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基于SIRT1和PI3K/Akt信号通路探讨黄芪甲苷对慢性难愈性创面大鼠模型修复愈合的影响及作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 101-108页

作者：崔梦迪高加巍朱吕群陈贵生陈奕粮南京中医药大学南京210023 南京中医药大学附属南京中医院南京210000 南京市第二医院南京210003

目的:探讨黄芪甲苷对慢性难愈性创面修复愈合的促进作用及其机制。方法:60只雄性SD大鼠背部构建全层皮肤缺损创面,除正常组外,其余大鼠构建难愈性创面模型,随机分为模型组、黄芪甲苷低、高剂量组、黄芪甲苷+LY294002[磷酸肌醇3-激酶(PI... 详细信息

目的:探讨黄芪甲苷对慢性难愈性创面修复愈合的促进作用及其机制。方法:60只雄性SD大鼠背部构建全层皮肤缺损创面,除正常组外,其余大鼠构建难愈性创面模型,随机分为模型组、黄芪甲苷低、高剂量组、黄芪甲苷+LY294002[磷酸肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂]组和黄芪甲苷+EX527[沉默调节蛋白1(SIRT1)抑制剂)]组。观察各组大鼠创面造模后第2、4、6、8天的伤口面积占比;免疫荧光检测创面组织Ⅰ型胶原α1(COL1A1)和α-肌动蛋白(α-SMA)表达;苏木素-伊红(HE)染色检测创面组织病理结构;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测创面炎症因子mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测创面SIRT1/核转录因子(NF)-κB和PI3K/蛋白激酶B(Akt)信号通路相关蛋白表达。结果:与模型组比较,黄芪甲苷低、高剂量组大鼠术后伤口面积占比均随时间逐渐降低,且黄芪甲苷高剂量组疗效更佳。与正常组比较,模型组创面组织COL1A1荧光强度降低而α-SMA表达升高;上皮组织破损严重,厚度增加,可见大量炎性细胞浸润;肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达升高;NF-κB p65、磷酸化(p)-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt蛋白表达升高,而SIRT1表达降低(P<0.05)。与模型组比较,黄芪甲苷治疗后COL1A1和α-SMA荧光强度增高;上皮细胞数量增多,厚度降低,炎性细胞减少,胶原数量增多;TNF-α、IL-1β、IL-6和iNOS的mRNA表达降低;NF-κB p65、p-PI3K/PI3K和pAkt/Akt蛋白表达降低,SIRT1升高,且高剂量组效果更佳(P<0.05)。与黄芪甲苷高剂量组比较,LY294002和EX527抑制PI3K/Akt和SIRT1通路可阻止黄芪甲苷对慢性难愈性创面的治疗效力。结论:黄芪甲苷外用对大鼠慢性难愈性创面愈合有明显促进作用,其机制可能与激活PI3K/Akt通路和SIRT1/NF-κB通路有关。

关键词：黄芪甲苷磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt) 沉默调节蛋白1(SIRT1) 慢性难愈性创面

翘芪组方治疗流行性感冒轻症患者36例有效性与安全性的随机对照试验

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中医杂志 2024年第7期65卷 710-715页

作者：孔德松赵峰张彦亮张愉张敬华杨烨朱国雪龚蕾蕾顾晓松虞鹤鸣南京中医药大学附属南京中医院江苏省南京市210022 南京中医药大学附属医院南京中医药大学南通大学

目的观察翘芪组方治疗流行性感冒(流感)轻症的有效性与安全性。方法采用随机对照研究设计,收集流感轻症患者74例,随机分为试验组和对照组。试验组口服翘芪组方,每次40 ml,每天2次;对照组口服连花清瘟胶囊,每次1.4 g,每天3次。两组均连... 详细信息

