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乳酸干预破骨细胞条件培养基促进内皮细胞血管的生成

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中国组织工程研究 2025年第11期29卷 2210-2217页

作者：黄宏莉聂闻麦昱颖覃媛廖红兵广西医科大学口腔医学院/附属口腔医院口腔修复科广西壮族自治区南宁市530021 广西口腔颌面修复与重建研究重点实验室广西壮族自治区南宁市530021

背景:聚乳酸作为可降解的骨组织工程支架材料被广泛用于组织再生与修复研究,在促进组织愈合与新骨形成、血管生成中具有重要作用。目的:观察聚乳酸降解终产物乳酸对破骨细胞的作用,以及乳酸干预后破骨细胞条件培养基对血管内皮细胞增殖... 详细信息

背景:聚乳酸作为可降解的骨组织工程支架材料被广泛用于组织再生与修复研究,在促进组织愈合与新骨形成、血管生成中具有重要作用。目的:观察聚乳酸降解终产物乳酸对破骨细胞的作用,以及乳酸干预后破骨细胞条件培养基对血管内皮细胞增殖、迁移和小管形成功能的影响。方法:(1)取对数生长期的小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7,贴壁后分别加入含0,5,10,20 mmol/L乳酸的破骨诱导培养基(含核因子κB受体活化因子配体、体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基),培养5 d后分别进行抗酒石酸酸性磷酸酶与细胞骨架纤维状肌动蛋白染色,培养24h后采用RT-PCR检测抗酒石酸酸性磷酸酶5 m RNA表达。(2)取对数生长期的RAW264.7细胞,贴壁后分2组培养:对照组加入破骨诱导培养基,实验组加入含10 mmol/L乳酸的破骨诱导培养基,培养5 d后更换为无血清DMEM培养基继续培养24 h,离心取上清液,分别与等体积含体积分数10%胎牛血清DMEM培养基混合后作用条件培养基备用。取对数生长期的人脐静脉内皮细胞,分别与对照组、实验组条件培养基共培养,通过CCK-8、Transwell、划痕、成管实验观察细胞的增殖、迁移和成管能力,通过RT-PCR和Western Blot检测血管生成相关基因和蛋白的表达。结果与结论:(1)抗酒石酸酸性磷酸酶与肌动蛋白染色结果显示,5,10 mmol/L乳酸可促进RAW264.7细胞破骨向分化,其中以10 mmol/L乳酸的促进作用更显著;RT-PCR检测结果显示,5,10,20 mmol/L乳酸均可提高酒石酸酸性磷酸酶5 m RNA的表达,其中以10 mmol/L乳酸的提高作用最显著;(2)与对照组条件培养基相比,实验组条件培养基可促进人脐静脉内皮细胞的增殖、迁移与成管能力(P<0.05),提高血管内皮生长因子、血管生成素1的m RNA和蛋白表达(P<0.05);(3)结果表明,乳酸诱导分化的破骨细胞条件培养基可促进内皮细胞的血管生成,机制可能与提高血管内皮生长因子、血管生成素1表达相关。

关键词：破骨细胞条件培养基乳酸人脐静脉内皮细胞血管生成内皮细胞

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罗汉果苷V调控高糖状态巨噬细胞M1极化促进骨髓间充质干细胞的成骨分化

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 3968-3975页

作者：叶枝茂惠久莹钟晓霞麦昱颖李昊广西医科大学口腔医学院/附属口腔医院口腔修复科广西壮族自治区南宁市530021 广西口腔颌面修复与重建研究重点实验室广西壮族自治区南宁市530021

背景:糖尿病微环境会造成巨噬细胞过度M1极化,这种高糖炎症状态会抑制骨髓间充质干细胞的成骨分化,从而影响糖尿病骨缺损的愈合。研究表明罗汉果苷Ⅴ具有抗炎、抗氧化、降血糖的作用,但其能否调节高糖炎症状态下巨噬细胞M1极化及骨髓间... 详细信息

