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基于网络药理学和实验验证的三黄膏治疗痔疮的作用机制研究

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中国现代应用药学 2024年第12期41卷 1591-1603页

作者：李文杰于倩郑怡杨亦柳张馨月李光哲严铭铭长春中医药大学长春130117 吉林省中药保健食品科技创新中心长春130117

目的基于网络药理学对三黄膏治疗痔疮的核心成分、靶点及信号通路进行预测,并借助分子对接和实验验证,对其作用机制进行初步探讨。方法经过文献研究和数据库筛选,得到三黄膏活性成分、靶点及痔疮相关靶点,通过Cytoscape软件构建关联... 详细信息

目的基于网络药理学对三黄膏治疗痔疮的核心成分、靶点及信号通路进行预测,并借助分子对接和实验验证,对其作用机制进行初步探讨。方法经过文献研究和数据库筛选,得到三黄膏活性成分、靶点及痔疮相关靶点,通过Cytoscape软件构建关联网络并筛选核心基因,然后对基因进行功能分析和通路富集分析。使用Autodock Vina进行分子对接验证,并通过酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫组化验证三黄膏对核心靶点的调控作用。结果收集到三黄膏治疗痔疮活性成分77个及其潜在靶点61个,KEGG显示三黄膏可调控钙信号通路、神经活性配体-受体相互作用、cGMP-PKG信号通路等,影响CGRP、NK-1R、TRPV1、VEGF、IL-6和TNF-α 6个核心靶点,分子对接显示三黄膏与靶点蛋白间有较好的亲和性,动物实验验证了三黄膏可抑制IL-6、CGRP、P物质等的表达,促进VEGF的表达。结论三黄膏可能作用于CGRP、NK-1R等靶点,通过调控钙信号通路及PI3K-Akt等通路,发挥镇痛抗炎、活血化瘀作用来治疗痔疮。

关键词：三黄膏痔疮网络药理学分子对接实验验证

五味子四种组分蛋白结构、理化性质和功能特性比较

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食品与发酵工业 2024年第2期50卷 67-77页

作者：王海东张红印曹珺李光哲严铭铭赵大庆长春中医药大学吉林省人参科学研究院吉林长春130117 吉林省中药保健食品科技创新中心吉林长春130117

以北五味子脱脂粉为原料,通过奥斯本四步法提取清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,分析比较4种组分蛋白的结构、理化性质和功能特性。结果表明,4种组分蛋白所含有的营养成分差异显著,其中谷蛋白的蛋白质含量最高而脂肪含量最低,同时蛋... 详细信息

以北五味子脱脂粉为原料,通过奥斯本四步法提取清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,分析比较4种组分蛋白的结构、理化性质和功能特性。结果表明,4种组分蛋白所含有的营养成分差异显著,其中谷蛋白的蛋白质含量最高而脂肪含量最低,同时蛋白提取率最高;4种组分蛋白还原性电泳和非还原型电泳在10~180 kDa和3.3~33.0 kDa亚基条带分布存在差异,超低分子质量电泳发现醇溶蛋白分子质量分布于5 kDa;扫描电镜观察出4种组分蛋白不同的表面结构和聚集程度,谷蛋白最为松散;傅里叶变换红外光谱证实了不同组分蛋白二级结构的差异。此外,谷蛋白的热稳定性、溶解性、持水性、持油性、乳化性和乳化稳定性及起泡性和泡沫稳定性均为最优,揭示出4种组分蛋白组成和结构的不同,导致其表现出的理化性质和功能特性也存在差异。

关键词：五味子组分蛋白结构理化性质功能特性

华南板块东南部南华纪-震旦纪沉积地层区域对比、物源特征及构造演化

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地球科学 2024年第9期49卷 3411-3427页

作者：宋芳何垚砚牛志军杨文强王志宏古生物与地质环境演化湖北省重点实验室中国地质调查局武汉地质调查中心(中南地质科技创新中心)

华南板块东南部南华纪-震旦纪的沉积大地构造背景等问题尚存在争议，本文以研究区内北东-南西向分布、砂岩-板岩夹砾岩为主要特征的碎屑岩地层为突破口，开展区域地层对比及物源示踪，进而对该地区沉积大地构造背景进行约束.对闽西南、... 详细信息

华南板块东南部南华纪-震旦纪的沉积大地构造背景等问题尚存在争议，本文以研究区内北东-南西向分布、砂岩-板岩夹砾岩为主要特征的碎屑岩地层为突破口，开展区域地层对比及物源示踪，进而对该地区沉积大地构造背景进行约束.对闽西南、赣中、湘东南以及桂北4个地区的代表性南华纪-震旦纪沉积地层剖面开展了岩性对比和碎屑锆石定年工作，结果显示：研究区内不同地区南华纪-震旦纪碎屑岩地层的岩石组合及沉积序列特征相似，以900～1 100 Ma年龄峰值为特征的物源从南华纪早期至震旦纪持续地从南东向北西推进.同时，本文从岩性和物源两个方面定义了“华夏型陆源碎屑地层”.研究结果对政和-大埔断裂带以西的扬子陆块和华夏地块之间在南华纪-震旦纪存在宽阔大洋的分隔提出了质疑.

