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畜禽肌纤维发育相关细胞种类及鉴定方法的研究进展

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畜牧兽医学报 2024年

作者：吴丹妮谢遇春秦箐张崇妍徐晓龙赵丹兰茗熙杨继徐松松刘志红内蒙古农业大学河北科技师范学院中国农业大学农业农村部肉羊遗传育种重点实验室内蒙古自治区羊遗传育种与繁殖重点实验室

肌细胞（又名肌纤维）是组成骨骼肌的基本单位，约占畜禽机体的50%左右，与畜禽产肉性能、骨骼保护密切相关，对调节畜禽机体代谢和内分泌有重要作用，同时也为畜禽的运动提供了动力。骨骼肌是一种较为复杂的组织，而组成这些组织的基... 详细信息

肌细胞（又名肌纤维）是组成骨骼肌的基本单位，约占畜禽机体的50%左右，与畜禽产肉性能、骨骼保护密切相关，对调节畜禽机体代谢和内分泌有重要作用，同时也为畜禽的运动提供了动力。骨骼肌是一种较为复杂的组织，而组成这些组织的基本单位是肌细胞，骨骼肌在发育时期需要多种类型的单核和多核细胞相互作用，这是形成优质肉类的关键。近些年，随着科学技术的快速发展，对鉴定骨骼肌发育相关细胞有了更多种且全面的技术，而单细胞测序技术在其中运用的最为广泛，它的运用对组成骨骼肌的细胞类型和相关细胞发育异质性的研究提供了技术支持，对肉品质的研究有重大意义。本文综述了通过细胞形态学观察、分子标记物、免疫组化、免疫荧光、原位杂交、单细胞测序的方法鉴定与骨骼肌发育过程相关的细胞，归纳与骨骼肌发育相关细胞的标记基因，为了解骨骼肌的结构和功能，为探索骨骼肌发育机制提供参考，为肉品质的研究提供理论基础，也在不同品种的个体选育中具有重要意义和实践价值。

关键词：骨骼肌骨骼肌发育细胞鉴定

梅迪-维斯纳病毒在绵羊4种细胞中的增殖特性

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中国兽医科学 2024年第6期54卷 833-844页

作者：方卉史晓娜陈思旭刘淑英内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业农村部动物临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区基础兽医学重点实验室内蒙古呼和浩特010018

为了解梅迪-维斯纳病毒(MVV)感染绵羊不同组织细胞的偏好性及其在不同细胞中的增殖情况,将MVV A2毒株接种绵羊成纤维细胞(OAR-L1)、绵羊脉络丛细胞(SCP)、绵羊滋养层细胞(STCs)、羊胎肾细胞(FLK-BLV),通过间接免疫荧光试验、PCR、Wester... 详细信息

为了解梅迪-维斯纳病毒(MVV)感染绵羊不同组织细胞的偏好性及其在不同细胞中的增殖情况,将MVV A2毒株接种绵羊成纤维细胞(OAR-L1)、绵羊脉络丛细胞(SCP)、绵羊滋养层细胞(STCs)、羊胎肾细胞(FLK-BLV),通过间接免疫荧光试验、PCR、Western-blot试验观察不同时间点细胞病变特征及检测MVV感染细胞后CA蛋白相对表达量,判断病毒在细胞中增殖情况。结果显示,SCP、OAR-L1这2种细胞在接毒组中可持续增殖,SCP出现多核合胞体细胞、拉丝等病变,并且细胞随着病毒感染时间的延长死亡程度增加;OAR-L1出现拉丝且细胞随着病毒感染时间延长死亡明显,未出现典型病变多核合胞体,对照组及空白组细胞状态良好,未见显著差异。FLK-BLV、STCs这2种细胞接毒组、对照组及空白组均未见明显变化。间接免疫荧光结果显示,SCP、OAR-L1这2种细胞接毒组出现绿色荧光,而FLK-BLV、STCs接毒组与对照组、空白组均未出现绿色荧光。SCP、OAR-L1细胞随着病毒感染时间延长,绿色荧光面积逐渐扩大,SCP接毒9 d后绿色荧光面积达到90%以上,为最佳感染时间;OAR-L1接毒12 d后绿色荧光面积达到90%以上,为最佳感染时间。Western-blot结果显示在25 ku处有明显条带,经ImageJ灰度值分析,CA蛋白相对表达量水平随着接毒时间的延长逐渐上调,与对照组和空白组有极显著差异(P研究发现SCP、OAR-L1这2种细胞在感染MVV A2毒株后随着感染时间的延长病毒蛋白表达量逐渐升高,MVV在以上2种细胞中可持续感染,并找到1株细胞系可以持续感染生产慢病毒。

