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没药倍半萜化合物M36抑制人肝癌细胞生长的作用

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中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 80-87页

作者：刘东晓刘亚鑫黄惠铭欧阳里山王超超谢锦欣王龙燕魏雪娇谭鹏屠鹏飞李军胡仲冬北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京100029

目的:针对从没药Myrrha中分离得到的倍半萜化合物M36对人肝癌Hep G2细胞的抗肿瘤活性开展观察和研究。方法:分别加入不同浓度M36(0、2、4、6、8、10μmol·L^(-1))干预Hep G2细胞。首先采用噻唑蓝(MTT)比色法、集落形成实验、Ed U增殖... 详细信息

目的:针对从没药Myrrha中分离得到的倍半萜化合物M36对人肝癌Hep G2细胞的抗肿瘤活性开展观察和研究。方法:分别加入不同浓度M36(0、2、4、6、8、10μmol·L^(-1))干预Hep G2细胞。首先采用噻唑蓝(MTT)比色法、集落形成实验、Ed U增殖实验来检测M36对人肝癌Hep G2细胞的增殖影响。再利用Hoechst染色、流式细胞术和蛋白免疫印迹法研究M36对人肝癌Hep G2细胞凋亡的影响。通过采用吖啶橙染色和蛋白免疫印迹法检测M36是否激活人肝癌Hep G2细胞发生自噬。最后借助蛋白免疫印迹法来检测相关通路的蛋白表达水平。结果:与空白组比较,M36能显著抑制人肝癌Hep G2细胞增殖(P<0.01),给药处理48 h的半数抑制浓度(IC_(50))为5.03μmol·L^(-1),且具有浓度和时间依赖性。M36还能够诱导人肝癌Hep G2细胞凋亡和自噬。8μmol·L^(-1)M36作用于Hep G2细胞48 h,其细胞凋亡率为(42.03±9.65)%(P<0.01)。与空白组比较,M36组(4、8μmol·L^(-1))Hep G2细胞孵育48 h,剪切的聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(cleaved-PARP)蛋白水平显著上调(P<0.01)。吖啶橙染色结果显示,与空白组比较,M36组(4、8μmol·L^(-1))Hep G2细胞孵育48 h自噬被显著激活(P<0.01),并从微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)蛋白水平上调中得到进一步验证(P<0.01)。蛋白免疫印迹实验结果显示,与空白组比较,M36组磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)及其下游核转录因子c-Jun、p-c-Jun蛋白水平均发生明显上调(P<0.05,P<0.01),说明其作用机制可能与上调MAPK信号通路有关。结论:没药倍半萜化合物M36能够抑制人肝癌细胞增殖,促进其凋亡和自噬,其机制可能与激活MAPK信号通路有关。

关键词：没药倍半萜化合物M36 人肝癌HepG2细胞凋亡自噬丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路

从获得性脑淀粉样血管病病机探讨“毒损脑络”的新内涵

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北京中医药大学学报 2024年第5期47卷 598-602页

作者：张帆刘佳霖姜俊辰张元馨陈俊龙刘金民北京中医药大学东方医院北京100078 北京中医药大学研究生院北京中医药大学东直门医院

获得性脑淀粉样血管病作为近年来发现的脑血管疾病,其传播途径与医源性因素相关。本文以获得性脑淀粉样血管病为研究对象,深入探讨王永炎院士提出的“毒损脑络”理论在中风病研究中的新应用及其深层含义。从“毒损脑络”的视角出发,综... 详细信息

获得性脑淀粉样血管病作为近年来发现的脑血管疾病,其传播途径与医源性因素相关。本文以获得性脑淀粉样血管病为研究对象,深入探讨王永炎院士提出的“毒损脑络”理论在中风病研究中的新应用及其深层含义。从“毒损脑络”的视角出发,综合分析获得性脑淀粉样血管病的发病原因及其病理机制,强调了外毒、伏毒和浊毒等在本病发病机制中的重要性,揭示了“毒损脑络”为获得性脑淀粉样血管病的核心病机,在此基础上,提出了“毒损脑络”的新内涵:一为“毒”既包括内毒也包括外毒,二为“毒损脑络”新内涵的具体延伸,指导了中风病理论研究、临床治疗、预防策略的完善,也促进对中风病的深层次理解。从“毒损脑络”认识获得性脑淀粉样血管病的方法不仅展现了中医学理论与现代生物医学的有效融合,也为临床诊治本病提供了思路与参考。

