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卵黄蛋白原2对地塞米松诱导肥胖的治疗作用

中国兽医杂志 2025年第01期 55-64页

作者：张慧玲姚志超孙雅琴李艺雷罗小毛王海东山西农业大学动物医学学院河南农业大学动物医学院

卵黄蛋白原2（VTG2）被证明可促进3T3-L1脂肪细胞棕色化进程，但其是否能通过促进体内脂肪组织棕色化以治疗肥胖的作用尚未见报道。本试验为探索VTG2对小鼠白色脂肪组织（WAT）棕色化的影响，设置腺相关病毒空载组（AAV9-NC1）和VTG2处... 详细信息

卵黄蛋白原2（VTG2）被证明可促进3T3-L1脂肪细胞棕色化进程，但其是否能通过促进体内脂肪组织棕色化以治疗肥胖的作用尚未见报道。本试验为探索VTG2对小鼠白色脂肪组织（WAT）棕色化的影响，设置腺相关病毒空载组（AAV9-NC1）和VTG2处理组（AAV9-VTG2），利用苏木精-伊红（H.E.）染色观察WAT脂肪细胞面积大小，免疫组织化学（IHC）染色法、实时荧光定量PCR（qPCR）和蛋白免疫印迹（WB）法检测WAT棕色化标志因子解偶联蛋白-1（UCP1）和过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活剂1-alpha（PGC1α）的表达；为进一步探究VTG2对地塞米松（DEX）诱导的肥胖小鼠中WAT棕色化的影响，设置腺相关病毒空载组（AAV9-NC2组）、DEX处理组（AAV9-NC+DEX组）和VTG2治疗组（AAV9-VTG2+DEX组），采用上述方法检测相同指标。结果显示，与AAV9-NC1组相比，AAV9-VTG2组小鼠腹股沟WAT脂肪细胞面积极显著减小（P<0.01）,UCP1和PGC1α的mRNA相对表达量均极显著升高（P<0.001或P<0.01），蛋白相对表达量均显著上调（P<0.01或P<0.05）；与AAV9-NC2组相比，AAV9-NC+DEX组小鼠腹股沟WAT脂肪细胞面积极显著增加（P<0.01）,UCP1和PGC1α的mRNA相对表达量均极显著降低（P<0.001或P<0.01），蛋白相对表达量均极其显著下调（P<0.001）；与AAV9-NC+DEX组相比，AAV9-VTG2+DEX组中小鼠腹股沟WAT脂肪细胞面积极其显著减小（P<0.001）,UCP1和PGC1α的mRNA相对表达量均极显著升高（P<0.001或P<0.01），蛋白相对表达量均显著上调（P<0.05）。综上表明，VTG2可促进WAT棕色化，对DEX诱导的肥胖具有抵抗作用，为治疗肥胖提供新的研究思路。

关键词：卵黄蛋白原2(VTG2) 腹股沟白色脂肪组织(WAT) 地塞米松棕色化

奶牛乳房炎5种致病菌多重PCR检测方法的建立与应用

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动物医学进展 2025年第1期46卷 48-55页

作者：王雪容张宇张海森杨王浩靳亚平陈华涛西北农林科技大学动物医学院/农业农村部动物生物技术重点实验室陕西杨凌712100

为建立一种能快速检测奶牛乳房炎主要病原菌(大肠埃希氏菌、无乳链球菌、肺炎克雷伯氏菌、金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌)的多重PCR检测方法,根据大肠埃希氏菌phoA基因、无乳链球菌ef-tu基因、肺炎克雷伯氏菌Khe基因、金黄色葡萄球菌Nu... 详细信息

为建立一种能快速检测奶牛乳房炎主要病原菌(大肠埃希氏菌、无乳链球菌、肺炎克雷伯氏菌、金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌)的多重PCR检测方法,根据大肠埃希氏菌phoA基因、无乳链球菌ef-tu基因、肺炎克雷伯氏菌Khe基因、金黄色葡萄球菌Nuc基因和肠炎沙门氏菌invA基因设计特异性引物,优化PCR反应体系与反应程序并进行特异性试验,同时分别构建含病原菌基因的pMD-19T重组质粒进行灵敏性试验。结果显示,多重PCR反应的最适引物工作浓度为0.8μmol/L,最适退火温度为59.6℃,最佳延伸时间为40 s,最合适的循环数为30次;优化后的多重PCR反应体系可扩增出5种目标病原菌的特异性条带;5种病原菌PCR检测灵敏度可达到5 copies/μL。进一步利用该多重PCR反应体系对采集的108份乳房炎乳样进行检测,检测结果显示,108份样本的阳性检出率为77.8%,大肠埃希氏菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌和肠炎沙门氏菌的检出率分别为23.1%、8.3%、34.3%、8.3%、5.6%。结果表明,建立了一种具有良好特异性和灵敏性的多重PCR检测方法,在临床生产实践中可用于快速鉴定奶牛乳房炎的致病菌,为奶牛乳房炎的诊断、防控与流行病学调查提供了方法基础。

