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口腔颅颌面系统组织再生的发展与研究现状

中华口腔医学杂志 2024年第5期59卷 407-417页

作者：毛学理施松涛中山大学附属口腔医院华南颅颌干细胞转化研究中心·中山大学光华口腔医学院·广东省口腔医学重点实验室广州

口腔颅颌面系统是包含多种组织的复杂综合性系统, 具有独特的生物学特征, 并赋予个体形貌, 口腔颅颌面系统组织缺损后的再生具有重要意义, 也是当前口腔医学领域的一项重大挑战。本文回顾口腔颅颌面系统组织再生领域的研究历程, 总结当... 详细信息

口腔颅颌面系统是包含多种组织的复杂综合性系统, 具有独特的生物学特征, 并赋予个体形貌, 口腔颅颌面系统组织缺损后的再生具有重要意义, 也是当前口腔医学领域的一项重大挑战。本文回顾口腔颅颌面系统组织再生领域的研究历程, 总结当前研究的现状和面临的问题, 聚焦口腔颅颌面系统间充质干细胞在组织再生中的关键作用, 并对未来该领域的发展进行探讨和展望, 旨在增进口腔医学工作者对本领域的了解, 并为口腔颅颌面系统组织再生领域的创新性治疗方法和临床实践提供可能的方向。

关键词：再生医学组织工程口腔颅颌面系统间充质干细胞牙髓牙周组织

不同细胞来源外泌体miRNAs在胃癌进展及诊断和预后中的作用

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中国组织工程研究 2024年

作者：王磊王白燕周春光任晓云代月优冯书营河南中医药大学医学院河南省中医药特医食品工程研究中心

背景：肿瘤微环境可通过多种途径参与胃癌的发生发展并促进胃癌化疗耐药，其中外泌体miRNAs介导的肿瘤微环境串话可诱导基质重编程，参与肿瘤异质性，并形成有利于肿瘤增殖、迁移、侵袭、免疫逃逸和化疗耐药的微环境。目的：对近年来外... 详细信息

背景：肿瘤微环境可通过多种途径参与胃癌的发生发展并促进胃癌化疗耐药，其中外泌体miRNAs介导的肿瘤微环境串话可诱导基质重编程，参与肿瘤异质性，并形成有利于肿瘤增殖、迁移、侵袭、免疫逃逸和化疗耐药的微环境。目的：对近年来外泌体miRNAs在胃癌微环境中的作用机制及其在胃癌诊断及预后评估中的应用进展作一综述。方法：以“Exosomal miRNAs,gastric cancer,angiogenesis,apoptosis,proliferation,migration,autophagy,invasion,immune response,chemotherapy resistance,biomarker”为英文检索词和“外泌体miRNAs，胃癌”为中文检索词分别检索PubMed及中国知网数据库。检索时限为2017-2024年。通过阅读文题及摘要进行初步筛选，排除研究内容相关性差及内容重复的文献，最终纳入77篇文献进行归纳探讨。结果与结论：(1)外泌体作为细胞间信息交流的重要载体，可携带miRNA等多种信息物质，通过激活靶细胞上的细胞表面受体、与受体细胞质膜融合及内吞作用3种途径实现细胞间信号传递。(2)外泌体miRNAs通过调节胃癌细胞增殖、凋亡、自噬、血管形成、侵袭转移、免疫应答以及耐药性的形成等多种途径，进而在胃癌进展中发挥着重要作用。(3)miRNA与靶mRNA相互作用及其调控网络广泛存在于肿瘤发生和人类癌症发展中，不同类型外泌体miRNAs对调控胃癌细胞凋亡具有不同的作用，鉴别不同外泌体miRNAs对胃癌细胞凋亡相关蛋白及通路的影响，合理运用其诱导剂或抑制剂可对胃癌细胞凋亡水平进行调控。(4)不同细胞来源的外泌体miRNAs通过将M1极化型巨噬细胞诱导为M2型，在肿瘤微环境的建立、血管生成、免疫应答及化疗耐药中扮演重要角色。(5)外泌体miRNAs广泛稳定存在于血液及其他体液中，其在胃癌患者中的差异性表达可作为胃癌患者诊断、预后及治疗依据。目前作为生物标志物研究较多的外泌体miRNAs包括miR-379-5p,miR-590-5p,miR-29s和miR-21等，其中miR-590-5p灵敏度与特异性分别为63.7%和86%，其表达水平与胃癌患者总体生存率、浸润深度密切相关。(6)设计外泌体miRNAs模拟物或抑制物，并利用纳米递送载体(如外泌体、脂质体)将其靶向递送至肿瘤部位以恢复miRNAs正常水平，可能是治疗胃癌的一种新策略。(7)虽然外泌体miRNAs在胃癌患者诊疗中具有很大的应用前景，但仍存在一些问题亟待解决，例如外泌体miRNAs的潜在靶点及作用机制尚未完全探讨，其有效性及安全性有待进一步确认；而且外泌体的提取及纯化缺乏标准化规模化制备流程等。

