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基于超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱和靶向网络药理学技术结合分子对接研究薤白治疗高血脂症的药效成分

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分析化学 2024年第4期52卷 578-586页

作者：王一凯董金旭白玉涛王瑞黄鑫陈长宝越皓刘侗杨德辉长春中医药大学薤白研究所吉林省东方制药有限公司

采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）技术快速分析了薤白中主要化学成分及入血成分，并根据相对分子质量、碎片离子以及色谱峰保留时间等信息对成分进行归属鉴定。在薤白药材中共鉴定出36种化学成分，包括28种皂苷... 详细信息

采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）技术快速分析了薤白中主要化学成分及入血成分，并根据相对分子质量、碎片离子以及色谱峰保留时间等信息对成分进行归属鉴定。在薤白药材中共鉴定出36种化学成分，包括28种皂苷类化合物、3种氨基酸类化合物、2种黄酮类化合物、1种有机硫化合物、1种核苷类化合物、1种类激素脂质化合物以及8种以原型入血的成分。基于入血成分与TCMSP平台数据库筛选交集成分，应用靶向网络药理学及分子对接技术，构建了“药物-成分-靶点-通路”关联网络，筛选出槲皮素、柚皮素、薤白苷E和25(R)-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-22-羟基-5β-呋甾3-O-β-D-吡喃葡萄糖基（1→2）-β-D-吡喃半乳糖苷为薤白药材治疗高血脂症的主要药效成分，磷酸腺苷活化蛋白激酶（AMPK）、肿瘤坏死因子（TNF）、血管内皮生长因子A(VEGFA)和基质金属蛋白酶9(MMP9)为薤白发挥降血脂药效的关键作用靶点。将主要药效成分与关键作用靶点进行分子对接，结果表明，4种药效成分均与AMPK结合较强，推测调节脂质代谢可能是薤白发挥降血脂作用的关键机制。本研究为研究薤白药效成分提供了数据参考，也为薤白药材质量标准的提升提供了依据。

关键词：超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱靶向网络药理学分子对接薤白药效成分

来源：博看期刊

五味子四种组分蛋白结构、理化性质和功能特性比较

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食品与发酵工业 2024年第2期50卷 67-77页

作者：王海东张红印曹珺李光哲严铭铭赵大庆长春中医药大学吉林省人参科学研究院吉林长春130117 吉林省中药保健食品科技创新中心吉林长春130117

以北五味子脱脂粉为原料,通过奥斯本四步法提取清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,分析比较4种组分蛋白的结构、理化性质和功能特性。结果表明,4种组分蛋白所含有的营养成分差异显著,其中谷蛋白的蛋白质含量最高而脂肪含量最低,同时蛋... 详细信息

以北五味子脱脂粉为原料,通过奥斯本四步法提取清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,分析比较4种组分蛋白的结构、理化性质和功能特性。结果表明,4种组分蛋白所含有的营养成分差异显著,其中谷蛋白的蛋白质含量最高而脂肪含量最低,同时蛋白提取率最高;4种组分蛋白还原性电泳和非还原型电泳在10~180 kDa和3.3~33.0 kDa亚基条带分布存在差异,超低分子质量电泳发现醇溶蛋白分子质量分布于5 kDa;扫描电镜观察出4种组分蛋白不同的表面结构和聚集程度,谷蛋白最为松散;傅里叶变换红外光谱证实了不同组分蛋白二级结构的差异。此外,谷蛋白的热稳定性、溶解性、持水性、持油性、乳化性和乳化稳定性及起泡性和泡沫稳定性均为最优,揭示出4种组分蛋白组成和结构的不同,导致其表现出的理化性质和功能特性也存在差异。

关键词：五味子组分蛋白结构理化性质功能特性

响应面法优化五味子蛋白肽的制备工艺及其体外抗氧化活性

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食品工业科技 2024年第19期45卷 166-176页

作者：王海东张涵周泓妍史佳琳石雨欣衣春光张红印严铭铭长春中医药大学东北亚中医药研究院吉林长春130117 吉林省中药保健食品科技创新中心吉林长春130117

目的:获取五味子蛋白肽的最适酶和最佳制备工艺并考察其体外抗氧化活性。方法:应用7种蛋白酶酶解,基于五味子蛋白不同酶解产物的水解度、自由基清除活性、多肽得率和含量结合SDS-PAGE中分子量多指标综合评价,筛选出最适蛋白酶。以DPPH... 详细信息

