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乳酸调控巨噬细胞功能促进登革病毒2型感染

中华微生物学和免疫学杂志 2024年第5期44卷 396-405页

作者：胡欢覃燕春黄贞植周璐吴家红商正玲贵州医科大学基础医学院免疫学教研室安顺550025 贵州医科大学基础医学院寄生虫教研室安顺550025

目的探究外源性乳酸对Raw264.7细胞、小鼠骨髓来源巨噬细胞(mouse bone marrow-derived macrophages,BMDMs)及THP-1细胞中登革病毒2型(dengue virus type 2,DENV-2)复制的影响及乳酸与细胞活化之间的关系。方法培养和诱导BALB/c小鼠骨... 详细信息

目的探究外源性乳酸对Raw264.7细胞、小鼠骨髓来源巨噬细胞(mouse bone marrow-derived macrophages,BMDMs)及THP-1细胞中登革病毒2型(dengue virus type 2,DENV-2)复制的影响及乳酸与细胞活化之间的关系。方法培养和诱导BALB/c小鼠骨髓中的BMDMs,流式细胞术检测F4/80+CD11b+细胞纯度。qRT-PCR检测不同时间点DENV-2感染BMDMs中葡萄糖转运体1(glucose transporter type 1,GLUT1)、己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)、乳酸转运体4(monocarboxylate transporters 4,MCT4)的mRNA表达水平,比色法检测细胞上清液中乳酸含量。使用CCK-8法评估不同浓度乳酸对Raw264.7细胞、BMDMs及THP-1细胞活力的影响,qRT-PCR检测不同浓度乳酸对不同MOI DENV-2感染细胞中病毒E基因、CD163、TGF-β、CD86、视黄酸诱导基因Ⅰ(retinoic acid-inducible geneⅠ,RIG-Ⅰ)、IFN-β、干扰素刺激基因15(interferon-stimulated gene 15,ISG15)及ISG56的mRNA表达水平,流式细胞术检测CD86和CD206蛋白的表达。结果BMDMs纯度为(87.53±1.66)%。DENV-2(MOI=3)感染BMDMs后,GLUT1 mRNA转录水平在12 h一过性增高,在24 h降低(P0.05)。结论本研究发现外源性乳酸能促进DENV-2在人源及鼠源巨噬细胞中的感染,该现象与细胞M2型极化有关。

关键词：乳酸巨噬细胞登革病毒病毒复制 M2型极化干扰素信号通路

非细胞渗透模型在BSCⅡ类药物渗透性研究中的应用进展

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中国现代应用药学 2024年第8期41卷 1135-1141页

作者：吴文娜丁丽冯仲亮何晓明何朝星方瑜河北医科大学药学院药剂教研室石家庄050017

渗透性是肠道吸收和口服生物利用度的决定因素之一。非细胞渗透模型是一种体外渗透性测定工具,具有高效率、低成本、性质稳定、使用方便、可定制化等优点。根据屏障类型,非细胞渗透模型可分为含有(磷酸)脂质的仿生屏障和无脂质的非仿生... 详细信息

渗透性是肠道吸收和口服生物利用度的决定因素之一。非细胞渗透模型是一种体外渗透性测定工具,具有高效率、低成本、性质稳定、使用方便、可定制化等优点。根据屏障类型,非细胞渗透模型可分为含有(磷酸)脂质的仿生屏障和无脂质的非仿生屏障。仿生非细胞渗透模型包括平行人工膜渗透性测定模型、基于囊泡的渗透测定模型和人工纤维素-磷脂仿生膜测定模型。非仿生无细胞渗透模型有基于聚醚砜材料的中空纤维膜模型等。在国外,应用这4种屏障进行不同目的的研究正逐渐成为药物吸收研究的热点,但在国内,仅对平行人工膜渗透性测定模型的应用研究较多,缺乏对其他3种屏障的应用研究。笔者总结了渗透性装置和渗透性计算方法,检索了近几年非细胞渗透模型在BSCⅡ类药物渗透性方面的应用,对3种仿生屏障,和无脂质的中空纤维膜的特点应用进行归纳总结,以期满足难溶性药物配方开发需求。

