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抗鼠IgG和IgM免疫血清的制备研究

军事医学 1984年第4期 415-418页

作者：李钟铎孙东连胥照平宋光昌何锦芳军事医学科学院微生物流行病研究所

抗鼠IgG和IgM免疫血清是实验诊断及单克隆抗体研究工作中的重要试剂。为开展单克隆抗体研究工作,我们于1981年制备了羊抗鼠IgG及羊抗鼠IgM免疫血清。本文报告这一试验方法和结果。材料与方法正常小鼠血清:由本院动物处领取正常小鼠用腋... 详细信息

抗鼠IgG和IgM免疫血清是实验诊断及单克隆抗体研究工作中的重要试剂。为开展单克隆抗体研究工作,我们于1981年制备了羊抗鼠IgG及羊抗鼠IgM免疫血清。本文报告这一试验方法和结果。材料与方法正常小鼠血清:由本院动物处领取正常小鼠用腋下或颈动脉放血分离血清,取178只正常小鼠分离出47毫升血清,取同样小鼠166只在尾静脉注射10％羊红细胞盐水(0.2—0.3ml/只),6—7天后放血分离血清41毫升。兔抗鼠IgG及兔抗鼠IgM样品血清:由中

关键词： IgM IgG 免疫血清

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人抗***5噬菌体抗体制备的初步研究

生物化学与生物物理进展 1996年第3期23卷 245-250页

作者：俞晓峰王海涛黄策军事医学科学院微生物流行病研究所

以Ｅ．ｃｏｌｉＪ５株对合人Ｉｇ基因的噬菌体抗体库进行淘筛富集，免疫印迹筛选，以及ＥＬＩＳＡ检测，结果获得４株能与Ｅ．ｃｏｌｉＪ５株结合的阳性克隆，且阳性克隆结合抗原的活性可分．别被ＥｃｏｌｉＪ５株、Ｅ．ｃｏｌｉＲｃ－... 详细信息

以Ｅ．ｃｏｌｉＪ５株对合人Ｉｇ基因的噬菌体抗体库进行淘筛富集，免疫印迹筛选，以及ＥＬＩＳＡ检测，结果获得４株能与Ｅ．ｃｏｌｉＪ５株结合的阳性克隆，且阳性克隆结合抗原的活性可分．别被ＥｃｏｌｉＪ５株、Ｅ．ｃｏｌｉＲｃ－ＬＰＳ和抗Ｅ．ｃｏｌｉＪ５株核心糖脂域ＭＡｂ抑制．ＰＣＲ检测表明，４株阳性克隆均分别带有约６６０ｂｐ大小的重链和轻链基因片段．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ与蛋白质印迹的结果显示，经ＩＰＴＧ诱导的阳性克隆能表达分子量约为５００００大小的蛋白，提示该４株阳性克隆能够表达具有一定抗原结合活性的人源Ｆａｂ片段．

关键词：噬菌体抗体库人源抗体制备

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登革2型病毒E基因的克隆及碱基序列测定

生物化学与生物物理进展 1996年第5期23卷 457-459页

作者：于曼秦鄂德杨佩英孙蕾徐品芳司炳银闫国珍军事医学科学院微生物流行病研究所

采用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术扩增了我国登革２型病毒Ｅ基因，大小为１．２９ｋｂ．将扩增的Ｅ基因片段首先克隆到Ｔ载体（ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ＋）中，用ＰＣＲ和限制性酶切分析鉴定出阳性重组子．然后利... 详细信息

采用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术扩增了我国登革２型病毒Ｅ基因，大小为１．２９ｋｂ．将扩增的Ｅ基因片段首先克隆到Ｔ载体（ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ＋）中，用ＰＣＲ和限制性酶切分析鉴定出阳性重组子．然后利用Ｍ１３通用引物直接对插入的Ｅ基因片段进行序列分析．结果表明，经限制性内切酶鉴定和ＤＮＡ序列分析证明所克隆的序列与已报道的Ｅ基因序列是一致的．