关键词：毒损脑络外毒获得性脑淀粉样血管病医源性脑淀粉样血管病脑淀粉样血管病

一种新型查耳酮衍生物C13通过ErbB4/PI3K/AKT信号通路抑制人胃癌细胞的生长

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药学学报 2024年第4期59卷 957-964页

作者：谭鹏张云封王龙燕黄惠铭王飞魏雪娇王柱国李军胡仲冬北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京100029

3ʹ-羟基-4ʹ-甲氧基-2-羟基-5-溴查耳酮(以下简称C13)是本课题组对龙血竭抗肿瘤活性化合物DHMMF进行结构修饰过程中获得的一个新型查耳酮衍生物。本研究探讨了C13对人胃癌HGC-27、AGS细胞增殖、凋亡的影响及其潜在的作用机制。首先采用... 详细信息

3ʹ-羟基-4ʹ-甲氧基-2-羟基-5-溴查耳酮(以下简称C13)是本课题组对龙血竭抗肿瘤活性化合物DHMMF进行结构修饰过程中获得的一个新型查耳酮衍生物。本研究探讨了C13对人胃癌HGC-27、AGS细胞增殖、凋亡的影响及其潜在的作用机制。首先采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)、集落形成实验、5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(5-ethynyl-2ʹ-deoxyuridine,EdU)染色法发现C13能显著抑制人胃癌HGC-27、AGS细胞的增殖能力。采用流式细胞术和免疫印迹法检测发现C13能诱导人胃癌HGC-27、AGS细胞发生凋亡,并上调剪切的聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(cleaved-poly ADP-ribose polymerase,cleaved-PARP)的蛋白水平。转录组测序分析结果显示C13可能通过调控人表皮生长因子受体4/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(Erb-B2 receptor tyrosine kinase 4/phosphoinositide 3-kinase/AKT,ErbB4/PI3K/AKT)信号通路发挥抗胃癌作用。最后免疫印迹实验结果表明,C13处理后能下调人胃癌细胞中ErbB4总蛋白及磷酸化水平,并能够抑制其下游PI3K及AKT蛋白磷酸化水平,进一步验证了转录组测序结果。综上所述,新型查耳酮衍生物C13能够显著抑制人胃癌HGC-27、AGS细胞增殖并诱导其发生凋亡,其机制可能与下调ErbB4/PI3K/AKT信号通路有关。本研究能够为胃癌治疗提供一个候选研究药物。

关键词：查耳酮衍生物C13 人胃癌细胞增殖凋亡 ErbB4/PI3K/AKT信号通路

马兜铃酸Ⅰ-脱氧核苷结合物对照品制备方法研究

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中国中药杂志 2024年第10期49卷 2728-2733页

作者：杨晓芹屈碧琼刘洁胡信全肖红斌北京中医药大学中药分析与转化研究中心北京100029 北京中医药大学中药学院北京100029 北京中医药大学北京中医药研究院北京102488 浙江工业大学化学工程学院浙江杭州310014

建立了以马兜铃内酰胺Ⅰ为原料的溴化及交叉偶联二步有机合成工艺,粗产物经过4种溶剂除杂纯化,制得马兜铃酸Ⅰ(aristolochic acidsⅠ,AAⅠ)的3种脱氧核苷结合物产物AAⅠ-dA、AAⅠ-dG、AAⅠ-dC,2步反应的收率均可达到90%,产物纯度均大于9... 详细信息