关键词：梅迪-维斯纳病毒细胞培养增殖特性致病变特性

5个SNP突变位点对乌珠穆沁羊不同时期体重的影响

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中国科学：生命科学 2024年第5期54卷 951-961页

作者：刘治辰秦箐张崇妍徐晓龙兰茗熙阿拉坦苏和王志新刘志红内蒙古农业大学动物科学学院呼和浩特010018 内蒙古自治区羊遗传育种与繁殖重点实验室呼和浩特010018 农业农村部肉羊遗传育种重点实验室呼和浩特010018 东乌珠穆沁旗乌珠穆沁羊原种场东乌珠穆沁旗026300

绵羊的体重大小能直接反映羊只的生长速度、肥育速度,也是衡量肉羊生长性能的重要指标.本研究以乌珠穆沁羊为研究对象.挑选出100个与绵羊体型相关的SNP位点,同时采集252只乌珠穆沁羊的血液和不同时期体重数据,使用MassARRAY基因分型技... 详细信息

绵羊的体重大小能直接反映羊只的生长速度、肥育速度,也是衡量肉羊生长性能的重要指标.本研究以乌珠穆沁羊为研究对象.挑选出100个与绵羊体型相关的SNP位点,同时采集252只乌珠穆沁羊的血液和不同时期体重数据,使用MassARRAY基因分型技术对这些绵羊在选定的SNP位点进行基因分型,并将体重数据与基因分型结果进行关联分析.结果表明,本研究共验证出5个突变位点与乌珠穆沁羊不同时期体重显著相关.进一步对3个错义突变位点进行蛋白结构预测分析发现,3个突变位点CDS序列改变导致其蛋白质三级结构发生不同程度改变,进而导致个体体重差异.本研究旨在挖掘与乌珠穆沁羊生长性状相关的特征位点,为乌珠穆沁羊今后的精准选育提供参考,以期推动乌珠穆沁羊产业的发展.

关键词：乌珠穆沁羊单核苷酸多态性错义突变结构预测 MassARRAY基因分型

基于转录组学分析自然感染绵羊肺腺瘤病毒患羊肺肿瘤组织中转录差异基因及病毒致瘤机制的研究

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中国预防兽医学报 2024年第2期46卷 185-194页

作者：段续接杨惠孙志伟杜晓悦张培梁浚哲刘淑英内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区基础兽医学重点实验室内蒙古呼和浩特010018

绵羊肺腺瘤病(OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的绵羊传染性肺肿瘤疾病。为探究JSRV对绵羊肺脏的致瘤机制,本研究从自然感染JSRV的羊(OPA患羊)肺肿瘤组织和健康羊肺组织中提取总RNA,构建二者的cDNA文库后采用Illumina Hi Seq 4000高... 详细信息

绵羊肺腺瘤病(OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的绵羊传染性肺肿瘤疾病。为探究JSRV对绵羊肺脏的致瘤机制,本研究从自然感染JSRV的羊(OPA患羊)肺肿瘤组织和健康羊肺组织中提取总RNA,构建二者的cDNA文库后采用Illumina Hi Seq 4000高通量测序平台进行转录组学测序(RNA-Seq),采用DESeqR筛选健康绵羊与患病绵羊肺组织中的转录差异基因,并以P研究进一步通过RT-qPCR、western blot检测Hippo信号通路核心蛋白哺乳动物STE20样蛋白激酶1/2 (MST1/2)、大肿瘤抑制因子1/2 (LATS1/2)、YES相关蛋白1/2 (YAP1)在两组绵羊肺组织样品中的转录及表达水平和YAP1的磷酸化水平(p-YAP1);采用免疫组化试验(IHC)检测Hippo信号通路中上述核心蛋白在两组绵羊肺组织中的表达及定位。RT-qPCR结果显示,与对照组相比,OPA羊肺组织中MST1和YAP1 mRNA的转录水平均极显著上调(P研究为JSRV致瘤机制提供了新的研究基础与研究思路和方向。

关键词：绵羊肺腺瘤病绵羊肺腺瘤病毒转录组学分析 Hippo信号通路

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灰树花功能性成分及其生物活性的研究进展

中国饲料 2024年第15期 167-173页

作者：郑越杜涓刘娜安晓萍王园齐景伟内蒙古农业大学动物科学学院内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区草食家畜饲料技术研究中心/国家乳业技术创新中心奶牛繁育与养殖技术研究中心/智慧畜牧自治区高等学校重点实验室/内蒙古自治区高校智慧畜牧集成攻关大平台内蒙古呼和浩特010018