关键词：登革2型病毒 E基因克隆碱基序列测定

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抗体库的发展及未来

生物化学与生物物理进展 1996年第4期23卷 312-316页

作者：王学王海涛军事医学科学院微生物流行病研究所

抗体库的出现为制备人源性单抗开辟了一条行之有效的途径．虽然该技术问世只有短短几年的时间，但其筛选系统已有了很大的改进；现已能够快速地从抗体库中筛选出各种具有不同用途的抗体．从而克服了传统杂交瘤技术的某些局限性．

关键词：抗体抗体库单克隆抗体噬菌体抗体

外源蛋白在中国仓鼠卵巢细胞中高效表达的策略

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生物化学与生物物理进展 2000年第5期27卷 496-500页

作者：刘国奇王海涛军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

高效表达外源蛋白 ,在生物制药中有重要意义 .中国仓鼠卵巢细胞 (Chinesehamsterovarycell)是表达外源蛋白的最佳真核表达系统之一 .影响外源蛋白在CHO细胞表达的因素甚多 ,主要包括载体、宿主细胞和外源基因几方面 .深入了解和灵活运... 详细信息

高效表达外源蛋白 ,在生物制药中有重要意义 .中国仓鼠卵巢细胞 (Chinesehamsterovarycell)是表达外源蛋白的最佳真核表达系统之一 .影响外源蛋白在CHO细胞表达的因素甚多 ,主要包括载体、宿主细胞和外源基因几方面 .深入了解和灵活运用它们之间的关系。

关键词：重组蛋白 CHO细胞真核表达系统生物制药

青蒿琥酯钠对体外大鼠红细胞膜钠-钾交换ATP酶的抑制

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中国药理学报 1995年第6期16卷 524-526页

作者：王京燕袁丽珍王明道军事医学科学院微生物流行病研究所

体外测定青蒿琥酯钠(SA)对大鼠红细胞膜Na^(+)-K^(+)-交换ATP酶活性的影响.方法:在反应系统中分别加入不同浓度的SA(0,0.5,1,5和10 μmol·L^(-1)),通过测定反应系统中释放的无机磷含量,计算酶活性.结果:随着SA浓度(O,0.5,1,5和10 μmol... 详细信息

体外测定青蒿琥酯钠(SA)对大鼠红细胞膜Na^(+)-K^(+)-交换ATP酶活性的影响.方法:在反应系统中分别加入不同浓度的SA(0,0.5,1,5和10 μmol·L^(-1)),通过测定反应系统中释放的无机磷含量,计算酶活性.结果:随着SA浓度(O,0.5,1,5和10 μmol·L^(-1))的增高,对Na^(+)-K^(+)-交换ATP酶活性的抑制作用也随之增强,抑制率分别为15％,29％,46％和75％.将底物ATP浓度增加为125,250,375和500 μmol·L^(-1),进行了酶的动力学测定.用直线回归分析作Eadie-Hofstee动力学曲线,结果表明,SA对该酶的抑制作用为竞争性抑制.结论:提示SA可影响宿主红细胞膜的离子转运及膜的功能.

关键词：抗疟药青蒿琥酯红细胞膜 ATP酶

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体外筛选炭疽芽孢适配子

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2002年第5期34卷 635-642页

作者：甄蓓宋亚军郭兆彪王津张敏丽俞守义杨瑞馥第一军医大学流行病学教研室军事医学科学院微生物流行病研究所广州510515 北京100071 军事医学科学院微生物流行病研究所

用SELEX技术 ,寻获炭疽芽孢适配子 ,研究其亲和功能及是否作为炭疽芽孢的检测分子。化学合成长度为 35mer的随机DNA库 ,以炭疽杆菌疫苗株A .16R芽孢为靶标进行 18轮的筛选 ,筛选产物克隆、测序 ,利用生物素亲和素辣根过氧化物酶显色... 详细信息

