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槲皮素靶向CCR1、CXCR4促进人骨髓间充质干细胞的迁移

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中国组织工程研究 2024年第31期28卷 4945-4950页

作者：陈双席志鹏王楠房晓阳刘鑫康然谢林南京中医药大学附属中西医结合医院

背景：槲皮素在骨髓间充质干细胞增殖和分化中起重要作用，但关于其促进骨髓间充质干细胞迁移的机制研究较少。目的：通过体外实验研究槲皮素对人骨髓间充质干细胞迁移的影响，并探讨CCR1、CXCR4的调控作用。方法：选取人骨髓间充质干... 详细信息

背景：槲皮素在骨髓间充质干细胞增殖和分化中起重要作用，但关于其促进骨髓间充质干细胞迁移的机制研究较少。目的：通过体外实验研究槲皮素对人骨髓间充质干细胞迁移的影响，并探讨CCR1、CXCR4的调控作用。方法：选取人骨髓间充质干细胞作为实验对象。CCK-8法检测槲皮素对人骨髓间充质干细胞增殖活性的影响；细胞划痕实验和Transwell实验分别检测槲皮素处理后人骨髓间充质干细胞的体外侵袭和迁移能力；借助分子对接技术进一步展示槲皮素与CCR1、CXCR4之间的作用关系；Western blot和实时荧光定量PCR检测槲皮素处理后迁移相关趋化因子的表达。结果与结论：(1)5,10μmol/L槲皮素具有显著促进人骨髓间充质干细胞增殖的作用，且药物浓度在10μmol/L时，细胞增殖效率最高；(2)为更好地探索槲皮素影响人骨髓间充质干细胞迁移的量效关系，选取5,10μmol/L槲皮素进行后续实验，采用川芎嗪作为阳性对照药物，实验分为空白对照组、5μmol/L槲皮素组、10μmol/L槲皮素组和100μmol/L川芎嗪组；(3)槲皮素处理后人骨髓间充质干细胞的体外迁移和侵袭能力呈浓度依赖性提升，10μmol/L槲皮素组的迁移效果优于川芎嗪组；(4)分子对接结果提示槲皮素与CCR1、CXCR4之间存在强烈的相互作用；(5)槲皮素可以上调CCR1、CXCR4蛋白和mRNA的表达；(6)该研究在细胞水平上证实了槲皮素可以通过靶向CCR1、CXCR4促进人骨髓间充质干细胞的迁移。

关键词：骨髓间充质干细胞槲皮素迁移增殖分子对接

细针穿刺检测BRAF突变丰度与甲状腺乳头状癌临床病理特征的相关性

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重庆医科大学学报 2023年

作者：章双艳黄驰马丙娥钱涛武心萍徐书杭王建华南京中医药大学附属中西医结合医院内分泌科南京中医药大学附属中西医结合医院超声科南京中医药大学附属中西医结合医院甲乳外科

目的：探讨术前细针穿刺基因检测BRAFV600E突变丰度与甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)临床病理特征的关系。方法：回顾性统计2021年1月30日至2022年2月28日就诊于南京中医药大学附属中西医结合医院的301例患者临床资料，... 详细信息

目的：探讨术前细针穿刺基因检测BRAFV600E突变丰度与甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)临床病理特征的关系。方法：回顾性统计2021年1月30日至2022年2月28日就诊于南京中医药大学附属中西医结合医院的301例患者临床资料，术前细针穿刺基因检测示BRAFV600E突变(含突变丰度检测)，所有患者完成甲状腺癌根治术，术后病理证实为甲状腺乳头状癌，分析BRAFV600E基因突变丰度与临床病理特征的关系。结果：纳入301例患者，男91例，女210例，年龄42(33～51)岁，范围18～69岁。肿瘤直径>1 cm的患者BRAFV600E基因突变丰度高于肿瘤直径≤1 cm者[29.05(18.03～37.56) vs. 18.35(6.74～29.61),P1 cm(OR=2.257～11.927,P<0.001)与女性PTC患者颈部淋巴结转移有明显相关性(P<0.05)。结论：BRAFV600E突变丰度与PTC患者肿瘤直径、颈部淋巴结转移明显相关。BRAFV600E突变丰度≥25.68%的女性PTC患者颈部淋巴结转移率明显升高。

