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铁自噬与线粒体自噬在缺血性脑卒中中的研究进展

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海南医学院学报 2025年

作者：杜秋思刘丹红韦梦真廖君湖南中医药大学医学院

缺血性脑卒中（ischemic stroke，IS）是因血液供应障碍产生脑缺血缺氧性损伤，进而出现神经功能障碍的一组临床综合征。选择性自噬是指自噬体围绕特定底物与溶酶体融合进行特异性降解维持细胞稳态的过程。越来越多证据表明选择性自噬... 详细信息

缺血性脑卒中（ischemic stroke，IS）是因血液供应障碍产生脑缺血缺氧性损伤，进而出现神经功能障碍的一组临床综合征。选择性自噬是指自噬体围绕特定底物与溶酶体融合进行特异性降解维持细胞稳态的过程。越来越多证据表明选择性自噬参与调节缺血性脑卒中后能量消耗、氧化应激和炎症导致的神经元损伤，本文回顾在缺血性脑卒中发挥主要作用的选择性自噬类型：铁自噬、线粒体自噬的机制，以及药物干预线铁自噬和粒体自噬的缺血脑卒中治疗作用，为探索缺血性脑卒中后神经保护的中西医结合新方案提供理论依据。

关键词：缺血性脑卒中选择性自噬铁自噬线粒体自噬

黄芩汤调控肠道菌群治疗小鼠肠道急性移植物抗宿主病的机制

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中国组织工程研究 2025年第1期29卷 95-102页

作者：夏梦婷孙润洁付佳琪李素贞于漫亚崔兴山东中医药大学第一临床医学院山东中医药大学千佛山校区山东省济南市250014 山东中医药大学中医学院山东省济南市250014 山东中医药大学第二附属医院肿瘤中心山东省济南市250000

背景:肠道急性移植物抗宿主病是异基因造血干细胞移植后最凶险的并发症之一,具有较高的致死率,如何通过应用中药改善肠道炎症、调节自噬以治疗肠道急性移植物抗宿主病是当下值得研究的问题。目的:探讨黄芩汤调控肠道菌群治疗肠道急性移... 详细信息

背景:肠道急性移植物抗宿主病是异基因造血干细胞移植后最凶险的并发症之一,具有较高的致死率,如何通过应用中药改善肠道炎症、调节自噬以治疗肠道急性移植物抗宿主病是当下值得研究的问题。目的:探讨黄芩汤调控肠道菌群治疗肠道急性移植物抗宿主病的机制。方法:CB6F1小鼠经总剂量8 Gy的60Co X射线照射后通过尾静脉输入Balb/c H-2d小鼠的单个核细胞悬液(骨髓+脾)制备急性移植物抗宿主病模型,随机分为模型组及黄芩汤高、中、低剂量组。造模后分别给予不同剂量黄芩汤或等体积生理盐水连续灌胃14 d,进行临床急性移植物抗宿主病评分并记录生存时间,取小肠组织做苏木精-伊红染色行小肠黏膜病理分级评分。使用16S rDNA测序检测各组小鼠肠道菌群,行免疫荧光、免疫组化染色、PCR等检测自噬相关标志物的表达。结果与结论:(1)与模型组相比,黄芩汤中、高剂量组小鼠存活时间显著延长(P<0.01),临床急性移植物抗宿主病评分显著降低(P<0.01),小肠黏膜病理分级评分显著降低(P<0.01),小肠组织炎症因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6水平显著下降(P<0.01),小鼠小肠黏膜上皮结构完整性部分恢复;(2)肠道菌群研究发现,与模型组相比,黄芩汤中剂量组促炎菌株肠球菌显著减少(P<0.05),而有益菌如梭状芽孢杆菌及促自噬的红球菌显著增多(P<0.05);(3)与模型组相比,黄芩汤中剂量组的自噬标志物显著升高(P<0.05);透射电镜下,黄芩汤中剂量组自噬泡数量显著增多;(4)结果表明:黄芩汤显著降低条件性致病菌丰度和小肠组织炎症因子水平,并提高有益菌相对丰度,同时促进小肠黏膜自噬的表达,从而明显改善急性移植物抗宿主病小鼠肠道症状。

