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石墨烯及其衍生物对血管生成和血管化骨的影响机制

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中国组织工程研究 2024年第17期28卷 2716-2722页

作者：高丽刘浏任文燕刘雪王一宇济宁医学院口腔医学院山东省济宁市272067 南京医科大学口腔疾病研究江苏省重点实验室南京医科大学口腔医学院放射科江苏省南京市210029

背景:石墨烯是最薄、最强韧的一类二维新型晶体材料,在生物医学的应用中显示出巨大的优势。血管生成和血管化骨是组织修复和再生的关键,是解决血管和成骨问题的有效途径。目的:综述石墨烯及其衍生物促进血管生成和血管化骨的特性及机制... 详细信息

背景:石墨烯是最薄、最强韧的一类二维新型晶体材料,在生物医学的应用中显示出巨大的优势。血管生成和血管化骨是组织修复和再生的关键,是解决血管和成骨问题的有效途径。目的:综述石墨烯及其衍生物促进血管生成和血管化骨的特性及机制,为其在血管化组织修复与再生的临床应用提供参考。方法:利用计算机检索PubMed、ScienceDirect、中国知网和万方数据库收录的相关文献,中文检索词为“石墨烯,血管生成,血管化,血管化骨,内皮细胞”,英文检索词为“graphene,Angiogenesis OR Vascularization,Vascularized bone,endothelial cells”。排除与文章主题不相关的文献,根据纳入标准和排除标准,最终纳入62篇文献进行结果分析。结果与结论:①目前氧化石墨烯在石墨烯及其衍生物中的研究较多,应用最为广泛。②石墨烯及其衍生物适用于心脏、骨、神经和创伤愈合等相关疾病。③石墨烯及其衍生物有优异的理化性能和生物学性能,但其存在潜在的细胞毒性,在应用中需注意其生物安全性。④石墨烯及其衍生物的应用还需要进一步的研究来证明其最适尺寸和浓度及降低毒性的措施。⑤就细胞层面而言,石墨烯及其衍生物可以通过促进尖端内皮细胞表型、间充质干细胞黏附和增殖、血管平滑肌细胞的生长,从而促进血管生成活性。⑥就分子层面而言,石墨烯及其衍生物可以增加血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子及肝细胞生长因子等的表达并活化活性氧/一氧化氮合酶/一氧化氮信号通路、溶血磷脂酸R6/Hippo-YAP通路、基质细胞衍生因子1/血管内皮生长因子和ZEB1/Notch1通路。⑦氧化石墨烯和氧化石墨烯-铜可以磷酸化细胞外调节蛋白激酶并激活缺氧诱导因子1,进而促进血管内皮生长因子和骨形态生成蛋白2的表达上调,从而促进血管生成和血管化骨。⑧因此,石墨烯及其衍生物特别是氧化石墨烯由于具有优良的生物学性能、良好的促血管生成及促血管化骨能力,在血管化组织修复与再生方面有很大的应用前景。

关键词：石墨烯及其衍生物血管化血管生成血管化骨内皮细胞支架材料分子机制信号通路

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基于德尔菲法构建真实世界证据评价体系

中国循证医学杂志 2024年第10期 1156-1161页

作者：姚振阁周佳薇陆梦依尤东方赵杨南京医科大学公共卫生学院生物统计学系南京医科大学国家疫苗研发创新平台江苏省恶性肿瘤生物标志物与防治重点实验室肿瘤个体化医学省部共建协同创新中心

目的构建真实世界证据评价体系，为获得高质量的循证医学证据提供参考。方法通过调研、分析影响真实世界研究证据的关键因素，结合国内外文献和评估工具，初步确定真实世界证据评价体系的指标，采用德尔菲法对相关领域专家进行征询，... 详细信息

目的构建真实世界证据评价体系，为获得高质量的循证医学证据提供参考。方法通过调研、分析影响真实世界研究证据的关键因素，结合国内外文献和评估工具，初步确定真实世界证据评价体系的指标，采用德尔菲法对相关领域专家进行征询，修改并确定最终评价指标。结果最终构建的真实世界证据评价体系的指标包括40个条目。两轮专家征询的有效回收率为88.2%和100%；专家协调系数为0.174(P学性，能够为真实世界研究转化为高质量的证据提供依据和帮助。

