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MDM2通过p53/Bcl-2/Bax轴调控H_(2)O_(2)诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤

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中华急诊医学杂志 2024年第8期33卷 1110-1116页

作者：郑杰陈博文梅鸿刘鑫鑫廖贞亮余琨余虹冯帮海陈淼傅小云覃松遵义医科大学附属医院重症医学科遵义563000 贵州医科大学附属医院重症医学科贵阳550004 遵义市中医院重症医学科遵义563000

目的探索H_(2)O_(2)诱导的氧化损伤时MDM2的功能及与p53的关系。方法使用0.5 mmol/L H_(2)O_(2)建立MLE-12 HALI细胞模型,分为:健康对照组、H_(2)O_(2)损伤组、H_(2)O_(2)+MDM2 overexpressed组、H_(2)O_(2)+MDM2-shRNA组。通过腺病毒载体感染MLE-12细胞过表达、沉默MDM2;采用免疫共沉淀(Co-IP)分析MDM2与p53的相互作用;采用Western blotting检测HALI建模后MDM2、p53、Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平;检测各组细胞凋亡率。结果通过转录组测序后发现p53信号通路与HALI密切相关。与正常组相比,H_(2)O_(2)损伤组MDM2表达较低(P<0.05);与H_(2)O_(2)损伤组相比,MDM2过表达后MLE-12细胞凋亡率降低(P<0.05),p53、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平下降,MDM2、Bcl-2蛋白表达上调(P<0.05)。与H_(2)O_(2)损伤组相比,当MDM2沉默时,细胞凋亡率增加(P<0.05),p53、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平上调,MDM2、Bcl-2蛋白表达下降(P<0.05)。Co-IP实验显示MDM2与p53蛋白结合。结论这些结果表明,MDM2可通过p53/Bcl-2/Bax轴抑制MLE-12细胞凋亡从而发挥对HALI的保护作用。

关键词：凋亡鼠双微立体基因2 高氧急性肺损伤 p53

脑脊液葡萄糖及乳酸水平与创伤后癫痫的相关性研究

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中华急诊医学杂志 2024年第8期33卷 1197-1201页

作者：张丽楠王磊林乐清杭州师范大学附属医院重症医学科杭州310015

创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)是发生创伤后癫痫(post-traumatic epilepsy,PTE)的主要原因[1]。TBI后PTE患病率从1.3%到53.3%不等,随着TBI的严重程度增加,癫痫发作的风险也显著增加,但发生癫痫的潜伏期可以维持数年[2]。PT... 详细信息

创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)是发生创伤后癫痫(post-traumatic epilepsy,PTE)的主要原因[1]。TBI后PTE患病率从1.3%到53.3%不等,随着TBI的严重程度增加,癫痫发作的风险也显著增加,但发生癫痫的潜伏期可以维持数年[2]。PTE可以进一步加重脑水肿,因此,PTE发作不仅是TBI后早期发病率和病死率增加的原因,也是晚期导致患者死亡的主要原因[3]。目前临床上的预防主要用于单次发生的急性PTE,对于复发性慢性癫痫效果较差。尽管给予预防性治疗但仍有15%~40%的TBI患者伴随有慢性癫痫发作[4]。由于脑脊液提供了血液、炎症、感染以及退行性疾病的信息,可以对脑代谢有一些了解,具有一定的预后价值[5-6]。因此,本研究目的是寻找TBI后发生PTE的危险因素,以及脑脊液中葡萄糖与乳酸水平对PTE的预测价值。

关键词：预防性治疗乳酸水平脑代谢创伤性脑损伤预后价值脑脊液退行性疾病脑水肿

不同持续时间俯卧位通气对急性呼吸窘迫综合征患者疗效的影响——一项小型Meta分析

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中华危重病急救医学 2024年第5期36卷 508-513页

作者：何娟刘颖李璐杨金凤张习靖陈启敏刘娇洋子沈锋贵州医科大学附属医院重症医学科贵阳550004

目的系统评价不同持续时间俯卧位通气对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者治疗效果的影响。方法计算机检索美国国立医学图书馆PubMed、Cochrane Library、荷兰医学文摘Embase、中国知网、万方数据库、维普数据库、中国生物医学文献数据库等... 详细信息