关键词：肠道急性移植物抗宿主病黄芩汤造血干细胞移植肠道菌群梭状芽孢杆菌肠球菌抗炎自噬

龟鹿二仙胶含药血清对膝骨关节炎小鼠软骨细胞模型自噬和凋亡的影响及作用机制研究

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中医正骨 2025年

作者：沈默金郑珍萍吴伟欣杨美鑫顾富城耿秋东王和鸣李楠福建中医药大学中医学院中医骨伤及运动康复教育部重点实验室

目的:探讨龟鹿二仙胶含药血清对白细胞介素-1β诱导的膝骨关节炎（knee osteoarthritis,KOA）小鼠软骨细胞模型自噬和凋亡的影响及作用机制。方法:将10只SD大鼠随机分为龟鹿二仙胶含药血清制备组和空白血清制备组,分别给予龟鹿二仙胶药... 详细信息

目的:探讨龟鹿二仙胶含药血清对白细胞介素-1β诱导的膝骨关节炎（knee osteoarthritis,KOA）小鼠软骨细胞模型自噬和凋亡的影响及作用机制。方法:将10只SD大鼠随机分为龟鹿二仙胶含药血清制备组和空白血清制备组,分别给予龟鹿二仙胶药液和生理盐水灌胃,连续灌胃1周后,采集腹主动脉血,制备龟鹿二仙胶含药血清和空白血清。取培养至第2代的C57BL/6小鼠膝关节软骨细胞,分为空白血清组、模型组、龟鹿二仙胶含药血清组。模型组、龟鹿二仙胶含药血清组加入终浓度为10 ng·mL-1的白细胞介素-1β,诱导培养24 h后,空白血清组、模型组加入10%空白血清,龟鹿二仙胶含药血清组加入10%龟鹿二仙胶含药血清,继续培养24 h。采用流式细胞分析仪检测各组软骨细胞凋亡率,采用电子显微镜观察各组软骨细胞自噬小体,分别采用实时定量PCR和蛋白质免疫印迹法检测AMP活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）、UNC-51样自噬激活激酶1 （UNC-51 like autophagy activating kinase 1,ULK1）、自噬相关蛋白5（autophagy related protein 5,ATG5）、微管相关蛋白1轻链3B（microtubule associated protein 1 light chain 3B,LC3B）、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）-13、趋化因子配体2（chemokine ligand 2,CCL2）的mRNA和蛋白表达水平。结果:（1）软骨细胞凋亡率检测结果。模型组软骨细胞凋亡率高于空白血清组（P=0.000）,龟鹿二仙胶含药血清组软骨细胞凋亡率低于模型组（P=0.000）。（2）软骨细胞自噬小体观察结果。空白血清组可见双层膜封闭的球状自噬小体,模型组自噬小体数量较空白血清组减少,龟鹿二仙胶含药血清组自噬小体数量较模型组增加。（3）软骨细胞自噬和凋亡相关基因mRNA和蛋白表达水平检测结果。模型组软骨细胞AMPK、ULK-1、ATG5、LC3B、Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均低于空白血清组（P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.002,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000）,mTOR、Bax、MMP-13、CCL2的mRNA和蛋白表达水平均高于空白血清组（P=0.002,P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.004,P=0.000,P=0.000,P=0.000）;龟鹿二仙胶含药血清组软骨细胞AMPK、ULK1、ATG5、LC3B、Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均高于模型组（P=0.000,P=0.003,P=0.001,P=0.001,P=0.001;P=0.020,P=0.002,P=0.000,P=0.008,P=0.004）,mTOR、Bax、MMP-13、CCL2的mRNA和蛋白表达水平均低于模型组（P=0.008,P=0.001,P=0.000,P=0.000;P=0.040,P=0.000,P=0.001,P=0.000）。结论:龟鹿二仙胶含药血清能够增强KOA软骨细胞自噬,抑制其凋亡与细胞外基质降解,且龟鹿二仙胶含药血清可能通过激活AMPK/mTOR/ULK1信号通路发挥作用。