关键词：奶牛乳房炎病原菌多重PCR

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牛结核病大罐奶抗体检测方法的评估

中国兽医杂志 2025年第01期 75-79页

作者：陈颖钰张琼文王杰陈洁郭爱珍华中农业大学农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室华中农业大学动物科技学院动物医学院华中农业大学湖北省兽医流行病学国际科技合作基地华中农业大学国家动物结核病专业实验室(武汉) 武汉市畜牧兽医科学研究所

为了评估大罐奶抗体检测是否可用于牛结核病的监测和预警，本试验利用酶联免疫吸附试验（ELISA）抗体检测法，对采自湖北省3家规模化奶牛场的85头奶牛的奶样与其对应的血样进行牛结核病抗体相关性分析；并通过检测27家奶牛场的大罐奶和2... 详细信息

为了评估大罐奶抗体检测是否可用于牛结核病的监测和预警，本试验利用酶联免疫吸附试验（ELISA）抗体检测法，对采自湖北省3家规模化奶牛场的85头奶牛的奶样与其对应的血样进行牛结核病抗体相关性分析；并通过检测27家奶牛场的大罐奶和2 998份个体奶样，分析大罐奶抗体水平与牛结核病流行率之间的相关性，建立基于大罐奶抗体检测的牛结核病的流行率预测模型；为确定不同效价阳性奶样在大罐奶中的检测能力，通过对不用阳性奶样进行稀释后混样检测，分析阳性奶样的效价和具有相近大罐奶S/P值的牛群中动物个体的抗体水平经验分布函数的差异性。结果显示，奶样和血样的牛结核病抗体检测结果之间具有高度一致性（Kappa=0.862）和相关性（Pearson相关系数r=0.976,P<0.01）。大罐奶抗体水平检测结果与牛结核病流行率之间具有中度相关性（Pearson相关系数r=0.681,P<0.01），流行率预测模型y=e4.701 0+1.878 4ln（x）-0.01（R2=0.893 3）的预测能力为89.33%。分别稀释不同效价的阳性奶样，牛结核弱阳性奶样2倍稀释后阳性检出率为16.67%，中阳性奶样16倍稀释后阳性检出率为50.00%，高阳性奶样16倍稀释后阳性检出率为100%。结果表明，奶样可用于牛结核病的抗体检测，且大罐奶抗体水平与牛结核病流行率之间具有相关性，并可以通过模型预测牛结核病的流行率。大罐奶抗体检测可作为一项经济快捷的检测手段用于牛结核病的监测和预警，对于有着较高流行率或存在有强阳性个体的牛场，该检测方法敏感性更高，更为适用。

关键词：牛结核病大罐奶效价预测模型

用现代生命科学治理健康——“治未病”理念新内涵初探

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中国科学:生命科学 2025年第1期 177-184页

作者：张启发黄恺石秀娟金红林侯东彬董志强陈振夏龚静白涛许智勇金安江华中农业大学生物医学与健康学院湖北洪山实验室华中科技大学同济医学院附属协和医院华中农业大学医院

健康长寿是人类从古至今的不懈追求.当今社会慢性病高发,亚健康人群日益增长.现代生命科学的理论创新和技术突破为破解这一全球性健康难题提供了新的可能.中国传统智慧倡导“上医治未病”,本文提出用现代生命科学治理健康,探索为“治未... 详细信息

健康长寿是人类从古至今的不懈追求.当今社会慢性病高发,亚健康人群日益增长.现代生命科学的理论创新和技术突破为破解这一全球性健康难题提供了新的可能.中国传统智慧倡导“上医治未病”,本文提出用现代生命科学治理健康,探索为“治未病”理念赋予新的时代内涵.其基本策略为:以现代生命科学的知识和认知,对“未病状态”持之以恒地动态治理,保持“未病状态”,实现永久健康;从“优化食谱结构、关注健康指标、调控自身基因”三个维度构建健康治理体系,贯之终身,达到健康长寿、无疾而终的境界.近年,我们在华中农业大学启动了“治未病行动计划”,试点先行,以积累经验,渐次完善,冀望逐步推广,惠及百姓,为民族昌盛和国家强盛作贡献.

