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基于SIRT1和PI3K/Akt信号通路探讨黄芪甲苷对慢性难愈性创面大鼠模型修复愈合的影响及作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 101-108页

作者：崔梦迪高加巍朱吕群陈贵生陈奕粮南京中医药大学南京210023 南京中医药大学附属南京中医院南京210000 南京市第二医院南京210003

目的:探讨黄芪甲苷对慢性难愈性创面修复愈合的促进作用及其机制。方法:60只雄性SD大鼠背部构建全层皮肤缺损创面,除正常组外,其余大鼠构建难愈性创面模型,随机分为模型组、黄芪甲苷低、高剂量组、黄芪甲苷+LY294002[磷酸肌醇3-激酶(PI... 详细信息

目的:探讨黄芪甲苷对慢性难愈性创面修复愈合的促进作用及其机制。方法:60只雄性SD大鼠背部构建全层皮肤缺损创面,除正常组外,其余大鼠构建难愈性创面模型,随机分为模型组、黄芪甲苷低、高剂量组、黄芪甲苷+LY294002[磷酸肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂]组和黄芪甲苷+EX527[沉默调节蛋白1(SIRT1)抑制剂)]组。观察各组大鼠创面造模后第2、4、6、8天的伤口面积占比;免疫荧光检测创面组织Ⅰ型胶原α1(COL1A1)和α-肌动蛋白(α-SMA)表达;苏木素-伊红(HE)染色检测创面组织病理结构;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测创面炎症因子mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测创面SIRT1/核转录因子(NF)-κB和PI3K/蛋白激酶B(Akt)信号通路相关蛋白表达。结果:与模型组比较,黄芪甲苷低、高剂量组大鼠术后伤口面积占比均随时间逐渐降低,且黄芪甲苷高剂量组疗效更佳。与正常组比较,模型组创面组织COL1A1荧光强度降低而α-SMA表达升高;上皮组织破损严重,厚度增加,可见大量炎性细胞浸润;肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达升高;NF-κB p65、磷酸化(p)-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt蛋白表达升高,而SIRT1表达降低(P<0.05)。与模型组比较,黄芪甲苷治疗后COL1A1和α-SMA荧光强度增高;上皮细胞数量增多,厚度降低,炎性细胞减少,胶原数量增多;TNF-α、IL-1β、IL-6和iNOS的mRNA表达降低;NF-κB p65、p-PI3K/PI3K和pAkt/Akt蛋白表达降低,SIRT1升高,且高剂量组效果更佳(P<0.05)。与黄芪甲苷高剂量组比较,LY294002和EX527抑制PI3K/Akt和SIRT1通路可阻止黄芪甲苷对慢性难愈性创面的治疗效力。结论:黄芪甲苷外用对大鼠慢性难愈性创面愈合有明显促进作用,其机制可能与激活PI3K/Akt通路和SIRT1/NF-κB通路有关。

关键词：黄芪甲苷磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt) 沉默调节蛋白1(SIRT1) 慢性难愈性创面

中药调控糖尿病肾脏疾病肾间质纤维化相关信号通路研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 213-225页

作者：朱玲玲佘云余江毅严倩华南京中医药大学南京210023 南京中医药大学附属医院南京210029

糖尿病肾脏疾病(DKD)是糖尿病(DM)常见的一种微血管并发症,也是造成终末期肾病(ESRD)的主要病因。肾间质纤维化(RIF)是DKD进展到ESRD的主要病理基础,显著增加了DKD患者的死亡率,给患者和社会带来了沉重的负担,是临床上亟待解决的问题。... 详细信息