目的观察翘芪组方治疗流行性感冒(流感)轻症的有效性与安全性。方法采用随机对照研究设计,收集流感轻症患者74例,随机分为试验组和对照组。试验组口服翘芪组方,每次40 ml,每天2次;对照组口服连花清瘟胶囊,每次1.4 g,每天3次。两组均连续治疗3天,治疗结束后连续访视4天。比较两组患者治疗后退热时间(包括退热起效时间,完全退热时间,24 h、48 h及72 h退热率),于治疗前及治疗后第4、7天比较两组中医证候总积分,于治疗后第7天评价中医证候疗效,并观察安全性指标,记录不良反应发生情况。结果最终纳入患者65例,其中试验组36例,对照组29例。试验组退热起效时间为(15.49±23.47)h、完全退热时间为(21.37±30.06)h、24 h退热率为77.14%、48 h退热率为88.57%、72 h退热率为91.42%,对照组以上指标分别为(17.58±20.38)h、(24.30±21.87)h、61.29%、90.32%、96.77%,两组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后第7天两组中医证候总积分均较本组治疗前降低(P中医证候疗效痊愈率、显效率、有效率、总有效率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。对照组患者治疗后第4天淋巴细胞比值高于本组治疗前(P<0.05),两组治疗后丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素、肌酐水平均在正常范围内。两组出现的主要不良反应为头痛和头晕,均为轻度,未发生严重不良反应。结论翘芪组方治疗流感轻症疗效与连花清瘟胶囊相当,均可缩短退热时间,改善临床症状,且研究过程中未发生严重不良反应,安全性较好。

关键词：流行性感冒翘芪组方连花清瘟胶囊退热随机对照试验

非酒精性脂肪肝及肝纤维化的免疫浸润分析与中药靶点预测

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世界科学技术-中医药现代化 2024年第4期 965-977页

作者：李璐吉刘晓王一缪伟峰杨勤唐莉南京中医药大学附属南京中医院重庆市中医院

目的本研究通过探讨巨噬细胞标志物与NAFLD及肝纤维化的相关性，以期为进一步探求NAFLD肝纤维化的发病机制，探索有效中药成分，为中医药防治肝纤维化提供帮助和借鉴。方法基于生物信息学方法分析NAFLD基因芯片，筛选差异表达基因；通... 详细信息

目的本研究通过探讨巨噬细胞标志物与NAFLD及肝纤维化的相关性，以期为进一步探求NAFLD肝纤维化的发病机制，探索有效中药成分，为中医药防治肝纤维化提供帮助和借鉴。方法基于生物信息学方法分析NAFLD基因芯片，筛选差异表达基因；通过WGCNA共表达网络分析和构建LASSO模型，筛选核心表达基因；利用CIBERSORT进行免疫细胞浸润分析，探索巨噬细胞表型与差异表达基因、纤维化程度的相关性，并通过外部数据集鉴定NAFLD及肝纤维化中巨噬细胞的相关生物标记物，通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）验证核心基因在不同巨噬细胞亚型中的表达差异。通过医学本体信息检索平台Coremine medical数据库，筛选NAFLD的中药治疗靶点并进行归纳分析。结果本研究共筛选出15个与NAFLD及肝纤维化相关的核心基因。CIBERSORT算法分析结果表明，NAFLD的发生与多种免疫细胞相关，其中M1型巨噬细胞在NAFLD组中显著升高，差异显著（P<0.01）,M1型巨噬细胞与肝纤维化程度呈正相关，M2型巨噬细胞与肝纤维化程度呈负相关。核心基因与巨噬细胞的相关性分析结果显示，KDM4A、MED30、IKBKG、ENO1、HSPA8与总巨噬细胞数呈负相关，IL-6、FOS、EDN2、NR4A2表达与M1型巨噬细胞数呈负相关，而与M2型巨噬细胞数呈正相关。通过外部数据集验证及体外RT-PCR验证结果显示，在M2型巨噬细胞中FOS、NR4A2 mRNA的表达量高于M1型巨噬细胞（P<0.001），与M1型巨噬细胞呈负相关，而与M2型巨噬细胞呈正相关。其中基于核心靶点通过Coremine medical数据库，根据药物功效与归经筛选出丹参、牡丹皮、地黄、当归、泽泻、枳椇子、人参、山茱萸、山楂等相关中药，功效分析其主要集中在清热解毒、祛湿化痰以及活血化瘀等方面，其中筛选频数最高的药物为牡丹皮。结论肝脏巨噬细胞是治疗肝病的靶细胞，调控巨噬细胞M2极化有助于治疗NAFLD及相关肝纤维化，c-Fos、NR4A2可能是关键作用靶点，其中牡丹皮等中药具有肝保护作用，为进一步研究NAFLD及肝纤维化的发病机制和治疗方法提供了新的参考。