关键词：骨关节炎,膝龟鹿二仙胶软骨细胞自吞噬细胞凋亡信号传导 TOR丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶小鼠

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益气活血类中药调控铁死亡机制研究进展

中国科学:生命科学 2025年

作者：刘耀东王春秋张月闵军霞王福俤南华大学衡阳医学院药学院南华大学衡阳医学院浙江大学医学院

铁死亡(ferroptosis)是一种铁依赖的细胞死亡方式,主要特征为铁过载、脂质过氧化物和活性氧蓄积.中医中“气血”是构成人体的重要组成部分,也是生命活动的动力和源泉.当“气血”失调时,会引发严重的疾病,所以调节“气血”是临床治疗疾... 详细信息

铁死亡(ferroptosis)是一种铁依赖的细胞死亡方式,主要特征为铁过载、脂质过氧化物和活性氧蓄积.中医中“气血”是构成人体的重要组成部分,也是生命活动的动力和源泉.当“气血”失调时,会引发严重的疾病,所以调节“气血”是临床治疗疾病的基本原则和核心思想.研究表明,益气活血类中药可以通过调节铁稳态和抑制铁死亡在防治重大疾病方面发挥着积极作用.本文综述了益气活血类中药调控铁死亡防治各类重大疾病的研究进展,梳理现有的益气活血类中药防治铁死亡引发重大疾病的相关药物,为中药防治铁死亡引发的重大疾病提供新的思路.

关键词：铁死亡铁稳态中药益气活血

黄芪补肾活血汤对芳香化酶抑制剂诱导骨质疏松模型小鼠破骨细胞活性的影响

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中国组织工程研究 2025年第14期29卷 2861-2867页

作者：浦冬青冯丹丹张梦棣刘炳蔚时光喜陈翰翰李静蔚山东中医药大学附属医院乳腺甲状腺外科山东省济南市250014 山东中医药大学药学院山东省济南市250355 山东中医药大学第一临床医学院山东省济南市250014 山东中医药大学中医学院山东省济南市250355

背景:芳香化酶抑制剂尽管显著提高了激素受体阳性乳腺癌患者的临床获益,但其相关的不良事件——骨质疏松严重影响了患者的生活质量,黄芪补肾活血汤能有效预防芳香化酶抑制剂所致骨质疏松的发生,但是其作用机制尚不清楚。目的:探究黄芪... 详细信息

背景:芳香化酶抑制剂尽管显著提高了激素受体阳性乳腺癌患者的临床获益,但其相关的不良事件——骨质疏松严重影响了患者的生活质量,黄芪补肾活血汤能有效预防芳香化酶抑制剂所致骨质疏松的发生,但是其作用机制尚不清楚。目的:探究黄芪补肾活血汤对芳香化酶抑制剂所致骨质疏松模型小鼠破骨细胞活性的影响及机制。方法:选取60只8周龄C57BL/6J雌性小鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪补肾活血汤高、中、低剂量组、阳性对照组各10只,除假手术组外,其余组小鼠均切除双侧卵巢联合皮下注射来曲唑构建绝经后芳香化酶抑制剂所致骨质疏松模型,黄芪补肾活血汤高、中、低剂量组分别给予19.24,9.62,4.81 g/(kg·d)黄芪补肾活血汤进行灌胃(1次/d),阳性对照组给予阿仑膦酸钠5 mg/kg灌胃(1次/周)。给药3个月后,Micro-CT检测胫骨骨密度和骨微结构,对股骨进行苏木精-伊红染色、抗酒石酸酸性磷酸酶染色及免疫组化检测核因子κB受体活化因子配体、骨保护素蛋白表达,ELISA检测血清中Ⅰ型胶原交联羧基端肽、抗酒石酸酸性磷酸酶5b水平。结果与结论:①与假手术组相比,模型组小鼠骨密度显著下降、骨小梁形态疏松断裂、血清中Ⅰ型胶原交联羧基端肽、抗酒石酸酸性磷酸酶5b水平显著上升,表明芳香化酶抑制剂所致骨质疏松模型构建成功;②与模型组相比,黄芪补肾活血汤高、中、低剂量组和阳性对照组小鼠骨密度、骨微结构显著改善,骨小梁形态增粗致密,血清中Ⅰ型胶原交联羧基端肽、抗酒石酸酸性磷酸酶5b水平显著下降,破骨细胞数量减少,核因子κB受体活化因子配体蛋白表达下降,骨保护素蛋白表达升高。结果表明,黄芪补肾活血汤可能调控核因子κB受体活化因子配体/核因子κB受体活化因子/骨保护素信号通路抑制破骨细胞活性,改善骨小梁形态和骨微结构,提高骨密度,进而预防芳香化酶抑制剂所致骨质疏松模型的发生发展。

