开腹HCCA根治性切除术的疗效与安全性,为临床实践提供循证医学参考。方法:检索国内外多个数据库,收集比较腹腔镜与开腹HCCA根治性切除术的临床研究,检索日期为建库至2023年8月31日。根据纳入、排除标准筛选文献,并对纳入研究的文献进行资料提取及质量评估后,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果:最终共纳入20篇文献,包含1036例患者,其中457例行腹腔镜HCCA根治性切除术(腹腔镜组),579例行开腹HCCA根治性切除术(开腹组)。Meta分析结果显示,主要结局指标方面,腹腔镜组较开腹组淋巴结清扫数目增加(MD=0.61,95%CI=0.11~1.12,P0.05);次要结局指标方面,腹腔镜组较开腹组手术时间延长(MD=51.39,95%CI=44.78~57.99,P研究的局限性,上述结论尚需更多高质量研究予以验证。

关键词： Klatskin肿瘤肝切除术腹腔镜预后 Meta分析

转移性黑色素瘤患者早期死亡风险的预测模型构建及验证

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四川大学学报（医学版） 2024年第2期55卷 367-374页

作者：李思儒李静杨栖尹存俐柳斌电子科技大学医学院成都610054 四川省肿瘤临床医学研究中心四川省肿瘤医院四川省肿瘤研究所四川省癌症防治中心电子科技大学附属肿瘤医院普通内科成都610042 成都中医药大学医学与生命科学院成都610032 四川省肿瘤临床医学研究中心四川省肿瘤医院四川省肿瘤研究所四川省癌症防治中心电子科技大学附属肿瘤医院肿瘤内科成都610042

目的构建预测转移性黑色素瘤(metastatic melanoma, MM)患者早期死亡风险的列线图模型。方法本研究纳入监测、流行病学和最终结果(Surveillance, Epidemiology, and End Results Program, SEER)数据库中(2010–2015年)2 138例被诊断... 详细信息

目的构建预测转移性黑色素瘤(metastatic melanoma, MM)患者早期死亡风险的列线图模型。方法本研究纳入监测、流行病学和最终结果(Surveillance, Epidemiology, and End Results Program, SEER)数据库中(2010–2015年)2 138例被诊断为MM的患者。使用logistic回归分析确定影响MM患者早期死亡的独立风险因素。并利用这些因素构建全因早死和癌症特异性早期死亡的列线图。通过受试者操作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线、校准曲线和决策曲线分析(decision curve analysis, DCA)评估该模型的效能,并使用四川省肿瘤医院2015年1月–2020年1月被诊断为MM的105例患者的临床病理资料进行外部验证。结果 logistic回归分析显示,婚姻状况、原发部位、N分期、手术、化疗、骨转移、肝转移、肺转移和脑转移可以被确定为早期死亡的独立预测因素。基于这些因素开发了两个列线图分别预测全因早死和癌症特异性早死风险。在全因和癌症特异性早期死亡模型中,训练组的曲线下面积(the area under the curve, AUC)分别为0.751[95%置信区间(confidence interval, CI):0.726~0.776]和0.740(95%CI:0.714~0.765))。内部验证组的AUC分别为0.759(95%CI:0.722~0.797)和0.757(95%CI:0.718~0.780),外部验证组的AUC分别为0.750(95%CI:0.649~0.850)和0.741(95%CI:0.644~0.838)。校准曲线表明预测概率与观察概率的一致性高,DCA分析表明该模型的临床应用价值较高。结论列线图模型预测MM患者的早期死亡表现出良好的预测能力,能够帮助临床医师制定更个性化的治疗策略。

关键词：黑色素瘤肿瘤转移列线图模型统计学早期死亡 SEER数据库

基于固相微萃取-气相色谱-质谱联用和气相色谱-离子迁移谱分析不同等级郫县豆瓣煸炒后风味特征差异

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食品科学 2024年第7期45卷 172-181页

作者：张浩顾思远邓静周剑琴唐英明易宇文四川旅游学院烹饪学院四川成都610100 四川旅游学院烹饪科学四川省高等学校重点实验室四川成都610100

为研究不同等级郫县豆瓣煸炒后风味差异,采用固相微萃取-气相色谱-质谱联用(solid phase microextraction-gas chromatography-mass spectrometry,SPME-GC-MS)和GC-离子迁移谱(GC-ion mobility spectrometry,GCIMS)技术,使用主成分分析、正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares discrimination analysis,OPLS-DA),结合气味活性值(odor activity value,OAV)确定关键化合物。结果表明:SPME-GC-MS鉴定出88种化合物,包含醛类15种、醇类11种、酯类17种、酮类13种、酸类5种、烯烃类5种、烷烃类6种、杂环类7种、苯酚类2种、醚类及其他化合物7种,其中34种为共有化合物;GC-IMS鉴定出57种化合物,并经OPLS-DA得到变量投影重要性值大于1的16种关键化合物;OAV结果表明,丁酸乙酯使特级豆瓣呈现苹果香,异戊醛带来麦芽香,异戊酸乙酯使一级豆瓣呈现果香,3-甲硫基丙醛带来烤土豆香和酱香,异丁酸乙酯使二级豆瓣呈现果香,异戊醛、异丁醛带来麦芽香,最终确定煸炒后豆瓣整体呈现果香、酒香、麦芽香、酸香、草香、可可香、杏仁香及酱香。研究结果可用于判定煸炒后豆瓣香气特征,并为感官定量描述法前期设计感官属性描述词汇提供参考依据。

关键词：郫县豆瓣煸炒固相微萃取-气相色谱-质谱联用气相色谱-离子迁移谱风味化合物