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液相色谱串联质谱法测定吉瑞替尼血药浓度在急性髓系白血病患者治疗药物监测的应用

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中国医院药学杂志 2024年

作者：李梦王红春刘红星刘瑞薛洋王磊北京陆道培医院病理和检验医学科河北燕达陆道培医院检验医学科

目的：建立一种快速、灵敏、可靠的定量检测急性髓系白血病患者血浆吉瑞替尼（gilteritinib，GLT）浓度的液相色谱串联质谱法（liquid chromatography tandem-mass spectrometry，LC-MS/ MS），并用于临床GLT治疗药物监测分析。方法：采... 详细信息

目的：建立一种快速、灵敏、可靠的定量检测急性髓系白血病患者血浆吉瑞替尼（gilteritinib，GLT）浓度的液相色谱串联质谱法（liquid chromatography tandem-mass spectrometry，LC-MS/ MS），并用于临床GLT治疗药物监测分析。方法：采用GLT-d8作为内标，血浆样品经含内标甲醇沉淀蛋白处理。色谱柱为Ultimate XB-C18（4.6×50 mm，5μm），柱温60 ℃，流动相为含0.1%甲酸和2 mmol·L-1乙酸铵的水溶液和含0.1%甲酸的甲醇溶液，流速0.7 mL·min-1，梯度洗脱，电喷雾电离源（ESI），正离子模式下多反应监测。对66例急性髓系白血病患者241份GLT血浆样本进行浓度监测分析，运用IBM SPSS Statistics 22.0和GraphPad Prism 8.3.0软件对结果数据进行统计分析。结果：GLT线性范围为10～2 500 ng·mL-1，标准曲线为Y=0.001 85X+0.012 2，r=0.999 0，其特异性、精密度、回收率、基质效应、残留和稳定性均符合指南接受标准。66例急性髓系白血病患者GLT血药浓度为（186.38±140.37）ng·mL-1，中位浓度为151.50（3.00-984.00）ng·mL-1，在性别之间差异无统计学意义（P=0.638）。相关性及ROC曲线分析显示：GLT浓度与乳酸脱氢酶、肌酸激酶存在显著正相关（P0.3），GLT浓度大于118.5 ng·mL-1（AUC=0.621>0.6 ，P=0.001）时提示患者心肌酶（乳酸脱氢酶、肌酸激酶）指标异常；与白细胞和中性粒细胞存在显著负相关（P0.2），GLT浓度大于159.5 ng·mL-1（AUC=0.616>0.6，P=0.008）时提示患者白细胞和中性粒细胞指标异常。白蛋白、丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、尿素氮、肌酐、血红蛋白、血小板及三唑类药物浓度与GLT浓度均无显著相关（P>0.01，r<0.3；AUC<0.6）。结论：LC-MS/MS法可准确、灵敏、快速地检测急性髓系白血病患者血浆GLT浓度，且可用于临床GLT治疗药物监测。此外，乳酸脱氢酶、肌酸激酶、白细胞和中性粒细胞等指标可辅助临床调整GLT用药剂量。

关键词：吉瑞替尼液相色谱串联质谱治疗药物监测方法学验证

环孢素血药浓度监测在异基因造血干细胞移植患者中的应用

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中国新药与临床杂志 2024年

作者：孙文利王红春李梦刘瑞赵颖郭进艳卢光泽刘红星王磊河北燕达陆道培医院检验医学科北京陆道培医院检验医学科北京陆道培血液病研究院

目的探索环孢素血药浓度对于移植仓内异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）患者环孢素疗效和安全性的影响。方法收集94例allo-HSCT患者临床资料，以输注干细胞第一日为+1d，将移植时间分为4段：A（-9d ～-1d）、B（+1d ～+7d）、C （+8d ... 详细信息