建立了以马兜铃内酰胺Ⅰ为原料的溴化及交叉偶联二步有机合成工艺,粗产物经过4种溶剂除杂纯化,制得马兜铃酸Ⅰ(aristolochic acidsⅠ,AAⅠ)的3种脱氧核苷结合物产物AAⅠ-dA、AAⅠ-dG、AAⅠ-dC,2步反应的收率均可达到90%,产物纯度均大于98%,满足中药化学对照品定性定量要求。该工艺重复性好,适合放大制备,具有制备步骤短及纯化操作高效、勿需色谱分离、产品收率及纯度高等特点。相比其他方法,该方法优势显著,更适于马兜铃酸Ⅰ-脱氧核苷结合物化学对照品制备。新开发的工艺为马兜铃酸Ⅰ-脱氧核苷结合物对照品的制备提供了技术支撑,为相关毒理学研究提供了坚实的物质基础。

关键词：马兜铃酸Ⅰ-脱氧核苷结合物合成制备溴代反应偶联反应

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韩振蕴教授治疗慢性失眠的用药经验

辽宁中医杂志 2024年

作者：牟雷马华萍吴彬于珊珊胡文悦郑聪榆韩振蕴北京中医药大学深圳医院(龙岗) 北京中医药大学

目的分析韩振蕴教授治疗慢性失眠的用药规律及特点。方法收集并整理韩振蕴教授治疗慢性失眠的临床处方，建立数据库，将纳入的有效处方运用R语言进行分析，应用频数统计、关联规则和聚类分析等数据挖掘方法总结其用药规律。结果最终... 详细信息

目的分析韩振蕴教授治疗慢性失眠的用药规律及特点。方法收集并整理韩振蕴教授治疗慢性失眠的临床处方，建立数据库，将纳入的有效处方运用R语言进行分析，应用频数统计、关联规则和聚类分析等数据挖掘方法总结其用药规律。结果最终获得处方399首，涉及中药151味，使用频次前10的药物为炙甘草、酸枣仁、柴胡、当归、党参、茯神、白术、木香、龙骨、牡蛎，药性以平、温居多，药味以甘、苦居多，归经以脾、心、肝为主，功效主要为补虚安神。通过关联规则分析得到核心药物是“茯神→酸枣仁”，核心组合为“酸枣仁+炙甘草→当归”。聚类分析获得功效分别为宁心安神，疏肝理气等8个药物组合。结论韩振蕴教授治疗慢性失眠主要从心、脾、肝三脏论治，治法以益气健脾、疏肝解郁、养血安神为主。

关键词：慢性失眠用药经验 R语言韩振蕴

益气活血方辅助治疗慢性肺源性心脏病心力衰竭气虚血瘀型患者58例随机对照临床研究

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中医杂志 2024年第10期65卷 1019-1025页

作者：陈伟涛曾燕鹏苏连华张红王惠欣张娟娟北京中医药大学房山医院北京房山102400 北京中医药大学东直门医院

目的探讨益气活血方辅助治疗慢性肺源性心脏病心力衰竭气虚血瘀型患者的临床疗效和安全性。方法将120例慢性肺源性心脏病心力衰竭气虚血瘀型患者随机分为治疗组和对照组各60例,对照组给予常规西医基础治疗,治疗组在对照组基础上加用益... 详细信息

目的探讨益气活血方辅助治疗慢性肺源性心脏病心力衰竭气虚血瘀型患者的临床疗效和安全性。方法将120例慢性肺源性心脏病心力衰竭气虚血瘀型患者随机分为治疗组和对照组各60例,对照组给予常规西医基础治疗,治疗组在对照组基础上加用益气活血方配方颗粒口服,每日1剂。两组疗程均为8周。比较两组患者治疗前后中医症状积分、明尼苏达生活质量量表(MLHF-Q)评分、超声心动图指标[包括右室舒张末期内径(RVEDD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左房舒张末期内径(LAEDD)、肺动脉平均压(PAMP)]、六分钟步行距离(6MWD)、血浆N-末端B型利钠肽原(NT-ProBNP)水平。治疗后比较两组患者心功能疗效及中医证候疗效,并观察不良事件发生情况。结果治疗组和对照组各脱落2例,两组各58例纳入分析。治疗组心功能疗效及中医证候疗效总有效率分别为91.38%(53/58)及96.55%(56/58),均高于对照组的70.69%(41/58)、48.27%(28/58)(P中医症状积分、RVEDD水平明显降低,两组治疗后MLHF-Q评分、血浆NT-ProBNP水平、PAMP降低,6MWD升高(P中医症状积分、MLHF-Q评分、血浆NT-ProBNP水平、PAMP水平低于对照组,6MWD高于对照组(P0.05)。结论在西医常规治疗基础上口服益气活血方可以显著提高慢性肺源性心脏病心力衰竭气虚血瘀型患者临床疗效,改善临床症状和心功能,提升患者生活质量和运动耐量,且安全性较好。

