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芦笋皂苷合成相关糖基转移酶基因克隆及原核表达分析

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生物技术通报 2024年第4期40卷 255-263页

作者：钟匀林春刘正杰董陈文华毛自朝李兴玉云南农业大学农学与生物技术学院昆明650201 云南农业大学特色小宗作物研究中心昆明650201 云南农业大学理学院农业化学研究中心昆明650201

【目的】克隆芦笋(Asparagus officinalis)甾醇糖基转移酶基因AoSGT1,分析其潜在催化活性,为解析芦笋皂苷合成途径及代谢调控机制提供科学依据。【方法】基于芦笋转录组数据设计特异性引物,扩增AoSGT1基因的完整开放阅读框(open reading... 详细信息

【目的】克隆芦笋(Asparagus officinalis)甾醇糖基转移酶基因AoSGT1,分析其潜在催化活性,为解析芦笋皂苷合成途径及代谢调控机制提供科学依据。【方法】基于芦笋转录组数据设计特异性引物,扩增AoSGT1基因的完整开放阅读框(open reading frame,ORF),经测序验证获得目标基因序列并进行生物信息学分析;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RTqPCR)测定各组织基因表达量;构建pGEX-4T-3-AoSGT1原核表达载体,并转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(De3),随后诱导实现重组蛋白表达。【结果】AoSGT1长1800 bp,编码599个氨基酸,其相对分子质量为66.72 kD,属于亲水性蛋白,无跨膜域和信号肽。系统发育结果表明,AoSGT1与盾叶薯蓣(Dioscorea zingiberensis)Dz3GT_(2)有较高同源性,同属UGT80B1亚家族。多序列比对揭示了该蛋白序列包含甾醇糖基转移酶保守结构域PSBD Box和PSPG Box,预示其具有对甾体化合物3β-OH位点潜在糖基化活性。RT-qPCR结果显示,AoSGT1在芦笋根中高表达,而在茎和花中低表达。此外,SDS-PAGE结果表明,目标蛋白在大肠杆菌中以可溶性形式高效表达,其大小与预测值相符。【结论】成功克隆AoSGT1基因,并确认其在芦笋中呈现组织特异性表达,推测其可能参与芦笋甾体皂苷生物合成。同时,成功在大肠杆菌中实现了目标蛋白的异源表达。

关键词：芦笋甾体皂苷甾醇糖基转移酶基因克隆生物信息学分析 RT-qPCR 原核表达转录组

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黄芪根腐致病尖孢镰刀菌实时荧光定量PCR检测体系的建立及应用

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农业生物技术学报 2024年第3期32卷 720-729页

作者：赵丽梅赵利田洪岭高芬山西大学中医药现代研究中心山西农业大学经济作物研究所山西大学应用化学研究所

尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)是引起蒙古黄芪(Astragalus membranaceus var. mongholicus,AMM)根腐病的优势致病菌之一。为了快速准确地检测和定量黄芪植株及其种植地土壤中的尖孢镰刀菌，根据延长因子(elongation factor-1α, EF-1... 详细信息

尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)是引起蒙古黄芪(Astragalus membranaceus var. mongholicus,AMM)根腐病的优势致病菌之一。为了快速准确地检测和定量黄芪植株及其种植地土壤中的尖孢镰刀菌，根据延长因子(elongation factor-1α, EF-1α)序列设计引物并验证其特异性，进而建立该病菌的实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR, qRT-PCR)检测体系，并运用该体系对黄芪和土壤样本内的尖孢镰刀菌进行检测。结果表明，设计的引物FaeF2/FaeR2特异性良好；所建体系对黄芪中尖孢镰刀菌DNA的检测灵敏度为0.896 pg/μL，土壤中尖孢镰刀菌孢子量的检测限度为102个分生孢子/g；标准曲线的相关系数分别为0.998和0.973；重复性评价显示该方法可靠、稳定。利用qRT-PCR方法对黄芪和土壤样本进行检测，接种发病样本、疑似发病样本和土壤样本中，尖孢镰刀菌的总检出率分别为100%、66.7%和43.75%；尖孢镰刀菌在黄芪中的定殖量与病情指数正相关，且相同种植年限下，发病土壤中尖孢镰刀菌孢子数显著大于健康土壤。综上结果表明，所建方法适用于黄芪及土壤中尖孢镰刀菌的检测。本研究可为黄芪根腐病的快速诊断、准确评价及土壤预警提供技术支持。