关键词：渗透性 BSCⅡ类药物非细胞渗透模型仿生屏障中空纤维膜

单核细胞趋化蛋白1对肺癌A549细胞迁移和侵袭的影响及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2024年第3期50卷 666-675页

作者：王远王志娟张明姝王艺慧张晴叶丽平锦州医科大学基础医学院病理学教研室辽宁锦州121001 锦州医科大学基础医学院病理生理学教研室辽宁锦州121001 锦州医科大学生物人类学研究所辽宁锦州121001

目的:探讨单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)对肺癌A549细胞迁移和侵袭的影响,并阐明其作用机制。方法:采用免疫组织化学法检测80例非小细胞肺癌(NSCLC)及癌旁正常肺组织中MCP-1蛋白表达情况。体外培养人肺癌A549细胞,MCP-1-小干扰RNA(siRNA)实... 详细信息

目的:探讨单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)对肺癌A549细胞迁移和侵袭的影响,并阐明其作用机制。方法:采用免疫组织化学法检测80例非小细胞肺癌(NSCLC)及癌旁正常肺组织中MCP-1蛋白表达情况。体外培养人肺癌A549细胞,MCP-1-小干扰RNA(siRNA)实验分为空白组、阴性对照组(si-NC组)、MCP-1-siRNA-1组和MCP-1-siRNA-2组;MCP-1过表达实验分为对照组、空载对照组(OE-NC组,转染MCP-1过表达空载质粒)、过表达MCP-1组(OE-MCP-1组,转染MCP-1过表达质粒)、过表达MCP-1+细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路抑制剂PD98059组(OE-MCP-1+PD98059组,共转染MCP-1过表达质粒和PD98059)和PD98059组(转染PD98059)。分别将MCP-1-siRNA和质粒转染至肺癌A549细胞,Western blotting法验证各组A549细胞转染效率。细胞划痕实验和Transwell小室实验观察各组A549细胞迁移率和侵袭细胞数,Western blotting法检测各组A549细胞中磷酸化ERK(p-ERK)、总ERK(t-ERK)和上皮-间质转化(EMT)相关蛋白表达水平。结果:与癌旁组织比较,NSCLC组织中MCP-1蛋白阳性表达率明显升高(P室实验,与si-NC组比较,MCP-1-siRNA-1组和MCP-1-siRNA-2组侵袭细胞数明显减少(P<0.01);与OE-NC组比较,OE-MCP-1组侵袭细胞数明显增加(P<0.01);与OE-MCP-1组比较,OE-MCP-1+PD98059组侵袭细胞数明显减少(P<0.01);与OE-MCP-1+PD98059组比较,PD98059组侵袭细胞数明显减少(P<0.01)。Western blotting法,与si-NC组比较,MCP-1-siRNA-1组和MCP-1-siRNA-2组A549细胞中p-ERK、波形蛋白(Vimentin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平均明显升高(P<0.01);与OE-NC组比较,OE-MCP-1组A549细胞中p-ERK、Vimentin和N-cadherin蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),E-cadherin蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);与OE-MCP-1组比较,OE-MCP-1+PD98059组A549细胞中p-ERK、Vimentin和N-cadherin蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),E-cadherin蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与OE-MCP-1+PD98059组比较,PD98059组A549细胞中p-ERK、 Vimentin和N-cadherin蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:MCP-1蛋白可上调肺癌A549细胞中EMT相关蛋白表达,促进肺癌A549细胞的迁移和侵袭,其作用机制与激活ERK信号通路有关。