关键词：真实世界证据德尔菲法质量评价偏倚识别

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三种轨迹分析方法的比较研究

中国卫生统计 2024年第3期41卷 331-338页

作者：王俊杰陈依娜陆梦依尤东方赵杨南京医科大学公共卫生学院生物统计学系 211166 南京医科大学国家疫苗研发创新平台江苏省恶性肿瘤生物标志物与防治重点实验室肿瘤个体化医学省部共建协同创新中心

目的介绍几种常见的轨迹分析方法,并对其使用效果和适用条件进行比较。方法在模拟实验中对不同轨迹分析方法在各种情境下的效果以及适用条件进行比较研究,并在实例分析中进行验证。结果增长混合模型(growth mixture modeling,GMM)在单... 详细信息

目的介绍几种常见的轨迹分析方法,并对其使用效果和适用条件进行比较。方法在模拟实验中对不同轨迹分析方法在各种情境下的效果以及适用条件进行比较研究,并在实例分析中进行验证。结果增长混合模型(growth mixture modeling,GMM)在单轨迹分析中表现最好,基于群体的轨迹模型(group-based trajectory modeling,GBTM)总体表现较好且可以拓展对多轨迹进行研究,聚类分析表现尚可且能分析多轨迹,但对随访数据质量要求较高。结论三种方法各有其优点,可根据分析数据的具体情况选择合适的方法。

关键词：轨迹分析基于群体的轨迹模型增长混合模型聚类分析

2016—2023年江苏省哨点医院68株耐碳青霉烯铜绿假单胞菌临床分离株耐药及基因特征分析

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疾病监测 2024年

作者：徐奥博杨阳周璐鲍倡俊谈忠鸣南京大学附属金陵医院外科国家卫生健康委员会肠道病原微生物重点实验室江苏省新发突发重大传染病病原微生物重点实验室江苏省疾病预防控制中心

目的了解江苏省临床分离的耐碳青霉烯铜绿假单胞菌的耐药、血清型及基因特征。方法收集2016—2023年江苏省各哨点医院临床分离的耐碳青霉烯铜绿假单胞菌，采用肉汤稀释法对分离株进行10类19种抗生素的敏感性测定，将分离株全基因组测... 详细信息

目的了解江苏省临床分离的耐碳青霉烯铜绿假单胞菌的耐药、血清型及基因特征。方法收集2016—2023年江苏省各哨点医院临床分离的耐碳青霉烯铜绿假单胞菌，采用肉汤稀释法对分离株进行10类19种抗生素的敏感性测定，将分离株全基因组测序并多位点序列分型，血清型预测，对耐药基因、转座子及可移动元件进行分析。结果本研究收集患者分离耐碳青霉烯铜绿假单胞菌菌株68株。药敏实验结果显示全部菌株对氯霉素、复方新诺明、头孢噻肟和头孢唑啉、四环素、氨苄西林和氨苄西林-舒巴坦以及阿莫西林-克拉维酸共计7类9种抗生素全部耐药，检出33种耐药表型，其中2株菌是对所有19种抗生素耐药的泛耐药菌株。所有分离株鉴定出43个序列型（ST）型，ST235数量最多，聚类图显示以ST241中心点向两个主要方向发散。共检出8个血清型，以O6、O11和O3血清型为主，占全部菌株的67.65%。共检出8类23种抗生素耐药基因，54.41%（37/68）的菌株存在整合和共轭元件，39.71%（27/68）的菌株存在整合和移动元件，未发现有菌株携带质粒。结论本研究从基因组水平阐述了江苏省耐碳青霉烯铜绿假单胞菌耐药性、高风险ST型和高耐药性/血清型的特征情况，为有效治疗及防控该菌引起的感染提供了科学依据。

