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抗体修饰DNA测序酶的开发及其运用

生物技术通报 2024年

作者：宋辉曹文刚肖晓文杜军北京擎科生物科技股份有限公司研究院湖北擎科生物科技有限公司研发部

【目的】开发一种新型DNA测序酶，解决一代测序技术应对复杂DNA结构模板所面临的主要挑战，如测序信号中断或测序信号快速衰减。【方法】从NCBI数据库中挖掘到了Taq DNA聚合酶和单链结合蛋白SSB基因信息，利用遗传融合、定点突变及基因... 详细信息

【目的】开发一种新型DNA测序酶，解决一代测序技术应对复杂DNA结构模板所面临的主要挑战，如测序信号中断或测序信号快速衰减。【方法】从NCBI数据库中挖掘到了Taq DNA聚合酶和单链结合蛋白SSB基因信息，利用遗传融合、定点突变及基因设计技术获得了一种新型的测序酶Sso-Sequenase。利用亲和层析和离子交换层析，获得了纯化的测序酶。利用抗体修饰技术改良了Sso-Sequenase的性能，并且利用STR技术对其热启动性能进行了表征。选取多组不同类型的复杂模板，采用一代技术对比分析了Sso-Sequenase测序酶试剂盒和传统BigDye测序试剂盒的测序表现。【结果】Sso-Sequenase在大肠杆菌中稳定表达，纯度达到95%以上，产量高达10.5 mg/L。当温度低于35℃时，Sso-Sequenase表现出热启动活性。在复杂模板的一代测序反应中，如重复序列、高GC和发夹结构等样本，Sso-Sequenase测序酶成功完成了所有样本的测序，序列的平均碱基质量QV大于20。相比而言，BigDye测序试剂盒在处理这些复杂样本时，多数样本测序信号出现了显著衰减或中断。【结论】开发了一种纯度好、产量高，兼具热启动活性的DNA测序酶Sso-Sequenase及测序试剂盒，显著提高了复杂DNA结构模板（重复序列、高GC和发夹结构）测序成功率。

关键词： DNA测序酶抗体修饰复杂模板测序

颜料与线密度对原液着色涤纶短纤维及纱线颜色的影响

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纺织学报 2024年第3期45卷 97-105页

作者：卢韵静王雪齐元章宋琳廉志军李鑫东华大学纺织学院上海201620 中国纺织科学研究院有限公司生物源纤维制造技术国家重点实验室北京100025 鲁丰织染有限公司山东淄博255100 中国通用技术(集团)控股有限责任公司北京100161 东华大学材料科学与工程学院上海201620

为掌握原液着色涤纶短纤维的颜色对其纱线颜色变化的影响规律,选取红、黄、蓝3种颜色半消光原液着色涤纶短纤维,根据实际生产中主要调整的参数,系统研究了颜料质量分数、纤维线密度对其色度值的影响规律;同时,考察了从纤维到纱线(线密度... 详细信息

为掌握原液着色涤纶短纤维的颜色对其纱线颜色变化的影响规律,选取红、黄、蓝3种颜色半消光原液着色涤纶短纤维,根据实际生产中主要调整的参数,系统研究了颜料质量分数、纤维线密度对其色度值的影响规律;同时,考察了从纤维到纱线(线密度为20 tex,捻系数为300)的色度值变化,并与特定规格半消光染色短纤维、大有光原液着色短纤维进行对比。结果表明:颜料质量分数显著影响半消光纤维的色度值,在浅、中色之间的差异尤为明显,是中、深色之间的2倍;线密度对纤维色差(ΔE_(CMC(2∶1)))的影响不大,黄色的色差变化较红色、蓝色更明显;半消光原液着色短纤维到纱线的色度值变化不明显,色差在0.8~2.6范围内;在半消光染色纤维中,黄色的色差变化偏大,为3.4~3.9,红色、蓝色与原液着色的色差相当;大有光原液着色涤纶短纤维到纱线的变化与半消光染色短纤维的更为相似,二者的色差ΔE_(CMC(2∶1))、明度差ΔL、饱和度差ΔC以及色调差ΔH基本相同,说明对于特定的颜色类型,可借鉴染色纱线的配色经验,为原液着色纱线配色模型的系数调整提供支持。