关键词：华南板块南华纪震旦纪地层对比碎屑锆石地层学沉积学

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小檗碱治疗阿尔茨海默病的药理作用研究进展

中国实验方剂学杂志 2024年

作者：王雪婧钟光成李舒婷张千罗柏榤王奇广州中医药大学科技创新中心

阿尔茨海默病（AD）是一种以学习、记忆、认知功能进行性减退为特点的中枢神经系统退行性疾病，目前AD的治疗药物十分有限且效果欠佳。小檗碱（BBR）是天然的异喹啉（类季铵）生物碱，药理作用广泛，研究发现其在治疗AD方面具有良好的... 详细信息

阿尔茨海默病（AD）是一种以学习、记忆、认知功能进行性减退为特点的中枢神经系统退行性疾病，目前AD的治疗药物十分有限且效果欠佳。小檗碱（BBR）是天然的异喹啉（类季铵）生物碱，药理作用广泛，研究发现其在治疗AD方面具有良好的潜力，其作用靶点主要涉及抑制β淀粉样蛋白（Aβ）生成、聚集和神经毒性，抑制Tau蛋白过度磷酸化，促进磷酸化Tau蛋白自噬清除，抑制胆碱酯酶活性，抑制神经炎症和氧化应激，调节神经元凋亡，改善线粒体功能，改善糖脂代谢，抑制单胺氧化酶活性，调节肠道微生物群等。BBR生物利用度较低的问题也得到了有效改善，通过对潜在靶点的分析，以期为BBR防治AD的进一步研究提供参考。

关键词：小檗碱阿尔茨海默病 β淀粉样蛋白 Tau蛋白神经炎症

响应面法优化五味子蛋白肽的制备工艺及其体外抗氧化活性

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食品工业科技 2024年第19期45卷 166-176页

作者：王海东张涵周泓妍史佳琳石雨欣衣春光张红印严铭铭长春中医药大学东北亚中医药研究院吉林长春130117 吉林省中药保健食品科技创新中心吉林长春130117

目的:获取五味子蛋白肽的最适酶和最佳制备工艺并考察其体外抗氧化活性。方法:应用7种蛋白酶酶解,基于五味子蛋白不同酶解产物的水解度、自由基清除活性、多肽得率和含量结合SDS-PAGE中分子量多指标综合评价,筛选出最适蛋白酶。以DPPH... 详细信息

目的:获取五味子蛋白肽的最适酶和最佳制备工艺并考察其体外抗氧化活性。方法:应用7种蛋白酶酶解,基于五味子蛋白不同酶解产物的水解度、自由基清除活性、多肽得率和含量结合SDS-PAGE中分子量多指标综合评价,筛选出最适蛋白酶。以DPPH自由基清除率为考察指标,通过单因素实验结合响应面分析法确定最佳酶解工艺。以五味子蛋白为参照,分析比较五味子蛋白肽对O_(2)^(−)·、·OH、DPPH·、ABTS^(+)·的清除能力和Fe^(2+)螯合能力及Fe^(3+)还原能力。结果:制备五味子蛋白肽的最适酶为碱性蛋白酶,最佳酶解工艺参数为:底物浓度5%,酶底比1%,酶解时间3 h,酶解温度55℃,pH为9.0,在此条件下获得的多肽含量为88.61%,水解度为24.21%,DPPH·清除率为86.96%。五味子蛋白肽的自由基清除能力和还原能力均优于五味子蛋白。结论:本研究确定了五味子蛋白肽的最适酶和最佳水解工艺,同时指出,五味子蛋白肽具有更加优良的体外抗氧化活性,可作为一种天然的抗氧化剂。

关键词：五味子酶解蛋白响应面分析抗氧化活性

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加味黄连膏差异标志物含量测定及其皮肤保护作用

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中国医院药学杂志 2024年第9期44卷 1023-1029页