关键词：甲状腺乳头状癌 BRAF 基因突变丰度淋巴结转移

苓桂术甘汤促进星形胶质细胞内化降解β淀粉样蛋白机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第11期30卷 1-8页

作者：高敏陈晓婧田清蓉凌云周西彬周春祥南京中医药大学中医学院中西医结合学院南京210046

目的:通过观察苓桂术甘汤(LGZGT)含药血清对β淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))诱导大鼠原代星形胶质细胞(AS)阿尔茨海默病(AD)病理模型的影响,探讨LGZGT对Aβ的吞噬及降解作用。方法:以Aβ_(1-42)诱导AS建立AD模型,实验分为正常组、模型组、... 详细信息

目的:通过观察苓桂术甘汤(LGZGT)含药血清对β淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))诱导大鼠原代星形胶质细胞(AS)阿尔茨海默病(AD)病理模型的影响,探讨LGZGT对Aβ的吞噬及降解作用。方法:以Aβ_(1-42)诱导AS建立AD模型,实验分为正常组、模型组、LGZGT低、中、高剂量(LGZGT-L、LGZGT-M、LGZGT-H)含药血清组(1.2、2.4、4.8 g·kg^(-1))、盐酸多奈哌齐含药血清组(0.5 mg·kg^(-1)),模型组加入Aβ_(1-42),终浓度为10μmol·L-1,LGZGT-L、LGZGT-M、LGZGT-H含药血清组在模型组的基础上均加入10%的含药血清。通过细胞增殖活力检测(CCK-8)试剂盒检测各组细胞活力;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测各组细胞LDH活力;用倒置显微镜观察各组细胞形态;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Aβ相关降解酶胰岛素降解酶(IDE)、组织蛋白酶D(CTSD)的表达;采用免疫荧光法测定组织蛋白酶B(CTSB)的荧光强度;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组细胞Aβ_(1-42)含量。结果:与空白组比较,各组AS活力下降,且不同浓度的Aβ_(1-42)对AS的增殖具有抑制作用;给药后,与正常组比较,模型组的细胞存活率明显降低(P<0.05);与模型组比较,LGZGT-H、盐酸多奈哌齐含药血清组细胞存活率明显增加(P<0.05,P<0.01);与正常组比较,模型组的细胞的LDH活力明显升高(P<0.05),且细胞胞体肥大肿胀,突起增多且延长,细胞相互聚集成团,提示细胞损伤较为明显;与模型组比较,盐酸多奈哌齐、LGZGT-L、LGZGT-M、LGZGT-H含药血清组细胞LDH活力显著降低(P<0.01);给药后,LGZGT-M组、LGZGT-H、盐酸多奈哌齐含药血清组细胞胞体肿胀有所改善,细胞突起短,细胞聚集结团减少;与正常组比较,模型组IDE、CTSD的表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,LGZGT-M、LGZGT-H含药血清组能够明显上调IDE的表达(P<0.05);与模型组比较,LGZGT-L、LGZGT-M、LGZGT-H、盐酸多奈哌齐含药血清组均能明显上调CTSD的表达(P<0.01);与正常组比较,模型组的CTSB的平均荧光强度明显降低(P<0.05),与模型组比较,LGZGT-L、LGZGT-M、LGZGT-H、盐酸多奈哌齐含药血清组CTSB平均荧光强度增强(P<0.05,P<0.01);与正常组比较,模型组的细胞胞内Aβ_(1-42)含量升高(P<0.05);给药后,与模型组比较,LGZGT-L、LGZGT-M、LGZGT-H、盐酸多奈哌齐含药血清组细胞胞内Aβ_(1-42)含量显著降低(P<0.01),LGZGT含药血清以剂量依赖性的形式降低Aβ_(1-42)。结论:LGZGT对Aβ_(1-42)诱导的AS具有保护作用,还可促进Aβ的降解,其机制可能与减轻Aβ毒性,增强细胞活力,促进IDE、CTSD、CTSB的表达及恢复溶酶体的功能相关。

