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几种中药体外抗猪流行性腹泻病毒活性的研究

中国预防兽医学报 2024年第3期46卷 229-235页

作者：甘晓凤孟心茹郭丽君张嫱郑哲王燕春赵权蔡亚南吉林农业大学动物医学院吉林长春130118 动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

为探究蒲公英、板蓝根、泽泻、葛根、黄芩5种中药水提物体外抑制猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染的效果,本研究先将不同浓度中药液分别2倍倍比稀释后加入非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)中,观察各药物对细胞生长状态的影响来确定各药物的最大安全... 详细信息

为探究蒲公英、板蓝根、泽泻、葛根、黄芩5种中药水提物体外抑制猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染的效果,本研究先将不同浓度中药液分别2倍倍比稀释后加入非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)中,观察各药物对细胞生长状态的影响来确定各药物的最大安全浓度。结果显示,蒲公英、板蓝根、泽泻、葛根、黄芩的最大安全浓度分别为3.91 mg/m L、1.95 mg/m L、1.95 mg/m L、0.98 mg/m L、0.98 mg/m L。以药物最大安全浓度为初始浓度,2倍倍比稀释各药物,共6个浓度,采用先加药物后加病毒(阻断作用),先加病毒后加药物(抑制作用)、药物和病毒同时加入(杀灭作用)3种不同加药的方式,加入已铺满单层Vero细胞的96孔细胞培养板中,72 h后加入CCK-8溶液1 h后测定各孔的OD_(450nm)值,评估阻断作用、抑制作用、杀灭作用下各药物对PEDV抑制率最高的浓度。结果显示,5种药物在阻断作用、抑制作用、杀灭作用下对PEDV抑制率最高的浓度分别为3.91 mg/m L、1.95 mg/m L、1.95 mg/m L、0.98 mg/m L以及0.98 mg/m L。以上述对PEDV抑制率最高的药物浓度为试验浓度,重复上述3种加药方式,72 h后加入CCK-8溶液1 h后测定各孔的OD_(450nm)值,计算3种作用方式下各药物对PEDV的抑制率,筛选出对PEDV抑制率最高的药物。结果显示,各中药均可在体外抑制PEDV的感染,阻断作用下黄芩对PEDV的抑制率最高达138.10%,抑制作用下蒲公英对PEDV的抑制率最高达149.90%,杀灭作用下葛根对PEDV的抑制率最高达102.90%,且蒲公英和黄芩在3种作用方式下对PEDV的抑制率均高于80%。以上结果表明蒲公英和黄芩体外抗PEDV感染的效果最好,本研究首次证实5种中药对体外抗PEDV感染的效果,为中药治疗PED提供了参考依据。

关键词：中药猪流行性腹泻病毒非洲绿猴肾细胞体外抗病毒活性

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柴胡皂苷体内外抗鸡柔嫩艾美耳球虫的研究

中国预防兽医学报 2024年第6期46卷 621-629页

作者：孟心茹甘晓凤郭丽君张嫱郑哲王燕春赵权蔡亚南吉林农业大学动物医学院吉林长春130118 动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118

为了探究柴胡皂苷对柔嫩艾美耳球虫(***)体内外感染的影响,本实验采用CCK-8法检测2倍倍比稀释(0.384 g/L~0.0645 g/L)的柴胡皂苷对MDBK细胞活力的影响,结果显示,浓度为0.0645 g/L的柴胡皂苷对MDBK细胞的活力影响最小,并且可以促进细胞... 详细信息