关键词：非酒精性脂肪肝肝纤维化巨噬细胞标志物免疫浸润中药靶点

超声测量胃窦横截面积指导脓毒症患者早期个体化肠内营养实施的应用价值分析

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中华急诊医学杂志 2024年第2期33卷 193-200页

作者：李探张潇月刘克琴曾浩唐振东邵龙刚南京中医药大学第二附属医院(江苏省第二中医院)急诊科南京210017 南京中医药大学南京210023

目的探索床旁超声测量胃窦横截面积(CSA)指导脓毒症患者的早期个体化肠内营养的价值。方法纳入2021年1月至2022年12月间南京中医药大学第二附属医院EICU和综合ICU收治的脓毒症患者各30例,EICU患者采用床旁超声测量胃窦CSA指导脓毒症患... 详细信息

目的探索床旁超声测量胃窦横截面积(CSA)指导脓毒症患者的早期个体化肠内营养的价值。方法纳入2021年1月至2022年12月间南京中医药大学第二附属医院EICU和综合ICU收治的脓毒症患者各30例,EICU患者采用床旁超声测量胃窦CSA指导脓毒症患者的早期肠内营养实施,综合ICU采用常规的营养治疗策略。统计分析CSA与脓毒症胃肠功能障碍患者发生喂养不耐受的相关性,绘制ROC曲线,获取最佳截断值;并分析与胃肠功能障碍的其他相关指标[胃肠功能障碍评分、SOFA评分、APACHEⅡ评分、腹内压(IAP)、血清前蛋白(PA)/白蛋白(Alb)]的相关性。对比两组患者不同策略的肠内营养实施后的炎症相关指标、营养状态指标、ICU住院天数等,分析不同策略的优劣性。结果两组患者的基线资料均衡可比;超声治疗组在第1天发现喂养不耐受的发生率(36.67%)显著高于常规治疗组(10.00%),经积极早期的个体化治疗,第3天发生率仅为10.00%,显著低于常规治疗组(40.00%);治疗至第5天,超声治疗组的相关功能评分(胃肠功能障碍评分、APACHEⅡ评分、SOFA评分、IAP)、营养状态指标(5 d热卡达标率、PA、Alb)及炎症相关指标(WBC、PCT、hs-CRP)较入院时均显著改善,且优于常规治疗组,另外超声治疗组患者的ICU住院天数及误吸发生率更低(P<0.05);CSA与胃肠功能障碍评分、APACHEⅡ评分、SOFA评分、IAP、PA、Alb均具有良好的相关性,相关系数分别为0.79、0.60、0.66、0.71、-0.67和-0.64,均P<0.05;CSA对喂养不耐受预测的ROC曲线显示AUC为0.828,95%CI为0.737~0.919,其预测喂养不耐受的最佳截断值为7.835 cm2,其敏感度和特异度分别为88.20%和71.80%。结论超声测量CSA能够早期、有效地发现脓毒症患者喂养不耐受,据此给予个体化的肠内营养实施策略,显著改善了患者的器官功能评分、营养状态及炎症指标,减少ICU的住院天数及误吸发生,与常规的评价指标有良好的相关性,且敏感度和特异度均较高,值得临床进一步推广。