关键词：单核细胞趋化蛋白1 细胞外信号调节激酶癌,非小细胞肺细胞侵袭细胞迁移

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网络认知行为疗法对青少年抑郁症状疗效Meta分析

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中国儿童保健杂志 2024年第7期32卷 778-784页

作者：许婷刘鹏鸿李树峰高胜利刘丽霞山西医科大学汾阳学院生理学教研室山西医科大学第一医院精神心理科山西医科大学汾阳学院预防医学教研室

目的系统评价网络认知行为疗法(iCBT)对青少年抑郁症状的疗效，以期为临床实践提供参考。方法网络检索PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science、中国知网、万方数据、维普网数据库中iCBT对青少年抑郁症状疗效的随机对照试... 详细信息

目的系统评价网络认知行为疗法(iCBT)对青少年抑郁症状的疗效，以期为临床实践提供参考。方法网络检索PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science、中国知网、万方数据、维普网数据库中iCBT对青少年抑郁症状疗效的随机对照试验(RCT),检索时限为建库至2023年2月，2名研究者独立筛选符合纳入标准的RCTs并提取数据，评价偏倚风险后运用RevMan 5.4.1和R 4.3.0软件的Metafor程序包进行统计分析。结果共纳入12个RCTs, 2 469例研究对象。Meta分析结果显示：对于干预后抑郁症状评分的组间比较，疗程≤8周，干预组比对照组降低得更多(SMD=-0.63, 95%CI:-0.93～-0.33),差异有统计学意义(P8周，干预组和对照组的变化都不明显(SMD=-0.23, 95%CI:-0.49～0.04),差异无统计学意义(P>0.05);对于长期随访后抑郁症状评分的组间比较，干预组比对照组降低得更多(SMD=-0.28, 95%CI:-0.53～-0.02),差异有统计学意义(P0.05)。结论 iCBT可改善青少年的抑郁症状，且疗效可持续较长时间，建议在临床实践中推广使用。

关键词：网络认知行为疗法青少年抑郁症状 Meta分析

Erastin通过MAPK介导的氧化应激信号通路诱导肺成纤维细胞铁死亡

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安徽医科大学学报 2024年第5期59卷 820-825页

作者：王沂然张诗捷关予博李渺渺蔡汝忆武琦徐州医科大学生理学教研室徐州221004 徐州医科大学病理生理学教研室徐州221004 徐州医科大学第一临床医学院徐州221004

目的探究Erastin对肺成纤维细胞铁死亡的作用机制。方法向小鼠肺成纤维细胞(C57/B6-L)中加入不同浓度的铁死亡诱导剂Erastin,通过细胞计数试剂(CCK-8)检测细胞活性、荧光显微镜观察氧化应激水平,蛋白质印迹法(Western blot)检测丝裂原... 详细信息

目的探究Erastin对肺成纤维细胞铁死亡的作用机制。方法向小鼠肺成纤维细胞(C57/B6-L)中加入不同浓度的铁死亡诱导剂Erastin,通过细胞计数试剂(CCK-8)检测细胞活性、荧光显微镜观察氧化应激水平,蛋白质印迹法(Western blot)检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白表达,之后分别加入p38和人细胞外信号调节激酶(ERK)的抑制剂SB203580和U0126,进一步验证Erastin诱导肺成纤维细胞铁死亡的作用机制。结果Erastin在100μmol/L药物浓度时,能够明显诱导肺成纤维细胞铁死亡,同时伴有氧化应激表达增强,此外MAPK通路中的p38和ERK蛋白磷酸化水平升高(P<0.05)。而在加入SB203580、U0126抑制剂后,肺成纤维细胞氧化应激水平明显下降,同时细胞的活性明显升高(P<0.05)。结论Erastin能够诱导肺成纤维细胞铁死亡,其作用机制可能与MAPK信号通路介导的氧化应激有关。