目的探索环孢素血药浓度对于移植仓内异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）患者环孢素疗效和安全性的影响。方法收集94例allo-HSCT患者临床资料，以输注干细胞第一日为+1d，将移植时间分为4段：A（-9d ～-1d）、B（+1d ～+7d）、C （+8d ～+14d）和D （+15d ～+21d）。观察各时段内环孢素血药浓度及其影响因素，细胞植活情况，肝肾功能指标、急性移植物抗宿主病（aGVHD）和环孢素相关不良反应发生情况及其与环孢素血药浓度的关系。采用受试者操作特征（ROC）曲线分析各时段环孢素血药浓度预测其安全性的价值。结果 allo-HSCT患者在移植仓内环孢素中位血药浓度为128（99，160）ng·mL-1，各时段浓度有非常显著差异（P＜0.01）。患者+21d内白细胞、血小板、中性粒细胞植活率分别为94%、64%、51%。肝损伤发生率为47%（44/94），肾损伤发生率为71%（67/94），aGVHD发生率为16%（15/94）。ROC曲线分析显示，A时段环孢素血药浓度对肝损伤预警值为128.5ng·mL-1，曲线下面积为0.712（95%Cl：0.578～0.847，P=0.002）；A时段环孢素血药浓度对肾损伤预警值为113.5ng·mL-1，曲线下面积为0.752（95%CI：0.637～ 0.868，P<0.001）。结论环孢素血药浓度影响因素较多，其血药浓度可影响临床疗效和安全性，及时、准确进行环孢素血药浓度监测可指导移植仓内allo-HSCT患者的临床治疗。

关键词：环孢素造血干细胞移植移植物抗宿主病肝损伤肾损伤

多参数流式细胞术筛选急性早幼粒细胞白血病免疫表型特征

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中华检验医学杂志 2024年第7期47卷 747-754页

作者：李婷伍平陈曼王爱先傅旻婧吴雪英甄军毅宫美维王卉北京陆道培医院病理与医学检验科北京100176 河北燕达陆道培医院检验科廊坊065201

目的:多参数流式细胞术(MFC)分析筛选急性早幼粒细胞白血病(APL)免疫表型特征。方法:回顾性描述性研究。纳入2016年1月1日至2023年12月31日于河北燕达陆道培医院就诊的130例急性髓系白血病(AML)患者,其中经典型APL(cAPL)组44例,微颗粒... 详细信息

目的:多参数流式细胞术(MFC)分析筛选急性早幼粒细胞白血病(APL)免疫表型特征。方法:回顾性描述性研究。纳入2016年1月1日至2023年12月31日于河北燕达陆道培医院就诊的130例急性髓系白血病(AML)患者,其中经典型APL(cAPL)组44例,微颗粒变异型APL(APLv)组24例,非APL[包括NPM1突变AML(NPM1 mut AML)、AML伴KMT2A重排等]组62例。采用MFC免疫分型法分析和比较各组侧向散射光(SSC)中位表达强度(MEI)及其白血病细胞与自身成熟淋巴细胞MEI比值(T/L MEIR),CD34、髓过氧化物酶(MPO)、CD64和CD9的中位荧光强度(MDFI)及其上述参数白血病细胞与自身成熟淋巴细胞MDFI比值(T/L MDFIR)差异;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价流式多参数模型对cAPL和非APL、APLv和非APL的鉴别诊断效能。结果:cAPL组SSC的MEI、T/L MEIR高于APLv组和非APL组(P均<0.05),且APLv组高于非APL组(P<0.05);cAPL组和APLv组CD34的MDFI均高于非APL组(P均<0.05),APLv组的CD34 T/L MDFIR高于非APL组(P<0.05);cAPL组和APLv组MPO、CD9的MDFI、T/L MDFIR均高于非APL组(P均<0.05);cAPL组CD64的MDFI、T/L MDFIR均高于非APL组(P均<0.05)。ROC曲线结果显示,SSC的MEI、CD64的MDFI、CD9的MDFI、SSC的T/L MEIR和CD9的T/L MDFIR诊断cAPL的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.932、0.816、0.893、0.960和0.894,诊断APLv的AUC分别为0.725、0.737、0.791、0.729和0.736,其对鉴别cAPL和非APL、APLv和非APL均有较好的诊断价值(P均<0.05)。结论:通过MFC方法可分析筛选APL的免疫表型特征,对cAPL、APLv和非APL患者进行鉴别诊断。

