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基于网络药理学和实验验证研究壮骨镇痛胶囊治疗骨转移癌痛的活性成分和作用机制

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天然产物研究与开发 2024年

作者：赖桂花曹建雄周君王菲聂多锐文玲马漪湖南中医药大学第一附属医院湖南中医药大学南华大学衡阳医学院附属第一医院康复医学中心南华大学衡阳医学院附属第一医院康复医学科

利用网络药理学和实验验证揭示壮骨镇痛胶囊治疗骨转移癌痛的活性成分及作用机制。首先，运用中药系统药理学数据库平台（TCMSP）和中药分子机制的生物信息学分析工具（BATMAN-TCM）获取壮骨镇痛胶囊的化学成分及靶点，GeneCards数据库... 详细信息

利用网络药理学和实验验证揭示壮骨镇痛胶囊治疗骨转移癌痛的活性成分及作用机制。首先，运用中药系统药理学数据库平台（TCMSP）和中药分子机制的生物信息学分析工具（BATMAN-TCM）获取壮骨镇痛胶囊的化学成分及靶点，GeneCards数据库获得骨转移癌痛的疾病靶点，然后通过Venn、Cytoscape、String及DAVID数据库分析壮骨镇痛胶囊治疗骨转移癌痛的潜在活性成分、核心靶点及作用通路之间的关系，使用Auto Dock进行分子对接分析，最后通过建立骨转移癌痛大鼠模型进行实验验证。网络药理学结果显示壮骨镇痛胶囊治疗骨转移癌痛的活性成分可能为槲皮素、木犀草素、异补骨脂素，关键靶点可能为蛋白激酶1（protein kinase B，AKT1）、肿瘤蛋白53（tumor protein 53，TP53）、表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）等，主要富集于丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）、磷脂酰肌醇激酶（phosphatidylinositol 3 kinase，PI3K）-AKT、核因子κB受体（nuclear factor kappa B，NF-κB）等通路。实验结果表明壮骨镇痛胶囊及其活性成分能有效改善骨转移癌痛大鼠的疼痛行为学和骨质破坏，降低PI3K、p-AKT1/AKT1、p-P38/P38、磷酸化-胞外信号调节激酶1/2（phosphorylation-extracellular signal regulated kinase，p-ERK1/2）/ERK1/2、p-c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK）/JNK、p-P65/P65及p-人核因子κB抑制蛋白α（inhibitor of nuclear factor-κB α，p-IKBα）/IKBα的蛋白表达水平（P<0.05）。因此，壮骨镇痛胶囊及其活性成分槲皮素、木犀草素和异补骨脂素能有效改善骨转移癌痛，其作用机制可能与抑制MAPK、PI3K-AKT及NF-κB通路有关。

关键词：壮骨镇痛胶囊骨转移癌痛网络药理学分子对接作用机制

柴胡疏肝散在抗抑郁治疗中的药效物质与作用机制研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第10期30卷 246-257页

作者：林洁筠段阳龙淼青李超亚邓曼菲曾鹏南华大学衡阳医学院基础医学院湖南衡阳421001 郴州市第一人民医院湖南郴州423000

抑郁症是一种复杂的神经精神疾病,目前主要采取西药治疗的方式,但由于抗抑郁西药存在不良反应与患者个体化差异的综合影响导致疗效欠佳。抑郁症属中医的“郁证”,其治疗原则为疏肝解郁。中医经典名方柴胡疏肝散治疗抑郁症历史悠久、疗... 详细信息

抑郁症是一种复杂的神经精神疾病,目前主要采取西药治疗的方式,但由于抗抑郁西药存在不良反应与患者个体化差异的综合影响导致疗效欠佳。抑郁症属中医的“郁证”,其治疗原则为疏肝解郁。中医经典名方柴胡疏肝散治疗抑郁症历史悠久、疗效确切。临床上,柴胡疏肝散加减方灵活,但有效成分性质性能模糊、机制作用不清。为阐明柴胡疏肝散药效基础、抗抑郁机制作用机制,该文综述了柴胡疏肝散药效物质基础、抗抑郁的临床研究与机制研究进展。临床上柴胡疏肝散可以治疗原发性抑郁、卒中后抑郁、产后抑郁等多种抑郁。汇总了柴胡疏肝散的32种主要成分,其中芍药苷内酯、阿魏酸、柚皮苷、橙皮苷、柴胡皂苷A、甘草次酸、桔皮素、橙皮内酯水合物、川陈皮素、甘草酸是柴胡疏肝散发挥抗抑郁作用的中药质量标志物(Q-Marker)。柴胡疏肝散抗抑郁作用机制复杂,包括调控单胺类神经递质、下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)、神经营养因子、炎症反应、细胞损伤相关通路、氧化应激等。该文有助于深入理解柴胡疏肝散治疗抑郁的药效基础与作用机制,为柴胡疏肝散抗抑郁的临床应用与抗抑郁药物研发提供了理论依据。