目的系统评价不同持续时间俯卧位通气对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者治疗效果的影响。方法计算机检索美国国立医学图书馆PubMed、Cochrane Library、荷兰医学文摘Embase、中国知网、万方数据库、维普数据库、中国生物医学文献数据库等,从建库至2023年9月发表的关于俯卧位通气治疗成人ARDS患者的研究,根据每次俯卧位通气持续时间分为≤24 h组和>24 h组。结局指标包括:病死率、重症监护病房(ICU)住院时间、压疮发生率及气管切开术操作。由2名研究员独立筛选文献、提取资料,评价纳入文献的偏倚风险。采用NOS量表对纳入的文献进行质量评估,Meta分析不同持续时间俯卧位通气对ARDS疗效的影响。结果最终纳入4篇文献共517例患者,其中俯卧位通气持续时间≤24 h者249例,>24 h者268例。4项研究均为队列研究,总体纳入文献经方法学质量评估后表明研究质量较高,存在偏倚风险性较低。Meta分析结果显示,俯卧位通气持续时间≤24 h组与>24 h组之间ARDS患者的病死率〔相对危险度(RR)=1.02,95%可信区间(95%CI)为0.79~1.31,P=0.88〕、ICU住院时间〔均数差(MD)=-2.68,95%CI为-5.30~-0.05,P=0.05〕差异无统计学意义。与俯卧位通气持续时间≤24 h组相比,俯卧位通气持续时间>24 h组ARDS患者的压疮发生率(RR=0.76,95%CI为0.59~0.98,P=0.04)及气管切开术操作(RR=0.71,95%CI为0.53~0.94,P=0.02)显著增加。结论俯卧位通气持续时间对ARDS患者病死率和ICU住院时间无明显影响,但俯卧位通气时间>24 h会增加压疮发生率及气管切开术操作,由于纳入研究数量少,该结论仍需大量研究进一步验证。

关键词：急性呼吸窘迫综合征俯卧位通气病死率不良事件 Meta分析

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脓毒症大鼠血小板受体CD62P的表达及替格瑞洛的心脏保护作用

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中华急诊医学杂志 2024年第2期33卷 172-178页

作者：郭沛雨郭飞黄海单亮青岛大学附属医院重症医学科青岛266061 青岛大学医学部青岛266061

目的探讨脓毒症大鼠血小板受体CD62P表达情况以及替格瑞洛的抗炎作用及其对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用。方法采用SD雄性大鼠32只,以随机数字表法将大鼠分为4组:假手术组(sham)、脓毒症组(cecal ligation and puncture,CLP)、低剂量... 详细信息

目的探讨脓毒症大鼠血小板受体CD62P表达情况以及替格瑞洛的抗炎作用及其对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用。方法采用SD雄性大鼠32只,以随机数字表法将大鼠分为4组:假手术组(sham)、脓毒症组(cecal ligation and puncture,CLP)、低剂量给药组(low dose,LD):给药剂量为10 mg/kg、高剂量给药组(high dose,HD):给药剂量为50 mg/kg,每组8只。假手术组大鼠仅进行开关腹并剥离盲肠处理,脓毒症组、低剂量给药组和高剂量给药组的大鼠采用CLP法构建脓毒症大鼠模型,给药组分别按照10 mg/kg及50 mg/kg用量进行替格瑞洛灌胃给药,假手术组及脓毒症组则按照1 mL/kg进行生理盐水灌胃处理。分别于手术前12 h及手术后12 h两次对大鼠进行灌胃给药。各组大鼠造模后24 h经腹主动脉取血并采集病理标本。应用流式细胞术检测各组大鼠血小板表面受体CD62P的表达情况;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测IL-6、TNF-α水平;检测心肌损伤标志物:CKMB、LDH水平;并检测转氨酶、肌酐、白细胞水平;对心肌组织进行HE染色观察病理形态;通过TUNEL法观察心肌细胞凋亡情况。结果①流式结果可见与sham组相比,CLP组的CD62P表达水平明显增加(P<0.01),两组给药组与CLP组相比CD62P的表达水平均明显降低,HD组更为显著(P<0.01)。②ELISA结果显示与sham组相比CLP组的IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.01),HD组较CLP组显著降低(P<0.05),LD组IL-6水平下降不明显。CLP组的TNF-α水平与sham组相比明显升高(P<0.01)。③CLP组和两组替格瑞洛干预组与sham组相比,CKMB和LDH的表达水平均有显著增加(P<0.01),给药组与CLP组相比CKMB、LDH均有明显下降(P<0.05),HD组下降更明显(P<0.01)。;④与sham组相比,CLP组大鼠血WBC,ALT,CR值升高明显,而使用替格瑞洛进行干预后,大鼠的WBC、ALT、CR值下降明显(P<0.05),且差异与剂量明显相关。⑤病理结果显示:sham组心肌细胞形态正常,CLP组心肌细胞损伤最重,LD组及HD组心肌细胞损伤较CLP组明显减轻。⑥Tunel染色显示与Sham组可见的少量阳性细胞比较,CLP组可见大量被染色的阳性细胞,LD组和HD组心肌细胞凋亡与CLP组相比明显减少。结论脓毒症激活血小板,刺激CD62P的过度表达,进而诱导炎症反应的过度激活,引起心肌细胞的凋亡和损伤,导致脓毒性心肌损伤;替格瑞洛的心脏保护作用可能与抑制血小板活化后CD62P表达的减少有关,且CD62P的表达与替格瑞洛之间存在剂量依赖关系。