关键词：肺纤维化肺成纤维细胞铁死亡活性氧 MAPK信号通路

自转录活性调节区测序技术在增强子发现研究中的应用

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遗传 2024年第8期46卷 589-602页

作者：王纪龙李青战廷正广西医科大学寄生虫学教研室南宁530021 广西医科大学细胞生物学教研室南宁530021 广西高校区域性疾病基础研究重点实验室(广西医科大学) 南宁530021

自转录活性调节区测序(self-transcribing active regulatory region sequencing,STARR-seq)是一种可发现并同时验证全基因组增强子活性的高通量测序方法。其原理为:将待验证序列插入质粒载体并电转入细胞中,该序列在作为增强子提高靶... 详细信息

自转录活性调节区测序(self-transcribing active regulatory region sequencing,STARR-seq)是一种可发现并同时验证全基因组增强子活性的高通量测序方法。其原理为:将待验证序列插入质粒载体并电转入细胞中,该序列在作为增强子提高靶基因转录的同时,其本身也作为靶基因被增强转录。通过对转录组进行测序,并对比未插入片段的测序结果,可获得增强子在基因组位置及活性的信息。在传统增强子研究方法中,通过对染色质开放区域和转录活性区域进行测序以预测增强子,但只能逐一验证预测结果,无法高通量验证增强子活性。STARR-seq技术解决了上述缺陷,可在对全基因组增强子高通量挖掘的同时,对其活性进行可靠的验证。自STARR-seq技术发明以来,已被广泛运用于不同物种与细胞中的增强子发现及活性验证研究。本文对传统增强子预测方法以及STARR-seq技术的基本原理、发展历史和具体运用进行了介绍,并对其发展前景进行展望,以期为后续增强子相关领域研究人员提供参考。

关键词：自转录活性区域测序增强子转录调控单核苷酸多态性

白藜芦醇激活自噬抑制焦亡减轻脑缺血再灌注损伤

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中国临床药理学与治疗学 2024年第11期 1240-1248页

作者：张小良高赛红杨迎春汪庆钰贾书雨山西医科大学汾阳学院解剖教研室山西医科大学汾阳学院

目的：研究白藜芦醇（Res）可能通过激活自噬抑制焦亡减轻脑缺血再灌注损伤（CIRI）。方法：100只SD大鼠采用线栓法制备大脑中动脉栓塞/再灌注（MCAO/I）模型，手术失败大鼠剔除，按照随机原则分为7组：假手术（Sham）组、模型对照（Mo... 详细信息

目的：研究白藜芦醇（Res）可能通过激活自噬抑制焦亡减轻脑缺血再灌注损伤（CIRI）。方法：100只SD大鼠采用线栓法制备大脑中动脉栓塞/再灌注（MCAO/I）模型，手术失败大鼠剔除，按照随机原则分为7组：假手术（Sham）组、模型对照（Model）组、白藜芦醇预处理（Res）组、3-甲基腺嘌呤（3-MA）组、白藜芦醇+3-甲基腺嘌呤（Res+3-MA）组、Z-YVAD组、Res+Z-YVAD组，每组12只。采用Longa评分、TTC染色及测量脑梗死体积评估大鼠神经功能缺损及脑损伤；免疫组化、免疫荧光及免疫印迹法检测自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-II、P62及焦亡相关蛋白NLRP3、caspase-1、GSDMD、IL-1β的表达。结果：白藜芦醇预处理可以改善大鼠神经功能缺损，减小脑梗死体积，上调自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-II，下调P62及焦亡相关蛋白NLRP3、caspase-1、GSDMD、IL-1β的表达。自噬抑制剂3-MA可以完全逆转Res的上述作用。加入焦亡抑制剂Z-YVAD后，自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-II及P62变化不明显，NLRP3、caspase-1、GSDMD、IL-1β的表达明显减少，大鼠神经功能缺损加重，脑梗死体积增大。结论：Res可能通过激活自噬抑制焦亡减轻脑缺血再灌注损伤，可能与P62蛋白的调控有关。