关键词：脓毒症超声胃窦横截面积喂养不耐受胃肠道功能障碍个体化肠内营养实施

人工智能术前规划系统辅助人工全髋关节置换术后翻修手术的疗效研究

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中国修复重建外科杂志 2024年第4期38卷 455-460页

作者：朱家庆孙家豪刘金柱马博闻张驰宇张超夏天卫沈计荣南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029 常州市中医医院骨伤科江苏常州213004

目的探究人工智能术前规划系统(AIHIP系统)辅助髋关节翻修手术的早期疗效。方法回顾分析2019年6月—2023年3月收治且符合选择标准的22例(23髋)髋关节翻修患者临床资料。其中男12例,女10例;年龄44~90岁,平均69.7岁。初次翻修19髋,2次翻修... 详细信息

目的探究人工智能术前规划系统(AIHIP系统)辅助髋关节翻修手术的早期疗效。方法回顾分析2019年6月—2023年3月收治且符合选择标准的22例(23髋)髋关节翻修患者临床资料。其中男12例,女10例;年龄44~90岁,平均69.7岁。初次翻修19髋,2次翻修3髋,3次翻修1髋。翻修原因:假体松动12髋,髋臼杯松动4髋,骨溶解3髋,髋臼脱位2髋,术后感染1髋,假体磨损1髋。Paprosky髋臼骨缺损分期:ⅡA期6髋,ⅡB期9髋,ⅡC期4髋,ⅢA期3髋,ⅢB期1髋。记录患者更换假体型号、手术时间、住院时间、下地情况等,以及术后感染、骨折、假体松动等不良事件发生情况。术前、术后1周及6个月采用Harris评分评价患肢功能,比较术前及术后6个月髋关节活动度。结果患者手术时间85~510 min,平均241.8 min;住院时间7~35 d,平均15.2 d;脱离助行器时间2~108 d,平均42.2 d。22例患者均获随访,随访时间8~53个月,平均21.7个月。除1例患者术后出现大腿血肿、1髋发生髋关节脱位外,余患者均无假体松动、感染等不良事件发生。术后髋臼杯型号匹配程度为完全匹配22髋,不匹配1髋(+2号),匹配率95.65%;股骨柄型号匹配程度为完全匹配22例髋、一般匹配1髋(–1号),匹配率100%。术后1周及6个月Harris评分分别为(55.3±9.8)分和(89.6±7.2)分,较术前(33.0±8.6)分显著改善(P<0.05),术后6个月较1周时进一步改善(P<0.05);术后6个月根据Harris评分评价患者髋关节功能,获良21髋、中2髋,可满足日常生活需求。术后6个月髋关节活动度为(111.09±10.11)°,与术前(79.13±18.50)°比较差异有统计学意义(t=−7.269,P<0.001)。结论AIHIP系统辅助治疗THA术后翻修患者,可提升翻修手术的精准性,降低手术难度,患者术后恢复效果好,早期疗效满意。

关键词：人工智能术前规划人工全髋关节置换术翻修手术

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肌骨超声在针灸临床疗效评估中的应用进展

世界科学技术-中医药现代化 2024年 1-5页

作者：姜珊李静陈洁陶腊梅陆瑾谢志红南京中医药大学附属南京中医院

目前，针灸临床疗效评估方法具有较强的主观性，应用的客观影像学数据也存在耗时长、辐射大、性价比不高等不足。肌骨超声技术能很好地解决这些问题，在很多疾病诊断或治疗评判中逐渐成为首选，也被广泛应用于针刺的临床及实验研究。肌... 详细信息

目前，针灸临床疗效评估方法具有较强的主观性，应用的客观影像学数据也存在耗时长、辐射大、性价比不高等不足。肌骨超声技术能很好地解决这些问题，在很多疾病诊断或治疗评判中逐渐成为首选，也被广泛应用于针刺的临床及实验研究。肌骨超声应用于评估疗效具有实时、无辐射、成像快速、客观性等优势。本文就肌骨超声技术在针灸临床疗效评估的优势进行综述分析，为其进一步临床应用发展提供相关参考。