关键词：蒙古黄芪根腐病尖孢镰刀菌实时荧光定量PCR (qRT-PCR) 检测体系

三维网状有机-无机杂化型DABCO锰配合物的合成及性能研究

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化工新型材料 2024年

作者：吕美霞胡宏志刘洋夏合娜孜·吐尔逊江刘尊奇新疆农业大学化学化工学院聚合物新型成型装备国家工程研究中心新疆分中心新疆农业化学与生物材料重点实验室

室温下以1，4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷-甲基氯化物 [DABCO-CH2Cl]+·Cl-、MnCl2·4H2O和氢溴酸为原料，在甲醇和水的混合溶液中以缓慢蒸发方式，得到一种氢键三维网状结构有机-无机杂化型锰配合物[HDABCO-CH2Cl]·MnBr4（1），通过单晶X... 详细信息

室温下以1，4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷-甲基氯化物 [DABCO-CH2Cl]+·Cl-、MnCl2·4H2O和氢溴酸为原料，在甲醇和水的混合溶液中以缓慢蒸发方式，得到一种氢键三维网状结构有机-无机杂化型锰配合物[HDABCO-CH2Cl]·MnBr4（1），通过单晶X射线衍射仪、红外光谱仪、粉末X射线衍射仪、热重分析仪（TG）、介电性能测试仪对晶体材料的结构、热性能和电性能进行分析和测试。单晶结构分析表明：合成的化合物属于单斜晶系，空间群为P21/n，其中[HDABCO-CH2Cl]2+阳离子和[MnBr4]2-四面体阴离子在晶体内部通过氢键相互作用形成三维网状结构；随着温度的改变，[HDABCO-CH2Cl]2+阳离子发生扭动、[MnBr4]2-四面体阴离子发生伸缩变形，引起晶体在240 ～270K范围内产生显著的可逆介电异常现象。

关键词： 1 4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷氢键三维网状结构锰配合物介电异常

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大蒜E素调控斑翅果蝇产卵选择及适合度

昆虫学报 2024年第3期67卷 374-383页

作者：李一璇李隆琦张晟鲍悦月刘安琪庄晶晶姜标刘威安徽农业大学植物保护学院合肥230036 中国科学院上海有机化学研究所上海200032

【目的】研究大蒜E素(allicin E, ALE)对斑翅果蝇Drosophila suzukii产卵行为的影响,为利用ALE生物防治斑翅果蝇提供参考依据。【方法】采用产卵双向选择模型检测0.01%, 0.015%和0.02%ALE对斑翅果蝇雌成虫产卵驱避作用。利用暗盒实验、... 详细信息

【目的】研究大蒜E素(allicin E, ALE)对斑翅果蝇Drosophila suzukii产卵行为的影响,为利用ALE生物防治斑翅果蝇提供参考依据。【方法】采用产卵双向选择模型检测0.01%, 0.015%和0.02%ALE对斑翅果蝇雌成虫产卵驱避作用。利用暗盒实验、摘除前足、摘除触角等方式检测视觉、味觉和嗅觉感觉系统对斑翅果蝇雌成虫产卵偏嗜行为的影响。利用Y生物迷宫试验检测0.015%ALE对斑翅果蝇雌成虫的产卵行为驱避作用。通过检测存活率和发育历期研究ALE对斑翅果蝇适合度的影响。利用荧光染色法检测ALE处理后斑翅果蝇成虫肠道中活性氧水平。【结果】ALE驱避斑翅果蝇雌成虫产卵,对0.01%, 0.015%和0.02%ALE的产卵指数分别为-0.30,-0.44和-0.51。在黑暗和摘除前足条件下,斑翅果蝇雌成虫存在对ALE的显著的产卵避性反应,而摘除触角的斑翅果蝇对ALE的产卵避性显著降低,对0.01%, 0.015%和0.02%ALE的产卵指数分别降低为-0.10,-0.11和-0.12。斑翅果蝇雌成虫所产卵暴露于0.02%ALE后,后代蛹和成虫的存活率分别降低了69.23%和69.70%,后代成蛹和羽化时间分别延长5.88和4.75 d。ALE缩短斑翅果蝇成虫寿命,雌性和雄性在0.02%ALE处理下LT_(50)值分别由39 d降低为18和15 d。0.02%ALE处理72 h后斑翅果蝇成虫奔跑和攀爬速度显著降低。0.02%和0.05%ALE处理3 d后斑翅果蝇成虫肠道中的活性氧水平上升。【结论】ALE引起斑翅果蝇雌成虫产卵避性,主要通过嗅觉介导此种产卵避性;ALE延缓了斑翅果蝇后代的生长发育,降低了亲代成虫的运动活力和存活率,并引起肠道损伤,因此具有潜在的生物防治斑翅果蝇价值。