关键词：白血病,早幼粒细胞,急性流式细胞术免疫表型分型中位荧光强度鉴别诊断

基于发生机制的FLT3长度突变分型及其临床意义值得重视

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白血病．淋巴瘤 2024年第6期33卷 329-333页

作者：张阳周晓苏刘红星河北燕达陆道培医院检验医学科廊坊065201 北京陆道培血液病研究院北京100176

FLT3内部串联重复(ITD)突变是急性髓系白血病中常见的基因突变, 具有重要的预后分层和靶向治疗指导意义。随着高通量测序技术的广泛应用和对突变序列分析能力的提升, 发现超过半数的FLT3-ITD突变并不只是单纯的串联重复, 还伴有非模板... 详细信息

FLT3内部串联重复(ITD)突变是急性髓系白血病中常见的基因突变, 具有重要的预后分层和靶向治疗指导意义。随着高通量测序技术的广泛应用和对突变序列分析能力的提升, 发现超过半数的FLT3-ITD突变并不只是单纯的串联重复, 还伴有非模板序列添加等复杂情况。近期的研究揭示了FLT3长度突变(FLT3-LM)的序列特征、发生机制及相关临床预后意义。伴非模板序列添加的FLT3-LM由异常活化的末端脱氧核苷酸转移酶参与形成, 这部分患者在化疗、靶向治疗和异基因造血干细胞移植治疗时表现出不同的治疗反应和预后。这为更精准理解FLT3-LM提供了新的视角, 同时提出了基于发生机制的FLT3-LM分型建议。新的分型规则更能体现疾病生物学特征的差异, 更精准地指导FLT3-LM患者的预后分层和个体化治疗方案的制订。

关键词：白血病 FLT3内部串联重复突变 FLT3长度突变 DNTT 末端脱氧核苷酸转移酶

不典型急性早幼粒细胞白血病关键发病和全反式维甲酸耐药机制研究进展

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白血病．淋巴瘤 2024年第2期33卷 82-85页

作者：周晓苏陈佳琦陈雪刘红星北京陆道培血液病研究院精准医学中心北京100176 河北燕达陆道培医院检验医学科廊坊065201

由于全反式维甲酸(ATRA)和砷剂的成功应用,PML::RARA融合基因阳性的急性早幼粒细胞白血病(APL)的治疗已经获得极大成功。但仍有部分患者细胞形态、免疫表型和基因表达谱表现为APL表型,但PML::RARA阴性,也被称为不典型APL。在不典型APL... 详细信息

由于全反式维甲酸(ATRA)和砷剂的成功应用,PML::RARA融合基因阳性的急性早幼粒细胞白血病(APL)的治疗已经获得极大成功。但仍有部分患者细胞形态、免疫表型和基因表达谱表现为APL表型,但PML::RARA阴性,也被称为不典型APL。在不典型APL患者中已报道20余种维甲酸受体相关的融合基因,并且发现所有可评估的RARG融合基因阳性患者和约半数少见型RARA融合基因阳性患者对ATRA耐药,但目前缺乏相关的分子机制研究。结合第65届美国血液学会年会报告,对我国在不典型APL的关键发病和ATRA耐药机制方面取得的重要进展进行报道。

关键词：急性早幼粒细胞白血病融合基因全反式维甲酸耐药

光学基因组图谱在血液肿瘤精准诊疗中的应用进展

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白血病．淋巴瘤 2024年第1期33卷 25-28页

作者：王彤张阳刘铭刘红星河北燕达陆道培医院检验医学科廊坊065201 北京陆道培血液病研究院精准医学中心北京100176

光学基因组图谱(OGM)是一种新型非测序的遗传学分析技术,可高精度分析全基因组范围的结构变异,具有独特技术优势,并且技术流程相对简单,易于实施。近年来OGM在血液肿瘤基因组结构变异分析中的应用已经得到广泛验证和认可。越来越多的研... 详细信息