背景:糖尿病微环境会造成巨噬细胞过度M1极化,这种高糖炎症状态会抑制骨髓间充质干细胞的成骨分化,从而影响糖尿病骨缺损的愈合。研究表明罗汉果苷Ⅴ具有抗炎、抗氧化、降血糖的作用,但其能否调节高糖炎症状态下巨噬细胞M1极化及骨髓间充质干细胞的成骨分化尚不清楚。目的:探讨罗汉果苷Ⅴ在高糖炎症状态下调节巨噬细胞M1型极化对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法:构建糖尿病C57BL/6小鼠模型,从正常和糖尿病小鼠分离骨髓来源巨噬细胞,分别培养于低糖和高糖培养基。使用脂多糖和干扰素γ作为炎症刺激诱导骨髓来源巨噬细胞的M1型极化,同时以160,320,640μmol/L罗汉果苷Ⅴ干预,用流式细胞术检测F4/80^(+)CD86^(+)细胞比例,qRT-PCR检测诱导型一氧化氮合酶、白细胞介素1β、白细胞介素6的mRNA表达水平,ELISA检测骨髓来源巨噬细胞上清液中肿瘤坏死因子α水平。分离C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,分别使用低糖或高糖成骨诱导液诱导成骨分化,添加M1型巨噬细胞条件培养基作为炎症刺激,以及320μmol/L罗汉果苷Ⅴ干预,成骨诱导14 d后采用qRT-PCR检测碱性磷酸酶、Runt相关因子2、骨钙素、骨桥蛋白的mRNA表达水平,成骨诱导21 d后进行茜素红染色及定量分析。结果与结论:①流式细胞术结果显示320,640μmol/L罗汉果苷Ⅴ组的F4/80^(+)CD86^(+)细胞比例明显低于高糖炎症对照组(P<0.05);②qRT-PCR结果显示160,320,640μmol/L罗汉果苷Ⅴ组的诱导型一氧化氮合酶、白细胞介素6的mRNA相对表达量较高糖炎症对照组显著降低(P<0.05),320,640μmol/L罗汉果苷Ⅴ组白细胞介素1β的mRNA相对表达量较高糖炎症对照组显著降低(P<0.05);③ELISA结果显示160,320,640μmol/L罗汉果苷Ⅴ组的肿瘤坏死因子α分泌水平较高糖炎症对照组显著降低(P<0.05);④320μmol/L罗汉果苷Ⅴ干预后,高糖炎症状态下骨髓间充质干细胞的钙盐沉积增加(P<0.05),且碱性磷酸酶、Runt相关因子2和骨桥蛋白的mRNA相对表达量增加(P<0.05)。结果表明,罗汉果苷Ⅴ可通过抑制高糖炎症状态下骨髓来源巨噬细胞的M1型极化及炎症因子表达,促进骨髓间充质干细胞的成骨分化。

关键词：罗汉果苷Ⅴ 巨噬细胞 M1型极化骨髓间充质干细胞炎症反应成骨分化高糖

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美国国立综合癌症网络肿瘤学临床实践指南指导下的口腔癌规范化治疗

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华西口腔医学杂志 2024年

作者：邱思齐李玥晗刘法昱中国医科大学口腔医学院中国医科大学附属口腔医院口腔颌面外科辽宁省口腔疾病重点实验室中国医科大学附属口腔医院口腔颌面-头颈外科辽宁省口腔疾病重点实验室

口腔癌在全球范围内发病率较高，是影响口腔与全身的重要公共健康问题。不同专业学科对于口腔癌的治疗手段不一，并且医生个人经验具有一定的局限性，临床工作指南能够使不同专业的医生根据实际情况确定一个对于患者最适合的、一致化的... 详细信息

口腔癌在全球范围内发病率较高，是影响口腔与全身的重要公共健康问题。不同专业学科对于口腔癌的治疗手段不一，并且医生个人经验具有一定的局限性，临床工作指南能够使不同专业的医生根据实际情况确定一个对于患者最适合的、一致化的治疗方案。美国国立综合癌症网络（NCCN）制定的NCCN肿瘤学临床实践指南已经成为全球肿瘤临床实践中应用最广泛的指南。本文就2024年第3版的《NCCN头颈癌指南》，结合具体病例，探讨不同分期口腔癌规范化治疗方案的选择。

