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黄连及其炮制品对实热型口腔溃疡大鼠干预作用的代谢组学研究

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中国中药杂志 2024年第2期49卷 389-402页

作者：张振凯郑亚娟张冰贤王永祥张金英曹玉敏冯卫生郑晓珂周宁河南中医药大学河南郑州450046 河南省中药开发工程技术研究中心河南郑州450046 河南中医药大学呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心河南郑州450046 豫药全产业链研发河南省协同创新中心河南郑州450046

采用UPLC-Q/TOF-MS技术,探究黄连及其3种炮制品对实热型口腔溃疡大鼠体内代谢的干预作用,揭示黄连3种炮制品的药效差异。将雄性SD大鼠随机分为假手术组、实热型口腔溃疡模型组、生黄连组、酒/姜/萸/黄连组、阳性药黄连上清片组。除假手... 详细信息

采用UPLC-Q/TOF-MS技术,探究黄连及其3种炮制品对实热型口腔溃疡大鼠体内代谢的干预作用,揭示黄连3种炮制品的药效差异。将雄性SD大鼠随机分为假手术组、实热型口腔溃疡模型组、生黄连组、酒/姜/萸/黄连组、阳性药黄连上清片组。除假手术组外,其他组连续灌胃2周党参-黄芪水煎液,实热造模期间记录大鼠肛温和饮水量,实热造模完成后结合乙酸进行口腔溃疡造模。苏木精-伊红(HE)观察口腔溃疡黏膜病理学变化;比色法检测血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平;ELISA检测大鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量;收集血清样本,利用UPLC-Q/TOF-MS技术进行非靶向代谢组学分析,通过主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)构建代谢轮廓并筛选潜在生物标志物,应用Mev软件对标志物相对定量结果进行热图绘制和聚类分析,最后结合MBRole、KEGG和MetaboAnalyst等在线数据库进行通路富集分析和代谢网络构建。实验结果显示,造模后大鼠口腔黏膜病理损伤严重,血清中TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平显著升高,SOD、GSH-Px水平显著降低;给药后各指标均有回调趋势,以酒黄连的改善效果最佳。非靶向代谢组学最终鉴定出48个差异代谢物,包括正源模式下27个、负源模式下21个,富集得到甘油磷脂代谢、亚油酸代谢、酪氨酸代谢等5条共有通路。综上,黄连及其3种炮制品均可通过干预脂质代谢、氨基酸代谢等途径,改善实热型口腔溃疡大鼠机体的炎症反应和氧化应激损伤,其中酒黄连的治疗效果最显著。

关键词：黄连实热型口腔溃疡代谢组学 UPLC-Q/TOF-MS

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小檗碱治疗阿尔茨海默病的药理作用研究进展

中国实验方剂学杂志 2024年

作者：王雪婧钟光成李舒婷张千罗柏榤王奇广州中医药大学科技创新中心

阿尔茨海默病（AD）是一种以学习、记忆、认知功能进行性减退为特点的中枢神经系统退行性疾病，目前AD的治疗药物十分有限且效果欠佳。小檗碱（BBR）是天然的异喹啉（类季铵）生物碱，药理作用广泛，研究发现其在治疗AD方面具有良好的... 详细信息

阿尔茨海默病（AD）是一种以学习、记忆、认知功能进行性减退为特点的中枢神经系统退行性疾病，目前AD的治疗药物十分有限且效果欠佳。小檗碱（BBR）是天然的异喹啉（类季铵）生物碱，药理作用广泛，研究发现其在治疗AD方面具有良好的潜力，其作用靶点主要涉及抑制β淀粉样蛋白（Aβ）生成、聚集和神经毒性，抑制Tau蛋白过度磷酸化，促进磷酸化Tau蛋白自噬清除，抑制胆碱酯酶活性，抑制神经炎症和氧化应激，调节神经元凋亡，改善线粒体功能，改善糖脂代谢，抑制单胺氧化酶活性，调节肠道微生物群等。BBR生物利用度较低的问题也得到了有效改善，通过对潜在靶点的分析，以期为BBR防治AD的进一步研究提供参考。