目的:获取五味子蛋白肽的最适酶和最佳制备工艺并考察其体外抗氧化活性。方法:应用7种蛋白酶酶解,基于五味子蛋白不同酶解产物的水解度、自由基清除活性、多肽得率和含量结合SDS-PAGE中分子量多指标综合评价,筛选出最适蛋白酶。以DPPH自由基清除率为考察指标,通过单因素实验结合响应面分析法确定最佳酶解工艺。以五味子蛋白为参照,分析比较五味子蛋白肽对O_(2)^(−)·、·OH、DPPH·、ABTS^(+)·的清除能力和Fe^(2+)螯合能力及Fe^(3+)还原能力。结果:制备五味子蛋白肽的最适酶为碱性蛋白酶,最佳酶解工艺参数为:底物浓度5%,酶底比1%,酶解时间3 h,酶解温度55℃,pH为9.0,在此条件下获得的多肽含量为88.61%,水解度为24.21%,DPPH·清除率为86.96%。五味子蛋白肽的自由基清除能力和还原能力均优于五味子蛋白。结论:本研究确定了五味子蛋白肽的最适酶和最佳水解工艺,同时指出,五味子蛋白肽具有更加优良的体外抗氧化活性,可作为一种天然的抗氧化剂。

关键词：五味子酶解蛋白响应面分析抗氧化活性

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乌药中3个新的倍半萜

天然产物研究与开发 2024年第4期36卷 555-561页

作者：李业生白旭岚许红涛侴桂新上海中医药大学中药研究所上海201203

研究乌药的化学成分。采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20、制备液相等多种色谱分离技术进行分离纯化,通过波谱数据分析进行结构鉴定。从乌药90%乙醇提取物中分离得到4个倍半萜,分别鉴定为linderaggredin B1(1)、乌药酮酸A(2)、乌药酮酸B(3)... 详细信息

研究乌药的化学成分。采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20、制备液相等多种色谱分离技术进行分离纯化,通过波谱数据分析进行结构鉴定。从乌药90%乙醇提取物中分离得到4个倍半萜,分别鉴定为linderaggredin B1(1)、乌药酮酸A(2)、乌药酮酸B(3)、chlorahupetolide K(4),其中化合物1~3为新化合物,化合物4为首次从樟科中分离得到。

关键词：乌药化学成分倍半萜桉叶烷型钓樟烷型

基于HPLC指纹图谱结合化学模式识别以及多指标成分定量评价前胡药材质量

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天然产物研究与开发 2024年第3期36卷 433-443页

作者：谢景秦优唐雪阳沈冰冰王勇庆陈林张水寒湖南省中医药研究院中药资源研究所长沙410013 湖南中医药大学药学院长沙410208

基于HPLC指纹图谱和多指标成分含量测定,并结合化学模式识别,评价不同产地前胡药材质量。采用Agilent SB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.5%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.5 mL/min,检测波长321 nm,建立指纹图谱并对... 详细信息

基于HPLC指纹图谱和多指标成分含量测定,并结合化学模式识别,评价不同产地前胡药材质量。采用Agilent SB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.5%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.5 mL/min,检测波长321 nm,建立指纹图谱并对4个香豆素类成分进行定量,采用聚类分析(hierarchical clustering analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)、偏最小二乘法-判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)对不同产地前胡药材进行质量评价。结果显示16批前胡药材HPLC指纹图谱相似度为0.966~0.999,确定了21个共有峰,共指认了9个成分。通过化学模式识别分析,将16批样品聚类为三类:以安徽宁国、亳州等为主的道地产区前胡,以湖南、贵州、重庆等为主的前胡,以及高海拔云南产区的前胡,并确立8个差异性质量标志物。多指标含量测定不同产地前胡的佛手柑内酯、白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡素E含量分别为0.0167~0.1319 mg/g、6.0696~16.2255 mg/g、0.4265~2.0100 mg/g、1.3407~3.1155 mg/g。本研究所建立的指纹图谱和含量测定方法专属性强,稳定性高,分离度良好,结合化学模式可用于前胡药材的质量评价。

关键词：前胡香豆素指纹图谱含量测定化学模式识别

基于网络药理学和实验验证的三黄膏治疗痔疮的作用机制研究

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中国现代应用药学 2024年第12期41卷 1591-1603页