关键词：阿尔茨海默病(AD) 星形胶质细胞(AS) 苓桂术甘汤(LGZGT) β淀粉样蛋白(Aβ) 痰饮

基于网络药理学和实验验证分析黄芪-莪术-蚤休角药配伍抗结直肠癌的作用机制

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中国中药杂志 2022年第3期47卷 776-785页

作者：梁研孙若岚刘夫艳刘甜甜关汉卿唐德才南京中医药大学中医学院·中西医结合学院江苏南京210023

运用网络药理学和分子对接技术及动物实验探究黄芪-莪术-蚤休角药配伍治疗结直肠癌(colorectal cancer,CRC)的潜在机制,并以原位移植瘤裸鼠模型对核心靶点进行验证。在TCMSP等数据库检索黄芪-莪术-蚤休角药活性成分,通过PubChem、SwissT... 详细信息

运用网络药理学和分子对接技术及动物实验探究黄芪-莪术-蚤休角药配伍治疗结直肠癌(colorectal cancer,CRC)的潜在机制,并以原位移植瘤裸鼠模型对核心靶点进行验证。在TCMSP等数据库检索黄芪-莪术-蚤休角药活性成分,通过PubChem、SwissTargetPrediction、TTD、DrugBank数据库获得药物及疾病相关靶点并取交集靶点导入STRING数据库进行蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)分析,在DAVID数据库进行基因功能注释(Gene Ontology,GO)和京都基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析。运用AutoDock Vina对角药活性成分与核心靶点进行分子对接和结合能力预测。构建原位移植瘤裸鼠模型,验证黄芪-莪术-蚤休角药对裸鼠肿瘤生长、转移及肿瘤组织中核心靶点蛋白磷酸化的影响。网络药理学分析结果得到黄芪-莪术-蚤休角药中包括槲皮素(quercetin)、姜黄素(curcumin)、β-蜕皮甾酮(β-ecdysone)等9个核心成分;关键靶点涉及AKT1(protein kinase B)、MAPK3(mitogen-activated protein kinase 3)、MAPK1(mitogen-activated protein kinase 1)、EGFR(epidermal growth factor receptor)等,初步表明黄芪-莪术-蚤休角药可能通过PI3K-AKT、MAPK及其他信号通路来调节肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和血管生成等生物学过程,从而在CRC治疗中发挥作用。分子对接结果表明9个核心成分与靶蛋白AKT1、MAPK3均有强烈的结合能力。动物实验结果表明,黄芪-莪术-蚤休角药能明显降低结肠癌裸鼠模型原位瘤的体积和肝转移灶数并显著降低AKT1、MAPK3的磷酸化,其干预结肠癌的机制可能与激活PI3K-AKT、MAPK信号通路最为相关。该研究为黄芪-莪术-蚤休角药的临床应用于治疗CRC提供科学依据,也为角药的现代化研究提供思路。

关键词：黄芪-莪术-蚤休角药结直肠癌网络药理学分子对接

益气养阴解毒方对Lewis肺癌小鼠的免疫调节及抗肿瘤作用

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南京中医药大学学报 2024年

作者：刘莲芳卢子涵胡霞周勤峰秦垠梅宇波南京中医药大学附属张家港医院南京中医药大学中西医结合学院

目的探索益气养阴解毒方对Lewis肺癌小鼠的抗肿瘤作用及其对免疫调节的影响。方法腋下皮下注射Lewis肺癌细胞构建Lewis肺癌小鼠模型,分为模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,并计算肿瘤体积、抑瘤率和生存率。分别使用HE染色,TUNE... 详细信息