糖尿病肾脏疾病(DKD)是糖尿病(DM)常见的一种微血管并发症,也是造成终末期肾病(ESRD)的主要病因。肾间质纤维化(RIF)是DKD进展到ESRD的主要病理基础,显著增加了DKD患者的死亡率,给患者和社会带来了沉重的负担,是临床上亟待解决的问题。RIF的发病机制错综复杂,主要与细胞外基质(ECM)过度沉积、上皮细胞-间充质转化(EMT)、氧化应激、炎症反应、细胞自噬等相关。转化生长因子-β1/Smad(TGF-β1/Smad)、核转录因子-κB(NF-κB)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、分泌型糖蛋白/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、酪氨酸激酶/信号转导和转录激活因子(JAK/STAT)、神经源性位点缺口同源蛋白(Notch)、核因子E_(2)相关因子2(Nrf2)等多条信号通路介导了RIF的发生发展,是DKD治疗的新型靶点。由于其发病机制复杂,目前西医治疗以改善代谢的基础治疗为主,疗效欠佳,难以阻止DKD的病情进展,因此寻找新的治疗方法具有重要的临床意义。近年来,诸多研究证明中药可通过调控相关信号通路,从而减轻氧化应激、抑制炎症反应、调控细胞自噬等,达到治疗糖尿病肾脏疾病肾间质纤维化(DKD-RIF)的目的,具有多途径、多靶点、多环节、疗效显著的优势。但目前尚缺乏相关的总结性记载,基于此,笔者查阅了近年来国内外相关文献,综述了上述相关信号通路在DKD-RIF发生发展中的作用及中药调控相关信号通路治疗DKD-RIF的研究进展,以期为进一步的科学研究及临床实践提供新的思路与参考。

关键词：中药糖尿病肾脏疾病(DKD) 肾间质纤维化(RIF) 信号通路研究进展

翘芪组方治疗流行性感冒轻症患者36例有效性与安全性的随机对照试验

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中医杂志 2024年第7期65卷 710-715页

作者：孔德松赵峰张彦亮张愉张敬华杨烨朱国雪龚蕾蕾顾晓松虞鹤鸣南京中医药大学附属南京中医院江苏省南京市210022 南京中医药大学附属医院南京中医药大学南通大学

目的观察翘芪组方治疗流行性感冒(流感)轻症的有效性与安全性。方法采用随机对照研究设计,收集流感轻症患者74例,随机分为试验组和对照组。试验组口服翘芪组方,每次40 ml,每天2次;对照组口服连花清瘟胶囊,每次1.4 g,每天3次。两组均连... 详细信息

目的观察翘芪组方治疗流行性感冒(流感)轻症的有效性与安全性。方法采用随机对照研究设计,收集流感轻症患者74例,随机分为试验组和对照组。试验组口服翘芪组方,每次40 ml,每天2次;对照组口服连花清瘟胶囊,每次1.4 g,每天3次。两组均连续治疗3天,治疗结束后连续访视4天。比较两组患者治疗后退热时间(包括退热起效时间,完全退热时间,24 h、48 h及72 h退热率),于治疗前及治疗后第4、7天比较两组中医证候总积分,于治疗后第7天评价中医证候疗效,并观察安全性指标,记录不良反应发生情况。结果最终纳入患者65例,其中试验组36例,对照组29例。试验组退热起效时间为(15.49±23.47)h、完全退热时间为(21.37±30.06)h、24 h退热率为77.14%、48 h退热率为88.57%、72 h退热率为91.42%,对照组以上指标分别为(17.58±20.38)h、(24.30±21.87)h、61.29%、90.32%、96.77%,两组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后第7天两组中医证候总积分均较本组治疗前降低(P中医证候疗效痊愈率、显效率、有效率、总有效率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。对照组患者治疗后第4天淋巴细胞比值高于本组治疗前(P<0.05),两组治疗后丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素、肌酐水平均在正常范围内。两组出现的主要不良反应为头痛和头晕,均为轻度,未发生严重不良反应。结论翘芪组方治疗流感轻症疗效与连花清瘟胶囊相当,均可缩短退热时间,改善临床症状,且研究过程中未发生严重不良反应,安全性较好。