我国拥有较多的食用菌品种,且其为发展现代高效农业的主导产业。灰树花是珍贵的食用菌资源之一,具有很高的药用价值和经济价值,已为世人所重视。近年来,关于灰树花功能性成分的研究主要集中在多糖、酚酸等化学成分,并发现其具有免疫调节... 详细信息

我国拥有较多的食用菌品种,且其为发展现代高效农业的主导产业。灰树花是珍贵的食用菌资源之一,具有很高的药用价值和经济价值,已为世人所重视。近年来,关于灰树花功能性成分的研究主要集中在多糖、酚酸等化学成分,并发现其具有免疫调节,抗肿瘤,抗菌消炎的生物活性。与此同时,灰树花还拥有自身的酶学系统,对食品工业和生物能源有一定作用,在生产实践中具有十分广泛的应用前景。本文具体介绍灰树花的功能性成分,并对其多种生物活性功能进行总结,旨在为灰树花的进一步开发利用提供参考。

关键词：灰树花功能性物质生物学功能

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反刍动物冷应激及智能监测研究进展

中国畜牧杂志 2024年第5期60卷 34-42页

作者：苏少晖胡宇超王园安晓萍齐景伟内蒙古农业大学动物科学学院内蒙古呼和浩特010018 智慧畜牧自治区高等学校重点实验室内蒙古自治区高校智慧畜牧集成攻关大平台内蒙古自治区草食家畜饲料技术研究中心国家乳业技术创新中心奶牛繁育与养殖技术研究中心内蒙古呼和浩特010018

在低温寒冷环境下,反刍动物的冷应激时有发生,冷应激影响动物机体的多项指标与功能,在降低动物健康水平与动物福利的同时,还严重影响到养殖场的经济效益。随着反刍动物规模化健康养殖的快速发展,具有高效率、低人工优点的动物智能监测... 详细信息

在低温寒冷环境下,反刍动物的冷应激时有发生,冷应激影响动物机体的多项指标与功能,在降低动物健康水平与动物福利的同时,还严重影响到养殖场的经济效益。随着反刍动物规模化健康养殖的快速发展,具有高效率、低人工优点的动物智能监测手段愈加成熟。本文结合国内外现有研究,综述了冷应激对反刍动物的影响以及对冷应激智能监测的研究进展,为保障恶劣环境下动物的健康福利,提高养殖场的经济效益,以及未来的反刍动物冷应激研究提供参考。

关键词：冷应激反刍动物应激影响智能监测

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Ghrelin通过下丘脑外侧核CART神经元影响小鼠采食和体质量

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中国兽医学报 2024年第6期44卷 1268-1273页

作者：曹晓娟刘昊东李鹏辉李嘉成樊奇王星陈玉洁海日汗张小宇杜晨光内蒙古农业大学职业技术学院内蒙古农业大学兽医学院内蒙古自治区草食家畜兽医基础与疫病防控重点实验室/动物胚胎与发育工程自治区高等学校重点实验室

生长素释放肽（ghrelin）是一种胃产生的激素，作用于中枢后调节机体能量代谢。可卡因苯丙胺调节转录肽（CART）神经元参与摄食行为和能量平衡调节过程。已知CART神经元受激素影响调节能量稳态，但Ghrelin是否通过影响CART神经元发挥促... 详细信息

生长素释放肽（ghrelin）是一种胃产生的激素，作用于中枢后调节机体能量代谢。可卡因苯丙胺调节转录肽（CART）神经元参与摄食行为和能量平衡调节过程。已知CART神经元受激素影响调节能量稳态，但Ghrelin是否通过影响CART神经元发挥促食欲功能尚不清楚。因此，本研究重点关注了Ghrelin调节摄食和体质量过程中下丘脑背内侧核（DMH）CART神经元的作用。首先通过免疫荧光确定CART的全脑表达。然后评估了腹腔注射Ghrelin后对DMHCART神经元表达的影响，最后将Ghrelin注射到DMH后测量了小鼠摄食量和体质量变化。结果显示，在内侧视前核（MPA）、弓状核（ARC）、下丘脑背内侧核（DMH）、丘脑室旁核（PVT）和中缝核（ROb）检测到CART免疫阳性神经元和纤维。与对照组相比，外周注射Ghrelin显著增加DMHCART免疫阳性神经元表达（P=0.037 3）。DMH注射Ghrelin导致体质量（P=0.004 0）和采食（P=0.023 1）增加。该研究证实了DMHCART神经元受Ghrelin调控，并有望为代谢紊乱及肥胖症疾病的临床干预提供新的调控靶点。