关键词：肌骨超声弹性成像针灸疗效评估

基于IFNγ-STAT1、IL-4-STAT6信号通路探究复方五凤草液治疗结核性溃疡的作用机制

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中药药理与临床 2024年

作者：黄子慧钱佳燕洪练青郭丹丹马朝群南京中医药大学南京中医药大学附属南京市中西医结合医院南京中医药大学附属医院

目的：观察复方五凤草液治疗结核性溃疡的临床疗效，并基于干扰素-γ（interferon-γ，INF-γ）/信号转导和转录激活因子1(signal transducer and activator of transcription 1，STAT1)、白细胞介素-4(interleukin-4，IL-4)/信号转导和转录激活因子6(signal transducer and activator of transcription 6，STAT6)信号通路和卡介苗（Bacillus Calmette Guerin，BCG）诱导巨噬细胞极化模型探讨其作用机制。方法：（1）临床试验：将135 例结核性溃疡患者分为观察组、中医对照组和西医对照组。在规范抗结核治疗基础上，观察组予复方五凤草液，中医对照组予康复新液，西医对照组予异烟肼液局部外用治疗，观察周期28 d。分别观察三组患者观察安全性指标、创面愈合总有效率、创面组织病理学形态及创面组织、血液中IFN-γ、IL-4、STAT1、STAT6的表达水平，填写中医评分量表(Traditional Chinese Medicine Syndrome Score Scale， TCMSSS）病例报告表(Case Report Form， CRF)。（2）细胞实验：建立BCG诱导THP-1巨噬细胞模型，分别予不同药物处理后分为BCG组、BCG+康复新液组、BCG+异烟肼液组、BCG+复方五凤草液组。镜下观察各组BCG菌落情况，收集细胞上清液并离心，蛋白质印迹（Western Blot）、实时荧光定量(Real Time Quantitative PCR，RT-qPCR）技术检测IFN-γ、IL-4、STAT1、STAT6的表达水平，流式细胞术检测药物对CD11b、CD86、CD163、CD206表达的影响。结果：（1）临床试验：治疗期间，3组患者安全性指标无明显差异；观察组总有效率（95.56%）高于中医对照组（82.22%）、西医对照组（75.56%）；治疗28 d后，与中、西医对照组比较，观察组创面组织病理学形态改善更为明显，观察组患者IFN-γ、STAT1的表达低于中、西医对照组，IL-4、STAT6的表达高于中、西医对照组；与中、西医对照组比较，观察组中医证候积分显著降低。（2）细胞实验：THP-1巨噬细胞在感染BCG后吞噬泡明显增多，自噬小体增多；各组药物干预后胞内结核分枝杆菌的存活率降低。Western blotting、RT-qPCR、流式实验结果显示与对照组相比，BCG组M1型巨噬细胞所占比例较多，另3组M2型巨噬细胞所占比例较多。其中，BCG+复方五凤草液组中M2巨噬细胞占比显著，高于其他3组。BCG+复方五凤草液组IFN-γ、STAT1表达降低，IL-4、STAT6表达增高，CD86表达明显下调，CD206的表达显著上调。结论：复方五凤草液治疗结核性溃疡临床疗效显著，其作用机制可能与抑制病原菌，干预IFN-γ/STAT1、IL-4/STAT6信号通路以介导M1/M2巨噬细胞极化平衡有关。

关键词：复方五凤草液结核性溃疡 IFN-γ/STAT1 IL-4/STAT6 BCG 巨噬细胞极化

柔肝健脾方对肝郁脾虚证溃疡性结肠炎小鼠铁死亡的影响

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中成药 2024年

作者：黄华孙薛亮季利江马俊杰魏巍郭天威南京中医药大学常熟附属医院肛肠科南京中医药大学附属苏州市中医医院肛肠科南京中医药大学中医学院南京中医药大学常熟附属医院脾胃病科南京中医药大学常熟附属医院病理科

