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骨疏方调节FoxO3a/Wnt信号通路对H2O2诱导成骨细胞损伤的影响

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中国骨质疏松杂志 2024年第10期 1426-1431页

作者：段波陈丽川马志毅喻昭刘静王进军武汉市中医医院风湿病科武汉市中医医院针灸科

目的探讨骨疏方调节FoxO3a/Wnt信号通路对过氧化氢（H2O2）诱导成骨细胞损伤的影响。方法 CCK-8法检测不同浓度（0.01、0.1、1、10、100μmol/L）的骨疏方对H2O2诱导的MC3T3-E1细胞活力。随后设置对照组、H2O2（150μmol/L H2O2）组、... 详细信息

目的探讨骨疏方调节FoxO3a/Wnt信号通路对过氧化氢（H2O2）诱导成骨细胞损伤的影响。方法 CCK-8法检测不同浓度（0.01、0.1、1、10、100μmol/L）的骨疏方对H2O2诱导的MC3T3-E1细胞活力。随后设置对照组、H2O2（150μmol/L H2O2）组、骨疏方组、骨疏方+空载体组、骨疏方+FoxO3a过表达组。CCK-8法、ELISA分别检测细胞活力、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）;成骨诱导分化后，碱性磷酸酶（ALP）试剂盒及茜素红分析ALP活性、细胞骨矿化结节；qRT-PCR检测成骨相关基因OPN mRNA、Runx2 mRNA以及FoxO3a mRNA表达水平；Western blot检测通路相关蛋白FoxO3a、Wnt2、β-连环蛋白（β-catenin）表达水平。结果与对照组比较，H2O2组MDA、FoxO3a表达显著增加，细胞活力、SOD、ALP活性、骨矿化结节数量、OPN mRNA、Runx2 mRNA、Wnt2、β-catenin表达显著降低（P<0.05）;与H2O2组比较，骨疏方组MDA、FoxO3a表达显著降低，细胞活力、SOD、ALP活性、骨矿化结节数量、OPN mRNA、Runx2 mRNA、Wnt2、β-catenin表达显著增加（P<0.05）;与骨疏方+空载体组比较，骨疏方+FoxO3a过表达组MDA、FoxO3a表达显著增加，细胞活力、SOD、ALP活性、骨矿化结节数量、OPN mRNA、Runx2 mRNA、Wnt2、β-catenin表达显著降低（P<0.05）。结论骨疏方可改善H2O2诱导成骨细胞损伤，可能与抑制FoxO3a/Wnt信号通路有关。

关键词：骨疏方过氧化氢成骨细胞 FoxO3a/Wnt信号通路骨质疏松症

梓醇对H_(2)O_(2)诱导成骨细胞损伤的影响及机制

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中国药房 2024年第10期35卷 1220-1225页

作者：段波陈丽川马志毅喻昭刘静王进军武汉市中医医院风湿病科武汉430050

目的探究梓醇对H_(2)O_(2)诱导成骨细胞损伤的影响及机制。方法将小鼠成骨细胞MC3T3-E1分为对照组、模型组、空载组(转染空载质粒)、梓醇组(100μmol/L)、梓醇+叉头框蛋白O3(FoxO3)过表达组(100μmol/L梓醇+转染FoxO3过表达质粒),经梓... 详细信息

目的探究梓醇对H_(2)O_(2)诱导成骨细胞损伤的影响及机制。方法将小鼠成骨细胞MC3T3-E1分为对照组、模型组、空载组(转染空载质粒)、梓醇组(100μmol/L)、梓醇+叉头框蛋白O3(FoxO3)过表达组(100μmol/L梓醇+转染FoxO3过表达质粒),经梓醇和转染处理后,除对照组细胞不作处理外,其余各组细胞以H_(2)O_(2)诱导建立成骨细胞氧化应激模型。检测各组细胞活力、凋亡率、碱性磷酸酶(ALP)活性、钙结节光密度(OD)值、活性氧(ROS)的平均荧光强度(MFI)、抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)]活性、炎症因子[白细胞介素6(IL-6)、IL-1β]水平、FoxO3/Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组细胞活力、ALP活性、钙结节OD值、抗氧化酶活性和Wnt、β-catenin蛋白表达水平均显著降低,凋亡率、ROS的MFI、炎症因子水平和FoxO3蛋白表达水平均显著升高(P0.05),梓醇组细胞上述指标均显著逆转(P<0.05);与梓醇组比较,梓醇+FoxO3过表达组细胞上述指标的逆转效果均被显著削弱(P<0.05)。结论梓醇可通过下调FoxO3激活Wnt/β-catenin信号通路,抑制H_(2)O_(2)诱导的MC3T3-E1细胞氧化应激和炎症反应,提高细胞活力与成骨分化能力,抑制细胞凋亡。