关键词：铜绿假单胞菌碳青霉烯耐药耐药性全基因组测序血清型耐药基因多位点序列分型

污水中肺炎克雷伯氏菌噬菌体的分离及其生物学特征、基因组分析

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四川大学学报（自然科学版） 2024年第4期61卷 320-331页

作者：邵瑞瑞周青帅崔古贞廖健程玉梅官志忠齐晓岚洪伟贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室&贵州省医学分子生物学重点实验室贵阳550001 贵州医科大学基础医学院贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室贵阳550004 贵州医科大学口腔医学院/附属口腔医院贵阳550001 贵州医科大学附属医院综合ICU 贵阳550001 省部共建地方病及民族区域性疾病防控协同创新中心贵阳550001

为探究噬菌体作为治疗肺炎克雷伯菌感染的新型潜在疗法的可能性,本研究采用双层平板法将医院周边污水中3株肺炎克雷伯菌裂解性噬菌体进行分离纯化,透射电镜观察噬菌体形态结构,并进一步分析噬菌体裂解谱、最佳感染复数、生长曲线和酸碱... 详细信息

为探究噬菌体作为治疗肺炎克雷伯菌感染的新型潜在疗法的可能性,本研究采用双层平板法将医院周边污水中3株肺炎克雷伯菌裂解性噬菌体进行分离纯化,透射电镜观察噬菌体形态结构,并进一步分析噬菌体裂解谱、最佳感染复数、生长曲线和酸碱耐受性等生物学特征,同时通过测序技术获得噬菌体全基因组信息并注释分析.实验结果表明,KP-ZS3为肌尾科噬菌体,KP-ZS4为短尾科噬菌体,KP-ZS6为长尾科噬菌体,且KP-ZS4的感染潜伏期稍长,KP-ZS3耐酸碱能力较强,KP-ZS6的裂解能力为3株噬菌体中最强、裂解谱较宽.3株噬菌体的外壳蛋白组分大小均在33~55 kD之间.此外全基因组分析发现KP-ZS3、KP-ZS62株噬菌体的基因组大小均在100 kb以上,噬菌体KP-ZS4的基因组相对较小(40608 bp).共线性分析显示噬菌体KP-ZS3与phiEap-3、Kp15高度相似;KP-ZS6与0507KN21、vB_EcoM_KWBSE43-6高度相似.KP-ZS4与Tyrion、TL-2011b相似度相对较低,序列一致性为76.77%、76.89%.以上结果表明,这3株噬菌体具有独特的生物学特性和基因组特征,它们在肺炎克雷伯菌感染治疗方面展现出不同的潜力和优势,特别是KP-ZS6因其裂解能力强和广泛的裂解谱,以及KPZS3因其强耐酸碱性,可能成为未来抗菌治疗的备用资源,这些发现为开发新型抗菌策略和治疗肺炎克雷伯菌感染提供了新的信息基础.

关键词：肺炎克雷伯菌噬菌体生物学特征基因组分析耐药菌治疗

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大别班达病毒mRNA疫苗的构建及初步评价

南京医科大学学报（自然科学版） 2024年第8期44卷 1120-1125页

作者：周婷婷郁心怡纪雪雯王桂芹吴梓菡闻瑜婷朱进刘新建东部战区疾病预防控制中心江苏南京210002 南京医科大学第一附属医院感染病科江苏南京210029 南京中医药大学整合医学院江苏南京210023 中科南京生命健康高等研究院江苏南京211135 南京医科大学基础医学院病原生物学系国家疫苗研发创新平台&卫健委抗体技术重点实验室江苏南京211166

目的:基于mRNA疫苗策略构建大别班达病毒(Bandavirus davieense virus,DBV)疫苗,并免疫BALB/c小鼠,评价其免疫学特征。方法:优化并合成DBV糖蛋白Gn序列,克隆至pGEM-3Zf(+)载体,质粒通过BamHⅠ酶切线性化,进行体外转录,酶法加帽和添加A... 详细信息