目的探究柔肝健脾方对肝郁脾虚证溃疡性结肠炎（UC）小鼠的影响。方法采用慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节方法诱导C57BL/6J小鼠形成肝郁脾虚证，再予3% DSS诱导建立UC模型，将小鼠随机分为空白组、模型组、柔肝健脾方组（20g/kg）、美... 详细信息

目的探究柔肝健脾方对肝郁脾虚证溃疡性结肠炎（UC）小鼠的影响。方法采用慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节方法诱导C57BL/6J小鼠形成肝郁脾虚证，再予3% DSS诱导建立UC模型，将小鼠随机分为空白组、模型组、柔肝健脾方组（20g/kg）、美沙拉嗪组（200 mg/kg），每组6只，灌胃给予相应药物。观察小鼠体质量、粪便情况、疾病活动指数，HE染色观察小鼠结肠组织病理学比较，ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平，采用试剂盒检测小鼠结肠组织铁负荷、GSH、MDA水平，RT-qPCR和Westernblot法检测小鼠结肠组织GPX4、FTH1、ACSL4mRNA和蛋白表达。利用TNF-α诱导NCM460结肠细胞炎症，加入柔肝健脾方含药血清和铁死亡诱导剂RSL3处理细胞，CCK-8法检测细胞存活率，ELISA法检测细胞上清液IL-1β、IL-6水平，分析细胞中铁负荷、GSH、MDA水平，以及GPX4、FTH1、ACSL4mRNA和蛋白表达。结果与模型组比较，柔肝健脾方组小鼠体质量增加（P<0.01），结肠长度延长（P<0.01），疾病活动指数、组织病理学评分、血清IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA水平、铁水平、ACSL4mRNA和蛋白表达降低（P<0.01），GSH水平、GPX4、FTH1mRNA和蛋白表达升高（P<0.01）。在NCM460细胞中，柔肝健脾方可抑制TNF-α诱导的细胞上清IL-1β、IL-6水平及铁死亡水平（P<0.01）。结论柔肝健脾方可有效改善DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠结肠炎症以及TNF-α诱导的结肠细胞炎症，其作用机制与调控细胞铁死亡有关。

关键词：柔肝健脾方溃疡性结肠炎氧化应激铁死亡

基于正交试验结合AHP-熵权法优化新蒲饮颗粒提取工艺

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时珍国医国药 2024年第5期 1156-1159页

作者：李丽萍王晓丽毛春芹杜秋南京中医药大学附属南京中医院南京中医药大学药学院

目的应用正交设计试验设计，结合层次分析法（AHP）-熵权法优化新蒲饮的提取工艺。方法以小檗碱、菊苣酸、连翘苷、苷草苷及干浸膏为关键质量属性，以加水量、提取时间、提取次数为关键工艺参数，采用正交试验设计优化工艺参数。采用A... 详细信息

目的应用正交设计试验设计，结合层次分析法（AHP）-熵权法优化新蒲饮的提取工艺。方法以小檗碱、菊苣酸、连翘苷、苷草苷及干浸膏为关键质量属性，以加水量、提取时间、提取次数为关键工艺参数，采用正交试验设计优化工艺参数。采用AHP-熵权法确定各评价指标的综合权重系数，进行综合评分。结果正交试验设计采用AHP-熵权法建立的工艺评价函数模型：综合评分=Cij小檗碱×70%+Cij菊苣酸×21%+Cij连翘苷×5%+Cij苷草苷×2%+Cij干浸膏×2%,该模型稳定可靠，确定提取工艺为全方饮片加20倍量水，浸泡45min,煎煮2次（第一次为总加水量倍数的60%,第二次为总加水倍数的40%）,每次煎煮1.5h。验证试验结果表明，所测得的指标性成分的RSD值均小于3.0%,符合要求，且方法具有适用性。结论筛选的新蒲饮现代提取工艺参数具有可行性，可为新蒲饮后续的开发利用提供理论依据。

关键词：新蒲饮颗粒正交设计提取工艺信息熵权法关键质量参数