关键词：梓醇 FoxO3/Wnt/β-catenin信号通路成骨分化氧化应激炎症因子

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新型乌蔹莓水凝胶对湿热蕴结型痛风性关节炎的干预效果

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实用临床医药杂志 2024年第5期28卷 25-30页

作者：徐媚媚郭亮陈月月景嵘月朱亚梅徐大可何静徐波周琰徐蕾南京市中医院风湿病科江苏南京210006

目的探讨新型乌蔹莓水凝胶对湿热蕴结型痛风性关节炎的干预效果及作用机制。方法选取90例符合痛风性关节炎西医诊断标准、中医辨证属湿热蕴结证的患者作为研究对象,随机分成治疗组、对照组和空白组,每组30例。空白组仅采用依托考昔治疗... 详细信息

目的探讨新型乌蔹莓水凝胶对湿热蕴结型痛风性关节炎的干预效果及作用机制。方法选取90例符合痛风性关节炎西医诊断标准、中医辨证属湿热蕴结证的患者作为研究对象,随机分成治疗组、对照组和空白组,每组30例。空白组仅采用依托考昔治疗,对照组采用依托考昔联合乌蔹莓膏治疗,治疗组采用依托考昔联合外敷乌蔹莓水凝胶治疗。比较3组临床疗效、症状改善时间、安全性、舒适性和治疗前后中医证候积分、血清炎性因子[C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血沉(ESR)]、NF-κB信号通路相关蛋白、疼痛视觉模拟评分法(VAS)评分、关节活动度变化情况。结果治疗组、对照组治疗总有效率分别为93.33%、90.00%,高于空白组的70.00%,差异有统计学意义(P中医证候积分低于对照组、空白组,治疗组、对照组血清CRP、TNF-α、ESR水平和NF-κB信号通路相关蛋白P50、P65表达低于空白组,差异有统计学意义(P0.05)。结论乌蔹莓水凝胶对痛风性关节炎的治疗效果优于乌蔹莓膏,其作用机制可能与调控NF-κB通路、抑制炎性因子表达有关,且水凝胶使用方便卫生,舒适性高,有望成为安全、有效、便捷的痛风性关节炎外敷中药。

关键词：乌蔹莓水凝胶湿热蕴结型痛风关节炎

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核桃灸联合中药超声雾化治疗干燥综合征干眼症疗效评价

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中文科技期刊数据库（文摘版）医药卫生 2024年第10期 0093-0096页

作者：郭亮徐长松南京市中医院风湿病科江苏南京210006

干眼症是临床常见的眼部疾患,以眼部干涩有异物感为主要症状,也是干燥综合征的典型表现之一。干燥综合征的干眼症,因其有免疫因素参与,加之目前治疗手段单一,持续缓解率较低,往往疗效较差。通过经络辨证与脏腑辨证相结合,采用核桃灸联... 详细信息

干眼症是临床常见的眼部疾患,以眼部干涩有异物感为主要症状,也是干燥综合征的典型表现之一。干燥综合征的干眼症,因其有免疫因素参与,加之目前治疗手段单一,持续缓解率较低,往往疗效较差。通过经络辨证与脏腑辨证相结合,采用核桃灸联合中药超声雾化治疗用于治疗干燥综合征干眼症的患者,临床上取得了良好的效果,值得广泛推广。

关键词：干燥综合征干眼症核桃灸中药超声雾化治疗

芪黄健脾滋肾颗粒改善MRL/lpr小鼠肾脏损害机制研究

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中国中西医结合杂志 2024年

作者：尚双双李明黄传兵安徽中医药大学第一附属医院风湿病科

目的基于长链非编码RNA生长停滞特异性转录因子5(IncRNA GAS5)/miR-21/软脂酰化磷蛋白（Sprouty1）轴，研究芪黄健脾滋肾颗粒（QJZ）治疗MRL/lpr小鼠肾脏损害的疗效及作用机制。方法选取10只C57BL/6雌性小鼠为对照组，40只MRL/lpr雌... 详细信息