关键词：柴胡疏肝散抑郁症药效基础中药质量标志物(Q-Marker) 作用机制

生殖支原体GroEL蛋白的生信分析、表达纯化及致炎分析

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生物工程学报 2024年

作者：陈丽苏晓玲罗浩荡王婧芸廖道庸甘甜于建威何军南华大学附属南华医院检验科南华大学附属南华医院输血科南华大学附属南华医院临床研究所

为初步了解生殖支原体(Mycoplasma genitalium， Mg) GroEL蛋白的致病机制，本文运用生物信息学软件对Mg GroEL蛋白结构和功能进行预测和分析，构建pET-28a-GroEL重组质粒，使用0.2 mmol/L IPTG诱导蛋白表达，通过Ni-亚氨基二乙酸(imino... 详细信息

为初步了解生殖支原体(Mycoplasma genitalium， Mg) GroEL蛋白的致病机制，本文运用生物信息学软件对Mg GroEL蛋白结构和功能进行预测和分析，构建pET-28a-GroEL重组质粒，使用0.2 mmol/L IPTG诱导蛋白表达，通过Ni-亚氨基二乙酸(iminodicitic acid， IDA)柱亲和纯化获得Mg rGroEL蛋白。将浓度为2 μg/mL的Mg rGroEL蛋白作用于Tohoku Hospital Pediatrics-1(THP-1)细胞，通过酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay， ELISA)检测细胞上清液中炎症因子IL-1β和TNF-α的含量，全自动化学发光仪检测细胞上清液中炎症因子IL-6的含量，细胞免疫荧光和Western blotting观察NF-κB信号通路激活情况。实验结果表明，Mg GroEL蛋白是含有543个氨基酸的酸性带负电荷蛋白，相对分子质量为58.44 kDa，等电点为5.68，分子式为C2568H4300N700O825S8，为稳定的亲水性蛋白；二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主；Mg GroEL蛋白存在12个B细胞优势抗原表位和10个T细胞优势抗原表位。与肺炎支原体、无乳支原体、关节炎支原体、猪肺炎支原体和牛支原体的GroEL蛋白高度同源；Mg rGroEL蛋白能激活THP-1细胞NF-κB信号通路并促进IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌。这些结果表明Mg GroEL具有较好的抗原性，能诱导宿主细胞发生炎症反应，为进一步研究GroEL蛋白在Mg中的功能及其致病机制奠定了理论基础。

关键词：生殖支原体 GroEL蛋白原核表达生物信息学炎症

电针对老年骨质疏松大鼠骨组织中组织蛋白酶K及Ⅰ型胶原表达的影响

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中国老年学杂志 2024年第15期 3679-3683页

作者：屈萌艰彭昕珂彭婷周君廖源王金玲刘丹妮钟培瑞廖阳黄夏荣南华大学衡阳医学院附属第一医院康复医学科南华大学衡阳医学院附属第一医院康复医学中心南华大学衡阳医学院附属第一医院康复医学实验室南华大学衡阳医学院附属第一医院康复医学四川省重点实验室广州医科大学附属清远医院(清远市人民医院)康复科

目的探讨电针对老年大鼠骨质疏松及组织蛋白酶K、Ⅰ型胶原表达的影响。方法选取8只6月龄SD雄性大鼠为青年组，16只24月龄SD雄性大鼠随机分为老年组和电针组，每组8只。电针组接受电针干预，电针穴位：“肾俞”“血海”“太溪”“阳陵... 详细信息