关键词：小檗碱阿尔茨海默病 β淀粉样蛋白 Tau蛋白神经炎症

通塞颗粒阻抑巨噬细胞炎症反应改善大鼠慢性阻塞性肺疾病急性加重

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南方医科大学学报 2024年第10期44卷 1995-2003页

作者：程蒙蒙刘新光魏焱鑫邢小香刘览辛楠赵鹏河南中医药大学呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心//河南省中医药防治呼吸病重点实验室河南郑州450046 河南中医药大学中医药科学院河南郑州450046 河南中医药大学第一附属医院呼吸科河南郑州450046

目的探讨通塞颗粒(TSG)阻抑巨噬细胞炎症反应改善慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)大鼠的作用机制。方法24只SD大鼠随机分为对照(Control)组、模型(Model)组、TSG组和莫西沙星+沙丁胺醇(MXF+STL)组,6只/组。第1~8周建立慢性阻塞性肺... 详细信息

目的探讨通塞颗粒(TSG)阻抑巨噬细胞炎症反应改善慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)大鼠的作用机制。方法24只SD大鼠随机分为对照(Control)组、模型(Model)组、TSG组和莫西沙星+沙丁胺醇(MXF+STL)组,6只/组。第1~8周建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,第9周第3天,经鼻滴入肺炎克雷伯杆菌建立AECOPD大鼠模型。第9周的第1~2天和第4~7天,Control组和Model组给予生理盐水灌胃,TSG组和MXF+STL组分别给予TSG和MXF+STL灌胃,灌胃结束后处死大鼠。HE染色观察大鼠肺组织病理变化;检测肺组织白细胞介素IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子TNF-α、基质金属蛋白酶MMP2和MMP9表达。采用脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞MH-S,给予TSG含药血清及其代表成分干预,检测IL-1β、IL-6、TNF-α、环氧化酶COX-2及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA水平,磷酸化P38(p-p38)、p-p62、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)、Forkhead box O3(FoxO3a)及p-mTOR蛋白水平。结果TSG显著改善AECOPD大鼠肺组织损伤与肺功能,包括降低支气管壁厚度、肺泡平均线性截距及上调平均肺泡数(P代谢酶COX-2、iNOS的表达(P<0.05)。血清药物化学联合网络药理鉴定了TSG含药血清10种化学成分,其对应466个靶点核心功能分析显示,TSG干预AECOPD可能与其主要成分木犀草素、槲皮素、贝母辛、贝母乙素等调控MAPK、mTOR、FoxO、自噬等有关。体外实验显示,木犀草素可以显著抑制LPS诱导巨噬细胞炎症反应及相关信号如p-p38,调控自噬相关信号FoxO3a、mTOR,以及抑制自噬相关蛋白p-p62、LC3的表达(P<0.05)。结论TSG抑制巨噬细胞炎症反应缓解AECOPD,其机制可能与调控p38、mTOR、FoxO3a信号及抑制自噬有关。

关键词：通塞颗粒慢性阻塞性肺疾病急性加重期巨噬细胞炎症反应

基于血清代谢组学研究金水缓纤方治疗肺纤维化机制

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中华中医药杂志 2024年第2期39卷 743-749页

作者：吴静杜燕陈龙飞冀会鸽李建生河南中医药大学呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心河南省中医药防治呼吸病重点实验室郑州450046 河南中医药大学中医药科学院郑州450046 河南中医药大学第一附属医院郑州450000

目的:采用代谢组学技术探讨金水缓纤方治疗肺纤维化(PF)大鼠的机制。方法:将32只SD大鼠分为对照组、模型组、金水缓纤方组和吡非尼酮组,每组8只。建立PF大鼠模型,金水缓纤方组和吡非尼酮组于造模后第29—41天分别采用相应药物进行治疗。... 详细信息