关键词：流行性感冒翘芪组方连花清瘟胶囊退热随机对照试验

当归多糖调节Caspase-1/Gasdermin D通路促进脑缺血-再灌注损伤大鼠脑微血管内皮细胞血管新生

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中药材 2024年 977-983页

作者：高加巍崔梦迪南京中医药大学南京中医药大学附属南京中医院

目的:考察当归多糖调节Caspase-1/Gasdermin D通路促进脑缺血-再灌注损伤大鼠脑微血管内皮细胞血管新生的作用。方法:将脑缺血-再灌注损伤大鼠随机分为模型组、依达拉奉(10 mg/kg)阳性对照组及当归多糖低(50 mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量... 详细信息

目的:考察当归多糖调节Caspase-1/Gasdermin D通路促进脑缺血-再灌注损伤大鼠脑微血管内皮细胞血管新生的作用。方法:将脑缺血-再灌注损伤大鼠随机分为模型组、依达拉奉(10 mg/kg)阳性对照组及当归多糖低(50 mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量组,另设假手术组,每组12只大鼠。灌胃给药,模型组和假手术组灌胃相应体积生理盐水,所有组别均连续给药14 d。记录各组大鼠给药前和末次给药后的生存状况、体质量、功能缺损评分,比较各组大鼠给药后的脑组织含水量、MVD,ELISA法检测大鼠血清IL-1β、IL-18水平及脑组织Caspase-1、Gasdermin D、VEGF、VEGFR2、IL-1β、IL-18水平,qPCR及Western Blot检测大鼠脑组织pro-Caspase-1、Caspase-1、Gasdermin D、VEGF、VEGR2、IL-1β、IL-18 m RNA及蛋白表达。结果:给药前,假手术组大鼠的精神、活动量和摄食量均正常,模型组及各给药组大鼠精神不振,活动量和摄食量减少,5组大鼠的体质量差异无统计学意义(P>0.05)。给药后,与假手术组比较,模型组大鼠功能缺损评分及血清IL-1β、IL-18和脑含水量显著升高,MVD显著降低,脑组织Caspase-1、Gasdermin D、IL-1β、IL-18水平显著升高,VEGF、VEGFR2水平显著降低,脑组织pro-Caspase-1、Caspase-1、Gasdermin D、IL-1β、IL-18、VEGF、VEGR2 m RNA及蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,当归多糖高剂量组和依达拉奉组大鼠功能缺损评分及血清IL-1β、IL-18和脑含水量显著降低,MVD显著升高,脑组织Caspase-1、Gasdermin D、IL-1β、IL-18水平显著降低,VEGF、VEGFR2水平显著升高,脑组织pro-Caspase-1、Caspase-1、Gasdermin D、IL-1β、IL-18 m RNA及蛋白表达显著降低,VEGF、VEGR2 m RNA及蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:当归多糖可促进脑缺血-再灌注损伤大鼠微血管内皮细胞血管新生,其机制可能与抑制细胞焦亡Caspase-1/Gasdermin D通路,上调VEGF、VEGFR2表达有关。

关键词：当归多糖胱天蛋白酶1/Gasdermin D通路再灌注损伤大鼠内皮细胞

半夏泻心汤对AOM/DSS致炎症相关性结直肠癌小鼠的保护作用

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中国现代应用药学 2024年第7期41卷 917-926页

作者：乐音子顾云慧秦媛媛苏联麟华晓东王雅慧李晓满王晓鹏颜帅南京中医药大学附属苏州市中医医院普外科江苏苏州215009 南京中医药大学附属苏州市中医医院药学部江苏苏州215009 南京中医药大学附属苏州市中医医院肛肠科江苏苏州215009 南京中医药大学药学院南京210023