关键词：现代生命科学治未病理念优化食谱结构关注健康指标调控自身基因

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云南省淡水螺广州管圆线虫感染情况调查分析

动物医学进展 2025年第1期46卷 123-128页

作者：董路段博芳杨建发杨红梅李坤马洲董星和李永华邹丰才云南省动物疫病预防控制中心云南昆明650201 云南农业大学动物医学院云南昆明650201 景洪市勐龙镇农业农村发展服务中心云南景洪666112 保山市动物卫生监督所云南保山678000 武定县动物疫病预防控制中心云南武定651600

为了查明云南省淡水螺广州管圆线虫感染情况和分布特点,从野外和农贸市场采集5种螺共4502份,取其肌肉用组织压片法镜检广州管圆线虫幼虫,再提取组织DNA,采用PCR扩增广州管圆线虫ITS基因。镜检发现,在福寿螺中发现广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫... 详细信息

为了查明云南省淡水螺广州管圆线虫感染情况和分布特点,从野外和农贸市场采集5种螺共4502份,取其肌肉用组织压片法镜检广州管圆线虫幼虫,再提取组织DNA,采用PCR扩增广州管圆线虫ITS基因。镜检发现,在福寿螺中发现广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫;PCR扩增显示:5份样品为广州管圆线虫阳性,总阳性率为0.111%(5/4502);不同地区间,昆明市阳性率最高(0.231%,4/1734),德宏州(0.221%,1/453)次之;不同淡水螺种类中,福寿螺阳性率为0.192%(4/2081),环棱螺阳性率为0.160%(1/624),其余3种螺未检出;不同采样环境下,农贸市场阳性率为0.192%(4/2083),野外环境阳性率为0.041%(1/2419)。不同螺种类和采样环境感染率有统计学意义(P<0.05)。研究结果获悉了云南省部分淡水螺广州管圆线虫的感染情况,为云南省广州管圆线虫病的防控提供了重要基础数据。

关键词：淡水螺广州管圆线虫 ITS基因感染

哺乳仔猪中伪狂犬病病毒鄂A株对细胞凋亡的诱导或抑制

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生物化学与生物物理学报 2003年第4期35卷 325-330页

作者：李祥敏钱平石德时金梅林蓝盛银陈焕春华中农业大学动物医学院动物病毒室华中农业大学生命科学技术学院分子细胞生物学研究室华中农业大学动物医学院动物病毒室武汉430070

通过人工感染伪狂犬病病毒阴性的健康仔猪 ,取实验组和阴性对照组仔猪的咽部扁桃体、胸腺、颈部淋巴结、腹股沟淋巴结、大脑、小脑、嗅球、三叉神经节等组织作样本。通过电子显微镜观察、DNA梯谱和原位末端脱氧核苷酸标记等试验进行细... 详细信息

通过人工感染伪狂犬病病毒阴性的健康仔猪 ,取实验组和阴性对照组仔猪的咽部扁桃体、胸腺、颈部淋巴结、腹股沟淋巴结、大脑、小脑、嗅球、三叉神经节等组织作样本。通过电子显微镜观察、DNA梯谱和原位末端脱氧核苷酸标记等试验进行细胞凋亡分析 ,结果发现实验组仔猪的淋巴组织细胞呈现典型的细胞凋亡的特征 ,而神经组织中无。这一结果表明 :伪狂犬病病毒感染诱导大量淋巴细胞凋亡 ,造成仔猪免疫功能低下 ,导致大量死亡 ,这可能是伪狂犬病病毒急性感染致病机制之一 ;同时也证实伪狂犬病病毒通过抑制神经细胞的凋亡 ,在神经组织中建立潜伏感染并终生带毒。

关键词：伪狂犬病病毒淋巴组织细胞神经组织细胞细胞凋亡

能量条件对鸭下丘脑5-羟色胺样神经元的影响

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中国农业科学 2004年第10期37卷 1560-1563页

作者：刘华珍彭克美华中农业大学动物科技-动物医学学院华中农业大学动物科技-动物医学学院武汉430070

选用来自同一父母代的1日龄健康樱桃谷鸭60羽,饲喂1周后,随机分为2组:高能组和低能组,分别饲喂高能和低能日粮。饲喂4周后,处理动物:灌流固定,取全脑后固定4h,入8%蔗糖溶液中4℃保存。制作石蜡切片,采用免疫组化链霉亲和素-生物素-过氧... 详细信息