目的:基于mRNA疫苗策略构建大别班达病毒(Bandavirus davieense virus,DBV)疫苗,并免疫BALB/c小鼠,评价其免疫学特征。方法:优化并合成DBV糖蛋白Gn序列,克隆至pGEM-3Zf(+)载体,质粒通过BamHⅠ酶切线性化,进行体外转录,酶法加帽和添加A尾制备mRNA,瞬时转染真核293FT细胞,免疫印迹验证蛋白的体外表达。通过脂质纳米颗粒递送mRNA,以低(2μg/只)、中(5μg/只)、高剂量(20μg/只)每2周肌肉注射1次免疫BALB/c小鼠,ELISA测定小鼠血清抗体效价,病毒中和实验评价小鼠血清阻断病毒感染细胞的能力。结果:制备的DBV mRNA疫苗能够进行体外转录和表达,低、中、高3个免疫剂量均能诱导小鼠产生高水平的特异性抗体,其中高剂量免疫组可诱导稳定抗体表达至10周以上;病毒中和实验显示,免疫血清能够与病毒结合,阻止病毒感染细胞。结论:获得了能够诱导小鼠产生特异性中和抗体的DBV mRNA疫苗,为DBV感染的预防奠定了研究基础。

关键词：大别班达病毒 mRNA疫苗中和抗体病毒感染

抗肿瘤肽Mt5对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响及机制

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贵州医科大学学报 2024年第8期49卷 1141-1147页

作者：曾晔石艳萍吴胜花张迎春王涛贵州医科大学基础医学院贵州安顺561000 贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室贵州安顺561000

目的探讨抗肿瘤肽Mt5通过磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路对人肝癌细胞增殖与凋亡的影响。方法采用pymol构建Mt5的三维可视化结构示意图,Prot Param分析Mt5的正电荷和疏水性,NPS分析Mt5的α-螺旋所占比例;运用实时无标... 详细信息

目的探讨抗肿瘤肽Mt5通过磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路对人肝癌细胞增殖与凋亡的影响。方法采用pymol构建Mt5的三维可视化结构示意图,Prot Param分析Mt5的正电荷和疏水性,NPS分析Mt5的α-螺旋所占比例;运用实时无标记细胞分析(RTCA)技术检测不同浓度Mt5(50 mg/L、100mg/L、200 mg/L、400 mg/L)作用后的HepG2细胞活力;通过实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)法检测不同浓度Mt5(25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L)作用后HepG2细胞中PI3K、AKT信使RNA(mRNA)表达;以Western blot法检测不同浓度Mt5(25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L)作用后凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(bax)和PI3K、AKT蛋白表达。结果生物学信息结果表明,Mt5的正电荷为+8,疏水性为0.588,α-螺旋度为84.62%;RTCA结果显示Mt5不同浓度处理组作用后,HepG2细胞指数随着Mt5浓度的增大和时间的延长逐渐降低至0以下;qPCR结果显示,Mt5组HepG2细胞中PI3K和AKT mRNA较阴性对照组表达降低(P<0.05),bax蛋白表达较阴性对照组升高(P<0.05),且呈浓度依赖性;Western blot结果显示,Mt5组HepG2细胞中Bcl-2、PI3K及AKT蛋白表达较阴性对照组降低(P<0.05),且呈浓度依赖性。结论Mt5可抑制人肝癌细胞增殖及诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。

关键词：细胞增殖细胞凋亡抗肿瘤肽Mt5 PI3K/AKT信号通路 HepG2细胞抗肿瘤活性

新型抗菌肽Mt-22S3对白念珠菌细胞的作用及机制

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贵州医科大学学报 2024年第3期49卷 375-380,396页

作者：李彩多曾晔石艳萍张迎春吴建伟陈峥宏王涛贵州医科大学基础医学院贵州贵阳550025 贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025

目的探讨家蝇抗真菌肽-1A(MAF-1A)突变体-22S3(Mt-22S3)对白念珠菌(***)细胞的作用及机制。方法取对数生长期的***菌悬液,分别与0、125、250及500 mg/L Mt-22S3作用12 h,采用荧光显微技术及荧光检测法观测Mt-22S3作用***后细胞内活性氧(... 详细信息