关键词：白黎芦醇缺血再灌注损伤自噬焦亡

肿瘤体积对宫颈癌近期疗效及近距离放疗的影响

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中华放射肿瘤学杂志 2024年第2期33卷 130-136页

作者：李书桢罗冬妮容雁蔡志福庞业滨高琨广西医科大学附属肿瘤医院妇科南宁530021 广西医科大学研究生院南宁530021

目的探讨肿瘤体积对行根治性放化疗的局部晚期宫颈癌患者的放疗剂量和疗效的影响。方法回顾性分析2019年11月至2022年11月于广西医科大学附属肿瘤医院诊断为ⅡB-ⅣA期宫颈癌并行根治性放化疗的126例患者资料。通过Jamovi软件计算得到外... 详细信息

目的探讨肿瘤体积对行根治性放化疗的局部晚期宫颈癌患者的放疗剂量和疗效的影响。方法回顾性分析2019年11月至2022年11月于广西医科大学附属肿瘤医院诊断为ⅡB-ⅣA期宫颈癌并行根治性放化疗的126例患者资料。通过Jamovi软件计算得到外照射放疗前、后肿瘤体积(pre-TV、post-TV)和肿瘤体积缩减率(TVRR)的截断值,并通过单因素和多因素分析探讨pre-TV、post-TV和TVRR对近期疗效、无进展生存(PFS)、近距离放疗(BT)方式、高危临床靶区(HR-CTV)和危及器官(OAR)剂量的影响。结果pre-TV≥67.03 cm^(3)、post-TV≥14.88 cm^(3)为6个月PFS和客观缓解率(ORR)的不良预后因素(P0.05)。post-TV0.05)。同期化疗次数≥4次组与<4次组间的6个月PFS和TVRR差异均无统计学意义。结论pre-TV和post-TV为局部晚期宫颈癌近期疗效和BT方式选择的影响因素。post-TV为独立预后因素,也间接影响了HR-CTV D90%和膀胱D_(2cm^(3))的剂量。增加同期化疗次数(≥4次)并不能提高TVRR和近期疗效。

关键词：宫颈肿瘤肿瘤负担近距离放射疗法剂量分布危及器官

SPARCL1在动脉粥样硬化斑块形成中的作用研究

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安徽医科大学学报 2024年第3期59卷 473-478页

作者：程煦陈心严陈婷婷程筱雯朱华庆葛圣林安徽医科大学第一附属医院心脏外科合肥230022 安徽医科大学第一附属医院检验科合肥230022 安徽医科大学病理教研室合肥230032 安徽医科大学生化与分子生物学教研室合肥230032

目的探讨富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白类似蛋白1(SPARCL1)对动脉粥样硬化(AS)斑块形成的影响。方法采用病例对照研究,选取394例AS确诊患者作为病例组,年龄、性别相匹配的394例健康对照者作为对照组。利用酶联免疫吸附试验测定血清SPARCL... 详细信息

目的探讨富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白类似蛋白1(SPARCL1)对动脉粥样硬化(AS)斑块形成的影响。方法采用病例对照研究,选取394例AS确诊患者作为病例组,年龄、性别相匹配的394例健康对照者作为对照组。利用酶联免疫吸附试验测定血清SPARCL1表达水平;免疫组织化学实验评估SPARCL1蛋白在AS斑块区的表达水平及定位,同时检测AS患者和正常对照人群外周血的中性粒细胞及单核细胞的SPARCL1蛋白表达情况;构建SPARCL1过表达及抑制表达的重组腺病毒载体,以小鼠巨噬细胞(J774A.1)为靶细胞,进行细胞划痕实验观察SPARCL1对细胞迁移的影响。结果AS患者组的血清SPARCL1水平低于健康组(P生发展。

关键词： SPARCL1 动脉粥样硬化巨噬细胞 SPARCL1重组腺病毒细胞划痕实验