关键词：胃癌肿瘤微环境外泌体miRNAs 血管生成免疫应答自噬耐药诊疗预后生物标记物

高活性脐带间充质干细胞干预老年树鼩衰老脾脏的作用与机制

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4000-4010页

作者：叶丽田川赵晓娟陈梦蝶叶倩倩李强廖珠银李晔朱向情阮光萍何志旭舒莉萍潘兴华贵州医科大学基础医学院免疫学教研室组织工程与干细胞实验中心贵州省贵阳市550004 中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室昆明市干细胞与再生医学重点实验室基础医学实验室云南省昆明市650032 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州省遵义市563100

背景:脾脏具有储血、造血和免疫功能,随着年龄增长,脾脏结构退变、功能衰退引起免疫系统功能受损,进而加速机体衰老进程,而高活性脐带间充质干细胞治疗树鼩脾脏衰老尚未见报道。目的:探讨高活性脐带间充质干细胞对树鼩脾脏衰老的干预作... 详细信息

背景:脾脏具有储血、造血和免疫功能,随着年龄增长,脾脏结构退变、功能衰退引起免疫系统功能受损,进而加速机体衰老进程,而高活性脐带间充质干细胞治疗树鼩脾脏衰老尚未见报道。目的:探讨高活性脐带间充质干细胞对树鼩脾脏衰老的干预作用及机制。方法:从剖腹产的新生树鼩脐带组织中分离、培养和获得高活性脐带间充质干细胞,三系分化试剂盒检测成脂、成骨、成软骨分化能力,流式细胞术检测细胞周期和表面标志物。以感染复数值分别为100,120,140,160,180,200的吉凯基因绿色荧光蛋白转染第2代高活性脐带间充质干细胞,筛选最佳转染条件;转染后的第4代高活性脐带间充质干细胞尾静脉输注给老年治疗组树鼩,青年对照组和老年模型组不予特殊处理,治疗4个月时取脾脏组织,苏木精-伊红染色观察脾脏组织结构;β-半乳糖苷酶染色检测衰老相关半乳糖苷酶活性;免疫组织化学染色检测p21和p53蛋白表达水平;Ki67和PCNA免疫荧光染色检测细胞增殖活性;免疫荧光染色检测脾脏自噬蛋白分子Beclin1和APG5L/ATG5表达水平;活性氧荧光染色检测脾脏组织的活性氧含量;CD3免疫荧光染色检测总T淋巴细胞比例变化;酶联免疫吸附实验检测脾脏组织白细胞介素1β和转化生长因子β1分泌水平;DAPI复染细胞核观察绿色荧光蛋白标记的高活性脐带间充质干细胞在脾脏组织的分布情况。结果与结论:①高活性脐带间充质干细胞呈核小短梭形、鱼群样生长,G_(0)/G_(1)期占比大,具有向成脂、成骨和成软骨分化潜能。②感染复数为140且转染72 h为吉凯基因绿色荧光蛋白标记树鼩高活性脐带间充质干细胞的最佳条件。③与老年模型组相比,老年治疗组树鼩脾脏组织细胞排列紧密,白髓面积增加(P0.05),脾脏组织衰老相关半乳糖苷酶活性水平降低(P细胞比例增加(P细胞介素1β分泌水平降低(P0.05)。与青年对照组相比,以上检测指标在老年治疗组中均有显著差异(P组织切片观察可见老年治疗组树鼩脾脏组织中有绿色荧光蛋白标记的绿色荧光细胞。结果表明:静脉输注高活性脐带间充质干细胞可迁移至脾脏组织,抑制活性氧产生,下调衰老相关蛋白分子表达,诱导细胞自噬,促进细胞增殖,降低慢性炎症,进而改善脾脏组织结构和功能。