目的探讨半夏泻心汤对结肠炎相关结直肠癌(colitis associated cancer,CAC)小鼠的影响及相关作用机制。方法将75只C57BL/6小鼠随机均分为正常组、模型组、美沙拉嗪组和半夏泻心汤低、高剂量组。除正常组外,其余各组小鼠均采用腹腔注射... 详细信息

目的探讨半夏泻心汤对结肠炎相关结直肠癌(colitis associated cancer,CAC)小鼠的影响及相关作用机制。方法将75只C57BL/6小鼠随机均分为正常组、模型组、美沙拉嗪组和半夏泻心汤低、高剂量组。除正常组外,其余各组小鼠均采用腹腔注射氧化偶氮甲烷联合口服葡聚糖硫酸钠法构建CAC模型,分别给予半夏泻心汤和美沙拉嗪进行干预。观察并记录用药后全部小鼠一般情况,监测体质量、疾病活动指数变化情况;利用HE染色观察结肠组织病理学改变情况;免疫组化检测PCNA、NF-κB P65和IκB-α蛋白表达水平;qRT-PCR检测结肠组织IL-17A、N-cadherin和Bcl-2 mRNA水平;免疫荧光检测巨噬细胞标记物表达情况;Western blotting分析各组结肠组织中NF-κB、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达。结果正常组无明显肿瘤发生,模型组小鼠体质量明显减轻,结肠瘤体数量增多,半夏泻心汤组结肠长度及肿瘤数量、炎性细胞浸润程度均较模型组明显改善。免疫组化结果显示,模型组小鼠结肠组织PCNA、NF-κB P65和IκB-α蛋白表达显著升高(P<0.01);免疫荧光结果显示,模型组小鼠结肠组织F4/80、CD80和CD206阳性巨噬细胞数目增多(P<0.05或P<0.01);qRT-PCR结果显示,模型组小鼠结肠组织中IL-17A、N-cadherin和Bcl-2 mRNA水平明显升高(P<0.01),而E-cadherin mRNA水平显著下降(P<0.01);Western blotting结果显示,模型组小鼠结肠组织NF-κB和Ncadherin蛋白表达水平均显著升高(P<0.01);E-cadherin蛋白水平明显下降(P<0.01)。与模型组比较,半夏泻心汤和美沙拉嗪组明显改善上述指标,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且以半夏泻心汤高剂量组变化更为显著。结论半夏泻心汤对CAC小鼠表现出良好的抗炎及抑瘤作用,抑制结肠组织巨噬细胞的活化并促进其向M2型极化;降低肿瘤相关蛋白PCNA和Bcl-2的表达,阻断EMT相关蛋白(E-cadherin和N-cadherin)进展,其机制可能与抑制NF-κB P65和IκB-α的活化调控NF-κB信号通路有关。

关键词：半夏泻心汤结直肠癌核转录因子kappa B 巨噬细胞上皮-间质转化

黄芪甲苷对高剂量S-氯胺酮诱导PC12细胞损伤的保护作用

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天然产物研究与开发 2024年第4期36卷 669-674,561页

作者：戴劲宋仕廉朱桂宁陈楠殷国平南京中医药大学附属南京医院南京210003

以高剂量S-氯胺酮(S-ketamine, SK)诱导PC12细胞构建体外神经损伤模型,探究黄芪甲苷(astragaloside IV,ASⅣ)对高剂量SK诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制。采用CCK-8法测定细胞活力,并以此确定SK的最佳造模浓度和ASⅣ的最佳治疗浓度... 详细信息

