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基于纳米抗体建立icELISA检测乳制品中黄曲霉毒素M1

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食品与发酵工业 2024年第12期50卷 46-52,62页

作者：刘海媛刘颖达 Tuyatsetseg Jambal 吉日木图伊丽内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室内蒙古呼和浩特010018 中-蒙生物高分子应用研究联合实验室蒙古国乌兰巴托999097 蒙古国立科技大学轻工业学院蒙古国乌兰巴托999097 内蒙古中哈骆驼研究院内蒙古阿拉善737300

纳米抗体(nanobody,Nb)具有稳定性高、特异性强、易于表达等优势,已经成为小分子免疫分析的重要工具。为了监测乳制品中黄曲霉毒素M1(aflatoxin M1,AFM1)的污染情况,以先前从双峰驼AFM1免疫文库中淘选得到的抗AFM1型纳米抗体M6为研究对... 详细信息

纳米抗体(nanobody,Nb)具有稳定性高、特异性强、易于表达等优势,已经成为小分子免疫分析的重要工具。为了监测乳制品中黄曲霉毒素M1(aflatoxin M1,AFM1)的污染情况,以先前从双峰驼AFM1免疫文库中淘选得到的抗AFM1型纳米抗体M6为研究对象,评估其理化性质并建立间接竞争酶联免疫吸附测定法(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,icELISA)。优化反应体系中封闭方法、甲醇溶液、pH值和离子强度等参数后,建立竞争抑制标准曲线,并进行方法学验证特异性和准确性。结果表明,Nb-M6具有良好的亲和力和热稳定性;Nb-icELISA的检测限(limit of detection,LOD)为0.111 ng/mL,半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))为1.498 ng/mL,乳制品加标回收率为89.8%~104.1%,与高效液相色谱法的检测结果趋于一致。该方法操作简单、便捷,可应用于乳制品中AFM1的初步批量筛查。

关键词：纳米抗体间接竞争酶联免疫吸附测定法黄曲霉毒素M1 乳制品

蓟马取食诱导的紫花苜蓿类黄酮生物合成基因表达分析

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草地学报 2024年第4期32卷 1034-1043页

作者：陈崎代蕊张岩爽爽霍晓伟边林郭娜张志强张雨桐内蒙古农业大学草原与资源环境学院国家林业草原北方抗旱耐寒草品种育繁工程技术研究中心草地资源教育部重点实验室内蒙古呼和浩特010000

紫花苜蓿(Medicago sativa)是国内外广泛栽培的重要豆科牧草。本研究利用PacBio技术对抗蓟马苜蓿品种‘草原4号’进行全长转录组测序,共获得35.10 Gb的clean data,355992条环形一致性序列(CCS Reads),其中全长非嵌合序列(FLNC Reads)238... 详细信息

紫花苜蓿(Medicago sativa)是国内外广泛栽培的重要豆科牧草。本研究利用PacBio技术对抗蓟马苜蓿品种‘草原4号’进行全长转录组测序,共获得35.10 Gb的clean data,355992条环形一致性序列(CCS Reads),其中全长非嵌合序列(FLNC Reads)238454个,占40.46%,共鉴定出11271个可变剪切事件(AS),32102个SSR位点,11514个lncRNA和76293个完整的CDS序列。在NR、COG、GO、KEGG、Swiss-Prot和Pfam数据库中注释了83008个转录本。基于转录组数据,对参与类黄酮生物合成基因进行qRT-PCR检测,分析发现除了ANS外,类黄酮生物合成基因DFR,FLS,F3H,CYP93B2_16,C3′H,CHI,CYP75B1,HCT,ANR的表达量在蓟马取食7天后均显著上调,之后急剧下降(P≤0.05);ANS基因则随着蓟马取食时间的延长表达量逐渐上升。研究结果表明类黄酮生物合成基因参与苜蓿响应蓟马取食过程,且大部分基因参与早期防御反应,ANS可能参与晚期防御反应。

关键词：紫花苜蓿全长转录组类黄酮蓟马

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用于氨电氧化反应生成硝酸盐/亚硝酸盐的金属基电催化剂:过去、现在和未来