目的:采用代谢组学技术探讨金水缓纤方治疗肺纤维化(PF)大鼠的机制。方法:将32只SD大鼠分为对照组、模型组、金水缓纤方组和吡非尼酮组,每组8只。建立PF大鼠模型,金水缓纤方组和吡非尼酮组于造模后第29—41天分别采用相应药物进行治疗。Masson染色观察大鼠肺组织病理变化,免疫组化法测定肺组织中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)的表达。基于超高效液相色谱联合四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC Q-Exactive MS)系统,对大鼠血清进行非靶向代谢组学分析,筛选差异代谢物,探讨PF大鼠代谢网络的变化及金水缓纤方的调控作用。结果:模型组大鼠肺组织纤维化评分和Col-Ⅰ、Col-Ⅲ表达较对照组显著升高(P代谢物较对照组发生显著变化(FDR代谢物(溶血磷脂酰胆碱18∶1、1-磷酸鞘氨醇和十五烷酸除外)较模型组有回调趋势,其中二十碳五烯酸和溶血磷脂酰胆碱20∶3差异有统计学意义(P代谢、磷脂代谢和赖氨酸代谢有关。

关键词：肺纤维化金水缓纤方代谢组学超高效液相色谱联合四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱脂肪酸代谢磷脂代谢赖氨酸代谢机制

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维生素C防治2型糖尿病研究进展

食品工业科技 2021年第15期42卷 372-376页

作者：丁丽娜王志斌王瑶宁杰张宪党丁文宇山东第一医科大学附属内分泌与代谢病医院(山东省内分泌与代谢病研究所) 山东济南250062 山东第一医科大学(山东省医学科学院) 山东济南250062

2型糖尿病(T2DM)是由胰岛素缺乏和胰岛素抵抗引起的复杂代谢紊乱性疾病。维生素C(VC)是人体必需的营养素,是众所周知的抗氧化剂,可保护细胞免受氧化应激的伤害。T2DM患者的氧化应激状态对并发症的发生发展起重要作用,适量补充VC可降低T... 详细信息

2型糖尿病(T2DM)是由胰岛素缺乏和胰岛素抵抗引起的复杂代谢紊乱性疾病。维生素C(VC)是人体必需的营养素,是众所周知的抗氧化剂,可保护细胞免受氧化应激的伤害。T2DM患者的氧化应激状态对并发症的发生发展起重要作用,适量补充VC可降低T2DM的发病风险。VC与T2DM及其并发症密切相关,T2DM患者血浆VC水平普遍偏低,且血浆VC水平与T2DM的患病风险呈负相关;补充VC可以改善胰岛素抵抗、改善炎症状态,同时可延缓糖尿病肾病的发生发展和心血管的发生风险,但在糖尿病牙周疾病方面并没有明显的改善作用。本文对VC与T2DM发生发展中的作用予以综述,旨在为T2DM的防治提供一定的参考。

关键词：维生素 C 2 型糖尿病氧化应激自由基抗氧化剂

通塞颗粒阻抑巨噬细胞炎症反应改善小鼠慢性阻塞性肺疾病急性加重

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南方医科大学学报 2024年

作者：程蒙蒙刘新光魏焱鑫邢小香刘览辛楠赵鹏河南中医药大学呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心//河南省中医药防治呼吸病重点实验室河南中医药大学中医药科学院河南中医药大学第一附属医院呼吸科

目的探讨通塞颗粒（TSG）阻抑巨噬细胞炎症反应改善慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）大鼠的作用机制。方法24只SD大鼠随机分为对照（Control）组、模型（Model）组、TSG组和莫西沙星+沙丁胺醇（MXF+STL）组，6只/组。第1～8周建... 详细信息

目的探讨通塞颗粒（TSG）阻抑巨噬细胞炎症反应改善慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）大鼠的作用机制。方法24只SD大鼠随机分为对照（Control）组、模型（Model）组、TSG组和莫西沙星+沙丁胺醇（MXF+STL）组，6只/组。第1～8周建立慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型，第9周第3天，经鼻滴入肺炎克雷伯杆菌建立AECOPD大鼠模型。第9周的第1～2天和第4～7天，Control组和Model组给予生理盐水灌胃，TSG组和MXF+STL组分别给予TSG和MXF+STL灌胃，灌胃结束后处死大鼠。HE染色观察大鼠肺组织病理变化；检测肺组织白细胞介素IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子TNF-α、基质金属蛋白酶MMP2和MMP9表达。采用脂多糖（LPS）刺激巨噬细胞MH-S，给予TSG含药血清及其代表成分干预，检测IL-1β、IL-6、TNF-α、环氧化酶COX-2及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA水平，磷酸化P38(p-p38)、p-p62、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)、Forkhead box O3(FoxO3a)及p-mTOR蛋白水平。结果 TSG显著改善AECOPD大鼠肺组织损伤与肺功能，包括降低支气管壁厚度、肺泡平均线性截距及上调平均肺泡数（P代谢酶COX-2、iNOS的表达（P<0.05）。血清药物化学联合网络药理鉴定了TSG含药血清10种化学成分，其对应466个靶点核心功能分析显示，TSG干预AECOPD可能与其主要成分木犀草素、槲皮素、贝母辛、贝母乙素等调控MAPK、mTOR、FoxO、自噬等有关。体外实验显示，木犀草素可以显著抑制LPS诱导巨噬细胞炎症反应及相关信号如p-p38，调控自噬相关信号FoxO3a、mTOR，以及抑制自噬相关蛋白p-p62、LC3的表达（P<0.05）。结论 TSG抑制巨噬细胞炎症反应缓解AECOPD，其机制可能与调控p38、mTOR、FoxO3a信号及抑制自噬有关。