关键词：高活性脐带间充质干细胞树鼩脾脏衰老免疫自噬炎症

补中益气汤对高原应激性胃溃疡小鼠的作用效果及其机制的代谢组学分析

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厦门大学学报(自然科学版) 2024年第5期 943-953页

作者：刘娜梁佳林李积良王芬祥奚胜艳赵成周王英杰青海大学医学院青海大学生态环境工程学院青海省中医院肛肠科青海大学藏医学院厦门大学医学院

[目的]分析补中益气汤对高原应激性胃溃疡小鼠胃黏膜损伤的作用，并基于代谢组学探究补中益气汤预防小鼠高原应激性胃溃疡的机制.[方法]使用低压氧舱构建小鼠高原应激性胃溃疡的模型，60只KM小鼠随机分为模型组、正常组、补中益气汤低... 详细信息

[目的]分析补中益气汤对高原应激性胃溃疡小鼠胃黏膜损伤的作用，并基于代谢组学探究补中益气汤预防小鼠高原应激性胃溃疡的机制.[方法]使用低压氧舱构建小鼠高原应激性胃溃疡的模型，60只KM小鼠随机分为模型组、正常组、补中益气汤低剂量组、补中益气汤高剂量组、阳性药物组；通过比较各组小鼠的体质量变化、胃黏膜表观形态及胃黏膜苏木精-伊红染色，分析补中益气汤对高原应激性胃溃疡胃黏膜损伤的影响；通过蛋白免疫印迹法检测各组葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)、转录因子YY1蛋白的表达情况，分析补中益气汤对低氧相关的G6PDH和YY1蛋白表达的调控作用；基于液相色谱-质谱联用技术对小鼠胃组织样本进行代谢组学分析，统计分析差异代谢物，进行代谢通路富集分析.[结果]与正常组相比，模型组的胃黏膜表观出现红肿，有大量出血点，出现腺体细胞脱落、细胞坏死、炎细胞浸润等现象，经过补中益气汤的预防，胃溃疡现象有较好的改善；模型组中G6PDH和YY1蛋白表达量增加，而补中益气汤处理后表达量明显减少；小鼠胃组织样本代谢组学检测结果表明差异代谢物参与花生四烯酸代谢、5-羟色胺能突触以及环磷酸腺苷信号等通路.[结论]补中益气汤通过调节5-羟色胺能突触、组氨酸代谢、环磷酸腺苷信号、花生四烯酸代谢等通路以及G6PDH和YY1蛋白的表达缓解高原应激性胃溃疡的发生.

关键词：代谢组学高原应激性胃溃疡补中益气汤

来源：博看期刊

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大气环境下激光制备高性能Ti6Al4V合金的工艺及组织调控研究

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中国激光 2024年

作者：赵莉赵同帅周炬邱长军朱红梅南华大学机械工程学院超常环境下机电装备安全服役技术湖南省重点实验室

在大气环境下激光制备Ti6Al4V（TC4）合金时易受大气中氮和氧的影响，形成氮化物和氧化物等脆硬相，从而导致裂纹等缺陷。本文设计了一种适于大气环境下激光增材制造TC4合金的带空气防护罩新型喷嘴，对比研究了有/无空气防护罩制备TC4... 详细信息

在大气环境下激光制备Ti6Al4V（TC4）合金时易受大气中氮和氧的影响，形成氮化物和氧化物等脆硬相，从而导致裂纹等缺陷。本文设计了一种适于大气环境下激光增材制造TC4合金的带空气防护罩新型喷嘴，对比研究了有/无空气防护罩制备TC4合金的微观组织与力学性能。基于组分传输、k-ε气体模型，采用计算流体动力学（CFD）模拟了多流道喷嘴的功能原型。结果表明：在空气防护罩的保护下，试样表面附近的N和O浓度可显著降低，其微观组织由α′马氏体、魏氏α组织、β相和纳米相Ti3AlC2组成；力学性能优异，其极限抗拉强度（UTS）、屈服强度（YS）、断后延伸率（EL）、显微硬度分别为1037 MPa、952 MPa、10.2%、365 HV0.2，与目前文献报道的普遍采用密闭环境制备的TC4合金性能相当。