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Chinese Journal of Catalysis 2024年第1期56卷 25-50页

作者：田芸睿谭皓天李霞贾晶晶毛子贤刘健梁骥天津大学材料科学与工程学院先进陶瓷与机械加工技术教育部重点实验室天津300350 内蒙古大学化学化工学院内蒙古呼和浩特010021

亚硝酸盐和硝酸盐(统称为NO_(2/3)−)是工业、农业和食品工程中的重要物质.目前通过Ostwald氧化法制备亚硝酸盐和硝酸盐过程常常伴随着大量的能源消耗和温室气体排放.氨的电催化氧化是一种低排放和节能的低温工艺过程,可以持续生产NO_(2/... 详细信息

亚硝酸盐和硝酸盐(统称为NO_(2/3)−)是工业、农业和食品工程中的重要物质.目前通过Ostwald氧化法制备亚硝酸盐和硝酸盐过程常常伴随着大量的能源消耗和温室气体排放.氨的电催化氧化是一种低排放和节能的低温工艺过程,可以持续生产NO_(2/3)−,避免了有害的N2O的形成,并且可以完全由可再生电力供电.目前对氨氧化反应的研究大多集中在氨裂解制氢和直接氨燃料电池上,而对氨转化为NO_(2/3)−的研究关注较少.因此,本文在总结近年来氨电催化工作的基础上,对催化剂的反应机理和设计思路进行了综述.本文从电催化氨氧化反应(AOR)可能的反应机理入手,介绍了AOR的反应条件、检测方法、原位表征方法以及理论计算的研究成果,在总结了影响AOR催化剂催化性能因素的基础上提出了近年来电催化剂的设计策略以及合成方法,并对未来氨领域的发展提出展望.首先,基于反应原理以及反应中间体的吸附路径等方面讨论了AOR的关键难点.然后,系统性总结了AOR的测试要求以及原位拉曼、原位红外、原位电化学质谱和原位X射线吸收光谱等技术在AOR机理研究中的重要作用,讨论了密度泛函理论对于研究AOR催化过程中的反应能垒和催化剂电子轨道分布的贡献.催化剂合金设计、界面工程、非晶化处理、单原子或双原子调制等可控策略有助于抑制副反应的进行以及电解过程中产生的腐蚀性物质对电极的破坏.最后,介绍了氨氧化在光、热以及生物催化领域的应用进展,提出了当前AOR所面临的挑战和解决策略,如将先进的材料设计与理论计算相结合,有助于寻找新的高性能AOR电催化剂.催化体系的改进和反应器的优化将加速大规模绿色、高效、低能耗电催化制备NO_(2/3)−的产业化.综上所述,AOR领域取得的进展说明氨电氧化制备NO_(2/3)−用于工业生产具有可行性,这为满足不断增长的NO_(2/3)−供应需求带来了新的机遇.尽管AOR仍面临性能不高、工艺不成熟等难题,但随着理论与实验研究的结合,原位表征技术不断地开发利用,未来高效、稳定的AOR催化剂会不断的出现.本文也为生成NO_(2/3)−的催化剂的研发提供理论参考.

关键词：氨氧化反应硝酸盐亚硝酸盐非贵金属催化剂氨

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聚合乳清蛋白对山羊酸乳贮藏品质的影响

食品科技 2024年第1期49卷 267-274页

作者：许竹尧姜超然张晓彤李蕊竹张明明夏亚男内蒙古农业大学食品科学与工程学院内蒙古呼和浩特010018 阿巴嘎旗牧人恋乳业有限责任公司内蒙古阿巴嘎011400 内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点试验室内蒙古呼和浩特010018

文章利用聚合乳清蛋白(Polymerized whey protein,PWP)提高山羊酸乳的凝乳与风味品质,考察PWP对山羊酸乳贮藏期间凝乳、质构、风味等品质特性的影响。结果表明:未处理山羊酸乳在贮藏期间出现略酸化,pH值由4.3降至4.1,活菌数降低了5.6%... 详细信息