关键词：生长素释放肽可卡因苯丙胺调节转录肽神经元下丘脑背内侧核室旁核

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荷斯坦奶牛胚胎基因组遗传评估研究

畜牧兽医学报 2024年第7期55卷 2940-2950页

作者：郭子骄郑伟杰孙伟吴宝江包向男张琪贺巾锋包斯琴赵高平王子馨韩博李喜和孙东晓中国农业大学动物科学技术学院农业农村部动物遗传育种与繁殖重点实验室动物育种国家工程实验室畜禽生物育种全国重点实验室北京100193 内蒙古赛科星家畜种业与繁育生物技术研究院有限公司呼和浩特011517 国家乳业技术创新中心呼和浩特010020 内蒙古大学生命科学学院呼和浩特010021

旨在建立一种荷斯坦奶牛胚胎细胞早期基因组检测和遗传评估的方法并筛选优秀种用胚胎,通过胚胎移植技术选育优秀种牛,进一步缩短世代间隔,加快遗传进展。本研究基于4头荷斯坦种公牛克隆细胞,比较分析2细胞、5细胞的微量基因组DNA提取效... 详细信息

旨在建立一种荷斯坦奶牛胚胎细胞早期基因组检测和遗传评估的方法并筛选优秀种用胚胎,通过胚胎移植技术选育优秀种牛,进一步缩短世代间隔,加快遗传进展。本研究基于4头荷斯坦种公牛克隆细胞,比较分析2细胞、5细胞的微量基因组DNA提取效果、全基因组芯片检出率及错配率;随后提取24枚荷斯坦奶牛早期胚胎5细胞样本的基因组DNA,利用150K芯片进行基因组检测;基于大规模基因组选择参考群体,采用GBLUP方法计算每枚胚胎9个性状的基因组育种值。结果表明,2和5克隆细胞的基因组DNA浓度、纯度和相对完整性均较好;5克隆细胞样品的150K芯片检出率较高(89.54%~95.07%)、错配率较低(1.02%~4.67%)。24枚胚胎的5细胞样品基因组DNA质量、总量和相对完整性均较好,150K芯片数据检出率为92.28%~98.51%,9个性状(产奶、体型和体细胞评分)基因组评估准确性为55%~79%,平均基因组评估准确性不低于65%。综上,本研究优化并建立了奶牛胚胎少量细胞DNA提取及基因组评估技术,胚胎样本基因组检出率不低于90%,平均基因组评估准确性不低于0.65。

关键词：荷斯坦奶牛胚胎基因组选择

剪接因子hnRNPF对蒙古马精子生成的影响

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畜牧兽医学报 2024年第2期55卷 598-606页

作者：翁雅娟李蓓芒来薛嘉宁特日格乐宋代玲王国庆蔺雅楠内蒙古农业大学动物科学学院内蒙古自治区马属动物科学研究与技术创新重点实验室农业农村部马属动物遗传育种与繁殖科学观测实验站内蒙古农业大学马属动物研究中心呼和浩特010018

旨在探究可变剪接因子核不均一核糖核蛋白F(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein F,hnRNPF)对蒙古马精子生成的影响。本研究提取并培养3岁性成熟蒙古马睾丸支持细胞;构建hnRNPF过表达慢病毒载体,将载体转染至蒙古马睾丸支持细胞中... 详细信息

旨在探究可变剪接因子核不均一核糖核蛋白F(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein F,hnRNPF)对蒙古马精子生成的影响。本研究提取并培养3岁性成熟蒙古马睾丸支持细胞;构建hnRNPF过表达慢病毒载体,将载体转染至蒙古马睾丸支持细胞中;每组3个重复,分别在转染0、24、48、72 h时利用CCK-8检测转染后细胞增殖情况并确定最佳转染时间;提取转染后与未转染的蒙古马睾丸支持细胞RNA,设计已知与精子生成相关基因的引物进行qRT-PCR试验,检测精子生成相关基因在两种细胞中的表达情况。琼脂糖凝胶电泳结果显示,hnRNPF慢病毒过表达载体构建成功;CCK-8检测发现,细胞经过表达慢病毒载体转染72 h后活性最高,并且转染后细胞活性要高于未转染细胞活性,说明hnRNPF过表达会促进蒙古马睾丸支持细胞的增殖;qRT-PCR结果显示,精子生成相关基因(PKMYT1、CDC25C、YWHAZ、BUB1、BTRC、CCNE1、CALM1、PLK1、REC8、MAPK3、ADCY7)在两种细胞中的表达量差异显著,均在转染hnRNPF过表达载体细胞中含量较高。本试验结果表明,剪接因子hnRNPF可能对于蒙古马精子生成具有直接或间接的促进作用,为提高蒙古马精子数量和精液品质提供了新的思路。

关键词：蒙古马 hnRNPF 精子生成可变剪接

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