关键词：黄芪补肾活血汤芳香化酶抑制剂骨质疏松症破骨细胞活性核因子κB受体活化因子配体核因子κB受体活化因子骨保护素信号通路

超声引导下针刀松解黄韧带对兔退变腰椎间盘整合素α5、β1表达的影响

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中国组织工程研究 2025年第2期29卷 331-338页

作者：陈灿赵宇胡斌涵杜梦凡刘俊宁牛素生张燕福建中医药大学中医学院福建省福州市350122 福建中医药大学中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福建省福州市350122

背景:针刀松解黄韧带可有效改善腰椎退行性患者的症状,超声引导可增加针刀松解的精准性,但针刀松解黄韧带后对退变椎间盘的具体影响及可能的机制尚待明确。目的:探讨超声引导下针刀松解黄韧带对兔腰椎间盘退变的作用。方法:取24只新西兰... 详细信息

背景:针刀松解黄韧带可有效改善腰椎退行性患者的症状,超声引导可增加针刀松解的精准性,但针刀松解黄韧带后对退变椎间盘的具体影响及可能的机制尚待明确。目的:探讨超声引导下针刀松解黄韧带对兔腰椎间盘退变的作用。方法:取24只新西兰兔,采用随机数字表法分为对照组(n=6)与造模组(n=18)。造模组采用横断L5/6、L6/7节段棘上、棘间韧带并保持站立姿势对腰椎施加轴向载荷的方式建立兔腰椎间盘退变模型,造模成功后再随机分为模型组、超声针刀组、假针刀组,每组6只,超声针刀组在超声引导下使用针刀松解L7/S1右侧黄韧带,假针刀组针刀入路同超声针刀组,但不松解黄韧带,1次/周,共4次。针刀干预后30 d,利用MRI观察L7/S1椎间盘髓核信号强度变化,苏木精-伊红染色观察L7/S1椎间盘形态变化,免疫组化染色检测L7/S1椎间盘髓核内Ⅰ,Ⅱ型胶原表达,RT-PCR、Western Blot检测L7/S1椎间盘中整合素α5、β1、p38、核因子κB的表达。结果与结论:①MRI成像显示,模型组兔椎间盘髓核呈灰-黑色,髓核灰度值明显低于对照组(P<0.01);超声针刀组兔椎间盘髓核亮度较模型组升高,髓核灰度值高于模型组(P<0.01);②苏木精-伊红染色显示,模型组髓核形状不规则,髓核细胞数量减少,细胞外基质被压缩,纤维环破裂,终板结构与边界不清,软骨细胞排列紊乱;与模型组相比,超声针刀组髓核细胞数量增多,纤维环破裂情况有改善,软骨终板细胞排列较为规则;③免疫组化染色显示,与对照组比较,模型组髓核内Ⅰ型胶原阳性表达增加(P<0.01),Ⅱ型胶原阳性表达减少(P<0.01);与模型组比较,超声针刀组髓核内Ⅰ型胶原阳性表达减少(P<0.01),Ⅱ型胶原阳性表达增加(P<0.01);④RT-PCR、Western Blot检测显示,与对照组比较,模型组兔椎间盘中整合素α5、整合素β1、p38、核因子κB的mRNA与蛋白表达均升高(P<0.01);与模型组比较,超声针刀组兔椎间盘中整合素α5、整合素β1、p38、核因子κB的mRNA与蛋白表达均降低(P<0.01);⑤结果表明,超声引导下针刀松解黄韧带可改善兔腰椎间盘退变程度,该作用与通过调控整合素α5、β1表达、抑制p38和核因子κB表达有关。