关键词：口腔癌临床实践指南治疗方案美国国立综合癌症网络

俯卧位单侧双通道内镜髓核摘除术后右眼失明医疗损害鉴定1例

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法医学杂志 2024年第1期40卷 95-97页

作者：贾鹏倪自翔代号易旭夫无锡市公安局刑事科学技术研究所江苏无锡214002 新疆医科大学基础医学院法医教研室新疆乌鲁木齐830054 四川大学华西基础医学与法医学院四川成都610041

1案例1.1简要案情段某,男,55岁,体质量95 kg,某年3月16日因“反复腰痛1年余,加重伴左下肢麻木疼痛功能障碍2月余”就诊于某医院。入院时双眼视力正常,诊断为L4~L5椎间盘突出症,经保守治疗无效,遂取俯卧位行单侧双通道内镜髓核摘除术,手... 详细信息

1案例1.1简要案情段某,男,55岁,体质量95 kg,某年3月16日因“反复腰痛1年余,加重伴左下肢麻木疼痛功能障碍2月余”就诊于某医院。入院时双眼视力正常,诊断为L4~L5椎间盘突出症,经保守治疗无效,遂取俯卧位行单侧双通道内镜髓核摘除术,手术时长6 h余,麻醉苏醒后即诉右眼视物不见,经治疗,目前右眼仍无光感。患方认为其系长时间俯卧位的手术姿势所致,而医方则认为其属难以避免的手术并发症,故双方诉诸医疗损害鉴定。

关键词：法医学髓核摘除术单侧双通道内镜技术术后失明俯卧位视网膜中央动脉阻塞医疗损害

局部注射不同剂量抗RANKL抗体对大鼠牙槽骨骨质疏松的影响

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口腔医学研究 2024年第8期40卷 687-692页

作者：周静张婧王璐马玲苏静洋张钊河北医科大学口腔医学院·口腔医院修复科河北省口腔医学重点实验室河北省口腔疾病临床医学研究中心河北石家庄050017

目的:探究局部注射抗核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)抗体对大鼠牙槽骨骨质疏松的影响及不同剂量间的比较研究。方法:采用SD大鼠30只(对照组9只,实验组21只),通过皮下注射地塞... 详细信息

目的:探究局部注射抗核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)抗体对大鼠牙槽骨骨质疏松的影响及不同剂量间的比较研究。方法:采用SD大鼠30只(对照组9只,实验组21只),通过皮下注射地塞米松建立大鼠牙槽骨骨质疏松模型,建模5周后进行模型验证,模型验证成功后,将实验组随机分为3组;实验组Ⅱ、Ⅲ于1、3、7 d在大鼠右上第一磨牙腭侧黏骨膜下注射兔抗大鼠RANKL抗体0.1μg/位点和1μg/位点,实验组Ⅰ注射等体积生理盐水。1周后处死取材,采用微计算机断层扫描技术(micro computed tomography,Micro-CT)测量右上第一磨牙区牙槽骨骨密度(bone mineral density,BMD)、骨体积分数(bone volume fraction,BV/TV);牙槽骨组织病理学染色观察组织形态学改变及破骨细胞数目变化;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测牙龈中RANKL/骨保护素(osteoprotegerin,OPG)比值变化。结果:成功建立大鼠牙槽骨骨质疏松模型。Micro-CT和组织病理学结果显示,注射RANKL抗体后,牙槽骨BMD、BV/TV增加,破骨细胞数目减少,成骨细胞活跃,骨髓腔减小,但高、低剂量抗体相比变化不显著;ELISA结果显示,注射高剂量抗体后牙龈中RANKL/OPG比值显著降低,注射低剂量抗体后RANKL/OPG比值虽降低,但变化不显著。结论:局部注射抗RANKL抗体可以改善大鼠牙槽骨骨质疏松,低剂量即可达到改善效果。