作者：李文杰于倩郑怡杨亦柳张馨月李光哲严铭铭长春中医药大学长春130117 吉林省中药保健食品科技创新中心长春130117

目的基于网络药理学对三黄膏治疗痔疮的核心成分、靶点及信号通路进行预测,并借助分子对接和实验验证,对其作用机制进行初步探讨。方法经过文献研究和数据库筛选,得到三黄膏活性成分、靶点及痔疮相关靶点,通过Cytoscape软件构建关联... 详细信息

目的基于网络药理学对三黄膏治疗痔疮的核心成分、靶点及信号通路进行预测,并借助分子对接和实验验证,对其作用机制进行初步探讨。方法经过文献研究和数据库筛选,得到三黄膏活性成分、靶点及痔疮相关靶点,通过Cytoscape软件构建关联网络并筛选核心基因,然后对基因进行功能分析和通路富集分析。使用Autodock Vina进行分子对接验证,并通过酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫组化验证三黄膏对核心靶点的调控作用。结果收集到三黄膏治疗痔疮活性成分77个及其潜在靶点61个,KEGG显示三黄膏可调控钙信号通路、神经活性配体-受体相互作用、cGMP-PKG信号通路等,影响CGRP、NK-1R、TRPV1、VEGF、IL-6和TNF-α 6个核心靶点,分子对接显示三黄膏与靶点蛋白间有较好的亲和性,动物实验验证了三黄膏可抑制IL-6、CGRP、P物质等的表达,促进VEGF的表达。结论三黄膏可能作用于CGRP、NK-1R等靶点,通过调控钙信号通路及PI3K-Akt等通路,发挥镇痛抗炎、活血化瘀作用来治疗痔疮。

关键词：三黄膏痔疮网络药理学分子对接实验验证

基于数据挖掘探析帅焘主任治疗咳嗽组方用药的临证经验

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云南中医中药杂志 2024年第10期 45-49页

作者：瞿广城李毅伟杨绍春蒲亚萍李韦杨玉琪云南省中医中药研究院

目的基于中医传承计算平台V3.0软件探析云南省名中医帅焘主任医师治疗咳嗽处方的组方用药规律，梳理其临证经验。方法筛选2018年8月—2022年10月在昆明市区中医门诊由帅焘主任医师接诊的咳嗽病例，通过中医传承计算平台V3.0,录入咳嗽... 详细信息

目的基于中医传承计算平台V3.0软件探析云南省名中医帅焘主任医师治疗咳嗽处方的组方用药规律，梳理其临证经验。方法筛选2018年8月—2022年10月在昆明市区中医门诊由帅焘主任医师接诊的咳嗽病例，通过中医传承计算平台V3.0,录入咳嗽有关处方信息，组建帅焘主任医师治疗咳嗽数据库，利用中医传承计算平台所包含的统计分析、方剂分析等数据挖掘功能，归纳出帅焘主任医师治疗咳嗽的常用中药及组方规律。结果共筛选出311首有效处方，使用中药187味，得出使用频数最高的中药为甘草，其他使用频数较高的中药依次有桔梗、前胡、杏仁、紫菀等；使用的化痰止咳平喘类药偏多；常用的药对为甘草-桔梗、桔梗-前胡、甘草-前胡、桔梗-杏仁、甘草-杏仁、前胡-杏仁、桔梗-紫菀等；当支持度为155,置信度为0.95时，常用中药组合有84对，关联规则有112对。结论帅焘主任医师治疗咳嗽重在调整肺脏之宣发肃降功能，适当运用化痰止咳药，很少使用强力镇咳药物；通过合理搭配升降性质的药对，使肺脏宣发肃降功能趋于平衡，则咳嗽自愈。

关键词：帅焘咳嗽临证经验中医传承计算平台

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整合药理学在中医药现代研究的若干进展

中国实验方剂学杂志 2024年第14期30卷 270-278页

作者：李珊珊李玮婕王萍中国中医科学院中药研究所北京100700

中药方剂作为临床治疗的主要形式和手段,是中医理法方药的关键环节,是中医学理论和临床实践的桥梁,探索中药方剂的化学物质实体和机体生命活动的关系及其复杂交互规律,是中药现代研究的关键科学问题之一。然因本身组成的复杂性、生物效... 详细信息