光学基因组图谱(OGM)是一种新型非测序的遗传学分析技术,可高精度分析全基因组范围的结构变异,具有独特技术优势,并且技术流程相对简单,易于实施。近年来OGM在血液肿瘤基因组结构变异分析中的应用已经得到广泛验证和认可。越来越多的研究显示,OGM的应用可帮助改进血液肿瘤的遗传学诊断、预后分层和治疗指导。现结合第65届美国血液学会年会的报道对相关研究进展进行阐述。

关键词：血液肿瘤细胞遗传学光学基因组图谱基因组结构变异

多参数流式细胞术检测人骨髓标本中非肿瘤性异常细胞表型研究

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中华检验医学杂志 2024年第7期47卷 740-746页

作者：陈曼王榕周静傅旻婧赵玮同格乐王爱先宫美维王卉河北燕达陆道培医院检验科廊坊065201 贵州医科大学检验医学院临床微生物与免疫学教研室贵阳550000 北京陆道培医院病理与医学检验科北京100176

目的:分析多参数流式细胞术(MFC)检测骨髓标本中非肿瘤性异常表型相关疾病,包括意义不明的单克隆免疫球蛋白血症(MGUS)、单克隆B细胞增多症(MBL)、Fcγ受体Ⅲ类B(FcγRⅢB)缺失、CD36缺失等的表型特征。方法:回顾性观察性研究。选取2020... 详细信息

目的:分析多参数流式细胞术(MFC)检测骨髓标本中非肿瘤性异常表型相关疾病,包括意义不明的单克隆免疫球蛋白血症(MGUS)、单克隆B细胞增多症(MBL)、Fcγ受体Ⅲ类B(FcγRⅢB)缺失、CD36缺失等的表型特征。方法:回顾性观察性研究。选取2020年1月3日至2024年3月31日于河北燕达陆道培医院进行骨髓白血病/淋巴瘤一步法MFC筛查肿瘤性疾病的24 864例患者。收集患者一般临床资料以及MFC结果。根据年龄分为<45岁组(11 495例)、45~<60岁组(5 322例)、≥60岁组(7 081例);按疾病性质分为良性疾病组(8 336例)、恶性疾病组(15 562例)、其他组(966例)。分析各组骨髓标本中非肿瘤性异常表型的发生情况。结果:MGUS、MBL、FcγRⅢB缺失、CD36缺失的发生率分别为0.072%(18/24 864)、0.511%(127/24 864)、0.221%(55/24 864)、0.004%(1/24 864)。恶性疾病组MBL的发病率低于良性疾病组( P<0.001),MGUS的发病率高于良性疾病组( P=0.034)。良性疾病组中各疾病类型的MBL发生率比较,差异有统计学意义( P<0.001),其中全血细胞减少患者中MBL发生率最高为2.72%(48/1 765);恶性疾病组中,各疾病类型的MBL、MGUS发生率比较,差异均有统计学意义( P均<0.001),其中骨髓增生异常综合征/骨髓增殖性疾病患者发生率均最高,分别为1.95%(3/154)、1.30%(2/154)。结论:应用MFC进行白血病/淋巴瘤一步法检测的非肿瘤性异常细胞表型特征存在一定差异,对疾病的筛查具有一定的借鉴意义。

关键词：流式细胞术意义不明的单克隆免疫球蛋白血症单克隆B细胞增多症 Fcγ受体Ⅲ类B缺失

伏立康唑及其代谢产物浓度监测在异基因造血干细胞移植患者中的应用研究

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中国实验血液学杂志 2024年第3期32卷 945-951页

作者：王红春王磊李梦时磊孙慧慧刘红星欧红玲锦州医科大学研究生培养基地-火箭军特色医学中心检验科北京100088 北京陆道培医院北京100176 河北燕达陆道培医院河北廊坊065201 火箭军特色医学中心检验科北京100088 北京陆道培血液病研究院北京100176