关键词：激光技术 Ti6Al4V合金大气环境 N/O浓度力学性能

环状RNA hsa_circUCK2参与调控二氧化硅致肺纤维化进程

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环境与职业医学 2024年第4期41卷 362-366,374页

作者：张聪罗薇王莎巢杰东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室江苏南京210009 东南大学医学院医学生理系江苏南京210009

[背景]肺纤维化疾病目前早期缺少筛查诊断方法,后期缺乏特效治疗措施,因此急需探究其机制并开发针对性的治疗方法。[目的]筛选病理条件下差异表达的环状RNA(circRNA)hsa_circUCK2的表达情况,探究其对肺纤维化的影响。[方法]在细胞实验中... 详细信息

[背景]肺纤维化疾病目前早期缺少筛查诊断方法,后期缺乏特效治疗措施,因此急需探究其机制并开发针对性的治疗方法。[目的]筛选病理条件下差异表达的环状RNA(circRNA)hsa_circUCK2的表达情况,探究其对肺纤维化的影响。[方法]在细胞实验中,使用小干扰RNA(siRNA)敲除HPF-a细胞中hsa_circUCK2,TGF-β1刺激HPF-a细胞,设立si-NC组、si-circUCK2组、si-NC+TGF-β1处理组、si-circUCK2+TGF-β1处理组4组,Western blot法检测4组HPF-a细胞中纤连蛋白(FN1)表达情况,划痕实验检测HPF-a细胞迁移能力,CCK-8实验检测TGF-β1刺激的2组(si-NC+TGF-β1处理组和si-circUCK2+TGF-β1处理组)HPF-a细胞活性。在动物实验中,健康SPF级雄性C57BL/6小鼠48只,随机分为生理盐水+si-con组,生理盐水+si-circ_0000115组,SiO_(2)+si-con组,SiO2+si-circ_0000115组4组。mmu_circ_0000115是hsa_circUCK2的小鼠同源基因,气管滴注siRNA敲除小鼠肺circRNA mmu_circ_0000115,48 h后通过气管滴注SiO2悬液(0.2 g·kg^(-1),50 mg·mL^(-1))构建小鼠肺纤维化模型,实时荧光定量PCR检测小鼠各脏器中敲除效率,Western blot检测肺组织中I型胶原α2蛋白(COL1A2)表达情况,天狼星红检测肺组织中胶原合成情况。[结果]在细胞实验中,Western blot结果显示,敲除hsa_circUCK2可下调TGF-β1刺激的HPFa细胞中FN1的表达水平(P 细胞划痕实验结果显示,hsa_circUCK2基因的下调可以抑制HPF-a细胞的增殖和迁移(P 组织中被显著敲除mmu_circ_0000115(P 组织中胶原的产生和沉积减少。[结论]敲低hsa_circUCK2抑制成纤维细胞活化和减少肺纤维化模型小鼠中胶原沉积。提示hsa_circUCK2参与肺纤维化进程,可能是肺纤维化的潜在治疗靶点。

关键词：环状RNA 转录组芯片 hsa_circUCK2 肺纤维化人肺成纤维-成人细胞

组蛋白去甲基化酶JMJD3通过调控巨噬细胞极化抑制实验性牙周炎牙槽骨破坏的研究

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中华口腔医学杂志 2024年第8期59卷 823-832页

作者：王瑞玲鲁嘉韦罗礼君同济大学附属口腔医院牙周病科、同济大学口腔医学院、上海牙组织修复与再生工程技术研究中心、同济大学口腔医学研究所上海200072

目的探究组蛋白去甲基化酶——含Jumonji结构域蛋白3(JMJD3)在炎症牙周组织中的表达及其对牙周炎调控的潜在机制。方法分析2022年发表在基因表达综合数据库(GEO)中牙周组织单细胞测序的结果,并收集2021年6至12月同济大学附属口腔医院牙... 详细信息