文章利用聚合乳清蛋白(Polymerized whey protein,PWP)提高山羊酸乳的凝乳与风味品质,考察PWP对山羊酸乳贮藏期间凝乳、质构、风味等品质特性的影响。结果表明:未处理山羊酸乳在贮藏期间出现略酸化,pH值由4.3降至4.1,活菌数降低了5.6%个对数值,感官评分由77分降至55分;而添加PWP可减缓山羊酸乳黏度、质构品质的下降,保持更高的活菌数与风味特性,具有较好的应用开发价值。研究结果可为乳清蛋白精深加工及山羊酸乳的品质优化提供理论依据。

关键词：聚合乳清蛋白热改性山羊酸乳品质特性贮藏期

根癌农杆菌介导的蒙古冰草稳定遗传转化体系建立

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植物学报 2024年第4期59卷 600-612页

作者：李宇琛赵海霞姜希萍黄馨田刘亚玲吴振映赵彦付春祥内蒙古农业大学草原与资源环境学院/农业农村部饲草栽培、加工与高效利用重点实验室/草地资源教育部重点实验室呼和浩特010018 中国科学院青岛生物能源与过程研究所山东省能源研究院青岛新能源山东省实验室青岛266101 内蒙古草业技术创新中心有限公司呼和浩特010052

蒙古冰草(Agropyron mongolicum)亦称沙芦草,为禾本科(Poaceae)小麦族(Triticeae)冰草属(Agropyron)多年生疏丛型牧草,具有饲用价值高、抗寒耐旱以及耐盐、耐瘠薄、耐风沙等特性,是改良天然草场的适宜草种与挖掘优良耐逆基因资源的重要... 详细信息

蒙古冰草(Agropyron mongolicum)亦称沙芦草,为禾本科(Poaceae)小麦族(Triticeae)冰草属(Agropyron)多年生疏丛型牧草,具有饲用价值高、抗寒耐旱以及耐盐、耐瘠薄、耐风沙等特性,是改良天然草场的适宜草种与挖掘优良耐逆基因资源的重要材料。然而,目前尚未建立蒙古冰草高效遗传转化体系,制约了该物种的基因资源鉴定与遗传改良应用。以蒙农1号蒙古冰草种子为来源的高再生效率的胚性愈伤系#89为外植体,建立了根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105介导的蒙古冰草稳定遗传转化体系,转化效率达30%。此外,针对多次继代后蒙古冰草愈伤系再生能力退化的难题,通过在再生培养基中添加1 mg·L^(-1) ABA或提高蔗糖浓度至45 g·L^(-1),成功将再生能力衰退的蒙古冰草愈伤系再生效率由5%分别提高至35%与42%。研究结果为后续蒙古冰草基因编辑体系建立、基因功能鉴定和新品种培育奠定了重要技术基础。

关键词：蒙古冰草胚性愈伤组织根癌农杆菌遗传转化

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草乌头光照适应性的转录组分析

草地学报 2024年第7期32卷 2018-2027页

作者：史佳怡吕丽娟穆赢通路景诗张晓明王俊杰内蒙古农业大学草原与资源环境学院内蒙古自治区中蒙药材良种育繁工程技术研究中心草地资源教育部重点实验室内蒙古呼和浩特010018 呼和浩特市林业和草原局内蒙古呼和浩特010019

研究通过分析遮荫处理对草乌头(Aconitum kusnezoffii L.)叶片中差异表达基因的影响,揭示其响应遮荫的分子机制。通过对遮荫处理后草乌头叶片的转录组测序,发现数据质量较高(Q30≥94.37%),并通过拼接和组装得到59082个Unigenes(N50为182... 详细信息

研究通过分析遮荫处理对草乌头(Aconitum kusnezoffii L.)叶片中差异表达基因的影响,揭示其响应遮荫的分子机制。通过对遮荫处理后草乌头叶片的转录组测序,发现数据质量较高(Q30≥94.37%),并通过拼接和组装得到59082个Unigenes(N50为1826 bp)。功能注释表明,有27668个Unigenes(46.83%)被注释到多个重要数据库。差异表达基因分析筛选出483个差异基因,其中421个获得注释。研究发现,光照条件显著影响草乌头的光合作用、激素调控和能量代谢等生物过程。关键基因分析显示,LHCB17,ATPβ,PetA等在遮荫下表达下调,LHCB1,GA2ox等表达上调。这些基因的调控作用揭示了光照对草乌头生长和代谢适应性的影响。实时荧光定量分析验证了转录组数据的可靠性。研究结果不仅增进了对草乌头适应光照环境的理解,还为其遗传调控网络和功能基因的研究提供了线索,对草乌头的合理栽培和利用具有重要意义。