为了探究柴胡皂苷对柔嫩艾美耳球虫(***)体内外感染的影响,本实验采用CCK-8法检测2倍倍比稀释(0.384 g/L~0.0645 g/L)的柴胡皂苷对MDBK细胞活力的影响,结果显示,浓度为0.0645 g/L的柴胡皂苷对MDBK细胞的活力影响最小,并且可以促进细胞的生长,因此以该浓度的柴胡皂苷进行后续试验。本研究设置阴性对照组(NC)、***感染组(PC)、磺胺嘧啶钠对照组(WM)以及柴胡皂苷治疗组(CA)。除NC组外,每组细胞加入1.6×10^(6)个***子孢子,4 h后WM组加入0.5 g/L磺胺嘧啶钠,CA组加入0.0645 g/L柴胡皂苷,继续培养至不同时间,分别提取4组细胞蛋白,通过western blot检测感染***的MDBK细胞中p65蛋白的磷酸化水平;采用荧光定量PCR(qPCR)检测4组细胞中炎症因子的转录水平。Western blot结果显示,培养至24 h时,4组细胞中p65蛋白磷酸化水平均无显著差异;感染48 h与72 h时,与WM和PC组相比,CA组细胞中p65蛋白磷酸化水平极显著降低(P及盲肠病变值计算每组雏鸡的抗球虫指数(ACI);分别于感染后4 d、6 d和8 d分别剖杀10只鸡,取盲肠组织制备病理切片,观察各组鸡盲肠组织的病变。结果显示,CA组鸡粪便卵囊排出率为22.00%,极显著低于PC组(P<0.0001),极显著高于WM组(P<0.0001);ACI为173.13,极显著高于PC组和WM组(P<0.0001),达到中效抗球虫水平;剖检病变观察可见PC组雏鸡的盲肠肠壁变薄,长度变短,高度肿胀,而CA组鸡盲肠肠壁逐渐恢复正常形态,与WM组雏鸡盲肠改善结果接近;组织病变可见,与PC组和WM组相比,CA组盲肠无炎性细胞浸润且肠绒毛肠壁形态完整,未观察到***裂殖子。以上结果首次证实柴胡皂苷在体内外均可有效抑制***对细胞的感染,并且能够改善与修复***对雏鸡盲肠的损伤,本研究为天然中药成分用于治疗***的感染提供参考依据。

关键词：柴胡皂苷柔嫩艾美耳球虫 p65蛋白的磷酸化 NF-κB信号通路

饲粮中添加辣椒素对产蛋后期长顺绿壳蛋鸡产蛋性能、蛋品质、卵泡发育及生殖激素水平的影响

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中国畜牧兽医 2024年第10期 4282-4291页

作者：张柏林刘宁王珍梅王述柏青岛农业大学动物科技学院遵义师范学院生物与农业科技学院吉林农业大学动物科技学院动物生产及产品质量安全教育部重点实验室贵州省种畜禽种质测定中心

[目的]探讨饲粮中添加不同水平辣椒素(capsaicin,CAP)对产蛋后期长顺绿壳蛋鸡产蛋性能、蛋品质、卵泡发育及生殖激素水平的影响,并估算CAP在产蛋后期蛋鸡饲粮中适宜的添加剂量。[方法]选取56周龄开产日龄相近且健康状况良好的长顺绿壳蛋... 详细信息

[目的]探讨饲粮中添加不同水平辣椒素(capsaicin,CAP)对产蛋后期长顺绿壳蛋鸡产蛋性能、蛋品质、卵泡发育及生殖激素水平的影响,并估算CAP在产蛋后期蛋鸡饲粮中适宜的添加剂量。[方法]选取56周龄开产日龄相近且健康状况良好的长顺绿壳蛋鸡500只,随机分为5个处理组,每个处理10个重复,每个重复10只鸡。其中,试验Ⅰ组鸡饲喂基础饲粮(0 mg/kg CAP),试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ及V组鸡分别饲喂在基础饲粮基础上添加100、150、200及400 mg/kg CAP的饲粮。试验期8周。试验结束后,统计蛋鸡产蛋性能和蛋品质;采集血液及卵巢组织,测定生殖器官发育指标及血清中生殖激素含量。[结果]与试验Ⅰ组相比,(1)试验Ⅱ～Ⅴ组蛋鸡试验期1～4、5～8及1～8周产蛋率及日产蛋重均显著升高,试验期1～4及1～8周蛋鸡的平均日采食量均显著升高(P及小黄卵泡的相对重均显著升高(P及血清中促卵泡生成素、黄体生成素、孕酮及雌二醇含量均显著升高(P品质,促进蛋鸡卵泡发育,并增加生殖激素水平,且以242～281 mg/kg添加量较佳。

关键词：辣椒素长顺绿壳蛋鸡产蛋性能卵泡发育生殖激素

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单细胞转录组测序技术在自身免疫病中应用的最新研究进展

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中国免疫学杂志 2024年第10期40卷 2219-2222+2228页