关键词：通塞颗粒慢性阻塞性肺疾病急性加重期巨噬细胞炎症反应

基于血清代谢组学和流式细胞术探讨百药煎不同炮制品及其复方治疗溃疡性结肠炎作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第15期30卷 172-181页

作者：王瑞生侯娅芳曹文文赵亚红张振凌河南中医药大学豫药全产业链研发河南省协同创新中心河南省中药特色炮制技术工程研究中心河南省中药生产一体化工程技术研究中心河南省中药饮片炮制中医药重点实验室呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心郑州450008

目的:通过比较百药煎不同炮制品及其复方香梅丸对溃疡性结肠炎(UC)大鼠的药效学与代谢组学差异,探讨其治疗UC的潜在作用机制。方法:80只SD大鼠适应性饲养3 d,随机分为空白组、模型组、美沙拉嗪组(0.4 g·kg^(-1)),百药煎组(1.89 g·kg^(... 详细信息

目的:通过比较百药煎不同炮制品及其复方香梅丸对溃疡性结肠炎(UC)大鼠的药效学与代谢组学差异,探讨其治疗UC的潜在作用机制。方法:80只SD大鼠适应性饲养3 d,随机分为空白组、模型组、美沙拉嗪组(0.4 g·kg^(-1)),百药煎组(1.89 g·kg^(-1))、焦百药煎组(1.89 g·kg^(-1))、百药煎炭组(1.89 g·kg^(-1))、香梅丸低、高剂量组(1.89、5.67 g·kg^(-1)),每组10只。空白组灌胃给予生理盐水,其余7组每日灌胃给予5%右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液5 m L,连续给药8 d,诱导UC模型。造模完成后,各给药组分别灌胃给予相应剂量药液,空白组和模型组灌胃等量生理盐水,连续给药8 d。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-1β水平;苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理变化;流式细胞仪检测各组大鼠外周血中辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)比例;利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)检测大鼠血清代谢物,结合主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对差异代谢物进行表征,根据变量重要性投影(VIP)值>1.0且P代谢物,根据人类代谢组数据库(HMDB)分析潜在代谢通路。结果:与空白组比较,模型组结肠组织充血,黏膜可见溃疡,结肠长度显著降低(P香梅丸低剂量组>百药煎炭组>焦百药煎组>百药煎组。代谢组学结果共筛选出26个差异代谢物,与空白组比较,模型组中有14个代谢物上调,5个代谢物下调,百药煎组、焦百药煎组、百药煎炭组、香梅丸低、高剂量组可分别回调14、9、14、12、17个代谢物。主要涉及柠檬酸盐循环通路、泛酸和辅酶A生物合成通路、芳香烃受体(Ah R)信号通路、糖酵解/糖异生通路等代谢通路。结论:百药煎炒炭后治疗UC效果明显提高,与白芷和乌梅炭配伍后疗效更加突出,可为百药煎复方制剂的开发提供依据。

关键词：百药煎溃疡性结肠炎血清代谢组学流式细胞技术辅助性T细胞17(Th17) 调节性T细胞(Treg) 炎症因子超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)