关键词：草乌头转录组遮荫 qRT-PCR

基于转录组学分析自然感染绵羊肺腺瘤病毒患羊肺肿瘤组织中转录差异基因及病毒致瘤机制的研究

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中国预防兽医学报 2024年第2期46卷 185-194页

作者：段续接杨惠孙志伟杜晓悦张培梁浚哲刘淑英内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区基础兽医学重点实验室内蒙古呼和浩特010018

绵羊肺腺瘤病(OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的绵羊传染性肺肿瘤疾病。为探究JSRV对绵羊肺脏的致瘤机制,本研究从自然感染JSRV的羊(OPA患羊)肺肿瘤组织和健康羊肺组织中提取总RNA,构建二者的cDNA文库后采用Illumina Hi Seq 4000高... 详细信息

绵羊肺腺瘤病(OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的绵羊传染性肺肿瘤疾病。为探究JSRV对绵羊肺脏的致瘤机制,本研究从自然感染JSRV的羊(OPA患羊)肺肿瘤组织和健康羊肺组织中提取总RNA,构建二者的cDNA文库后采用Illumina Hi Seq 4000高通量测序平台进行转录组学测序(RNA-Seq),采用DESeqR筛选健康绵羊与患病绵羊肺组织中的转录差异基因,并以P生物过程(BP)、19个细胞成分(CC)和45个分子功能(MF),主要涉及生长因子活性、复制后修复、NAD^(+)二磷酸酶活性、核苷代谢过程和鸟苷核苷酸交换因子活性等生物学功能。KEGG分析显示转录显著差异基因主要富集在细胞增殖、分化和肿瘤生成,如PI3K/Akt、MAPK和Hippo等信号通路。RT-qPCR结果显示,10个转录显著差异基因与RNA-Seq筛选结果均一致。本研究进一步通过RT-qPCR、western blot检测Hippo信号通路核心蛋白哺乳动物STE20样蛋白激酶1/2 (MST1/2)、大肿瘤抑制因子1/2 (LATS1/2)、YES相关蛋白1/2 (YAP1)在两组绵羊肺组织样品中的转录及表达水平和YAP1的磷酸化水平(p-YAP1);采用免疫组化试验(IHC)检测Hippo信号通路中上述核心蛋白在两组绵羊肺组织中的表达及定位。RT-qPCR结果显示,与对照组相比,OPA羊肺组织中MST1和YAP1 mRNA的转录水平均极显著上调(P<0.01、P<0.001),LATS1 mRNA的转录水平显著上调(P<0.05)。Western blot结果显示,MST1/2蛋白在59 ku、YAP1和p-YAP1蛋白在65 ku、LATS1/2蛋白在140 ku处分别出现特异性条带;与对照组相比,OPA绵羊肺肿瘤组织中MST1/2和p-YAP1的表达水平显著上调(P<0.05),LATS1/2和YAP1的表达水平极显著上调(P<0.01)。IHC结果显示,在OPA组和对照组羊肺组织中MST1/2、LATS1/2及p-YAP1均定位于肺组织细胞质中,且与对照组相比,OPA组羊肺组织中上述分子均呈强阳性表达。YAP1主要定位于对照组羊肺组织细胞的胞质中,而在OPA组中YAP1主要定位于细胞核中(少量定位于细胞质中)。上述结果表明,OPA组绵羊肺组织中存在转录显著差异基因,主要参与细胞增殖、肿瘤发生和转移等过程,且主要富集在PI3K/Akt、MAPK、Hippo等信号通路,尤其是Hippo信号通路中的YAP蛋白可能通过核异位促进肿瘤的发生与发展。本研究为JSRV致瘤机制提供了新的研究基础与研究思路和方向。