作者：孙金梅石春卫杨桂连杨文涛王春凤吉林农业大学动物医学院动物科学技术学院吉林省重点实验室动物微生态制剂工程研究中心动物生产及产品质量安全教育部重点实验室

单细胞转录组测序技术是以单个细胞为研究对象，对每个转录本的基因表达水平以及细胞间的异质性进行统计分析，在一定程度上弥补了传统测序技术的缺陷。自身免疫病是自身免疫耐受状态或自身免疫细胞调节异常时所致的自身组织细胞损伤或... 详细信息

单细胞转录组测序技术是以单个细胞为研究对象，对每个转录本的基因表达水平以及细胞间的异质性进行统计分析，在一定程度上弥补了传统测序技术的缺陷。自身免疫病是自身免疫耐受状态或自身免疫细胞调节异常时所致的自身组织细胞损伤或功能异常。本文综述了近年来关于单细胞转录组测序技术在自身免疫病中应用的研究成果，为尽早实现精准医疗提供有价值的线索。

关键词：单细胞转录组测序自身免疫病研究进展

抗菌肽对鱼类肠道菌群及免疫功能影响的研究进展

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饲料工业 2024年第2期45卷 43-48页

作者：董晓庆姜丹曲桂娟陈玉珂王桂芹吉林农业大学动物科技学院吉林长春130118 动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118 吉林省动物营养与饲料科学重点实验室吉林长春130118

抗菌肽是先天免疫的组成部分,构成许多生物体抵御入侵病原体的第一道防线。抗菌肽是基因编码的(小于100个氨基酸),具有空间排列的疏水性和阳离子氨基酸特性的两性分子,具有多种生物学功能。抗菌肽(作为饲料添加剂)能够改善水产动物的生... 详细信息

抗菌肽是先天免疫的组成部分,构成许多生物体抵御入侵病原体的第一道防线。抗菌肽是基因编码的(小于100个氨基酸),具有空间排列的疏水性和阳离子氨基酸特性的两性分子,具有多种生物学功能。抗菌肽(作为饲料添加剂)能够改善水产动物的生长性能,增强水产动物机体的抗病能力。鱼类肠道承担着营养物质消化吸收的功能,同时鱼类肠道内的微生物也参与机体的免疫反应。文章对抗菌肽的来源、分类、生物学功能、抗菌机制以及抗菌肽对鱼类肠道菌群和机体免疫功能的影响进行了系统的阐述,进而分析了抗菌肽、肠道菌群、机体免疫三者的关系。为抗菌肽替代抗生素在鱼类健康养殖中的应用提供了技术指导,为揭示抗菌肽在鱼体的相关作用机制奠定基础。

关键词：抗菌肽鱼类肠道菌群免疫功能研究进展

表面展示传染性法氏囊病病毒VP2蛋白细菌样颗粒的构建与鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2024年第2期 65-71,78页

作者：洪新雅段姝宇兰奇官王瑞楠朱凡王春凤王建忠吉林农业大学动物医学院吉林省微生态制剂工程研究中心/动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118

为构建表面展示传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus, IBDV)VP2蛋白的细菌样颗粒(bacterium-like particies, BLPs),试验分别克隆VP2基因和乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白(protein anchor, PA)基因片段,通过融合PCR技术构建VP2-PA融合基因,利用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统构建重组杆状病毒rBV-VP2-PA,将表达产物与裸露BLPs共孵育,在PA的介导下,构建表面展示IBDV VP2蛋白的细菌样颗粒(BLPs-VP2);依次采用透射电镜观察、SDS-PAGE、Western-blot、间接免疫荧光对BLPs-VP2进行鉴定。结果表明:VP2蛋白获得成功表达并展示于BLPs表面,可与IBDV阳性血清发生特异性结合,1 U(2.5×10~9颗粒)BLPs最大可负载约107μg VP2-PA融合蛋白。说明构建的IBDV VP2蛋白BLPs可用于传染性法氏囊病(IBD)新型亚单位疫苗的研发。

关键词：传染性法氏囊病 VP2蛋白细菌样颗粒细菌表面展示系统亚单位疫苗

新型非粮蛋白源黄粉虫粉的营养特性及替代鱼粉对水产养殖动物的影响

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饲料工业 2024年第2期45卷 13-18页

作者：孟思彤王吟涛李良李登来刘思影吴莉芳吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118 吉林省动物营养与饲料科学重点实验室吉林长春130118