用SELEX技术 ,寻获炭疽芽孢适配子 ,研究其亲和功能及是否作为炭疽芽孢的检测分子。化学合成长度为 35mer的随机DNA库 ,以炭疽杆菌疫苗株A .16R芽孢为靶标进行 18轮的筛选 ,筛选产物克隆、测序 ,利用生物素亲和素辣根过氧化物酶显色系统判断适配子与芽孢的结合活性 ;计算机软件分析测序适配子保守序列和二级结构 ;以兔抗炭疽芽孢抗体为捕获分子 ,适配子为检测分子混合夹心法检测炭疽芽孢。第 18轮筛选的适配子与芽孢结合后A值比第 1轮的提高了 3733 .33 %以上 ;测序 79个序列中 ,A值最高为 1.2 0 ,最低为 0 .2 0 ;混合夹心法检测表明 ,适配子量为 16 μg ,芽孢为 4× 10 7个时 ,显色信号强度最强。结果提示 ,其 5′端茎环及发夹结构是与芽孢结合的基础 ,远程高级结构对其结合功能有一定的影响 ;寡核苷酸适配子可以作为炭疽芽孢的检测分子

关键词： SELEX 炭疽芽孢适配子亲和性混合夹心法

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伯氨喹类似物的合成及其抗鼠疟活性

药学学报 1998年第3期33卷 194-200页

作者：蒋秋弟钟景星时云林李国福军事医学科学院微生物流行病研究所

报道１０个４甲基５取代苯氧基６甲氧基８［（１乙基４氨基）丁氨基］喹啉（１０ａ～ｊ）的合成及其抗疟活性。鼠疟初筛结果表明，有３个化合物对鼠疟Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｙｏｅｌｉ的病因性预防作用较强，其中１... 详细信息

报道１０个４甲基５取代苯氧基６甲氧基８［（１乙基４氨基）丁氨基］喹啉（１０ａ～ｊ）的合成及其抗疟活性。鼠疟初筛结果表明，有３个化合物对鼠疟Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｙｏｅｌｉ的病因性预防作用较强，其中１０ｃ的活性可达伯氨喹的４～８倍；同时，１０ｃ也有较强的杀血液裂殖体活性，对鼠疟Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｂｅｒｇｈｅｉ的抑制性治疗作用以ＥＤ５０和ＥＤ９０计算，为伯氨喹的２倍，其余多数化合物活性与伯氨喹相当，少数不如伯氨喹。

关键词： 8-氨基喹啉伯氨喹衍生物抗疟活性

大气细菌粒子浓度的时间分布特征及最佳采样时间的研究

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卫生研究 1997年第4期26卷 226-231页

作者：胡庆轩军事医学科学院微生物流行病研究所

用ＭＦ－４５型和ＨＴＫ－２０１型空气微生物采样器分别在北京、天津和沈阳三地观测了不同季节和一天中大气细菌粒子的浓度及其变化。结果表明：京、津二地春季大气细菌粒子浓度高，分别为２０５３个／ｍ３和２５５６个／ｍ３；夏季低... 详细信息

用ＭＦ－４５型和ＨＴＫ－２０１型空气微生物采样器分别在北京、天津和沈阳三地观测了不同季节和一天中大气细菌粒子的浓度及其变化。结果表明：京、津二地春季大气细菌粒子浓度高，分别为２０５３个／ｍ３和２５５６个／ｍ３；夏季低，分别为９９５个／ｍ３和１０６４个／ｍ３。沈阳秋季大气细菌粒子浓度高，为１０１０８个／ｍ３；冬季低，为１２９４个／ｍ３。一天中，大气细菌粒子浓度呈双峰型变化，６：００～７：００和１８：００时大气细菌粒子浓度高，１１：００～１３：００和１：００～２：００时大气细菌粒子浓度低。根据大气细菌粒子浓度的季节变化和一天中大气细菌粒子浓度的时间分布特征，经过京、津、沈三地一天中分别１２次、８次、６次和４次不同采样时间组合的大气细菌粒子浓度的数理统计分析，大气细菌粒子浓度的监测拟集中在一年冬、春、夏、秋四季的中间月份，即１月、４月、７月、１０月进行；一天中采样８次的时间序列可为７：００、１０：００、１３：００、１６：００、１９：００、２２：００、１：００、４：００一天采样４次的时间序列可为５：００、１１：００、１７：００、２３：００。白天采样４次的时间序列可为春、秋季６：００、９：００、１２：００、１５：００?

关键词：空气微生物粒子浓度采样时间