作者：李佳肖凤琴庞会娜曹国世张红印严铭铭长春中医药大学吉林长春130117 吉林省中药保健食品科技创新中心吉林长春130117

目的:建立加味黄连膏HPLC指纹图谱,结合化学模式识别方法筛选差异标志物,进行定量检测,并研究其对皮肤的保护作用。方法:采用高效液相色谱法考察21批加味黄连膏的相似度并建立指纹图谱,结合化学模式识别,以变量重要性投影(VIP)值>1为标... 详细信息

目的:建立加味黄连膏HPLC指纹图谱,结合化学模式识别方法筛选差异标志物,进行定量检测,并研究其对皮肤的保护作用。方法:采用高效液相色谱法考察21批加味黄连膏的相似度并建立指纹图谱,结合化学模式识别,以变量重要性投影(VIP)值>1为标准筛选影响加味黄连膏质量的差异标志物,通过含量测定对其质量进行评价,并以加味黄连膏对B16F10细胞酪氨酸酶抑制活性及黑色素生成的抑制活性为指标评价其皮肤保护作用。结果:加味黄连膏的HPLC指纹图谱中21批样品(S1~S21)的相似度>0.950,共标定17个共有峰,并指认出8个峰,盐酸黄柏碱、芝麻酚、阿魏酸、盐酸黄连碱、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、姜黄素和芝麻素。OPLS-DA结果显示,3号峰(盐酸黄柏碱),5号峰(阿魏酸),15号峰(姜黄素),16号峰(芝麻素)为影响加味黄连膏质量的差异标志物,其含量分别为0.021 0~0.028 7、0.006 7~0.010 0、0.021 5~0.025 8、0.209 5~0.235 5 mg·g^(–1),且加味黄连膏对B16F10细胞酪氨酸酶抑制率为100.33%,黑色素抑制率为59.80%。结论:建立的指纹图谱及含量测定方法为加味黄连膏的质量评价提供了可靠的理论依据,为工业化生产提供了科学的质控依据;加味黄连膏具有一定的皮肤保护作用,可为其临床应用提供参考。

关键词：中药软膏含量测定质量评价皮肤保护

抗金黄色葡萄球菌肠膜明串珠菌细菌素的生物学特性分析

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微生物学通报 2024年

作者：王嘉悦潘果钟忻桐苏惠路雨李国江董文龙吉林省猪生态养殖及疫病防控科技创新中心吉林农业科技学院动物科技学院吉林省预防兽医学重点实验室

【背景】金黄色葡萄球菌是导致全球耐药负担加重的重要原因，乳酸菌细菌素是治疗致病性细菌感染的一种新型的手段，具有广阔的应用前景。【目的】筛选抑制金黄色葡萄球菌的乳酸菌细菌素。【方法】采用琼脂扩散法筛选产细菌素的乳酸菌；... 详细信息

【背景】金黄色葡萄球菌是导致全球耐药负担加重的重要原因，乳酸菌细菌素是治疗致病性细菌感染的一种新型的手段，具有广阔的应用前景。【目的】筛选抑制金黄色葡萄球菌的乳酸菌细菌素。【方法】采用琼脂扩散法筛选产细菌素的乳酸菌；通过16S rRNA基因测序鉴定菌株，并利用MEGA 11构建系统发育树；排除酸和过氧化氢影响后，经生物学特性分析确定菌株细菌素的抗酶解性、pH稳定性、热稳定性；对菌株的生长曲线、产酸能力进行研究并观察其生长特性；对菌株进行模拟胃液耐受能力检测。【结果】从延吉南瓜中分离获得一株肠膜明串珠菌WJY-6，该菌株分泌的细菌素对不同源金黄色葡萄球菌表现出抑菌效果，并且具有良好的抗酶解性，在100 ℃和121 ℃处理后抑菌活性仍能维持在35%以上，该细菌素在pH 3.0-5.0条件下抑菌活性最佳；该菌株在18 h进入生长稳定期，培养8 h时pH值下降到5.0以下，抑菌效果稳步增加；该菌株在模拟胃液中有极强的存活能力，并能够大幅增殖。【结论】肠膜明串珠菌WJY-6有着极强的产酸能力，在模拟胃液中耐受能力良好，其所分泌的细菌素具备优异的理化特性，且对金黄色葡萄球菌存在显著的抑制活性，有望成为金黄色葡萄球菌病防治的新型替抗产品。

关键词：金黄色葡萄球菌乳酸菌肠膜明串珠菌细菌素生物学特性

道地药材天麻DNA真伪鉴定试剂盒的研制与评价

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中国现代应用药学 2024年第9期41卷 1198-1203页