关键词：核因子κB受体活化因子配体抑制剂抗核因子κB受体活化因子配体抗体核因子κB受体活化因子配体骨保护素牙槽骨骨质疏松

基于16S rDNA高通量测序技术的重度低龄儿童龋患者口腔微生物及肠道菌群群落分析

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上海口腔医学 2024年第2期33卷 164-169页

作者：李杨赵梦珺卢红巧刘建国刘云坤吴家媛遵义医科大学附属口腔医院贵州遵义563000 贵州省普通高等学校口腔疾病研究特色重点实验室贵州遵义563000 无锡口腔医院江苏无锡214000 口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院四川成都610041

目的:应用16S rDNA高通量测序,分析高龋及无龋儿童口腔和肠道微生物群落构成特征。方法:从本团队前期流行病学调查的431名遵义市3~5岁儿童中,随机抽取高龋和无龋儿童各25名,采集其唾液及粪便样本。采用16S rDNA测序技术分析样本菌群结构... 详细信息

目的:应用16S rDNA高通量测序,分析高龋及无龋儿童口腔和肠道微生物群落构成特征。方法:从本团队前期流行病学调查的431名遵义市3~5岁儿童中,随机抽取高龋和无龋儿童各25名,采集其唾液及粪便样本。采用16S rDNA测序技术分析样本菌群结构,比较口腔和肠道微生物菌群的构成差异。采用SPSS 18.0软件包对结果进行统计学分析。结果:高龋组儿童肠道菌群多样性显著高于无龋组(P0.05)。在门水平上,高龋组和无龋组儿童的肠道及口腔菌群物种差异无显著性。在属水平上,无龋组肠道中的Blautia、[Eubacterium]hallii group、[Eubacterium]eligens group显著高于高龋组(P口腔和肠道微生物组成在属水平上存在显著差异性菌种。

关键词：高通量测序低龄儿童龋微生物群落肠道菌群失衡

脱落乳牙牙髓干细胞来源外泌体对大鼠TMJ OA软骨下骨稳态的影响

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实用口腔医学杂志 2024年第3期40卷 315-322页

作者：段宇辰何睿陈晓华何峰吴凡詹英苗辉于世宾逄键梁安徽医科大学第五临床学院空军特色医学中心口腔科北京100142 口颌系统重建与再生全国重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心陕西省口腔疾病国际联合研究中心空军军医大学第三附属医院口腔解剖生理学教研室

目的:探讨关节腔内注射脱落乳牙牙髓干细胞外泌体(SHED-EXO)对大鼠颞下颌关节骨关节炎(TMJ OA)软骨下骨稳态的影响。方法:36只雄性SD大鼠随机分为3组(n=12):对照组(CON组)、碘乙酸钠(MIA)诱导TMJ OA组(MIA组)和SHED-EXO治疗TMJ OA组(治... 详细信息

目的:探讨关节腔内注射脱落乳牙牙髓干细胞外泌体(SHED-EXO)对大鼠颞下颌关节骨关节炎(TMJ OA)软骨下骨稳态的影响。方法:36只雄性SD大鼠随机分为3组(n=12):对照组(CON组)、碘乙酸钠(MIA)诱导TMJ OA组(MIA组)和SHED-EXO治疗TMJ OA组(治疗组)。治疗2、6周后取材,Micro-CT、荧光双标、TRAP染色、免疫组化染色和免疫荧光染色检测成骨与破骨情况,qRT-PCR检测ADAMTs5,IL-1β,OCN,OPG/RANKL等相关因子表达变化。结果:MIA组骨量丧失明显,骨髓腔明显扩大,相较于CON组,BV/TV和***降低(P<0.001),BS/BV、***和Tb.N升高(P<0.01),且5 d内骨生成速率低于对照组(P<0.001);SHED-EXO组与MIA组相比,骨形态与骨量显著增加,BV/TV和***升高(P<0.01),BS/BV、***和Tb.N降低(P<0.05),骨生成速率增加(P<0.01)。2、6周后,MIA组较对照组与治疗组,下骨内破骨细胞数量均升高(P<0.01),而H型血管与OCN阳性面积减少(P<0.01)。结论:关节腔注射SHED-EXO可以通过促进成骨和抑制破骨调节TMJ OA大鼠髁突软骨下骨稳态。