关键词：涤纶短纤维原液着色纤维颜料线密度色度值纱线配色

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预防及治疗用噬菌体质量标准专家共识

中国生物工程杂志 2024年第1期44卷 152-158页

作者：中国噬菌体研究联盟中国微生物学会医学微生物学与免疫学专业委员会中国生物工程学会噬菌体技术专业委员会秦金红郭晓奎吴楠楠童贻刚不详上海交通大学医学院上海2000252 上海交通大学医学院国家热带病研究中心全球健康学院上海200025 创噬纪(上海)生物技术有限公司上海201108 北京化工大学生命科学与技术学院北京100029

日益严重的细菌耐药性给全球公共卫生带来了重大挑战,噬菌体疗法作为细菌感染治疗的替补疗法,近年来重新得到医生、研究者和产业界的重视。噬菌体是特异性感染细菌的一类病毒。噬菌体疗法可以精准靶向并清除病原菌而不破坏自然环境微生... 详细信息

日益严重的细菌耐药性给全球公共卫生带来了重大挑战,噬菌体疗法作为细菌感染治疗的替补疗法,近年来重新得到医生、研究者和产业界的重视。噬菌体是特异性感染细菌的一类病毒。噬菌体疗法可以精准靶向并清除病原菌而不破坏自然环境微生态及人体正常菌群。由于噬菌体的活病毒属性、杀菌特异性等特征,使得噬菌体的药学、非临床和临床研究有别于传统药物。目前,国内外尚缺乏相关规范和指南,限制了噬菌体的转化应用和推广。为此,基于国内外前期噬菌体治疗临床研究的经验,并参考噬菌体治疗相关文献报道,组织噬菌体基础研究、临床、药学等领域专家,起草了本共识。对入库噬菌体的来源、噬菌体宿主、入库噬菌体的生物学特性以及入库噬菌体的包装与标识提出要求,旨在规范应用型噬菌体的标准,并满足噬菌体库的共享需求,加速推动噬菌体的研究、转化及应用。

关键词：噬菌体预防及治疗质量标准专家共识

基于围岩应力差异梯度控制的深部煤巷防冲机制与技术

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煤炭学报 2024年

作者：刘国磊王泽东张修峰曲效成崔嵛马秋峰山东理工大学资源与环境工程学院山东能源集团有限公司北京安科兴业科技股份有限公司

针对深部煤巷冲击地压灾害，以聚焦围岩垂向应力与径向水平应力差异的“煤巷围岩应力差异梯度致冲机理”为基础，探究其致冲机制，研发防冲关键技术。论文采用数值模拟、理论分析、现场实践等方法，从应力差异角度，分析单元体、围岩的... 详细信息

针对深部煤巷冲击地压灾害，以聚焦围岩垂向应力与径向水平应力差异的“煤巷围岩应力差异梯度致冲机理”为基础，探究其致冲机制，研发防冲关键技术。论文采用数值模拟、理论分析、现场实践等方法，从应力差异角度，分析单元体、围岩的稳定性及破坏特征，分析基于应力差异控制的防冲机制；基于Dgc区域和局部联合控制的思路，提出煤巷围岩三级改造防冲技术方案，结合母杜柴登井田30202工作面现场三级改造工程案例进行分析。结果表明：强冲击倾向性煤体能承载更高的应力差异，为补偿过高的应力差异需要更高的能量释放强度，应力差异驱动煤体偏向于脆性剪切破裂；具有冲击倾向性的煤巷围岩易因高Dgc驱动而发生失稳，强冲击倾向性煤层Dgc值更大，冲击风险激增；单一强支护提升围岩强度，也导致Dg在帮部集中，Dgc更加接近冲击临界条件，增强围岩Dg升高区阻抗、降低Dgmax值是防冲着力点，主动支护和被动支护以及煤层改造需要协同作用才能有效降低围岩冲击风险；经微震事件、管路压力、排出煤粉量等指标及开采实践验证，三级改造防冲技术方案相较于传统卸压技术方法具有更强的减冲效果，适用于高应力差异区的煤层改造防冲需求，一级区域压裂改构和二级区域注水改性显著降低煤巷围岩的应力差异程度，巷道冲击危险等级降低，三级卸压钻孔间距可适当增加，减小工程量。

关键词：深部煤巷围岩应力差异梯度梯度控制防冲机制

暂堵剂用聚乳酸/聚乙醇酸复合纤维的制备及降解性能研究

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材料导报 2024年第13期38卷 266-271页

作者：吴鹏飞崔华帅朱金唐史贤宁崔宁李杰黄庆中国纺织科学研究院有限公司生物源纤维制造技术国家重点实验室北京100025

暂堵剂是石油气开采中增产的重要材料,随着环保要求的提高,可降解暂堵剂材料已成为当前石油气开采中的首选材料。聚乙醇酸作为降解速率最快且最简单的线性脂肪族聚酯,由其制成的可降解暂堵绳结已在石油气开采中得到应用。但聚乙醇酸存... 详细信息