关键词：脓毒症 CD62P P选择素替格瑞洛心肌损伤血小板血小板受体脓毒性心肌病

全身麻醉及现场快速评价在EBUS-TBNA诊断肺癌中的价值

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中国肺癌杂志 2024年第2期27卷 96-101页

作者：胡雨禾李玉英西南医科大学附属医院呼吸与危重症医学科泸州646000

背景与目的肺癌是常见的呼吸系统恶性肿瘤。超声引导下经支气管针吸活检(endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration,EBUS-TBNA)是诊断肺癌和评估分期的重要工具。EBUS-TBNA大多在局部麻醉或清醒镇静下进行,而... 详细信息

背景与目的肺癌是常见的呼吸系统恶性肿瘤。超声引导下经支气管针吸活检(endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration,EBUS-TBNA)是诊断肺癌和评估分期的重要工具。EBUS-TBNA大多在局部麻醉或清醒镇静下进行,而在全身麻醉下行EBUS-TBNA以及同时应用快速现场评价(rapid on-site evaluation,ROSE)能否进一步提高诊断效能目前仍未可知,本研究拟探索全身麻醉及ROSE在EBUS-TBNA诊断肺癌中的价值。方法回顾性分析164例于2018年1月至2022年12月于西南医科大学附属医院呼吸与危重医学科就诊患者的资料,所有患者术前均疑诊为肺癌并行EBUS-TBNA,根据是否行全身麻醉及ROSE将患者分为局麻组(n=54)、全麻组(n=67)和全麻ROSE组(n=43),分析各组的穿刺情况以及在疾病诊断方面的差异。结果局麻组的淋巴结穿刺针数高于全麻ROSE组(P0.05)。三组中没有患者出现严重并发症及麻醉相关不良反应。结论与局部麻醉联合静脉镇痛镇静相比,全身麻醉下实施EBUS-TBNA无论是否联合ROSE均可得到同样准确的结果,全身麻醉联合ROSE可以减少淋巴结穿刺针数。

关键词：肺肿瘤超声引导下经支气管针吸活检全身麻醉快速现场评价

过敏性鼻炎哮喘综合征中西医结合诊疗专家共识

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中华医学杂志 2024年第14期104卷 1108-1123页

作者：中国中西医结合学会变态反应专业委员会唐华平汤葳贾新华陈如冲冯岩高翔吉宁飞鹿振辉赵丽敏不详青岛市市立医院呼吸与危重症医学科青岛266071 上海交通大学医学院附属瑞金医院呼吸与危重症医学科山东中医药大学附属医院呼吸与危重症医学科广州医科大学附属第一医院变态反应科河南省人民医院呼吸与危重症医学科青岛大学附属医院变态反应科南京医科大学第一附属医院呼吸与危重症医学科上海中医药大学附属龙华医院呼吸与危重症医学科

过敏性鼻炎哮喘综合征(CARAS)是指同时发生的临床或亚临床上呼吸道过敏性症状(过敏性鼻炎)和下呼吸道过敏性症状(哮喘)的呼吸系统常见疾病,发病率高,对患者的生活质量影响大。目前国际和国内对于这项综合疾病的诊疗措施往往在耳鼻咽喉... 详细信息

过敏性鼻炎哮喘综合征(CARAS)是指同时发生的临床或亚临床上呼吸道过敏性症状(过敏性鼻炎)和下呼吸道过敏性症状(哮喘)的呼吸系统常见疾病,发病率高,对患者的生活质量影响大。目前国际和国内对于这项综合疾病的诊疗措施往往在耳鼻咽喉科和呼吸科分别进行,没有进行协同诊治的原因之一为缺乏对该疾病的综合性诊治共识。作为常见呼吸系统疾病,中医诊治CARAS也有深厚的临床基础。因此,中国中西医结合学会变态反应专业委员会组织了国内呼吸内科、耳鼻咽喉科、变态反应科、儿科、中医内科等相关领域的专家,分别从病因和解剖学特点,西医病理生理及发病机制,中医病名及病因病机,实验室检查、中西医的诊断评估及鉴别诊断,以及中西医的治疗进行讨论汇总,以期为CARAS提供整合性诊治意见。