作者：马秋贺马玉贺刘悦李涛高丽君夏薇李明成曲永梅北华大学医学技术学院吉林132013 吉林省中药DNA指纹检测技术科技创新中心吉林132013 吉林国安药业有限公司吉林132013

目的建立一种将DNA提取技术与PCR技术相结合的天麻DNA真伪鉴定试剂盒,并对试剂盒性能进行方法学评价。方法通过美国国家生物技术信息中心(NCBI)查找天麻及其常见伪品紫茉莉根、大丽菊块茎、马铃薯的ITS2序列,应用DNAMAN进行多序列比对,N... 详细信息

目的建立一种将DNA提取技术与PCR技术相结合的天麻DNA真伪鉴定试剂盒,并对试剂盒性能进行方法学评价。方法通过美国国家生物技术信息中心(NCBI)查找天麻及其常见伪品紫茉莉根、大丽菊块茎、马铃薯的ITS2序列,应用DNAMAN进行多序列比对,NCBI-Primer-Blast设计天麻特异性引物。改良植物常用DNA提取的CTAB法,确保提取出高效的正品天麻及其常见伪品的基因组DNA,应用紫外分光光度法测其浓度及纯度。优化PCR反应体系,确定试剂盒的组成与反应条件,随机抽样检测市售天麻样品。结果应用所研制的试剂盒提取样品DNA,纯度OD260/OD280值为(1.87±0.13),灵敏度为10 ng·μL^(-1),3次重复性检测结果相同,反复冻融5、10、15、20次对检测效果无影响,于-20℃可保存1年,检测10个市售天麻样品,其中7个是正品,3个是伪品。结论道地药材天麻DNA真伪鉴定试剂盒特异性强,灵敏度高,重复性和稳定性均良好,检测结果准确,适用于天麻及其常见伪品的快速鉴别。

关键词：天麻 ITS2 DNA提取真伪鉴定试剂盒聚合酶链式反应

人参-黄芪药对不同配比化学成分分析及抗氧化活性研究

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中国新药杂志 2024年第11期33卷 1164-1173页

作者：曹国世李波李佳尉忠贤赵彧陈越赵大庆张红印严铭铭长春中医药大学长春130117 长春中医药大学附属医院长春130021 吉林省中药保健食品科技创新中心长春130117

目的:比较不同配比人参-黄芪药对中指标性成分差异,探究其抗氧化活性。方法:制备人参、黄芪提取物及不同配伍比例(1∶1,1∶2,1∶4,m/m)的人参-黄芪药对提取物,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和2,2'-... 详细信息

目的:比较不同配比人参-黄芪药对中指标性成分差异,探究其抗氧化活性。方法:制备人参、黄芪提取物及不同配伍比例(1∶1,1∶2,1∶4,m/m)的人参-黄芪药对提取物,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸+[2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline)-6-sulfonate+,ABTS+]和等化学法检测人参-黄芪药对清除自由基能力;建立H_(2)O_(2)诱导的HepG2细胞氧化损伤模型,通过荧光探针法与ELISA法分析人参-黄芪药对对HepG2细胞模型中氧化因子分泌水平的影响;建立D-半乳糖诱导小鼠衰老模型分析人参-黄芪药对不同配比的体内抗氧化活性;采用紫外分光光度法和HPLC-ELSD法,分析比较各提取物中活性成分(总酚酸、总皂苷、总多糖、总黄酮、总蛋白)及7种主要化学成分的含量差异。结果:人参-黄芪药对不同配比提取物,均显示出较好的抗氧化活性,人参-黄芪(1∶2)药对具有较强的清除自由基能力。体外细胞模型实验中,人参-黄芪药对给药后可显著提高细胞活力、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)含量,降低丙二醛(malondialdehyde,MDA)浓度,其中,人参-黄芪(1∶2)给药浓度为400μg·mL^(-1)时,细胞活力最高可达(92.88±2.81)%。体内实验表明,人参-黄芪(1∶2)可以增强模型小鼠血液和肝脏中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶含量,降低丙二醛浓度。人参-黄芪药对活性成分分析结果表明,人参-黄芪(1∶2)配比时总黄酮和总皂苷含量最高。结论:与单药材提取物相比,人参-黄芪药对不同配比提取物均具有良好的清除自由基能力及体内体外抗氧化作用,其中人参-黄芪(1∶2)药对的抗氧化活性最好。

关键词：人参黄芪药对化学成分抗氧化活性