目的探讨电针对老年大鼠骨质疏松及组织蛋白酶K、Ⅰ型胶原表达的影响。方法选取8只6月龄SD雄性大鼠为青年组，16只24月龄SD雄性大鼠随机分为老年组和电针组，每组8只。电针组接受电针干预，电针穴位：“肾俞”“血海”“太溪”“阳陵泉”。电流强度1 mA,疏密波，频率3 Hz/15 Hz,每周5 d, 1次/d,连续干预8 w,其余2组不接受干预。8 w后取材，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血骨代谢标志物Ⅰ型前胶原氨基末端肽(PⅠNP)、Ⅰ型胶原交联氨基末端肽(NTX)水平，双能X射线检测左侧胫骨和L5椎体的骨密度，显微CT检测右胫骨近端和L4椎体的骨微结构，Western印迹、实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测股骨组织组织蛋白酶K、Ⅰ型胶原蛋白及mRNA表达水平。结果与青年组相比，老年组NTX水平升高，PⅠNP水平降低，骨密度、骨体积分数、骨小梁数量均降低，骨小梁间距增大，组织蛋白酶K蛋白及mRNA表达升高，Ⅰ型胶原蛋白及mRNA表达降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与老年组相比，电针组NTX水平降低，PⅠNP水平升高，骨密度、骨体积分数、骨小梁数量升高，骨小梁间距降低，组织蛋白酶K蛋白及mRNA表达降低，Ⅰ型胶原蛋白及mRNA表达升高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论电针通过下调组织蛋白酶K的表达从而抑制Ⅰ型胶原蛋白的降解，达到治疗骨质疏松的作用。

关键词：电针骨质疏松组织蛋白酶K Ⅰ型胶原蛋白骨吸收骨形成

SFXN家族蛋白的功能及其在疾病中作用的研究进展

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中南医学科学杂志 2024年第2期52卷 157-162页

作者：何也川王丹玲南华大学衡阳医学院附属长沙中心医院南华大学衡阳医学院

SFXN是一种在真核生物中高度保守的多次跨膜线粒体蛋白，属于线粒体载体家族的成员。在人类细胞中，SFXN家族由5种蛋白SFXN1～5组成，其功能与铁稳态、氨基酸代谢和三羧酸循环紧密相关。SFXN基因突变所致的表达异常与癌症、神经退行性... 详细信息

SFXN是一种在真核生物中高度保守的多次跨膜线粒体蛋白，属于线粒体载体家族的成员。在人类细胞中，SFXN家族由5种蛋白SFXN1～5组成，其功能与铁稳态、氨基酸代谢和三羧酸循环紧密相关。SFXN基因突变所致的表达异常与癌症、神经退行性疾病的发生发展密切相关。本文主要总结和归纳了SFXN家族蛋白的定位、线粒体转运和生理功能，并介绍了其在癌症、神经退行性疾病及线粒体疾病中的最新研究进展。

关键词： SFXN 铁代谢单碳代谢三羟酸循环癌症神经退行性疾病线粒体疾病

电针干预老年膝骨关节炎大鼠关节软骨及软骨下骨P53、P21的表达

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中国组织工程研究 2024年第8期28卷 1174-1179页

作者：黄夏荣胡莉芝孙光华彭昕珂廖瑛廖源刘静尹林伟钟培瑞彭婷周君屈萌艰南华大学衡阳医学院附属第一医院康复医学科湖南省衡阳市421001 南华大学衡阳医学院附属第一医院康复医学中心湖南省衡阳市421001 南华大学衡阳医学院附属第一医院康复医学实验室湖南省衡阳市421001 南华大学衡阳医学院附属第一医院肛肠科湖南省衡阳市421001 广州医科大学附属第六医院清远市人民医院康复科广东省清远市511500 康复医学四川省重点实验室四川省成都市610041

背景:膝骨关节炎的治疗方法有很多,其中电针作为一种重要的非药物治疗方法,治疗膝骨关节炎疗效确切,目前其确切的作用机制尚不明确。目的:探讨电针对老年大鼠膝骨关节炎关节软骨及软骨下骨P53、P21表达的影响。方法:青年组为8只6月龄SD... 详细信息