关键词：哮喘过敏性鼻炎哮喘综合征中西医结合

光甘草定调控NETs抑制细胞焦亡缓解脓毒症肺损伤机制

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中华急诊医学杂志 2024年第2期33卷 179-185页

作者：杨铃清马辰东王雷王敏李增亮张利鹏内蒙古医科大学附属医院重症医学科呼和浩特010050

目的探讨传统中药光甘草定对脓毒症肺损伤中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)形成及细胞焦亡影响。方法将24只雄性Wistar大鼠,按照随机数字表法分为3组:脓毒症组采用盲肠结扎穿孔术(cecalligation and puncture... 详细信息

目的探讨传统中药光甘草定对脓毒症肺损伤中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)形成及细胞焦亡影响。方法将24只雄性Wistar大鼠,按照随机数字表法分为3组:脓毒症组采用盲肠结扎穿孔术(cecalligation and puncture,CLP)建立脓毒症大鼠模型;光甘草定组(CLP+GLA)行CLP及光甘草定灌胃(30 mg/kg);假手术组(Sham)行盲肠探查术,仅进行盲肠翻动后关腹。12 h后留取血浆、肺泡灌洗液及肺组织标本检测。测定肺泡灌洗液蛋白含量;测定肺组织湿重/干重(W/D)比值;用苏木精-伊红(HE)染色后观察肺组织病理学改变;用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血浆中NETs标志物MPO-DNA复合物水平、焦亡相关炎症因子IL-18、IL-1β的表达水平;Western blot技术检测大鼠肺组织Caspase-1及Cleaved-caspase-1焦亡蛋白的变化。结果脓毒症组肺泡灌洗液总蛋白浓度较假手术组明显升高(P<0.01),光甘草定组肺泡灌洗液总蛋白浓度较脓毒症组下降(P<0.05)。脓毒症组肺水肿程度明显加重,光甘草定组较脓毒症组肺水肿减轻。光镜下观察肺组织病理结果显示:假手术组小鼠肺组织结构正常,肺泡清晰;脓毒症组肺泡壁广泛增厚,炎性细胞明显浸润;光甘草定组较脓毒症组肺组织损伤明显减轻。ELISA显示:脓毒症组血浆中NETs标志物MPO-DNA复合物水平和炎症因子IL-18、IL-1β含量较假手术组明显升高(P<0.001),光甘草定组NETs标志物MPO-DNA复合物水平和炎症因子IL-18、IL-1β炎症因子表达水平较脓毒症组均显著降低(MPO-DNA:P<0.01;IL-18、IL-1β:P<0.05)。Western blot技术结果显示:与假手术组大鼠相比,脓毒症组大鼠肺组织中Caspase-1及Cleaved-caspase-1蛋白阳性信号表达增强;光甘草定组肺组织Caspase-1阳性细胞分布与假手术组相似,Cleaved-caspase-1阳性信号表达高于假手术组。结论光甘草定通过抑制NETs生成及细胞焦亡,有效减轻肺部炎症,发挥对脓毒症大鼠肺损伤的保护作用。

关键词：光甘草定中性粒细胞胞外诱捕网细胞焦亡脓毒症肺损伤

重症监护病房抗凝新视角——凝血因子Ⅻ和Ⅺ抑制剂的基础与临床新进展

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中华危重病急救医学 2024年第1期36卷 16-22页

作者：王睿华杨智蕴马少林朱峰同济大学附属东方医院重症医学科上海200120

抗凝药物是血栓性疾病的治疗方法之一,但现有抗凝方案的出血风险是危及患者预后的重要因素之一。在重症监护病房(ICU)中,患者通常需要器官支持,因此不可避免地会在血管中置入人工材料,进而需要抗凝治疗,以免发生血栓,使器官支持无法进行... 详细信息

抗凝药物是血栓性疾病的治疗方法之一,但现有抗凝方案的出血风险是危及患者预后的重要因素之一。在重症监护病房(ICU)中,患者通常需要器官支持,因此不可避免地会在血管中置入人工材料,进而需要抗凝治疗,以免发生血栓,使器官支持无法进行,但这类患者往往出血风险更大。1953年发现的丙型血友病是一种先天性凝血因子Ⅺ(FⅪ)缺乏症,将人们的视角聚焦于内源性凝血途径,即接触途径。当人工材料表面与FⅫ接触后,FⅫ被激活,继而激活FⅪ,开启接触途径的"凝血瀑布反应"。目前已知的接触途径抑制剂主要包括FⅫ抑制剂与FⅪ抑制剂两类药物,可以阻断这一过程。本文针对FⅫ与FⅪ在接触途径激活中的作用进行综述,旨在阐明其在血栓形成中所扮演的角色;并通过列举研发相对成熟的药物及其适应证,使临床医生熟悉这一新型抗凝药物。