目的探讨家蝇抗真菌肽-1A(MAF-1A)突变体-22S3(Mt-22S3)对白念珠菌(***)细胞的作用及机制。方法取对数生长期的***菌悬液,分别与0、125、250及500 mg/L Mt-22S3作用12 h,采用荧光显微技术及荧光检测法观测Mt-22S3作用***后细胞内活性氧(ROS)的变化;以荧光检测法测定Mt-22S3作用***后细胞内线粒体膜电位水平的变化;通过Annexin V-FITC/PI双染法,观察Mt-22S3对***细胞凋亡的影响;以琼脂糖凝胶电泳阻滞实验分析Mt-22S3对***细胞DNA的影响。结果经Mt-22S3作用的***细胞内ROS增高,且随着Mt-22S3浓度升高,细胞内ROS上升(P实验结果显示,Mt-22S3与*** DNA孵育后产生明显的凝胶阻滞现象。结论Mt-22S3可进入***细胞内发挥抗菌作用,其机制与诱导细胞内ROS积累、去极化线粒体膜、诱导细胞凋亡和死亡、结合DNA等有关。

关键词：白念珠菌活性氧细胞凋亡抗菌肽线粒体膜电位 DNA凝胶阻滞

BRACO-19和TMPyP4在HBV-1.3mer质粒感染模型对HBV转录和复制的抑制作用

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中国病原生物学杂志 2024年第9期19卷 999-1003,1008页

作者：马海洋贺丽娜吕树娟余莉安徽医科大学基础医学院微生物学教研室安徽合肥230032 动物源性传染病安徽省重点实验室

目的探讨G-四链体小分子配体BRACO-19和TMPyP4对乙型肝炎病毒转录和复制的影响。方法利用含有HBV全基因组1.3倍复制子(HBV 1.3-mer)质粒转染HepG2细胞感染模型,BRACO-19和TMPyP4分别作用48 h,酶联免疫吸附试验检测上清表面抗原(HBsAg)和... 详细信息

目的探讨G-四链体小分子配体BRACO-19和TMPyP4对乙型肝炎病毒转录和复制的影响。方法利用含有HBV全基因组1.3倍复制子(HBV 1.3-mer)质粒转染HepG2细胞感染模型,BRACO-19和TMPyP4分别作用48 h,酶联免疫吸附试验检测上清表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)表达水平,实时荧光定量PCR检测细胞内HBV Total RNA、3.5kbRNA以及DNA表达水平,将HBV DNA用plasmid SafeTMATP-Dependent DNase 37℃作用3 h后,定量PCR检测病毒cccDNA的表达;QGRS Mapper软件分析HBV推定的四链体形成序列(putative quadruplex-forming sequences,PQS),并在HBV 1.3-mer质粒DNA上设计PQS区域上下游引物及非PQS区域对照引物,两种小分子配体分别作用HBV 1.3-mer质粒DNA,qPCR stop试验分别定量PQS和非PQS区域DNA扩增水平,1%琼脂糖凝胶电泳可视化验证。结果20μmol/L BRACO-19和TMPyP4作用HepG2转染模型显著抑制HBsAg和HBeAg的表达水平,HBV的Total RNA、3.5 kb RNA、DNA和cccDNA水平相较于对照组均显著下调。通过不同浓度BRACO-19和TMPyP4作用HBV质粒DNA,qPCR stop试验发现随着BRACO-19和TMPyP4药物浓度递增可以显著抑制DNA聚合酶在基因组中三个HBV PQS区域的扩增。结论小分子配体BRACO-19和TMPyP4均能抑制HBV转染模型中的转录和复制,HBV基因存在富含鸟嘌呤的四链体形成序列,BRACO-19和TMPyP4特异性阻滞DNA聚合酶在HBV的PQS区域复制延伸。

关键词：乙型肝炎病毒 BRACO-19 TMPyP4 PCR stop assay