背景:膝骨关节炎的治疗方法有很多,其中电针作为一种重要的非药物治疗方法,治疗膝骨关节炎疗效确切,目前其确切的作用机制尚不明确。目的:探讨电针对老年大鼠膝骨关节炎关节软骨及软骨下骨P53、P21表达的影响。方法:青年组为8只6月龄SD雄性大鼠,16只24月龄SD雄性大鼠按随机抽样法分为老年组和电针组,每组8只。电针组大鼠接受电针刺激,每周5 d,1次/d,连续刺激8周,其余两组不做处理。8周后取材,ELISA法检测外周血Ⅱ型胶原C端肽水平,番红O-固绿染色对左膝关节软骨及软骨下骨进行形态学观察;改良Mankin’s评分评估膝关节软骨退变程度;显微CT检测左膝关节软骨及软骨下骨微结构;RT-qPCR、Western blot检测右膝关节软骨及软骨下骨基质金属蛋白酶13、P53、P21 mRNA及蛋白表达水平。结果与结论:①与青年组相比,老年组大鼠外周血Ⅱ型胶原C端肽水平升高(P0.05);基质金属蛋白酶13、P53蛋白表达降低(P0.05);③结果表明电针可能通过抑制P53和P21的表达而延缓老年大鼠关节软骨退变,并抑制关节软骨下骨骨质疏松,从而达到保护关节的作用延缓关节衰老。

关键词：电针膝骨关节炎软骨软骨下骨 P53蛋白 P21蛋白

SENP-1/HIF-1α通路对慢性间歇性低氧诱导大鼠血管内皮损伤的影响

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吉林大学学报（医学版） 2024年第4期50卷 1026-1034页

作者：贾远航江义霞何振华陈林周芳南华大学衡阳医学院附属第二医院呼吸与危重症医学科湖南衡阳421001

目的:探讨小泛素样修饰特异性蛋白酶1(SENP-1)/低氧诱导因子1α(HIF-1α)通路对慢性间歇性低氧(CIH)诱导大鼠血管内皮损伤的影响,阐明其相关作用机制。方法:SD大鼠随机分为对照组和CIH组,再将每组分为2、4和6周3个时间点亚组,每亚组8只... 详细信息

目的:探讨小泛素样修饰特异性蛋白酶1(SENP-1)/低氧诱导因子1α(HIF-1α)通路对慢性间歇性低氧(CIH)诱导大鼠血管内皮损伤的影响,阐明其相关作用机制。方法:SD大鼠随机分为对照组和CIH组,再将每组分为2、4和6周3个时间点亚组,每亚组8只。CIH组大鼠暴露于CIH舱中进行CIH诱导,制备阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)模型,对照组大鼠暴露于常氧环境中。于各时间点收集各组大鼠血清和胸主动脉组织。HE染色观察各组大鼠胸主动脉血管损伤情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠血清中一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)、血管性血友病因子(vWF)和血栓调节蛋白(TM)水平,Western blotting法检测各组大鼠胸主动脉组织中SENP-1、HIF-1α和血管内皮生长因子A(VEGFA)蛋白表达水平。体外培养大鼠主动脉内皮细胞(rAECs),经SENP-1 shRNA腺病毒(sh-SENP-1)感染构建SENP-1基因低表达的rAECs细胞株,采用CIH诱导建立血管内皮细胞损伤模型,分为CIH组、CIH+sh-NC组和CIH+sh-SENP-1组,另设对照组。CCK-8检测各组细胞增殖活性,ELISA法检测各组细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)活性及细胞中NO、ET-1、丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中SENP-1、HIF-1α和VEGFA蛋白表达水平。结果:随着CIH诱导时间的延长,与对照组比较,CIH组大鼠胸主动脉内膜逐渐粗糙并明显增厚,血清中NO水平逐渐减低(P<0.05),血清中ET-1、vWF和TM水平及胸主动脉组织中SENP-1、HIF-1α和VEGFA蛋白表达水平逐渐升高(P<0.05)。与对照组比较,CIH组细胞增殖活性降低(P<0.05),细胞培养上清中LDH活性及细胞中ET-1、MDA水平和细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞中NO水平和SOD活性降低(P<0.05),SENP-1、HIF-1α和VEGFA蛋白表达水平升高(P<0.05);与CIH组比较,CIH+sh-SENP-1组细胞增殖活性升高(P<0.05),细胞培养上清中LDH活性及细胞中ET-1、MDA水平和细胞凋亡率降低(P<0.05),细胞中NO水平和SOD活性升高(P<0.05),SENP-1、HIF-1α和VEGFA蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:SENP-1/HIF-α通路在CIH诱导的大鼠胸主动脉损伤组织中高度活化,沉默SENP-1表达可减轻CIH诱导的血管内皮细胞损伤,其作用机制可能与下调SENP-1/HIF-α通路活化水平有关。

关键词：慢性间歇性低氧胸主动脉小泛素样修饰特异性蛋白酶1 低氧诱导因子1α 血管内皮损伤

^(1)H-MRS和3D-ASL技术在脑胶质瘤术后复发与放射性坏死鉴别中的应用价值探索

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临床放射学杂志 2024年第7期43卷 1060-1066页