关键词：斑翅果蝇大蒜E素产卵避性嗅觉系统活性氧

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壳聚糖-京尼平纳米凝胶体系交联动力学与应用

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高分子学报 2024年第3期55卷 275-286页

作者：赵欣悦李培通刘砚华胡冰刘勇刚陈全中国科学院长春应用化学研究所高分子物理与化学国家重点实验室长春130022 中国科学技术大学应用化学与工程学院合肥230026 南京农业大学食品科技学院南京210095

天然交联剂京尼平交联壳聚糖稀溶液可得到具有生物相容性的纳米凝胶.利用非对称流场流分离(AF4)对该纳米凝胶交联过程中的尺寸分布及结构演化进行系统研究,发现纳米凝胶分子量分布很宽,跨越3个数量级,但尺寸分布较窄.为探究该规律的普适... 详细信息

天然交联剂京尼平交联壳聚糖稀溶液可得到具有生物相容性的纳米凝胶.利用非对称流场流分离(AF4)对该纳米凝胶交联过程中的尺寸分布及结构演化进行系统研究,发现纳米凝胶分子量分布很宽,跨越3个数量级,但尺寸分布较窄.为探究该规律的普适性,系统研究了预聚物链的分子量以及交联剂浓度对于凝胶行为的影响.发现:(1)不同分子量预聚物得到的纳米凝胶具有相似的尺寸与分子量分布特征,其中相同分子量产物的特征尺寸会随着预聚物分子量的降低而减小,这一现象是由于达到相同尺寸时,低分子量预聚物形成凝胶支化程度更高造成的,这一结论也进一步通过分析比较反应程度与链内密度得到证实;(2)随着交联浓度的提高,凝胶特征尺寸先逐渐降低再逐渐升高.这是由于京尼平具有2个交联位点,交联分两步进行,尺寸降低是由于链内交联密度增加造成纳米凝胶网络结构塌缩,后续尺寸升高是由于第一步交联过度后,反而不利于第二步交联的进行;(3)制备的壳聚糖-京尼平纳米凝胶由于其尺寸的均一性和亲疏水平衡性,可作高效乳化剂制备Pickering乳液:仅需要0.57wt%的壳聚糖纳米凝胶就可以制备稳定的含油量可高达90%的Pickering乳液.

关键词：壳聚糖京尼平交联纳米凝胶场流分离高内相乳液

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铑(Ⅲ)催化氧化锍叶立德和重氮化合物环化偶联反应（英文）

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有机化学 2024年

作者：杨帆范小梦姚雪婧米瑞杰于松杰李兴伟肖建青岛农业大学化学与药学院山东大学化学与化工学院前沿化学研究院

本工作报道了氧化还原中性条件下过渡金属铑催化氧化锍叶立德C–H键活化与两类环状重氮化合物发生环化反应，分别合成了结构多样性的稠环和螺环。该反应通过螯合辅助的C–H活化、卡宾插入以及随后的分子内[3+3]环化或者[4+1]螺环化反应... 详细信息

本工作报道了氧化还原中性条件下过渡金属铑催化氧化锍叶立德C–H键活化与两类环状重氮化合物发生环化反应，分别合成了结构多样性的稠环和螺环。该反应通过螯合辅助的C–H活化、卡宾插入以及随后的分子内[3+3]环化或者[4+1]螺环化反应进行。

关键词：铑催化氧化锍叶立德碳氢键活化重氮环化

三氮唑冠醚型超分子功能材料的合成及性能研究

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化学研究与应用 2024年第3期36卷 499-508页

作者：努尔曼·依斯马依力胡宏志刘洋才别加甫·才仁吉刘尊奇新疆农业大学化学化工学院新疆乌鲁木齐830052 聚合物新型成型装备国家工程研究中心新疆分中心新疆乌鲁木齐830052 新疆农业化学与生物材料重点实验室新疆乌鲁木齐830052

以三唑类化合物4-氨基-1,2,4-三氮唑、18-冠醚-6和高氯酸为原料,获得一种新型的有机-无机杂化功能材料(18-crown-6)(C_(2)H_(2)N_(3)N_(H)_(3))(C10_(4))(1)。对其进行了红外光谱、单晶X射线衍射、介电常数、热重(TG)、粉末X射线衍射(X... 详细信息

以三唑类化合物4-氨基-1,2,4-三氮唑、18-冠醚-6和高氯酸为原料,获得一种新型的有机-无机杂化功能材料(18-crown-6)(C_(2)H_(2)N_(3)N_(H)_(3))(C10_(4))(1)。对其进行了红外光谱、单晶X射线衍射、介电常数、热重(TG)、粉末X射线衍射(XRD)等分析测试,由单晶X射线衍射测试结果表明,该化合物在低温和室温下空间群均为C2/c,属于单斜晶系,晶胞内(C_(2)H_(2)N_(3)NH_(3))^(+)阳离子结构呈现有序-无序运动,质子化的4-氨基-1,2,4-三氮唑离子通过氢键相互作用镶嵌入18-冠醚-6环内,在c轴形成一维链状超分子结构。通过变温变频介电测试发现化合物1在a、c轴方向上240~280 K温度范围内产生明显的介电异常,这可能是有机阳离子及无机阴离子发生分子运动导致的。