关键词：抗凝治疗内源性凝血系统接触途径抑制剂凝血因子Ⅺ

泛素连接酶Cullin3对三阴性乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制探讨

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中华医学杂志 2024年第20期104卷 1868-1878页

作者：何志贤李晶王沁凡程乾倪苏婕南通大学附属医院甲乳外科南通南通大学附属医院心电图室南通南通大学附属医院肿瘤化疗科南通

目的探讨泛素化连接酶E3蛋白(Cullin3, CUL3)对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法基于生物信息学方法获取TNBC组织中CUL3基因和蛋白的表达数据, 评估CUL3在TNBC患者肿瘤组织(n=160)中和正常乳腺组织(... 详细信息

目的探讨泛素化连接酶E3蛋白(Cullin3, CUL3)对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法基于生物信息学方法获取TNBC组织中CUL3基因和蛋白的表达数据, 评估CUL3在TNBC患者肿瘤组织(n=160)中和正常乳腺组织(NC)(n=572)中的表达及其与临床预后的关系。通过CCK8细胞增殖实验、划痕实验、Transwell实验检测过表达CUL3对TNBC细胞体外增殖、迁移及侵袭能力的影响;通过免疫共沉淀(IP)联合质谱分析筛选出可能与CUL3相互作用的蛋白质, 确定CUL3调控的底物蛋白为谷胱甘肽S-转移酶P1(GSTP1);通过划痕实验、Transwell实验检测过表达GSTP1对TNBC细胞迁移及侵袭能力的影响, 探索过表达CUL3是否可以逆转GSTP1对细胞迁移及侵袭能力的影响;通过Western 印迹和IP检测CUL3对GSTP1蛋白泛素化修饰的影响, 验证CUL3调控GSTP1表达影响TNBC迁移和侵袭的分子机制。结果 CUL3在TNBC中表达量显著增高(P<0.000 1), CUL3高表达与TNBC患者预后不良相关, 高表达CUL3的TNBC患者总生存期(OS)、无病生存期(RFS)均更短(OS, P=0.018;RFS, P=0.008);过表达CUL3可显著增加TNBC细胞增殖(231细胞组F=11.97, P=0.002;468细胞组F=51.92, P<0.001)、迁移[231细胞系和468细胞系过表达组穿膜细胞数分别为(74.7±4.0)、(128.0±6.1)个, 而空白对照(NC)组分别为(21.0±2.7)、(70.0±6.6)个, 231和468细胞组t分别为-19.24和-11.23, P均<0.001]和侵袭能力(231细胞系和468细胞系过表达组48 h细胞增殖率分别为56.6%±4.4%、51.6%±3.7%, 而NC组分别为40.5%±2.9%、32.9%±4.8%, 231细胞组t=-5.26, P=0.006 3;468细胞组t=-5.38, P=0.005 8);GSTP1在TNBC表达中降低, 上调GSTP1可抑制TNBC细胞迁移[231细胞系和468细胞系过表达组穿膜细胞数分别为(16.3±6.5)、(33.0±6.2)个, 而NC组分别为(34.3±2.5)、(77.3±5.0)个, 231细胞组t=5.44, P=0.006;468细胞组t=7.20, P=0.002]和侵袭(231细胞系和468细胞系过表达组48 h细胞增殖率分别为49.6%±1.7%、36.2%±1.4%, 而NC组分别为59.4%±4.7%、53.0%±1.7%, 231细胞组t=3.42, P=0.027;468细胞组t=13.18, P<0.001), 而上调CUL3可逆转GSTP1对细胞迁移[231细胞系和468细胞系过表达组穿膜细胞数分别为(37.0±1.0)、(67.0±5.3)个, 231细胞组t=-3.97, P=0.017;468细胞组t=-6.12, P=0.004]、侵袭(231细胞系和468细胞系过表达组48 h细胞增殖率分别为71.9%±3.6%、59.4%±2.1%, 231和468细胞组t值分别为-9.61和-16.01, P均<0.001)的抑制作用;CUL3通过增加GSTP1泛素化修饰, 促进泛素-蛋白酶体系统降解GSTP1蛋白, 从而降低GSTP1蛋白的稳定性。结论过表达CUL3通过促进GSTP1泛素化降解诱导细胞迁移和侵袭, 从而促进TNBC发生发展。

关键词：乳腺肿瘤 Cullin蛋白质类谷胱甘肽S-转移酶P1 泛素化