暂堵剂是石油气开采中增产的重要材料,随着环保要求的提高,可降解暂堵剂材料已成为当前石油气开采中的首选材料。聚乙醇酸作为降解速率最快且最简单的线性脂肪族聚酯,由其制成的可降解暂堵绳结已在石油气开采中得到应用。但聚乙醇酸存在降解速率快、货架期短等问题,大大限制了其产品的推广使用。本工作采用复合熔融纺丝法制备了以聚乳酸为皮层、聚乙醇酸为芯层的圆形截面皮芯复合纤维,研究了不同皮芯比例聚乳酸/聚乙醇酸复合纤维的形貌、降解性能、热性能和结晶性。结果表明:复合纤维在70℃下的溶解率“转折点”出现在降解6 h时,降解前6 h内,复合纤维的溶解率都在3%(质量分数)以内;降解6 h后,复合纤维的溶解率几乎呈线性升高,皮芯比例为20/80的复合纤维降解24 h后,溶解率可以达到23.2%。扫描电镜照片显示,复合纤维降解24 h后,聚乳酸层厚度越小,纤维降解程度越高,在皮芯比例为20/80的复合纤维中,聚乳酸层大量开裂,造成芯层的聚乙醇酸沿纤维轴向降解断裂成小段。热性能结果显示,聚乳酸结晶度随降解时间延长而增大,而聚乙醇酸结晶度随降解时间延长先增大后减小。广角X射线衍射结果显示,复合纤维中聚乙醇酸晶粒尺寸较小,尤其是c轴长度仅为约34 nm。纤维强度保持率和降解液的pH值都与皮层厚度成正比。本工作为暂堵剂制备提供了新途径。

关键词：聚乳酸聚乙醇酸(PGA) 皮芯复合纤维暂堵剂降解性能

Vero细胞狂犬病疫苗Zagreb和Essen程序接种安全性、免疫原性的Meta分析

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微生物学免疫学进展 2024年第2期52卷 52-57页

作者：刘合钦苏锦锋赵韵芽芦颜陈军舒祥中国生物技术股份有限公司营销中心市场部北京100020

目的探讨Vero细胞狂犬病疫苗采用Zagreb和Essen程序接种后的安全性及免疫原性的差异。方法通过检索PubMed、Embase、Web of science、中国知网、万方、维普网等数据库,收集Vero细胞狂犬病疫苗Zagreb和Essen程序接种安全性、免疫原性... 详细信息

目的探讨Vero细胞狂犬病疫苗采用Zagreb和Essen程序接种后的安全性及免疫原性的差异。方法通过检索PubMed、Embase、Web of science、中国知网、万方、维普网等数据库,收集Vero细胞狂犬病疫苗Zagreb和Essen程序接种安全性、免疫原性的相关文献,采用RevMan 5.4软件进行Meta分析。结果共有9篇文献纳入分析。通过Meta分析对比了Zagreb和Essen程序接种Vero细胞狂犬病疫苗的安全性和免疫原性。Zagreb和Essen程序之间总体不良反应率,差异无统计学意义(RR:1.12,95%CI:0.92~1.32,P=0.26)。局部不良反应发生率和全身不良反应发生率在Zagreb和Essen程序之间,差异均无统计学意义(RR:1.13,95%CI:0.99~1.28,P=0.07;RR:1.12,95%CI:0.88~1.41,P=0.36)。在首针接种后7 d,狂犬病病毒中和抗体(RVNA)阳转率Zagreb程序高于Essen程序(RR:1.27,95%CI:1.20~1.35,P<0.000 01),具有统计学差异。然而,首针接种后14 d, RVNA阳转率Zagreb在Essen程序之间无统计学意义(RR:1.00,95%CI:1.00~1.01,P=0.66)。结论 Vero细胞狂犬病疫苗Zagreb较Essen程序安全性无统计学意义。首针接种后7 d,RVNA阳转率Zagreb程序高于Essen程序,但在首针接种后14 d, 2种程序RVNA阳转率无统计学差异。