目的探究组蛋白去甲基化酶——含Jumonji结构域蛋白3(JMJD3)在炎症牙周组织中的表达及其对牙周炎调控的潜在机制。方法分析2022年发表在基因表达综合数据库(GEO)中牙周组织单细胞测序的结果,并收集2021年6至12月同济大学附属口腔医院牙周病科和口腔颌面外科牙周手术和拔牙术中获取的健康及牙周炎患者的牙龈样本各9例,进行免疫组织化学染色、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)。构建小鼠牙周炎模型,实验分组为:健康对照+生理盐水组、丝线结扎+生理盐水组、丝线结扎+GSK-J4(JMJD3抑制剂)组。体外使用牙龈卟啉单胞菌(Pg)来源的脂多糖(LPS)(Pg-LPS)模拟牙周炎症微环境,并使用靶向Jmjd3的小干扰RNA(siRNA)、GSK-J4分别处理巨噬细胞。siRNA转染实验分组为:阴性对照序列转染(NC)组、siRNA-Jmjd3组、NC+LPS组、siRNA-Jmjd3+LPS组。抑制剂实验分组为:二甲基亚砜(DMSO)组、GSK-J4组、DMSO+LPS组、GSK-J4+LPS组。使用蛋白质免疫印迹法、免疫荧光染色等方法探索JMJD3在体内、体外环境下对巨噬细胞极化及牙周炎症的影响。结果牙周炎患者牙龈组织的JMJD3表达(1.97±0.91)显著高于健康牙龈组织(1.00±0.33)(t=2.45,P=0.048)。体外实验RT-qPCR结果显示,siRNA敲低JMJD3或使用GSK-J4抑制JMJD3均可促进炎症环境下巨噬细胞的M1极化,抑制M2极化:NC+LPS组精氨酸酶Ⅰ(Arg1)的表达(0.90±0.06)显著高于siRNA-Jmjd3+LPS组(0.61±0.11)(P细胞介素(Il)-6、Il-1β和肿瘤坏死因子α(Tnf-α)的表达(分别为8.50±0.16、5.56±0.20、3.44±0.16)均显著低于siRNA-Jmjd3+LPS组(分别为14.63±0.48、8.55±0.10、11.72±0.58)(均P组织中巨噬细胞的M1极化,降低了M2极化。丝线结扎+生理盐水组的颊侧釉质牙骨质界至牙槽嵴顶的距离(CEJ-ABC)、腭侧CEJ-ABC及M1/M2型巨噬细胞比值[分别为(0.26±0.03)、(0.24±0.01)mm和0.35±0.10]均显著低于丝线结扎+GSK-J4组[分别为(0.34±0.04)、(0.30±0.05)mm和2.50±0.58](t=3.65,P=0.006;t=2.67,P=0.049;t=7.31,P=0.004)。结论单细胞测序及体内外实验验证JMJD3在牙周炎牙周组织中表达上调,JMJD3可能通过调控巨噬细胞极化抑制牙周炎的牙槽骨破坏,从而在牙周炎症过程中发挥保护作用。

关键词：牙周炎牙槽骨质丢失单细胞测序含Jumonji结构域蛋白3 巨噬细胞巨噬细胞极化

乳腺癌原代细胞系为药物筛选和基础研究提供癌症新模型

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中国癌症杂志 2024年第6期34卷 561-570页

作者：郝弦黄建军杨文秀刘晋廷张军红罗钰蓓李青王大红高玉炜谭福云薄莉郑羽王荣冯江龙李静赵春华豆晓伟贵州医科大学附属医院病理科贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院乳腺外科贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院急诊骨科贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院临床医学研究中心贵州贵阳550004 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院中国医学科学院组织工程研究中心干细胞新药研发及临床转化研究北京市重点实验室(BZ0381)北京100005

背景和目的:2016年美国国家癌症研究所(National Cancer Institute,NCI)宣布不再使用NCI-60细胞系进行药物筛选,提示传统的肿瘤细胞系失去作为药物研发和基础研究工具的价值。NCI-60细胞“退休”原因是基于癌症细胞系和动物的实验结果... 详细信息