关键词：绵羊肺腺瘤病绵羊肺腺瘤病毒转录组学分析 Hippo信号通路

乳双歧杆菌Probio-M8发酵乳缓解便秘的作用

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食品研究与开发 2024年第2期45卷 22-27,43页

作者：李培培李树森孙二娜王月娇刘巨龙内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室内蒙古呼和浩特010018 蒙牛高科乳制品(北京)有限责任公司北京101107

便秘是一种常见的消化道疾病,益生菌可通过维持肠道菌群平衡、产生有益代谢产物、促进肠道蠕动和缓解炎症等方式改善便秘。该文对乳双歧杆菌Probio-M8发酵乳进行动态体外仿生消化系统测试,并利用人群实验探究发酵乳对便秘的有益影响。... 详细信息

便秘是一种常见的消化道疾病,益生菌可通过维持肠道菌群平衡、产生有益代谢产物、促进肠道蠕动和缓解炎症等方式改善便秘。该文对乳双歧杆菌Probio-M8发酵乳进行动态体外仿生消化系统测试,并利用人群实验探究发酵乳对便秘的有益影响。结果发现:乳双歧杆菌Probio-M8具有良好的耐胃肠液能力,能够以活菌的状态进入宿主体内发挥益生功效。受试者在饮用乳双歧杆菌Probio-M8发酵乳后,排便频次、排便类型和排便用力程度均得到改善,其中排便类型和排便用力程度的改善效果在40~50岁的人群中尤为明显。

关键词：便秘益生菌乳双歧杆菌Probio-M8 发酵乳动态体外仿生消化系统

蒙古冰草咖啡酸氧甲基转移酶基因AmCOMT1的鉴定及功能分析

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植物学报 2024年第3期59卷 383-396页

作者：杜锦瑜孙震苏彦龙王贺萍刘亚玲吴振映何峰赵彦付春祥内蒙古农业大学草原与资源环境学院/农业农村部饲草栽培、加工与高效利用重点实验室/草地资源教育部重点实验室呼和浩特010018 中国科学院青岛生物能源与过程研究所青岛266101 山东能源研究院青岛266101 青岛新能源山东省实验室青岛266101 内蒙古草业技术创新中心有限公司呼和浩特010018

蒙古冰草(即沙芦草(Agropyron mongolicum))是我国北方代表性的多年生牧草之一,具有较强的耐寒和耐旱能力。在植物中,咖啡酸氧甲基转移酶基因(COMT)是参与木质素和褪黑素生物合成的关键基因,在调节植物生长、品质和抗逆性中发挥重要作... 详细信息

蒙古冰草(即沙芦草(Agropyron mongolicum))是我国北方代表性的多年生牧草之一,具有较强的耐寒和耐旱能力。在植物中,咖啡酸氧甲基转移酶基因(COMT)是参与木质素和褪黑素生物合成的关键基因,在调节植物生长、品质和抗逆性中发挥重要作用。通过分析蒙古冰草全长转录组数据,从蒙古冰草中克隆了COMT候选基因AmCOMT1。该基因在茎秆和根等木质素含量高的组织中高表达,且其表达受多种非生物胁迫诱导。在拟南芥(Arabidopsis thaliana)野生型(Col-0)和突变体(omt1-2)中过表达AmCOMT1,显著促进了转基因拟南芥的木质素合成,使突变体的木质素单体和组分恢复至野生型水平,同时Col-0/35S:AmCOMT1中木质素总量提高11%。此外, AmCOMT1过表达显著提高了Col-0/35S:AmCOMT1转基因拟南芥的褪黑素含量。在盐胁迫条件下,该株系平均根长相比野生型拟南芥提高20.3%,表现出更强的抗逆性。综上,蒙古冰草AmCOMT1基因在木质素和褪黑素合成中发挥关键作用,可提高转基因拟南芥的抗逆性,在蒙古冰草等单子叶牧草遗传改良方面具有重要应用潜力。

关键词：蒙古冰草咖啡酸氧甲基转移酶木质素褪黑素盐胁迫