关键词：腰椎间盘退变针刀黄韧带超声引导整合素

经颅直流电刺激改善脑卒中患者下肢运动功能障碍的Meta分析

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中国组织工程研究 2025年

作者：王贺于少泓山东中医药大学康复医学院山东中医药大学医学院山东中医药大学第二附属医院

目的：评估经颅直流电刺激对脑卒中患者下肢运动功能障碍的康复疗效。方法：计算机检索PubMed、Web of Science、Embase、Cochrane Library、Scopus、中国知网、维普数据库和万方数据库，搜集已公开发表的有关经颅直流电刺激治疗脑卒中... 详细信息

目的：评估经颅直流电刺激对脑卒中患者下肢运动功能障碍的康复疗效。方法：计算机检索PubMed、Web of Science、Embase、Cochrane Library、Scopus、中国知网、维普数据库和万方数据库，搜集已公开发表的有关经颅直流电刺激治疗脑卒中患者下肢运动功能障碍的随机对照试验，检索时限均从各数据库建库至2024-09-22。采用RevMan 5.4软件进行传统Meta分析，采用Stata 14.0软件进行网状Meta分析，采用GRADE进行证据等级评价。结果：共纳入17项研究，涉及851例患者。传统Meta分析显示，经颅直流电刺激能够提高脑卒中患者的Fugl-Meyer下肢运动功能量表评分[MD=1.97,95%CI(0.78,3.16),P 30 min、干预周期> 3周的治疗方案对于脑卒中患者的下肢运动能力改善效果更佳。结论：当前证据表明，经颅直流电刺激对脑卒中患者下肢运动功能、步行能力以及平衡能力均有较好的治疗效果，其中下肢运动功能的改善效果受患者年龄和病程的影响，且与电流强度、每天治疗时间和治疗周期存在一定程度的剂量反应关系。

关键词：脑卒中平衡步行下肢运动功能障碍经颅直流电刺激 Meta分析

加味十宝汤对肾精亏虚型男性迟发性性腺功能减退症合并糖尿病患者血清性激素水平的影响

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中国实验方剂学杂志 2025年第1期 227-233页

作者：单意陈少康史振滏徐海锋路艺宁夏医科大学中医学院银川市中医医院

目的：观察加味十宝汤对肾精亏虚型男性迟发性性腺功能减退症合并糖尿病患者血清性激素水平的影响。方法：选取2022年10月至2023年10月就诊于银川市中医医院符合标准的肾精亏虚型男性迟发性性腺功能减退症合并糖尿病患者60例，随机分为... 详细信息

目的：观察加味十宝汤对肾精亏虚型男性迟发性性腺功能减退症合并糖尿病患者血清性激素水平的影响。方法：选取2022年10月至2023年10月就诊于银川市中医医院符合标准的肾精亏虚型男性迟发性性腺功能减退症合并糖尿病患者60例，随机分为观察组与对照组各30例。两组均维持降糖、调脂等原有治疗手段，观察组予加味十宝汤治疗，对照组予十一酸睾酮胶囊治疗，疗程12周。比较两组治疗前后中医证候评分、中老年男性雄激素部分缺乏综合征（PADAM）症状积分、糖代谢相关指标[空腹血糖（FPG）、餐后2 h血糖（2 h PG）、糖化血红蛋白（HbA1c）]、血清性激素指标[性激素结合球蛋白（SHBG）、游离睾酮（FT）、总睾酮（TT）、催乳素（PRL）、促黄体生成素（LH）、促卵泡生成素（FSH）、雌二醇（E2）]的变化，并进行安全性评价。结果：（1）临床疗效比较。治疗后与对照组比较，两组患者临床疗效相当，差异无统计学意义（。2）中医证候评分、PADAM症状积分比较。与本组治疗前比较，治疗后两组患者中医证候评分、PADAM症状积分均显著降低（P中医证候评分、PADAM症状积分降低更明显（P<0.05）。（3）糖代谢相关指标比较。与本组治疗前比较，治疗后两组患者FPG、2 h PG、HbA1c水平均显著降低（P<0.01）；治疗后组间比较，两组患者FPG、2 h PG、HbA1c水平差异无统计学意义。（4）血清性激素指标比较。与本组治疗前比较，治疗后两组患者血清FT、TT、PRL、LH、FSH水平均显著上升（P<0.01）,E2水平显著降低（P<0.01）；治疗后组间比较，两组之间FT、TT、PRL、LH、FSH、E2水平差异无统计学意义。治疗前后两组患者SHBG指标组内及组间比较差异均无统计学意义。临床观察过程中两组患者均未见明显不良反应。结论：加味十宝汤能明显改善肾精亏虚型男性迟发性性腺功能减退症合并糖尿病患者的临床症状，降低血糖，提高性激素水平，其机制可能是通过抑制脂肪细胞中芳香化酶的转化作用，促进促性腺激素释放激素的生成，调节下丘脑-垂体-性腺轴功能而实现的。