关键词：氢键 18-冠醚-6 三氮唑功能材料介电性

膜滤工艺中添加Fe^(2+)及在不同干燥工艺条件下对牛乳胶束酪蛋白的结构及功能性质的影响

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食品与发酵工业 2024年第1期50卷 105-111页

作者：冯子真杨继涛郑杰秦娟娟杨敏甘肃农业大学农业资源化学与应用研究所甘肃兰州730070 甘肃农业大学理学院甘肃兰州730070

利用膜滤工艺从脱脂鲜牛乳中制备胶束型酪蛋白,膜滤过程中添加不同浓度的Fe^(2+)水洗液,利用冷冻干燥及喷雾干燥制备出胶束酪蛋白浓缩物粉末,分析样品结构、吸油性、溶解性、乳化性、浊度及热稳定性等相关性质的变化。结果表明,不同干... 详细信息

利用膜滤工艺从脱脂鲜牛乳中制备胶束型酪蛋白,膜滤过程中添加不同浓度的Fe^(2+)水洗液,利用冷冻干燥及喷雾干燥制备出胶束酪蛋白浓缩物粉末,分析样品结构、吸油性、溶解性、乳化性、浊度及热稳定性等相关性质的变化。结果表明,不同干燥工艺及Fe^(2+)添加均对酪蛋白胶束二级结构产生了较显著的影响,其溶解性变化不大;在喷干工艺下,加入Fe^(2+)会使胶束酪蛋白热稳定性增加、浊度上升,改善了乳化性及乳化稳定性,增强吸油性;在冻干工艺下,加入Fe^(2+)同样会使胶束酪蛋白热稳定性增加、浊度上升,但是其吸油能力减小,乳化活力增大,添加0.1 mg/L Fe^(2+)时胶束酪蛋白乳化活力最佳。相关研究结果可为胶束酪蛋白食品开发提供参考依据。

关键词：胶束酪蛋白亚铁离子二级结构浊度乳化性

探讨鼠李糖乳酸杆菌GKLC1 (Lacticaseibacillus rhamnosus GKLC1)对胃部保护的作用

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生物医学 2024年第2期14卷 179-188页

作者：邱婕宁蔡侑珊林珊陈嘉琪林诗伟林静敏陈炎炼陈劲初葡萄王生技股份有限公司台湾桃园动物科技研究所农业科技研究院台湾苗栗上海葡萄王企业有限公司上海台湾大学食品科技研究所台湾台北

过去研究团队于酒精引起之肝损伤动物试验中,观察到益生菌(probiotics)鼠李糖乳酸杆菌GKLC1 (Lacticaseibacillus rhamnosus GKLC1)不仅具护肝效果,同时在该模式下观察到受酒精影响损伤的胃部组织获保护的效果。因此进一步地,本研究探... 详细信息

过去研究团队于酒精引起之肝损伤动物试验中,观察到益生菌(probiotics)鼠李糖乳酸杆菌GKLC1 (Lacticaseibacillus rhamnosus GKLC1)不仅具护肝效果,同时在该模式下观察到受酒精影响损伤的胃部组织获保护的效果。因此进一步地,本研究探讨益生菌GKLC1对胃部的保健功效。针对幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori)引起的胃溃疡(gastric ulcer),以体外试验琼脂纸锭扩散法(agar disk diffusion test)测试益生菌GKLC1对于三种不同株H. pylori的抑制效果。针对非类固醇消炎药(non-steroidal anti-inflammatory drugs, NSAIDs)引起的胃溃疡,则以ICR小鼠连续摄入10天阿斯匹林(500 mg/kg/day Aspirin)诱发胃损伤,评估益生菌GKLC1 (高剂量:20.4 mg/kg/day;低剂量:5.12 mg/kg/day)预先补充对胃保护的效果。结果益生菌GKLC1对于标准病原株H. pylori 26695或临床分离的抗药病原株H. pylori v633、H. pylori v1354皆无抑制表现;然而经Aspirin诱导的胃溃疡,益生菌GKLC1则可显著减少胃溃疡的面积、胃黏膜溃疡深度、以及增加胃溃疡治愈力。综合以上结果,L. rhamnosus GKLC1对于胃部机能具保护功效,特别是饮食、药物引起的伤胃保护,对于微生物引起的胃病则较无效果。

关键词：胃溃疡幽门螺旋杆菌非类固醇消炎药益生菌胃保护