关键词： Vero细胞狂犬病疫苗 Zagreb程序 Essen程序 Meta 安全性免疫原性

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蛋白质纳米颗粒在疫苗研发中的应用

国际生物制品学杂志 2024年第4期47卷 238-244页

作者：张欣明(综述) 李媛媛(审校) 国药中生生物技术研究院有限公司疫苗研发课题组(一) 北京101111

蛋白质纳米颗粒作为抗原展示载体,与天然病原体大小相似,能够有效帮助抗原提高其稳定性和免疫原性。临床试验研究表明,蛋白质纳米颗粒可被应用于新型疫苗的开发。此文对蛋白质纳米颗粒疫苗的免疫学特性,以及蛋白质颗粒在疫苗研发中的应... 详细信息

蛋白质纳米颗粒作为抗原展示载体,与天然病原体大小相似,能够有效帮助抗原提高其稳定性和免疫原性。临床试验研究表明,蛋白质纳米颗粒可被应用于新型疫苗的开发。此文对蛋白质纳米颗粒疫苗的免疫学特性,以及蛋白质颗粒在疫苗研发中的应用进行综述,旨在为蛋白质纳米颗粒的进一步研究提供参考。

关键词：蛋白质纳米颗粒病毒样颗粒铁蛋白 SpyTag/SpyCatcher系统

窄煤柱沿空掘巷迎头区贯通阶段矿压显现规律及防治技术研究

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中国矿业 2024年第3期33卷 219-225页

作者：陈国华王颜亮王朝引韩刚吕玉磊周林王海乌审旗蒙大矿业有限责任公司内蒙古鄂尔多斯017307 北京安科兴业科技股份有限公司北京100083 中煤西北能源化工集团有限公司内蒙古鄂尔多斯017307 中煤能源研究院有限责任公司陕西西安710054

对于存在冲击地压危险的沿空掘巷工作面,由于其应力环境的复杂性,大大增加了巷道贯通阶段防冲工作的难度。基于如何避免掘进工作面迎头区冲击地压频发的问题,确保工作面安全科学贯通,以纳林河二号矿井31120沿空掘进工作面为工程背景,展... 详细信息

对于存在冲击地压危险的沿空掘巷工作面,由于其应力环境的复杂性,大大增加了巷道贯通阶段防冲工作的难度。基于如何避免掘进工作面迎头区冲击地压频发的问题,确保工作面安全科学贯通,以纳林河二号矿井31120沿空掘进工作面为工程背景,展开理论分析和实践探索。通过理论分析,对掘进工作面迎头区冲击地压的发生机理展开初步探讨;进一步采用地音监测的方法,分析了掘进贯通期间迎头滞后区域地音事件突增的范围,进而确定该范围为掘进贯通影响区域。为了消除冲击地压隐患,设计了掘进贯通期间的多轮循环大直径钻孔卸压措施,并通过现场实测数据分析得到卸压效果良好的结论。本文研究对于提高纳林河二号矿井31120沿空掘进工作面的安全性与稳定性具有重要意义,同时也为类似工程提供了有益的参考和借鉴。

关键词：沿空掘巷掘进贯通地音监测冲击地压防治技术

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胶体金免疫层析法快速检测韭菜中肟菌酯残留

农药 2024年

作者：丛倩千王磊朱亮亮刘国强陶燕飞王兆芹北京勤邦科技股份有限公司唐山市食品药品综合检验检测中心北京市食品安全免疫快速检测工程技术研究中心广州勤邦生物技术有限公司

[目的]建立一种针对韭菜中肟菌酯残留量的快速检测方法，并应用于实际样品检测，为农产品检测实验室提供快速筛查技术。[方法]优化前处理技术，将胶体金免疫层析技术应用于韭菜基质中肟菌酯的检测，验证方法的检出限、灵敏度、假阳性率... 详细信息

[目的]建立一种针对韭菜中肟菌酯残留量的快速检测方法，并应用于实际样品检测，为农产品检测实验室提供快速筛查技术。[方法]优化前处理技术，将胶体金免疫层析技术应用于韭菜基质中肟菌酯的检测，验证方法的检出限、灵敏度、假阳性率、假阴性率和特异性，并通过液相色谱-串联质谱法确认方法的准确性。[结果]建立的胶体金免疫层析法对韭菜中肟菌酯的检出限为0.7 mg/kg，灵敏度100%，假阳性率3%，假阴性率0；与醚菌酯、吡唑醚菌酯、啶氧菌酯、嘧菌酯4种类似物无交叉反应；实际样本检测结果与液相色谱-串联质谱法结果符合性较好。[结论]本方法具有操作简便、检测速度快、准确性高等优点，适用于基层实验室的大批量样本检测及现场快速检测，对保障农产品质量安全具有现实意义。

关键词：韭菜肟菌酯快速检测胶体金免疫层析技术