以高剂量S-氯胺酮(S-ketamine, SK)诱导PC12细胞构建体外神经损伤模型,探究黄芪甲苷(astragaloside IV,ASⅣ)对高剂量SK诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制。采用CCK-8法测定细胞活力,并以此确定SK的最佳造模浓度和ASⅣ的最佳治疗浓度;流式细胞术测定细胞凋亡率;DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)的含量;qPCR法检测目的基因的表达;Western blot技术检测目的蛋白的表达。结果显示,SK的最佳造模浓度为450μg/mL,ASⅣ的最佳治疗浓度为25μmol/L;与对照组相比,SK组细胞凋亡率、ROS含量、Caspase-9和Cytochrome C mRNA表达水平均显著升高(P<0.05),Bax、Pro-Caspase-9、Cleaved-Caspase-9和Cytochrome C蛋白表达量同样显著上升(P<0.05),而Bcl-2/Bax mRNA表达水平比值、Bcl-2蛋白表达量显著下降(P<0.05);ASⅣ治疗后,明显逆转了高剂量SK诱导引起的各项指标变化(P<0.05)。这说明黄芪甲苷可以减轻高剂量S-氯胺酮所致PC12细胞损伤,其机制可能与抑制线粒体凋亡途径有关。

关键词：黄芪甲苷 S-氯胺酮神经损伤线粒体凋亡途径

基于CTA/CTP评价协定方通脑饮改善急性脑梗死痰瘀阻络证患者脑血流动力学疗效

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中国实验方剂学杂志 2024年第12期30卷 105-111页

作者：季连红刘沛桉厉励李昀泽朱清唐晓刚蒋辉刘永康袁翠平李文磊朱元吴明华南京中医药大学附属医院/江苏省中医院南京210029

目的:基于头颈部计算机断层扫描(CT)血管成像(CTA)联合颅脑CT灌注成像(CTP)技术,探讨急性脑梗死患者服用中药通脑饮后脑血流灌注的变化。方法:选取江苏省中医院自2018年3月至2023年9月治疗的240例脑梗死痰瘀阻络证患者,随机分为对照组(9... 详细信息

目的:基于头颈部计算机断层扫描(CT)血管成像(CTA)联合颅脑CT灌注成像(CTP)技术,探讨急性脑梗死患者服用中药通脑饮后脑血流灌注的变化。方法:选取江苏省中医院自2018年3月至2023年9月治疗的240例脑梗死痰瘀阻络证患者,随机分为对照组(99例),通脑饮组(141例)。基于指南对照组采用抗聚、抗凝、降脂稳斑、脑保护及支持治疗等常规治疗方案;通脑饮组在对照组治疗基础上加用中药通脑饮200 mL,早晚温服。两组患者均于入院24 h内行CTA联合CTP检查,并于6个月时复查CTA和CTP。根据北美症状性颈动脉内膜切除试验(NASCET)法判断颅内动脉血管的狭窄程度,并对治疗前后病变区的相对脑血容量(rCBV)、相对脑血流量(rCBF)、平均通过时间(MTT)和达峰时间(TTP)进行比较,并比较两组患者出院6个月不良结局。结果:与本组治疗前比较,通脑饮组患者血管狭窄不同程度明显减轻,差异具有统计学意义(Z=105.369,P<0.01);对照组患者血管狭窄减轻不明显,差异无统计学意义。与对照组治疗后比较,通脑饮组患者血管狭窄好转率更高(χ^(2)=84.179,P<0.01),疗效更好(好转率86.5%)。与本组治疗前比较,通脑饮组患者rCBV与rCBF均显著升高(P<0.01),MTT、TTP有缩短趋势,但差异无统计学意义;对照组rCBV、rCBF、MTT、TTP差异无统计学意义。与对照组治疗后比较,通脑饮组患者rCBV、rCBF均显著升高,MTT、TTP均显著降低(P<0.01)。与本组治疗前比较,通脑饮组患者出院6个月后NIHSS评分显著降低(Z=15.097,P<0.01);对照组患者出院后6个月NIHSS评分变化较小,差异无统计学意义。与对照组治疗后比较,通脑饮组患者NIHSS评分降低更明显,患者预后更好,差异具有统计学意义(Z=5.96,P<0.05)。出院6个月后通脑饮组患者预后不良风险较对照组明显降低(P<0.05)。结论:协定方通脑饮有较好的改善急性脑梗死患者脑血流灌注的作用,可以作为缺血性脑卒中常规治疗的有效补充以提高临床疗效。