目的探索益气养阴解毒方对Lewis肺癌小鼠的抗肿瘤作用及其对免疫调节的影响。方法腋下皮下注射Lewis肺癌细胞构建Lewis肺癌小鼠模型,分为模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,并计算肿瘤体积、抑瘤率和生存率。分别使用HE染色,TUNEL试验和彗星实验检测肿瘤细胞凋亡和DNA损伤。ELISA法检测IFN-γ、IL-2、TNF-α的表达水平。免疫荧光、流式细胞术检测CD8+、CD4+/CD8+、PD-1+、IFN-γ+、CD28+细胞占比。Western Blot法检测PD-1、CD69、CD28的蛋白水平。结果益气养阴解毒方具有抗肿瘤,延长生存期的作用,还可促进肿瘤细胞凋亡并加剧肿瘤细胞DNA损伤。药物处理促进了IFN-γ、IL-2、TNF-α的表达,提高了CD8+、CD4+/CD8+、IFN-γ+、CD28+细胞占比,并抑制了PD-1+细胞占比和蛋白表达,CD69,CD28的蛋白水平显著上升。结论益气养阴解毒方可以抑制肿瘤发展,其对免疫功能的调节是其抗肿瘤作用的潜在作用机制。

关键词：益气养阴解毒方非小细胞肺癌免疫调节

蝎毒素BmK M2的分离鉴定及其电生理活性研究

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中国药科大学学报 2022年第4期53卷 498-506页

作者：桑明陈永根周谦曹鹏卢悟广南京中医药大学附属中西医结合医院南京210028 南京中医药大学药学院南京210023

从东亚钳蝎蝎毒中分离鉴定出新型的Na~+通道毒素,采用Sephadex-G-50分子筛、高效液相色谱、多肽指纹图谱及氨基酸测序等技术从野生东亚钳蝎毒液中分离鉴定了一种长链多肽毒素BmK M2,其相对分子质量为7 235.5,由64个氨基酸组成,包含4对... 详细信息

从东亚钳蝎蝎毒中分离鉴定出新型的Na~+通道毒素,采用Sephadex-G-50分子筛、高效液相色谱、多肽指纹图谱及氨基酸测序等技术从野生东亚钳蝎毒液中分离鉴定了一种长链多肽毒素BmK M2,其相对分子质量为7 235.5,由64个氨基酸组成,包含4对二硫键。序列比对显示,BmK M2的序列与已发现的Na~+通道毒素BmK M1、BmK M3、BmK M9等具有较高的序列和结构相似性,是一种潜在的新型Na~+通道调节剂。全细胞膜片钳实验结果显示,BmK M2可显著增强电压门控Na~+通道Nav1.7的激活,延迟Nav1.7的稳态失活及关闭状态失活,但对Nav1.8无活性。实验结果表明BmK M2可作为一种新型的Na~+通道探针,用于Nav1.7结构功能研究以及靶向药物的开发。

关键词：东亚钳蝎 BmK M2 Nav1.7 全细胞膜片钳电生理活性分离鉴定

细针穿刺检测BRAF^(V600E)突变丰度与甲状腺乳头状癌临床病理特征的相关性

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重庆医科大学学报 2023年第4期48卷 398-403页

作者：章双艳黄驰马丙娥钱涛武心萍徐书杭王建华南京中医药大学附属中西医结合医院甲乳外科南京210028 南京中医药大学附属中西医结合医院超声科南京210028 南京中医药大学附属中西医结合医院内分泌科南京210028

目的:探讨术前细针穿刺基因检测BRAF^(V600E)突变丰度与甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)临床病理特征的关系。方法:回顾性统计2021年1月30日至2022年2月28日就诊于南京中医药大学附属中西医结合医院的301例患者临床资料,... 详细信息

目的:探讨术前细针穿刺基因检测BRAF^(V600E)突变丰度与甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)临床病理特征的关系。方法:回顾性统计2021年1月30日至2022年2月28日就诊于南京中医药大学附属中西医结合医院的301例患者临床资料,术前细针穿刺基因检测示BRAF^(V600E)突变(含突变丰度检测),所有患者完成甲状腺癌根治术,术后病理证实为甲状腺乳头状癌,分析BRAF^(V600E)基因突变丰度与临床病理特征的关系。结果:纳入301例患者,男91例,女210例,年龄42(33~51)岁,范围18~69岁。肿瘤直径>1 cm的患者BRAF^(V600E)基因突变丰度高于肿瘤直径≤1 cm者[29.05(18.03~37.56)vs.18.35(6.74~29.61),P1 cm(OR=2.257~11.927,P<0.001)与女性PTC患者颈部淋巴结转移有明显相关性(P<0.05)。结论:BRAF^(V600E)突变丰度与PTC患者肿瘤直径、颈部淋巴结转移明显相关。BRAF^(V600E)突变丰度≥25.68%的女性PTC患者颈部淋巴结转移率明显升高。

