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过表达溶质载体家族1成员5和敲低慢病毒载体构建及稳定转染RAW264.7细胞株

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中国组织工程研究 2025年第7期29卷 1414-1421页

作者：郭大鑫范苏苏朱振东侯建红张旋云南省第三人民医院/大理大学第二附属医院云南省昆明市650011 昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室/现代生物医药产业学院云南省昆明市650500

背景:溶质载体家族1成员5(solute carrier family 1 member 5,SLC1A5)在多种疾病中发挥了潜在作用,但确切作用机制尚不清楚。构建稳定的SLC1A5过表达和敲低细胞模型可为深入研究SLC1A5在疾病中的确切作用机制以及发现潜在治疗靶点提供... 详细信息

背景:溶质载体家族1成员5(solute carrier family 1 member 5,SLC1A5)在多种疾病中发挥了潜在作用,但确切作用机制尚不清楚。构建稳定的SLC1A5过表达和敲低细胞模型可为深入研究SLC1A5在疾病中的确切作用机制以及发现潜在治疗靶点提供有力的实验工具。目的:构建小鼠SLC1A5过表达和敲低的慢病毒载体,以建立稳定转染的RAW264.7细胞株,为深入探讨SLC1A5在炎症中的作用提供实验基础。方法:根据SLC1A5基因序列设计合成引物并使用聚合酶链反应扩增该基因片段。将目的基因定向接入经Age I/Nhe I酶切的载体质粒GV492中构建重组慢病毒质粒,对阳性克隆进一步筛选后测序比对结果;pHelper1.0质粒载体、pHelper2.0质粒载体、目的质粒载体与293T细胞共同培养并转染,获得慢病毒原液进行包装和滴度测定;在此基础上,通过体外培养RAW264.7细胞,确定嘌呤霉素工作质量浓度;不同滴度的慢病毒分别与RAW264.7细胞共同培养,根据荧光强度确定转染效率;用嘌呤霉素挑选出稳定转染细胞,实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白免疫印迹方法检测稳定转染细胞株的SLC1A5基因和蛋白表达水平。结果与结论:(1)测序序列与目的序列一致提示重组慢病毒载体构建成功;(2)过表达SLC1A5慢病毒的滴度为1×10~9 TU/mL,敲低SLC1A5慢病毒的滴度为3×10~9 TU/mL;(3)确定RAW264.7细胞嘌呤霉素工作质量浓度为3μg/mL;(4)过表达/敲低SLC1A5慢病毒转染RAW264.7细胞的最佳条件皆为HiTransG P转染增强液且感染复数值等于50;(5)过表达SLC1A5稳转细胞株中SLC1A5基因和蛋白的表达量明显上调,而敲低SLC1A5稳转细胞株中SLC1A5基因和蛋白的表达量显著下调。结果表明,成功构建了小鼠SLC1A5过表达和敲低的慢病毒载体并获得稳定转染的RAW264.7细胞株。

关键词：慢病毒载体溶质载体家族1成员5 SLC1A5 过表达敲低 RAW264.7细胞稳转细胞株

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医学理论与实践 2025年第1期 26-29+37页

作者：刘莹袁玉华康义华杨夕朱晓云刘威云南省楚雄彝族自治州人民医院普外二科

目的：探讨外周血中血管生成相关因子的表达与晚期结直肠癌患者接受贝伐珠单抗联合化疗治疗效果的相关性。方法：选取2021年9月—2023年8月在我院接受贝伐珠单抗联合mFOLFOX-6化疗方案治疗的转移性结直肠癌患者66例为研究对象，在治疗... 详细信息

目的：探讨外周血中血管生成相关因子的表达与晚期结直肠癌患者接受贝伐珠单抗联合化疗治疗效果的相关性。方法：选取2021年9月—2023年8月在我院接受贝伐珠单抗联合mFOLFOX-6化疗方案治疗的转移性结直肠癌患者66例为研究对象，在治疗开始前、治疗12周、24周时分别取所有患者的血清，采用ELISA检测患者血清中血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)、人表皮生长因子受体-2(HER-2)、白细胞介素-8(IL-8)的水平，在治疗24周时观察评估两组患者的治疗结果及不良反应，并分析上述细胞因子及治疗结果之间的相关性。结果：治疗后总有效率为37.88%,无论是治疗前还是治疗后，治疗有效组的VEGF、VEGFR和IL-8均显著高于无效组，在治疗24周时治疗无效组HER-2水平高于有效组(P0.05),在治疗24周时较基线水平明显下降(P<0.05)。结论：VEGF、VEGFR和IL-8基线水平可能与贝伐珠单抗联合化疗对晚期结直肠癌的治疗效果相关，高水平的VEGF、VEGFR和IL-8可能预示着更好的治疗效果；在使用贝伐珠单抗联合化疗期间血清中HER-2表达的变化与治疗结果相关，HER-2过表达可能提示治疗无效、疾病预后不佳。