目的基于长链非编码RNA生长停滞特异性转录因子5(IncRNA GAS5)/miR-21/软脂酰化磷蛋白（Sprouty1）轴，研究芪黄健脾滋肾颗粒（QJZ）治疗MRL/lpr小鼠肾脏损害的疗效及作用机制。方法选取10只C57BL/6雌性小鼠为对照组，40只MRL/lpr雌性小鼠随机分为模型组、泼尼松组、QJZ组、吗替麦考酚酯组，每组10只；泼尼松组予以泼尼松溶液灌胃，QJZ组予以泼尼松+QJZ溶液灌胃，吗替麦考酚酯组予以泼尼松+吗替麦考酚酯溶液灌胃，对照组及模型组予以等量生理盐水，干预8周。二喹啉甲酸检测尿蛋白定量；ELISA检测肾损害指标[肌酐（SCr）和尿素氮（BUN）]、细胞因子[白介素（IL）-1、IL-6和肿瘤相关因子（TNF-α）、免疫学指标[抗dsDNA抗体、C3、C4];HE、Masson染色、肾脏病理损伤进行活动性指数（AI）及慢性指数（CI）评分评价小鼠肾脏组织病变；RT-qPCR检测小鼠肾脏lncRNA GAS5、miR-21-5p、Sprouty1、细胞外信号调节激酶（ERK）1/2、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）基因的表达；Western Blot检测小鼠肾脏Sprouty1、ERK1/2、CREB蛋白的表达。结果病理结果显示，模型组小鼠肾脏出现大量炎症、不同程度纤维化、系膜区细胞过度增殖等病理改变，AI与CI评分升高（P<0.01）。与模型组比较，QJZ能改善小鼠肾脏病理病变，降低AI与CI评分（P<0.01）；降低尿蛋白、SCr、BUN(P<0.01)，降低抗dsDNA抗体，升高补体C3、C4，降低细胞因子IL-1、IL-6和TNF-α水平（P<0.01）。与对照组比较，模型小鼠肾脏中GAS5的表达降低，miR-21-5p的表达升高，Sprouty1的表达下降（P<0.01）,ERK/CREB通路的磷酸化水平升高（P<0.01）。与模型组比较，QJZ能够上调GAS5、下调miR-21-5p、上调Sprouty1的表达（P<0.01），抑制ERK/CREB通路的磷酸化（P<0.01）。结论 QJZ可能通过lncRNA GAS5/miR-21-5p/Sprouty1信号轴，抑制ERK/CREB通路磷酸化，抑制肾小球系膜细胞增殖，减少炎症因子产生，改善系统性红斑狼疮肾脏损害。

关键词： MRL/lpr小鼠肾损害肾小球系膜细胞增殖芪黄健脾滋肾颗粒中药复方

尪痹胶囊治疗活动性类风湿关节炎多中心、随机双盲、平行对照研究

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中国中西医结合杂志 2024年第1期44卷 44-48页

作者：吴金联苏励黄清春王薇萍苏晓王勇翟付明刘雅文上海中医药大学附属龙华医院风湿免疫科上海200032 广东省中医院风湿病科广州510006 上海市光华中西医结合医院风湿病科上海200052 上海市中医医院风湿病科上海200071 华润三九医药股份有限公司广东518110

目的观察尪痹胶囊治疗活动性类风湿关节炎(RA)的临床疗效和安全性。方法招募的114例活动性RA患者中,101例符合纳入标准,采用区组随机化方法,分别按中心分层,选取段长为2,借助SAS9.4软件PROC PLAN过程语句,给定种子数,将受试者以1:1随机... 详细信息

目的观察尪痹胶囊治疗活动性类风湿关节炎(RA)的临床疗效和安全性。方法招募的114例活动性RA患者中,101例符合纳入标准,采用区组随机化方法,分别按中心分层,选取段长为2,借助SAS9.4软件PROC PLAN过程语句,给定种子数,将受试者以1:1随机分入治疗组(52例)和对照组(49例),治疗组给予尪痹胶囊+甲氨蝶呤(MTX),对照组给予尪痹胶囊模拟剂+MTX治疗,疗程12周。通过比较治疗前后的基于血沉(ESR)的28个关节疾病活动评分(DAS28-ESR)、基于C反应蛋白(CRP)的28个关节疾病活动评分(DAS28-CRP)、DAS28-ESR缓解率、DAS28-CRP缓解率、ESR、CRP、类风湿因子(RF)和抗环瓜氨酸抗体(ACPA)、患者视觉模拟评分(VAS)、医生VAS评分、关节疼痛数、关节肿胀数、健康评定问卷(HAQ)评分和中医证候积分等指标评估尪痹胶囊的疗效,通过观察安全性指标和不良反应评估尪痹胶囊安全性。结果101例患者治疗过程中脱落5例,最终纳入分析96例,治疗组49例,对照组47例。与本组治疗前比较,两组治疗后DAS28-CRP、患者VAS评分、医生VAS评分、关节压痛数、关节肿胀数、HAQ评分及中医证候积分均下降(P中医证候积分下降更明显(P<0.05)。结论尪痹胶囊联用MTX治疗活动性RA较单用MTX临床疗效更好,安全性良好(中国临床试验注册中心,***1900026079)。