关键词：甲状腺乳头状癌 BRAF^(V600E)基因突变丰度淋巴结转移

桑白皮及其相关方剂治疗呼吸系统疾病的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2022年第19期28卷 241-249页

作者：杨昱斌范欣生周丽萍陈叶青倪瑛郝梦阳劳子珊南京中医药大学中医学院中西医结合学院南京210023

桑白皮味甘、辛,性寒,归肺经,具泻肺平喘、利水消肿之功,主治肺热喘咳、尿少水肿、面目肌肤肿胀等证,是临床最常用的草药之一,用桑白皮配伍的方剂如桑白皮汤、清金化痰方和清肺化痰汤等被广泛使用于临床。桑白皮的主要活性成分是发挥其... 详细信息

桑白皮味甘、辛,性寒,归肺经,具泻肺平喘、利水消肿之功,主治肺热喘咳、尿少水肿、面目肌肤肿胀等证,是临床最常用的草药之一,用桑白皮配伍的方剂如桑白皮汤、清金化痰方和清肺化痰汤等被广泛使用于临床。桑白皮的主要活性成分是发挥其功效的物质基础,现代中药药效物质分析鉴定手段已较成熟,对桑白皮化学成分的研究已经非常深入系统,该文查阅了近些年来关于桑白皮化学成分、药理作用及其相关方剂治疗呼吸系统疾病的文献报道,结合桑白皮已分离鉴定出的主要药效成分及主要药理作用,对桑白皮及其相关方剂治疗呼吸系统疾病的作用和机制进行综述;该文通过总结并分析现临床常用桑白皮方剂的组方配伍思路和常用量,为桑白皮治疗呼吸系统疾病提供参考。该文为桑白皮及其相关方剂治疗呼吸系统疾病的深入研究提供思考,有利于桑白皮及其相关方剂在临床上发挥更广泛的治疗作用。

关键词：桑白皮方剂化学成分呼吸系统疾病

超声引导下微波消融治疗12例原发性甲状旁腺功能亢进症的疗效及安全性

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中华内科杂志 2021年第10期60卷 904-907页

作者：倪文婧褚晓秋陆晨雅陈国芳韩雪许洋武心萍王建华刘超徐书杭南京中医药大学附属中西医结合医院内分泌科 210028 南京中医药大学附属中西医结合医院超声科 210028 南京中医药大学附属中西医结合医院普外科 210028

为探讨微波消融(MWA)治疗原发性甲状旁腺功能亢进症(PHPT)的有效性和安全性,选择2019年5月至2021年2月在南京中医药大学附属中西医结合医院行MWA的PHPT患者12例,观察治疗前后及随访期的甲状旁腺激素(PTH)、血钙磷变化;比较术前及末次随... 详细信息

为探讨微波消融(MWA)治疗原发性甲状旁腺功能亢进症(PHPT)的有效性和安全性,选择2019年5月至2021年2月在南京中医药大学附属中西医结合医院行MWA的PHPT患者12例,观察治疗前后及随访期的甲状旁腺激素(PTH)、血钙磷变化;比较术前及末次随访病灶体积及体积缩小率。观察临床治愈率和技术成功率。末次随访时,PTH[66.60(42.21,80.03)ng/L比169.90(89.01,396.50)ng/L]和血钙[2.39(2.32,2.49)mmol/L比2.75(2.57,2.96)mmol/L]水平与术前相比均有显著下降(P值均<0.05)。6例PTH和血钙水平在正常范围内,4例仅血清PTH轻度高于正常参考范围上限。2例血清PTH和血钙均未恢复正常。临床治愈率50%。所有患者病灶体积较术前显著缩小(P<0.05),技术成功率92.3%。无患者出现严重并发症。超声引导下MWA治疗PHPT有效且安全。

关键词：甲状旁腺功能亢进症,原发性微波消融