关键词： SHED-EXO 骨稳态外泌体骨关节炎颞下颌关节

FBXW7通过抑制c-Myc/SOX2/SLC7A11促进头颈鳞癌细胞铁死亡

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口腔医学 2024年第6期44卷 426-432页

作者：陈以任赵振远郑阳玉张玮宋晓萌南京医科大学口腔疾病重点实验室江苏南京210029 南京医科大学附属口腔医院口腔颌面外科江苏南京210029 南京医科大学附属口腔医院病理科江苏南京210029

目的探究FBXW7对头颈鳞状细胞癌铁死亡的影响。方法体外培养头颈鳞癌细胞系HN4和HN6,构建FBXW7,SOX2过表达质粒,将质粒稳定转染细胞系培养,采用qRT-PCR和Western blot实验分别在转录水平和蛋白水平验证过表达转染效率。通过检测丙二醛(M... 详细信息

目的探究FBXW7对头颈鳞状细胞癌铁死亡的影响。方法体外培养头颈鳞癌细胞系HN4和HN6,构建FBXW7,SOX2过表达质粒,将质粒稳定转染细胞系培养,采用qRT-PCR和Western blot实验分别在转录水平和蛋白水平验证过表达转染效率。通过检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和活性氧(ROS)水平来验证过表达FBXW7后头颈鳞癌细胞的脂质过氧化水平。用铁死亡抑制剂Fer-1处理细胞后进一步检测细胞活力变化验证FBXW7对铁死亡的影响。通过Western blot检测转染过表达质粒后对细胞通路的影响。结果HN4和HN6细胞系在过表达FBXW7后表现出脂质过氧化水平增加,铁死亡抑制剂Fer-1能够有效逆转过表达FBXW7引起的细胞铁死亡。Western blot实验结果显示过表达FBXW7降低了c-Myc、SOX2和SLC7A11的表达。结论FBXW7通过降解c-Myc来调控SOX2-SLC7A11的表达,从而有效调控头颈鳞状细胞癌铁死亡。

关键词：头颈鳞状细胞癌 FBXW7 铁死亡 SOX2

金属有机骨架材料沸石咪唑酯骨架-8在抗菌方面的应用及研究进展

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化工新型材料 2024年第6期52卷 38-43,49页

作者：周家玮裴香王剑何子涵张鑫口腔疾病防治全国重点实验室国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院成都610041 全牙再生及口腔组织功能重建北京市重点实验室北京口腔医院首都医科大学口腔医学院北京100050

细菌是引起慢性传染病和感染的主要原因。用抗生素杀灭细菌、消除感染是当今普遍使用的有效医疗手段,但是抗生素的滥用和误用导致越来越多的细菌出现耐药性。此外,现有给药方式常导致大量药物难以到达作用位点,造成药效浪费。在应对抗... 详细信息

细菌是引起慢性传染病和感染的主要原因。用抗生素杀灭细菌、消除感染是当今普遍使用的有效医疗手段,但是抗生素的滥用和误用导致越来越多的细菌出现耐药性。此外,现有给药方式常导致大量药物难以到达作用位点,造成药效浪费。在应对抗菌困境的各类策略中,抗菌纳米材料已成为一种被广泛认可的新兴方法。沸石咪唑酯骨架-8(ZIF-8)是一种在连接节点可生长药物的金属-有机骨架材料,因具有生物相容性好、结构稳定、pH响应特性及其靶向给药且减少细菌耐药性产生的能力等特点,成为目前研究较为广泛的抗菌方式之一。同时,大量研究表明,ZIF-8有利于保持药物活性,具有潜在的临床抗菌应用可能。综述了ZIF-8的抗菌机理、在抗菌方面的应用及研究进展,并对该领域未来发展中面临的挑战和前景进行了总结与展望。

关键词：沸石咪唑酯骨架-8 纳米颗粒抗菌机理应用

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