关键词：类风湿关节炎尪痹胶囊甲氨蝶呤临床疗效和安全性随机双盲、平行对照研究中西医结合

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尪痹片调控cGAS-STING信号通路改善肾虚证胶原诱导性关节炎大鼠炎症水平机制研究

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中国中药杂志 2024年第18期 5006-5015页

作者：边雨婷张艳珍陶庆文干畅韩雨欣鄢泽然王金平王建明胡春宇北京中医药大学研究生院中日友好医院中医风湿病科北京中医医院顺义医院中医风湿病科中国中医科学院研究生院

探究尪痹片(Wangbi Tablets, WBT)通过调控cGAS-STING信号通路改善肾虚证胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis, CIA)大鼠炎症水平的作用机制。24只SPF级SD大鼠，随机选取18只构建肾虚证CIA模型，共分为4组，每组6只，分别为空... 详细信息

探究尪痹片(Wangbi Tablets, WBT)通过调控cGAS-STING信号通路改善肾虚证胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis, CIA)大鼠炎症水平的作用机制。24只SPF级SD大鼠，随机选取18只构建肾虚证CIA模型，共分为4组，每组6只，分别为空白对照组(control组)、肾虚证CIA组(model组)、肾虚证CIA+WBT组(M+WBT组)、肾虚证CIA+甲氨蝶呤(methotrexate, MTX)组(M+MTX组)。评估各组肾虚证和关节炎评分；酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平；苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色、番红-固绿染色观察踝关节、滑膜及软骨的病理变化情况；免疫组化(immunohistochemistry, IHC)检测踝关节骨组织内DNA聚合酶β(polymerase beta, Polβ)、环磷酸鸟苷-腺苷合成酶(cGAS)的表达水平；蛋白免疫印迹(Western blot)法检测Polβ、cGAS、干扰素刺激因子(STING)、磷酸化STING(p-STING)、核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、磷酸化NF-κB (phospho-NF-κB, p-NF-κB)、干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3, IRF3)、消皮素D(gasdermin D,GSDMD)、GSDMD蛋白N端(GSDMD-NT)、半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)的表达水平；TUNEL染色检测踝关节骨组织细胞凋亡率。结果显示，与control组相比，model组肾虚和关节炎症状和体征变化最严重，经WBT干预后关节变形、精神状态、毛色有一定程度改善；与model组相比，WBT能够显著改善肾虚和关节炎症状。与control组相比，model组血清IL-18、IL-1β水平升高；与model组相比，M+WBT组IL-18水平显著降低，IL-1β有降低趋势。与control组相比，model组踝关节骨组织内可见大量炎细胞浸润伴结构破坏，软骨基质已破坏，WBT能够减轻model组大鼠踝关节骨组织的炎症、骨与软骨破坏。与control组相比，model组cGAS、IRF3、p-NF-κB/NF-κB、caspase-1、cleaved-caspase-1水平显著升高，p-STING/STING、GSDMD、GSDMD-NT升高；与model组相比，WBT干预后的model组大鼠踝关节骨组织中Polβ表达显著增强，cGAS、IRF3、GSDMD、GSDMD-NT、caspase-1表达水平显著降低，p-STING/STING、p-NF-κB/NF-κB、cleaved-caspase-1有降低趋势。与control组比，model组骨组织内、滑膜、新生血管内皮处细胞凋亡显著降低，WBT的干预能够增加滑膜等处的细胞凋亡。综上得出，WBT对肾虚证CIA大鼠有治疗作用，其机制体现在显著提高踝关节骨组织的Polβ的表达水平，抑制cGAS-STING信号通路，降低焦亡标志蛋白的表达，减少细胞因子的释放，从而减轻炎症反应，延缓骨破坏的进展，发挥防治RA的作用。