关键词：慢性肺源性心脏病心力衰竭气虚血瘀益气活血方心功能生活质量运动耐量肺动脉高压

基于患者队列的随机对照试验设计:队列内试验(TwiCs)的方法与应用

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中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 96-102页

作者：王禹毅施泽阳李恪丞卜志军王雪惠王彬刘建平刘兆兰北京中医药大学循证医学中心北京100029 重庆市中医院重庆400011 北京中医药大学东直门医院北京101121

队列内试验(TwiCs)是随机对照试验的一种衍生设计方法,目前已在肿瘤、心血管疾病等慢性疾病领域内广泛应用。TwiCs设计基础是一个特定疾病的前瞻性队列,当要实施随机对照试验时,从队列中随机抽样部分符合纳入排除标准的患者接受“试验... 详细信息

队列内试验(TwiCs)是随机对照试验的一种衍生设计方法,目前已在肿瘤、心血管疾病等慢性疾病领域内广泛应用。TwiCs设计基础是一个特定疾病的前瞻性队列,当要实施随机对照试验时,从队列中随机抽样部分符合纳入排除标准的患者接受“试验干预”,而队列中符合纳入排除标准但未被抽样的患者继续接受常规治疗并作为对照组。通过比较试验组和对照组干预措施的疗效差异,来评估干预措施的效果。在队列内,可以重复执行同样的过程来实施多个随机对照试验(RCTS),以评估不同干预措施或比较不同剂量或时机的干预效果。相较经典随机对照试验,TwiCs利用队列更易招募患者,具有更高的外部真实性,为提升随机对照试验的效率和适用性提供了临床研究新范式。但同时TwiCs也可能面临队列内患者依从性不高的挑战,需要研究者在TwiCs设计和操作过程中采取有效措施进行控制。该文重点介绍了TwiCs实施过程中的方法学要点,包括多阶段知情同意(患者进入队列、进入试验组、试验结束后3个阶段分别进行知情同意)、随机程序(只从队列中随机抽样接受“试验干预”的患者)、样本量计算、统计分析方法,对比了TwiCs与经典RCTS的差异,并以实例说明TwiCs研究设计与分析的过程,以期为广大临床研究者提供新的研究思路和方法。

关键词：队列内试验队列多重随机对照试验患者队列随机抽样多阶段知情同意

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针刺介入时机对突发性聋患者疗效的影响

针刺研究 2024年第6期49卷 618-624页

作者：石安妮李阳张佳佳邢御洪玉颖白鹏北京中医药大学东直门医院针灸科北京100700 北京中医药大学第三附属医院针灸科北京100029

目的:研究不同针刺介入时机治疗突发性聋患者的临床疗效差异。方法:纳入突发性聋患者(87例,脱落1例),根据针刺介入时机分为早暴露组和晚暴露组,早暴露组为发病14 d内介入针刺治疗,晚暴露组为发病14 d后介入针刺治疗。应用倾向性评分匹... 详细信息