关键词：迟发性性腺功能减退症糖尿病加味十宝汤十一酸睾酮胶囊肾精亏虚型

灵芝多糖通过Akt/mTOR通路调控肝母细胞瘤细胞凋亡及自噬的机制研究

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中国中药杂志 2025年

作者：葛洋高航覃云鹏沈瑞吴华彰叶婷宋航安徽中医药大学中西医结合学院张家界学院医学院蚌埠医学院安徽省癌症转化医学重点实验室

通过探讨灵芝多糖（Ganoderma lucidum polysaccharide， GLP）对肝母细胞瘤HepG2、Huh6细胞模型及KM小鼠原位移植瘤模型的作用机制，以期为GLP的临床应用提供理论依据。采用CCK-8法检测细胞活力；BeyoClickTMEdU-488实验检测细胞增殖... 详细信息

通过探讨灵芝多糖（Ganoderma lucidum polysaccharide， GLP）对肝母细胞瘤HepG2、Huh6细胞模型及KM小鼠原位移植瘤模型的作用机制，以期为GLP的临床应用提供理论依据。采用CCK-8法检测细胞活力；BeyoClickTMEdU-488实验检测细胞增殖能力；Hochest 33258染色检测细胞凋亡情况；Mrfp-GFP-LC3双荧光染色检测细胞自噬情况；采用HepG2细胞建立原位移植瘤动物模型，分别用生理盐水及100、200、300 mg·kg-1GLP处理小鼠，分析取材后肿瘤数目和大小的变化；苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色观察肿瘤组织及主要脏器（心、肝、脾、肺、肾）组织病理情况；Western blot法检测细胞中肿瘤抑制蛋白53（tumor protein P53， P53）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（B-cell lymphoma-2， Bcl-2）、Bcl-2关联X蛋白（Bcl-2-associated X protein， Bax）、裂解半胱氨酸蛋白酶蛋白-3（cleaved-caspase-3）、苄氯素-1（Beclin-1）、自噬相关蛋白-5（autophagy related protein-5， Atg-5）、微管相关蛋白轻链-3Ⅰ（microtubule-associated protein-light chain-3Ⅰ， LC3Ⅰ）/LC3Ⅱ、自噬衔接蛋白62（autophagy adapter protein 62， P62）、蛋白激酶B（protein kinase B， Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin， mTOR）、磷酸化mTOR（p-mTOR）的蛋白表达。体外实验结果显示，与对照组相比，GLP处理后肿瘤细胞活力显著降低，细胞凋亡比例呈剂量依赖性增高，且自噬流被抑制。在体内实验中，与模型组相比，GLP处理后小鼠的肿瘤数目和大小显著下降；Western blot结果显示，与对照组或模型组相比，GLP处理后P53、Bax、cleaved-caspase-3、Beclin-1、Atg-5、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ水平显著升高，Bcl-2、P62、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR水平显著降低。这些结果表明GLP能够通过调控Akt/mTOR途径诱导肝母细胞瘤细胞凋亡与自噬。

关键词：灵芝多糖肝母细胞瘤凋亡自噬 Akt/mTOR信号通路