关键词：尪痹片类风湿关节炎 cGAS-STING信号通路细胞焦亡机制

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红景天苷调控miR-20a-5p/TIMP2轴对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖和迁移的影响

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安徽医科大学学报 2024年第5期59卷 803-809页

作者：朱光昭方璐严婕李琴青海省中医院风湿病科西宁810000 青海大学医学部西宁810016

目的探讨红景天苷调控miR-20a-5p/金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP2)轴对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)功能和活化的影响。方法以HFLS-RA细胞为研究对象,将HFLS-RA细胞分为肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组、对照组、红景天苷组、miR-... 详细信息

目的探讨红景天苷调控miR-20a-5p/金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP2)轴对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)功能和活化的影响。方法以HFLS-RA细胞为研究对象,将HFLS-RA细胞分为肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组、对照组、红景天苷组、miR-20a-5p抑制物阴性对照(inhibitor NC)组、miR-20a-5p抑制物组、红景天苷+miR-20a-5p模拟物阴性对照(mimic NC)组、红景天苷+miR-20a-5p模拟物组。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测HFLS-RA细胞中miR-20a-5p表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HFLS-RA细胞上清液中白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;细胞计数试剂盒8(CCK-8)法、5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)染色检测HFLS-RA细胞增殖;划痕实验检测HFLS-RA细胞迁移;免疫印迹实验(Western blot)检测HFLS-RA细胞中TIMP2、细胞周期素D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)-9蛋白表达;双荧光素酶验证miR-20a-5p与TIMP2的关系。结果与对照组比较,TNF-α组miR-20a-5p表达、IL-1β、IL-6水平、吸光度(OD_(450))值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率及CyclinD1、MMP-9蛋白上调,TIMP2蛋白下调(P<0.05);与TNF-α组相比,红景天苷组miR-20a-5p表达、IL-1β、IL-6水平、OD_(450)值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率及CyclinD1、MMP-9蛋白下调,TIMP2蛋白上调(P<0.05);与inhibitor NC组、TNF-α组相比比较,miR-20a-5p抑制物组miR-20a-5p表达、IL-1β、IL-6水平、OD_(450)值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率及CyclinD1、MMP-9蛋白下调,TIMP2蛋白上调(P<0.05);与红景天苷+mimic NC组、红景天苷组相比,红景天苷+miR-20a-5p模拟物组miR-20a-5p表达、IL-1β、IL-6水平、OD_(450)值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率及CyclinD1、MMP-9蛋白表达升高,TIMP2蛋白表达降低(P<0.05)。miR-20a-5p与TIMP2存在靶向调控关系。结论红景天苷可能通过调控miR-20a-5p/TIMP2抑制TNF-α诱导的HFLS-RA细胞增殖、迁移及炎症反应。

关键词：红景天苷 miR-20a-5p 金属蛋白酶组织抑制剂-2 类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖迁移

罗浮山风湿膏药在膝骨关节炎患者中的应用分析

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辽宁中医杂志 2024年

作者：刘明岭徐强刘丽娟张明英广州中医药大学第一附属医院风湿病科

目的探讨罗浮山风湿膏药治疗对膝骨关节炎（kneeosteoarthritis，KOA）患者的应用效果。方法选取我院2020年1月-2021年1月治疗的200例KOA患者，随机分为对照组和观察组各100例。对照组口服艾瑞昔布片，0.1g/次，2次/d；观察组在对照... 详细信息

目的探讨罗浮山风湿膏药治疗对膝骨关节炎（kneeosteoarthritis，KOA）患者的应用效果。方法选取我院2020年1月-2021年1月治疗的200例KOA患者，随机分为对照组和观察组各100例。对照组口服艾瑞昔布片，0.1g/次，2次/d；观察组在对照组的基础上外敷罗浮山风湿膏药，1次/d；两组患者均治疗3周。观察两组临床疗效，比较两组运动功能指标、关节疼痛情况。结果治疗后，观察组临床有效率高于对照组（P＜0.05）。治疗后，观察组膝关节（LKSS）评分和美国膝关节协会评分量表AKS功能评分显著高于对照组（P＜0.05）；且观察组视觉模拟评分法（VAS）评分在静息状态下、行走时、上下楼时均低于对照组（P＜0.05）。结论罗浮山风湿膏药联合艾瑞昔布片治疗可以显著缓解KOA患者疼痛，改善膝关节功能，促进运动功能恢复，提高临床疗效。

关键词：膝骨关节炎罗浮山风湿膏药艾瑞昔布片运动功能疼痛