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甘露糖对巨噬细胞炎症反应的双向调节作用

中山大学学报（医学科学版） 2020年第4期41卷 549-557页

作者：吴惠娟韦曲星张盛昔胡因铭王乐旬广东省代谢病中西医结合研究中心//广东省代谢性疾病中医药防治重点实验室//粤港澳联合代谢病重点实验室//广东药科大学中医药研究院广东广州510006

【目的】探讨甘露糖(Man)对炎症反应的调控及其机制,为甘露糖在炎症疾病中的应用提供依据。【方法】利用不同浓度的甘露糖处理RAW264.7巨噬细胞24 h或48 h,细胞计数检测增殖情况。低浓度(2 mmol/L)和高浓度(20 mmol/L)Man预处理RAW264.... 详细信息

【目的】探讨甘露糖(Man)对炎症反应的调控及其机制,为甘露糖在炎症疾病中的应用提供依据。【方法】利用不同浓度的甘露糖处理RAW264.7巨噬细胞24 h或48 h,细胞计数检测增殖情况。低浓度(2 mmol/L)和高浓度(20 mmol/L)Man预处理RAW264.7细胞12 h,然后脂多糖(LPS)处理8 h或24 h,收集mRNA、蛋白质及培养上清,通过Q-PCR、Western blot和ELISA检测炎症相关指标以及甘露糖受体(CD206)的变化。【结果】在5 mmol/L以下,细胞增殖随Man的浓度增加而增加;在5 mmol/L以上,则相反。和LPS处理相比,LPS+甘露糖2 mmol/L(Man2)能够增高IL-1β、IL-12和TNF-α的mRNA水平以及蛋白水平(均P代谢产物的潜在作用靶点有包括AKT和STAT3在内的20个蛋白。Man2可协同LPS刺激AKT和STAT3的磷酸化(均P<0.05),而Man20可抑制LPS诱导的AKT、p65和ERK磷酸化水平的增加(均P<0.05)。单独甘露糖处理可抑制AKT、STAT3和p65的磷酸化(均P<0.05)。【结论】不同浓度的甘露糖对炎症反应具有不同的作用。低浓度甘露糖能够促进LPS诱导的巨噬细胞炎症反应,而高浓度的甘露糖具有抑制LPS诱导的炎症反应,其机制与调控AKT、STAT3、p65和ERK的活性有关。

关键词：甘露糖巨噬细胞炎症信号通路

参白解毒方对结直肠腺瘤患者粪便代谢组学及肠道菌群分布的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第19期30卷 55-63页

作者：张烨倪明欣沈梦陶玉泉李柳范旻旻程海波南京中医药大学附属医院江苏省中医院南京210029 南京中医药大学第一临床医学院江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京210023

目的:观察参白解毒方对结直肠腺瘤患者粪便代谢组学及肠道菌群多样性分布的影响,探索其潜在的作用靶点。方法:共纳入21例结直肠腺瘤患者,连续服用参白解毒方4周,观察患者临床症状的改善,同时收集患者治疗前后粪便样本,采用液质联用(LC-... 详细信息

目的:观察参白解毒方对结直肠腺瘤患者粪便代谢组学及肠道菌群多样性分布的影响,探索其潜在的作用靶点。方法:共纳入21例结直肠腺瘤患者,连续服用参白解毒方4周,观察患者临床症状的改善,同时收集患者治疗前后粪便样本,采用液质联用(LC-MS)非靶向代谢组学及宏基因组学技术,探索参白解毒方可能作用的代谢通路及其对患者肠道菌群分布的影响。结果:患者服药后中医证候积分总分显著降低(P代谢组学结果显示服药前及服药后代谢物分布各自呈聚集状态,共筛选出106种差异代谢产物(P代谢通路主要有精氨酸-脯氨酸代谢通路;铁死亡;甘氨酸,丝氨酸和苏氨酸代谢等通路(P代谢物参与上述代谢通路;将这几种代谢物与差异的肠道菌群进行关联分析,结果显示参白解毒方可通过调节Lachnoclostridium、Eggerthella及Dialister等肠道菌群干预结直肠腺瘤患者氨基酸及铁死亡等代谢通路(P代谢通路发挥改善患者临床症状作用。该研究可能为参白解毒方干预结直肠腺瘤复发及癌变提供一些研究思路及方向。

关键词：结直肠腺瘤参白解毒方代谢组学肠道菌群宏基因组学