环状RNA hsa_circUCK2参与调控二氧化硅致肺纤维化进程

作     者：张聪 罗薇 王莎 巢杰 ZHANG Cong;LUO Wei;WANG Sha;CHAO Jie

作者机构：东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室江苏南京210009 东南大学医学院医学生理系江苏南京210009 

出 版 物：《环境与职业医学》 (Journal of Environmental and Occupational Medicine)

年 卷 期：2024年第41卷第4期

页      面：362-366,374页

核心收录：

学科分类：100405[医学-卫生毒理学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81972987) 

主　　题：环状RNA 转录组芯片 hsa_circUCK2 肺纤维化 人肺成纤维-成人细胞 

摘      要：[背景]肺纤维化疾病目前早期缺少筛查诊断方法,后期缺乏特效治疗措施,因此急需探究其机制并开发针对性的治疗方法。[目的]筛选病理条件下差异表达的环状RNA(circRNA)hsa_circUCK2的表达情况,探究其对肺纤维化的影响。[方法]在细胞实验中,使用小干扰RNA(siRNA)敲除HPF-a细胞中hsa_circUCK2,TGF-β1刺激HPF-a细胞,设立si-NC组、si-circUCK2组、si-NC+TGF-β1处理组、si-circUCK2+TGF-β1处理组4组,Western blot法检测4组HPF-a细胞中纤连蛋白(FN1)表达情况,划痕实验检测HPF-a细胞迁移能力,CCK-8实验检测TGF-β1刺激的2组(si-NC+TGF-β1处理组和si-circUCK2+TGF-β1处理组)HPF-a细胞活性。在动物实验中,健康SPF级雄性C57BL/6小鼠48只,随机分为生理盐水+si-con组,生理盐水+si-circ_0000115组,SiO_(2)+si-con组,SiO2+si-circ_0000115组4组。mmu_circ_0000115是hsa_circUCK2的小鼠同源基因,气管滴注siRNA敲除小鼠肺circRNA mmu_circ_0000115,48 h后通过气管滴注SiO2悬液(0.2 g·kg^(-1),50 mg·mL^(-1))构建小鼠肺纤维化模型,实时荧光定量PCR检测小鼠各脏器中敲除效率,Western blot检测肺组织中I型胶原α2蛋白(COL1A2)表达情况,天狼星红检测肺组织中胶原合成情况。[结果]在细胞实验中,Western blot结果显示,敲除hsa_circUCK2可下调TGF-β1刺激的HPFa细胞中FN1的表达水平(P 0.05);CCK-8实验和细胞划痕实验结果显示,hsa_circUCK2基因的下调可以抑制HPF-a细胞的增殖和迁移(P 0.01)。在动物实验中,实时荧光定量PCR结果显示,在各脏器中只有肺组织中被显著敲除mmu_circ_0000115(P 0.000 1);Western blot结果表明,与SiO2+si-con组相比,敲低mmu_circ_0000115可以降低COL1A2蛋白表达水平(P 0.000 1);天狼星红结果显示,敲低mmu_circ_0000115后,模型组小鼠肺组织中胶原的产生和沉积减少。[结论]敲低hsa_circUCK2抑制成纤维细胞活化和减少肺纤维化模型小鼠中胶原沉积。提示hsa_circUCK2参与肺纤维化进程,可能是肺纤维化的潜在治疗靶点。