目的:研究不同针刺介入时机治疗突发性聋患者的临床疗效差异。方法:纳入突发性聋患者(87例,脱落1例),根据针刺介入时机分为早暴露组和晚暴露组,早暴露组为发病14 d内介入针刺治疗,晚暴露组为发病14 d后介入针刺治疗。应用倾向性评分匹配法均衡组间基线,最终成功匹配30对患者,每组各30例。两组患者均在西医基础治疗同时给予“颈部七线法”针刺治疗,每周针刺3次,隔日1次,共12次。治疗前、治疗后及治疗3个月后观察患者耳鸣残疾评估量表(THI)评分;治疗前后分别对患者进行纯音测听,评价临床疗效;采用多因素Logistic回归分析倾向性评分匹配前可能影响疗效的因素对临床疗效的影响。结果:与本组治疗前比较,两组患者治疗后及随访时THI评分均下降(P<0.05);与同时点晚暴露组比较,早暴露组治疗后及随访时THI评分均降低(P<0.05)。早暴露组总有效率为80.00%(24/30),晚暴露组为53.33%(16/30),早暴露组总有效率高于晚暴露组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,本研究中突发性聋的分型及中药使用情况并非影响总有效率的独立因素。结论:介入时机是影响针刺治疗突发性聋患者听力疗效及耳鸣残疾程度的重要因素,早期针刺介入的疗效优于晚介入。

关键词：突发性聋针刺介入时机颈部七线法耳鸣残疾评估量表

对膝骨关节炎肝肾亏虚证和痰瘀互结证患者关节液中MMP-13、TGF-β1含量及关节软骨中Smad3磷酸化的研究

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北京中医药大学学报 2024年第8期47卷 1111-1118页

作者：刘雨煊刘向春亓建陈婧刘勤哲王乾顺吕天成蓝典叶超北京中医药大学东直门医院北京100700 北京中医药大学第三附属医院

目的比较膝骨关节炎肝肾亏虚证和痰瘀互结证患者关节液中基质金属蛋白酶13(MMP-13)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量、关节软骨Smad3磷酸化(P-Smad3)程度及其与证候的相关性。方法采用横断面现场调查研究的方法,收集2019年9月—2023年... 详细信息

目的比较膝骨关节炎肝肾亏虚证和痰瘀互结证患者关节液中基质金属蛋白酶13(MMP-13)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量、关节软骨Smad3磷酸化(P-Smad3)程度及其与证候的相关性。方法采用横断面现场调查研究的方法,收集2019年9月—2023年2月于北京中医药大学东直门医院骨伤科住院的膝骨关节炎患者。共纳入112例膝骨关节炎患者,其中,肝肾亏虚证63例、痰瘀互结证49例。分别利用视觉模拟评分法(VAS)、Lysholm膝关节评分量表及Kellgren-Lawrence(K-L)分级标准对膝关节疼痛强度、功能及影像学结果进行量化;应用中医证候评分量表辨识及量化证候;以免疫组化法测定关节软骨Smad3磷酸化特点,ELISA测定关节液MMP-13和TGF-β1含量,然后分析其水平特点及其与证候程度间的相关性。结果①膝骨关节炎肝肾亏虚证与痰瘀互结证患者VAS评分、Lysholm评分、K-L分级差异无统计学意义。②与痰瘀互结证患者比较,肝肾亏虚证患者关节液MMP-13含量较高,而关节液TGF-β1含量较低(P中医证候评分呈正相关性(r=0.292,P=0.020),关节液TGF-β1含量与中医证候评分呈负相关性(r=-0.781,P中医证候评分呈正相关性(r=0.936,P<0.001)。④膝骨关节炎肝肾亏虚证患者关节软骨P-Smad3表达低于痰瘀互结证患者(P<0.05)。结论膝骨关节炎肝肾亏虚证和痰瘀互结证患者关节液TGF-β1、MMP-13含量和P-Smad3表达不同,与不同证候下的病因病机分析相一致。肝肾亏虚证患者关节液TGF-β1、MMP-13水平可以在一定程度上反映证候的严重程度,其作用机制可能与TGF-β/Smad信号通路激活水平受到抑制有关,此研究丰富了证候基础的研究内容。

关键词：膝骨关节炎肝肾亏虚证痰瘀互结证转化生长因子-β1 基质金属蛋白酶-13 Smad磷酸化

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