目的:探索移植后植入前(即移植后+1至+30 d)伏立康唑(voriconazole,VRCZ)及其代谢产物氮氧化物(voriconazole N-oxide,VNO)浓度监测在VRCZ用于异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)患者防治真菌感染疗效和安全性中的应用价值。方法:分析VRCZ、VNO浓度及MR(CVNO/CVRCZ)的影响因素及在VRCZ防治真菌感染和发生肝肾损伤中的差异,并采用受试者工作特征曲线(ROC)对其进行分析(将曲线上约登指数最大一点对应值设定为临界值),确证其临界值。结果:影响VRCZ浓度(CVRCZ)、VNO浓度(CVNO)和MR的因素为:患者体重、VRCZ每日给药量及移植类型等(均P<0.05)。有效组CVRCZ和CVNO均明显高于无效组(P<0.001),MR则相反(P<0.001);肝、肾功能损伤组MR均明显低于正常组(P<0.05)。ROC显示,CVRCZ、CVNO和MR预测allo-HSCT患者移植后植入前VRCZ防治侵袭性真菌感染的临界值分别为0.95μg/ml、1.35μg/ml、1.645(AUC分别为0.9677、0.7634、0.9564)。CVRCZ和MR可以辅助提示患者肝[其临界值分别为0.65μg/ml、1.96(AUC分别为0.5971、0.6663)]、肾损伤[其临界值分别为0.95μg/ml、1.705(AUC分别为0.6039、0.6164)]。结论:同时监测VRCZ、VNO浓度及MR对预测allo-HSCT患者移植后植入前VRCZ防治侵袭性真菌感染具有重要价值,CVRCZ预测有效的准确性高于MR及CVNO;CVRCZ升高、MR降低会增加肝肾损伤的发生风险。

关键词：伏立康唑伏立康唑氮氧化物异基因造血干细胞移植治疗药物监测安全性

BCR::ABL1 p210转录水平定量检测多中心比对

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中华病理学杂志 2024年第7期53卷 672-677页

作者：赵楚婷倪灿荣蔺亚妮马小丽吴祁生王芳韩晓雪刘丰徐阳刘红星陈杰汝昆朱明华天津见康华美医学诊断中心天津300385 上海长海医院病理科上海200433 河北燕达陆道培医院检验医学科廊坊065200 北京陆道培医院病理和检验医学科北京100176 武汉康圣达医学检验所有限公司武汉430075 天津金域医学检验实验室有限公司天津300392 北京高博博仁医院分子诊断实验室北京100070 杭州迪安医学检验中心杭州310030 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院病理科北京100730 山东省肿瘤医院病理检验特检中心济南250117

目的评估7家独立医学实验室BCR::ABL1 p210转录水平定量检测能力及实验室之间结果的可比性。方法比对分两个阶段完成,由参考实验室制备比对样本,每个阶段比对样本的BCR::ABL1 p210定量值均覆盖0.001%~0.01%、0.01%~0.1%、0.1%~1%、1%~10... 详细信息

目的评估7家独立医学实验室BCR::ABL1 p210转录水平定量检测能力及实验室之间结果的可比性。方法比对分两个阶段完成,由参考实验室制备比对样本,每个阶段比对样本的BCR::ABL1 p210定量值均覆盖0.001%~0.01%、0.01%~0.1%、0.1%~1%、1%~10%及>10%。各比对实验室分别采用即时荧光定量PCR法(real-time quantitative PCR,RT-PCR)和数字PCR法(digital PCR,dPCR)进行比对样本的检测,计算并确认各比对实验室转换因子(conversion factor,CF)。结果(1)RT-PCR比对中,1家实验室第一阶段14例样本未检出,其余6家实验室比对结果合格,偏倚10%时,RT-PCR和dPCR均能全部检出;BCR::ABL1 p210定量值为0.001%~0.01%时,dPCR检出率高于RT-PCR法(85.56%比68.00%)。结论各比对实验室结果呈较好一致性,各实验室间BCR::ABL1 p210定量检测通过CF值换算具备可比性;BCR::ABL1 p210深度分子反应定量检测中,dPCR法阳性检出率更高,更有优势;为保证检测结果的准确性和稳定性,各实验室应加强日常质控工作。

关键词：白血病,髓系,慢性,BCR-ABL阳性融合蛋白质类,bcr-abl 实时聚合酶链反应