鱼粉供应资源短缺,价格日益高涨,严重制约水产养殖业的可持续发展。我国新型非粮蛋白源资源丰富,种类繁多,具有可持续性强、营养价值高等特点,但在水产饲料中的应用并未得到充分挖掘。黄粉虫(Tenebrio molitor)具有蛋白质含量高、氨基... 详细信息

鱼粉供应资源短缺,价格日益高涨,严重制约水产养殖业的可持续发展。我国新型非粮蛋白源资源丰富,种类繁多,具有可持续性强、营养价值高等特点,但在水产饲料中的应用并未得到充分挖掘。黄粉虫(Tenebrio molitor)具有蛋白质含量高、氨基酸组成均衡等优点,其虫粉是一种颇具潜力的优质非粮蛋白源。文章对黄粉虫粉的营养特性及其替代鱼粉对水产养殖动物的生长性能、肉品质、消化功能、免疫功能和抗氧化能力的影响进行概述,旨在为合理开发和应用新型非粮蛋白源提供参考。

关键词：新型非粮蛋白源黄粉虫粉水产养殖动物替代鱼粉营养特性

原花青素对泥鳅生长、免疫功能及抗氧化能力的影响

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饲料工业 2024年第4期45卷 55-61页

作者：方琼亚孔祎頔李民李科刘晓蕊刘海惠王桂芹吉林农业大学动物科学技术学院动物生产及产品质量安全教育部重点实验室现代农业技术教育部国际合作联合实验室吉林省动物营养与饲料科学重点实验室吉林长春130118

研究旨在探究原花青素(Oligomeric proanthocyanidins,OPC)对泥鳅生长、免疫功能及抗氧化能力的影响。在基础饲料中分别添加0、100、200、400 mg/kg和800 mg/kg OPC[分别记为对照(CON)、OPC100、OPC200、OPC400、OPC800组],饲喂300尾初始体重为(2.13±0.01)g的泥鳅。进行8周的饲养试验后,测定泥鳅的生长性能、血清免疫指标及肝脏、肠道中抗氧化酶活性。结果表明:随着OPC添加量的增加,泥鳅的特定生长率(SGR)、终末体质量(FBW)、增重率(WG)和蛋白质效率(PER)显著升高(P及肝脏中SOD和谷胱甘肽(GSH)活性显著高于对照组(P<0.05),且各组肠道中GSH活性均显著提升(P<0.05),而所有组肝脏和肠道的丙二醛(MDA)含量显著下降(P<0.05);综上,饲料中添加200~400 mg/kg OPC能够增强泥鳅生长、改善免疫能力和提高抗氧化能力。

关键词：原花青素泥鳅生长免疫功能抗氧化能力

牛病毒性腹泻病毒NM-1株的分离鉴定及基因序列分析

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中国兽医科学 2024年

作者：刘方圆张东亮吕文雪吕爽王春霞许皓袁帅陈雪徐凤宇赵传芳吉林农业大学动物医学院吉林特研生物技术有限责任公司中国农业科学院特产研究所吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室

为探究内蒙古地区牛病毒性腹泻的流行情况及牛病毒性腹泻病毒（BVDV）流行株基因特征，本研究采集了内蒙古某奶牛场腹泻犊牛的粪便样品，经过滤除菌等处理后，接种于牛肾细胞（MDBK），盲传5代后，观察细胞病变并进行RT-PCR鉴定。结果... 详细信息

为探究内蒙古地区牛病毒性腹泻的流行情况及牛病毒性腹泻病毒（BVDV）流行株基因特征，本研究采集了内蒙古某奶牛场腹泻犊牛的粪便样品，经过滤除菌等处理后，接种于牛肾细胞（MDBK），盲传5代后，观察细胞病变并进行RT-PCR鉴定。结果显示，成功分离到1株能致细胞病变的BVDV毒株，命名为BVDV-NM-1株；电镜观察到BVDV-NM-1株具有典型BVDV病毒粒子形态；对BVDV-NM-1株5′-UTR基因序列扩增后进行序列比对，结果显示，BVDV-NM-1株属于BVDV-1型，与BVDV-1v亚型的基因同源性为96%。本研究结果为内蒙古地区牛病毒性腹泻的防控奠定了基础。

关键词：牛病毒性腹泻病毒分离鉴定序列分析