背景和目的:2016年美国国家癌症研究所(National Cancer Institute,NCI)宣布不再使用NCI-60细胞系进行药物筛选,提示传统的肿瘤细胞系失去作为药物研发和基础研究工具的价值。NCI-60细胞“退休”原因是基于癌症细胞系和动物的实验结果没有在临床试验中获得对应的预期,导致绝大部分潜在药物临床试验失败。癌症细胞系失去价值归因于肿瘤细胞经过长期培养后,其增殖和转移等主要生物学行为和与之有关的关键蛋白质系统发生了根本改变,已不能代表患者的真实癌症特征。现阶段需要创立一种来源于患者新鲜癌症组织和具有清晰临床背景的新癌症模型。本研究旨在为药物研发和基础研究建立经济的患者来源的可以无限传代的乳腺癌原代细胞系。方法:乳腺癌组织在贵州医科大学附属医院乳腺外科收集。肿瘤组织样本收集得到贵州医科大学附属医院伦理委员会批准(伦理编号:2022伦理第313号),收集和使用肿瘤组织均遵守赫尔辛基宣言,患者的乳腺癌组织消化分离后在BCMI培养基中培养,待乳腺癌细胞增殖到一定数量时更换成DMEM培养基。乳腺癌细胞经短串联重复序列(short tandem repeat,STR)检测确定细胞特异性遗传学标志和来源。克隆形成实验和动物实验分析乳腺癌原代细胞系形成肿瘤的能力。结果:成功建立了6种乳腺癌原代细胞系。他们具有清晰的临床病理学特征,包括病理学标志性分子检测、临床诊断、治疗方案和结果以及确定的预后结果。STR检测确定了6种乳腺癌原代细胞系特异性遗传标志和确定了该细胞系的来源。克隆形成实验和动物移植实验说明乳腺癌原代细胞系增殖能力显著大于传统乳腺癌细胞系,二者在形成肿瘤能力方面存在明显的差异。结论:构建的6种乳腺癌原代细胞系为乳腺癌药物研发和基础研究提供了新的癌症模型。

关键词：乳腺癌原代细胞系药物研发基础研究新癌症模型

一种贻贝酰胺酶型肽聚糖识别蛋白的分子特征及功能分析

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水生生物学报 2024年

作者：阳宗欣王昊东何志巧肖文慧杨子霖张晓林何建瑜严小军廖智浙江海洋大学海洋科学与技术学院海洋生物蛋白质工程研究室

从厚壳贻贝(Mytilus coruscus)鳃组织中鉴定到一种新型贻贝肽聚糖识别蛋白(Peptidoglycan recognition protein,PGRP)分子,为探讨其在贻贝先天免疫系统中的作用,对其开展了序列分析,表达模式,亚细胞定位,原核重组表达及表达产物的功能... 详细信息

从厚壳贻贝(Mytilus coruscus)鳃组织中鉴定到一种新型贻贝肽聚糖识别蛋白(Peptidoglycan recognition protein,PGRP)分子,为探讨其在贻贝先天免疫系统中的作用,对其开展了序列分析,表达模式,亚细胞定位,原核重组表达及表达产物的功能验证研究。研究结果表明,厚壳贻贝新型PGRP由438个氨基酸残基组成。序列中含典型肽聚糖识别蛋白/酰胺酶(PGRP/Amidase)结构域,属于酰胺酶型PGRP。该蛋白在厚壳贻贝各组织中呈组成型表达特征。微生物胁迫可明显上调PGRP表达量,其响应速度和表达量上调幅度对不同微生物胁迫具有差异。利用原核重组表达技术成功表达出可溶性重组厚壳贻贝PGRP。对表达产物的功能验证结果表明,重组厚壳贻贝PGRP蛋白表现出明显的抑菌活性、细菌凝集活性和对PGN的酰胺酶活性,上述活性均具有锌离子依赖性。亚细胞定位分析结果表明,该PGRP分子主要定位于细胞核内。上述结果为深入了解厚壳贻贝的免疫识别机制奠定了基础。

关键词：肽聚糖识别蛋白荧光定量PCR 原核重组表达免疫厚壳贻贝