中药方剂作为临床治疗的主要形式和手段,是中医理法方药的关键环节,是中医学理论和临床实践的桥梁,探索中药方剂的化学物质实体和机体生命活动的关系及其复杂交互规律,是中药现代研究的关键科学问题之一。然因本身组成的复杂性、生物效应表达的多样性,使其“化学成分群-体内过程-药效活性”之间缺乏“完整的证据链”,存在严重的“碎片化”现象。整合药理学的提出,是中药复杂系统分子作用解析的有效策略和方法,特别体现了以生物技术革命为代表的第四次浪潮的时代背景下,利用互联网、大数据、人工智能为代表的新技术驱动中药复杂体系发展的新趋势,为系统揭示多成分药物与机体相互作用及其整合规律和作用原理提供了一条切实可行的途径。该文试从中药整合药理学的形成和发展、研究思路、关键技术及应用等方面进行综述,为阐释中医药理论的科学内涵和中医原创思维的科学价值、总结与传承名医经验、中药质量控制、中药作用原理阐释和中药新药研发等提供强有力支持。

关键词：整合药理学中药方剂证候生物内涵安全性和有效性质量控制药效物质基础

黄体酮撤退加情志刺激诱导型经前期综合征大鼠模型的建立与评价

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中国中药杂志 2024年第13期49卷 3608-3618页

作者：陈可点高双荣刘雪婷林娜张彦琼中国中医科学院中药研究所北京100700

经前期综合征(PMS)缺乏与中西医临床诊疗标准吻合度高、可行性好且表现稳定的动物模型,导致其发病机制、药效药理的相关研究缺乏可靠的实验载体。该研究旨在从“病-证-症”关联视角,系统解析PMS的生物内涵,在此基础上建立黄体酮撤退与... 详细信息

经前期综合征(PMS)缺乏与中西医临床诊疗标准吻合度高、可行性好且表现稳定的动物模型,导致其发病机制、药效药理的相关研究缺乏可靠的实验载体。该研究旨在从“病-证-症”关联视角,系统解析PMS的生物内涵,在此基础上建立黄体酮撤退与情志刺激结合诱导型PMS动物模型,并对其进行客观评价。首先通过GeneCards、DisGeNET、MalaCards和中医证候本体及多维定量关联计算平台(SoFDA)数据库与已发表文献,收集PMS现代医学与中医诊疗标准中肝郁气滞与气滞血瘀证型相关的临床症状基因集,并依据基因间相互作用信息,建立PMS的“病-证-症”关联网络。基于数据挖掘结果,在经典黄体酮撤退模型基础上,结合慢性束缚刺激,模拟临床发病过程中由外部环境刺激引起的情绪抑郁,从生理与情志2个维度引起病理损伤,制备PMS大鼠模型,评价2种造模条件下的模型在旷场实验得分,脏器指数,卵巢病理变化,血清雌二醇(E_2)、促卵泡激素/促黄体生成素(FSH/LH)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)水平及凝血四项、血流变指标。通过计算“病-证-症”关联网络节点在网络中的度值、介度和接近度,筛选出163个具有网络拓扑重要性的核心基因。进一步的生物功能挖掘结果表明,PMS核心基因主要参与“神经-内分泌-免疫”系统与血液循环障碍相关通路的调控;临床表型症状基因集映射分析提示,PMS核心基因与抑郁症状及血瘀所致肿痛症状显著相关。与单纯的黄体酮撤退模型相比,注射与束缚双重刺激的大鼠在旷场实验水平得分与总分,卵巢组织病理变化,血清神经递质5-HT与DA水平,血清性激素E_2与FSH/LH水平的异常改变均更为显著,且注射加束缚条件加剧了模型大鼠血液流变性、凝血功能和红细胞形态的病理改变,证实了该大鼠模型能够表征PMS发生、进展中的“神经-内分泌-免疫”系统紊乱与血液循环系统障碍,与该疾病的中西医临床诊疗标准相符。黄体酮撤退与情志刺激结合诱导型PMS大鼠模型的建立能够为PMS发病机制的阐释、治疗药物的发现与药效评价提供可靠的实验载体,也为客观化反映PMS中西医临床表征与精准治疗提供参考。

关键词：经前期综合征 “病-证-症”关联黄体酮慢性束缚应激抑郁血瘀