关键词：急性脑梗死通脑饮计算机断层扫描(CT)血管成像(CTA) CT灌注成像(CTP) 血流动力学

基于指纹图谱及网络药理学探究胃宁散抗胃溃疡药效关联物质及作用机制

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中国现代应用药学 2024年第7期41卷 895-905页

作者：周彤梁艺瑶谢颖苏雪蓉吴杨倩万毅许金国赵晓莉王超南京中医药大学药学院南京210023 南京中医药大学附属医院南京210029

目的根据指纹图谱及网络药理学探讨胃宁散(Weining San,WNS)抗胃溃疡(gastric ulcer,GU)的药效关联物质及作用机制。方法采用HPLC建立12批WNS指纹图谱,并进行方法学考察,结合对照品指认特征峰,筛选药效关联物质,进行网络药理学分析。... 详细信息

目的根据指纹图谱及网络药理学探讨胃宁散(Weining San,WNS)抗胃溃疡(gastric ulcer,GU)的药效关联物质及作用机制。方法采用HPLC建立12批WNS指纹图谱,并进行方法学考察,结合对照品指认特征峰,筛选药效关联物质,进行网络药理学分析。利用TCMIP、Swiss Target Prediction数据库检索成分靶点;利用OMIM、Gene Cards和Drugbank数据库检索GU疾病靶点,取成分与疾病的交集靶点,采用String数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用网络图,并进行拓扑学参数分析;采用Cytoscape 3.8.2软件构建“成分-疾病-靶点”网络图;采用Metascape网站对交集靶点进行GO和KEGG富集分析。随后采用灌胃无水乙醇的方式建立酒精性GU小鼠模型,对网络药理学预测的结果进行验证。结果 HPLC指纹图谱方法学考察的精密度、稳定性、重复性均良好。经对照品比对及综合分析,确定三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯、人参皂苷Rb1、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子酯甲为WNS中的药效关联物质,其可能通过调控AKT1、IL-6、STAT3、TNF、IL1B等核心靶点及PI3K-Akt、JAK-STAT等关键信号通路来发挥作用。小鼠胃溃疡指数和溃疡抑制率测定、HE染色观察结果显示,WNS对GU小鼠胃黏膜损伤有良好的改善作用。ELISA、WST-1及TBA测定结果表明,WNS干预后能降低模型小鼠TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平,升高SOD、PGE2水平,提示WNS抗GU作用与抑制炎症反应与氧化应激机制相关,进一步验证了网络药理学预测的结果。结论本研究结合指纹图谱、网络药理学及动物实验验证,对WNS抗GU药效关联物质及作用机制进行了探讨,为WNS的质量控制及临床研究提供参考。

关键词：胃宁散指纹图谱网络药理学胃溃疡

试论头针流派的共同性和头针方案统一的可能性

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中国针灸 2024年

作者：胡效萌孙畅李妍莫溪桐颜芃陈思璇范刚启南京中医药大学附属南京中医院脑病科

收集44个头针流派资料，分析各流派理论基础、针刺部位、针刺方法、适应病症等方面的共同性。整合并形成优化的统一头针方案，似已成为必然趋势。从头针流派理论统一、穴区穴线穴点关系、针刺针数等讨论头针方案统一的可能性，并探讨头... 详细信息

收集44个头针流派资料，分析各流派理论基础、针刺部位、针刺方法、适应病症等方面的共同性。整合并形成优化的统一头针方案，似已成为必然趋势。从头针流派理论统一、穴区穴线穴点关系、针刺针数等讨论头针方案统一的可能性，并探讨头针方案统一所面临的主要问题及对策，为头针方案的标准化和统一提供参考。

关键词：头针疗法流派穴穴线穴区针数颅脑解剖学头针共同性统一