选用来自同一父母代的1日龄健康樱桃谷鸭60羽,饲喂1周后,随机分为2组:高能组和低能组,分别饲喂高能和低能日粮。饲喂4周后,处理动物:灌流固定,取全脑后固定4h,入8%蔗糖溶液中4℃保存。制作石蜡切片,采用免疫组化链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法(Streptavidin-biotin-peroxidasecomplexmethod,SABC)进行染色,并用图像分析系统作半定量分析。结果显示:高能组室旁核(17.73±1.41个/19.46×103μm2)及腹内侧核(15.80±1.71个/19.46×103μm2)有大量的阳性胞体;低能组外侧区(11.25±1.53个/19.46×103μm2)也有大量的阳性胞体,而室旁核没有。上述研究结果表明,下丘脑5-羟色胺样神经元参与摄食和能量代谢的调节。

关键词：樱桃谷鸭 5-羟色胺下丘脑摄食能量代谢

牛疱疹病毒Ⅰ型VP22和猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5融合基因DNA疫苗的免疫效应

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生物工程学报 2005年第5期21卷 725-730页

作者：赵武肖少波方六荣江云波宋云峰严琳余晓岚陈焕春华中农业大学动物医学院动物病毒室

为了提高表达GP5的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)DNA疫苗的免疫效应,将具有蛋白转导功能的牛疱疹病毒1型(BHV1)VP22基因插入到经过修饰具有更好免疫原性的PRRSV修饰型ORF5基因(ORF5M)上游,构建VP22和ORF5M融合表达的真核表达质粒pCIVP2... 详细信息

为了提高表达GP5的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)DNA疫苗的免疫效应,将具有蛋白转导功能的牛疱疹病毒1型(BHV1)VP22基因插入到经过修饰具有更好免疫原性的PRRSV修饰型ORF5基因(ORF5M)上游,构建VP22和ORF5M融合表达的真核表达质粒pCIVP22ORF5M。经间接免疫荧光试验(IFA)和Westernblot检测证实体外表达后,免疫BALBc小鼠,检测小鼠免疫后的GP5特异性ELISA抗体、抗PRRSV中和抗体和脾淋巴细胞增殖反应,并与非融合的真核表达质粒pCIORF5M进行比较。结果显示,融合表达VP22GP5的DNA疫苗pCIVP22ORF5M诱导的体液免疫和细胞免疫反应均明显高于非融合表达的DNA疫苗pCIORF5M,表明蛋白转导相关蛋白BHV1VP22能显著增强表达GP5的PRRSVDNA疫苗的免疫效应,有效发挥了基因免疫佐剂效应;这为研制PRRSV高效DNA疫苗奠定了基础,同时也为其它疾病的高效新型疫苗研究提供了思路。

关键词：牛疱疹病毒1型VP22 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5M基因蛋白转导 DNA疫苗

猪O型口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗原模拟表位的筛选

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畜牧兽医学报 2006年第8期37卷 793-798页

作者：何玉龙伍晓雄赵娜袁芳艳聂芬龙良启华中农业大学动物医学学院

口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3ABC与FMDV复制有关,感染FMDV的动物产生的NSP 3ABC抗体可在体内存留较长时间,是鉴别诊断动物接种疫苗与自然感染口蹄疫的可靠指标。本文从猪FMDV-NSP3ABC阳性抗血清中分离和纯化IgG,以此为固相筛选分子... 详细信息

口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3ABC与FMDV复制有关,感染FMDV的动物产生的NSP 3ABC抗体可在体内存留较长时间,是鉴别诊断动物接种疫苗与自然感染口蹄疫的可靠指标。本文从猪FMDV-NSP3ABC阳性抗血清中分离和纯化IgG,以此为固相筛选分子,对噬菌体随机十二肽库进行4轮吸附-洗脱-扩增的富集筛选后,随机挑取20个噬菌斑进行扩增,用ELISA方法分别检测扩增后的噬菌体抗原性,其中有8个噬菌体克隆与纯化的IgG有较强的特异性结合能力;对得到的阳性克隆提取ssDNA进行测序,分析所递呈的氨基酸序列,其中的7个噬菌体展示肽的氨基酸片段具有较高的保守性;进一步分别以8个阳性噬菌体克隆为固相捕获分子,对22份疑似FMD病猪血清进行检测,结果显示,有5个噬菌体克隆检测结果与试剂盒检测有较高的符合率。本研究为FMDV-NSP 3ABC抗原表位结构进一步研究和建立猪自然感染FMDV快速鉴别诊断新方法奠定了基础。

关键词： FMDV NSP 3ABC 模拟表位噬菌体随机肽库