作者：周克阳蔡强邓灵灵代月黎彭建春陈志华南华大学衡阳医学院附属第二医院放射影像科衡阳421001 湖南省脑科医院放射科(湖南省第二人民医院) 长沙410007

目的探讨磁共振氢质子波谱成像(^(1)H-MRS)与三维动脉自旋标记(3D-ASL)成像技术在脑胶质瘤术后复发与放射性脑坏死鉴别诊断中的应用价值。方法回顾分析40例脑胶质瘤术后放疗患者,分为术后复发(TR)组23例,放射性脑坏死(RN)组17例。所有... 详细信息

目的探讨磁共振氢质子波谱成像(^(1)H-MRS)与三维动脉自旋标记(3D-ASL)成像技术在脑胶质瘤术后复发与放射性脑坏死鉴别诊断中的应用价值。方法回顾分析40例脑胶质瘤术后放疗患者,分为术后复发(TR)组23例,放射性脑坏死(RN)组17例。所有被试均接受MRI平扫+增强、DWI、^(1)H-MRS及3D-ASL检查,并通过后处理软件获取感兴趣区(ROI)内代谢物比值[N-乙酰天门冬氨酸/肌酸(NAA/Cr)、胆碱/肌酸(Cho/Cr)、胆碱/N-乙酰天门冬氨酸(Cho/NAA)]与脑血流量(CBF)值。采用SPSS软件对人口学资料、临床资料和影像学指标进行统计分析,并计算^(1)H-MRS指标与3D-ASL指标之间的Pearson相关性。最后,基于ROC曲线分析对^(1)H-MRS、3D-ASL及两者联合的诊断效能进行评估。结果与同层面正常的脑组织比较,TR组ROI的Cho/Cr(2.527±0.565)、Cho/NAA(3.074±1.407)、CBF值[(76.666±15.961)ml·min^(-1)·100g^(-1)]显著增加;RN组ROI的Cho/Cr(1.275±0.266)、Cho/NAA(1.280±0.389)、CBF值[(33.359±8.283)ml·min^(-1)·100g^(-1)]显著降低,且TR组上述指标均显著高于RN组(P<0.05);而TR组ROI的NAA/Cr值(0.871±0.344)低于RN组(1.107±0.272)(P值为0.025);相关性分析发现所有研究被试ROI的CBF值与Cho/Cr、Cho/NAA均存在显著正相关(r值分别为0.864、0.624,P值均<0.001)。此外,ROC曲线分析发现^(1)H-MRS指标、3D-ASL指标及两者联合在TR与RN鉴别诊断中的敏感度均为100%,特异度分别为87.00%、91.30%、95.70%,AUC值分别为0.985、0.989、0.986。结论^(1)H-MRS及3D-ASL指标对TR与RN鉴别诊断均具有很好的敏感度,联合使用可以提高TR与RN鉴别诊断的特异度,这提示^(1)H-MRS和3D-ASL技术在胶质瘤术后的评估中具有重要价值。

关键词：脑胶质瘤磁共振氢质子波谱成像动脉自旋标记术后复发放射性坏死

预见性护理对CT增强扫描造影剂外渗预防及患者护理满意度探究

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中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生 2024年第2期 0172-0175页

作者：田颖南华大学衡阳医学院附属第一医院放射科湖南衡阳421001

分析患者接受CT增强扫描检测中为预防造影剂外渗等而实施预见性护理的综合性护理效果以及对患者护理满意度的影响。方法研究纳入南华大学衡阳医学院二零二二年二月一日至二零二三年五月一日收治一百四十例接受增强CT检测的患者为对象,... 详细信息

分析患者接受CT增强扫描检测中为预防造影剂外渗等而实施预见性护理的综合性护理效果以及对患者护理满意度的影响。方法研究纳入南华大学衡阳医学院二零二二年二月一日至二零二三年五月一日收治一百四十例接受增强CT检测的患者为对象,抽签分组成立两个组(对照组、观察组),都有70名患者,分别采用的护理方式为常规护理、预见性护理;比对不同护理下患者的满意度以及护理的质量。结果观察组造影剂外渗(轻度、中度、重度)情况发生率的次数和比例相比于对照组更低(P医院护理质都有积极的影响和意义,建议临床推广使用。

关键词：预见性护理 CT增强扫描造影剂外渗满意度