关键词：转移性结直肠癌贝伐珠单抗血管生成联合化疗

腹腔镜脾切除联合断流术对肝脏合成功能和肝纤维化程度影响的前瞻性研究

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中华外科杂志 2025年第1期63卷 51-57页

作者：肖坤清高添铭蔡金红史招宝金圣杰张弛周保换柏斗胜蒋国庆扬州大学附属苏北人民医院肝胆外科扬州大连医科大学扬州临床医学院肝胆外科扬州江苏省苏北人民医院肝胆外科扬州

目的探讨腹腔镜脾切除联合断流术(LSD)对肝脏合成功能和肝纤维化程度的影响。方法本研究为前瞻性病例系列研究。纳入2014年9月至2016年1月扬州大学附属苏北人民医院肝胆外科连续收治的接受了LSD的肝硬化合并门静脉高压患者的围手术期和... 详细信息

目的探讨腹腔镜脾切除联合断流术(LSD)对肝脏合成功能和肝纤维化程度的影响。方法本研究为前瞻性病例系列研究。纳入2014年9月至2016年1月扬州大学附属苏北人民医院肝胆外科连续收治的接受了LSD的肝硬化合并门静脉高压患者的围手术期和随访资料。收集患者的门静脉直径、门静脉血流速度、血常规、肝功能、肝合成蛋白 [抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)、蛋白S、蛋白C]、肝硬化四项(Ⅳ型胶原、Ⅲ型前胶原、层粘连蛋白、透明质酸)等临床数据。多组间比较采用重复测量方差分析, 事后多重比较采用最小显著性差异法。结果研究共纳入106例患者, 其中男性70例, 女性36例, 年龄(51.8±9.8)岁(范围:28～75岁)。术后门静脉直径和门静脉血流速度均较术前有下降趋势(F值分别为14.03、12.15, P值均<0.01), 总胆红素、白蛋白、凝血酶原时间、国际标准化比值、Child-Pugh评分和分级有所改善(F值分别为17.96、56.01、66.63、35.83、33.49和27.50, P值均<0.01), AT-Ⅲ、蛋白S、蛋白C、Ⅳ型胶原、Ⅲ型前胶原、层粘连蛋白和透明质酸水平亦有改善(F值分别为47.87、36.26、18.02、2.79、14.58、44.35和14.38, P值均<0.01)。与术前相比, 术后第1周至术后第24个月门静脉直径有所降低(t=5.45～9.39, P值均<0.01)。与术前相比, 术后第1周至术后第24个月门静脉血流速度有所降低(t=4.02～8.43, P值均<0.01)。与术前相比, 术后第24个月血常规(白细胞计数、血红蛋白、血小板计数)、肝功能(总胆红素、白蛋白、凝血酶原时间、国际标准化比值、Child-Pugh评分)、肝合成蛋白(AT-Ⅲ、蛋白S、蛋白C)、肝硬化四项(Ⅳ型胶原、Ⅲ型前胶原、层粘连蛋白、透明质酸)等均得到不同程度的改善(t=-20.46～11.93, P值均<0.01)。结论初步研究结果显示, LSD可降低肝硬化门静脉高压患者的门静脉压力、恢复血细胞数量, 并改善肝脏合成功能和肝纤维化程度。

关键词：肝硬化高血压, 门静脉腹腔镜脾切除术断流术

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改良结扎法用于脊髓损伤造模的优势分析

中国组织工程研究 2025年第2期29卷 379-384页

作者：李道辉徐晓霜李郑涛田新鹏毕航川刘源戴永文陈凌强昆明医科大学第一附属医院骨科云南省昆明市650032 昆明医科大学公共卫生学院云南省昆明市650500 西昌市人民医院四川省凉山彝族自治州615000

背景:目前根据脊髓损伤的损伤方式不同衍生出不同的模型构建方法,传统物理损伤造模方法都有各自的优缺点,尚缺乏较为有效和稳定的脊髓损伤动物模型。目的:建立一种可复制、可调控、创伤小、死亡率低、模型更稳定、适用范围广、术后护理... 详细信息

背景:目前根据脊髓损伤的损伤方式不同衍生出不同的模型构建方法,传统物理损伤造模方法都有各自的优缺点,尚缺乏较为有效和稳定的脊髓损伤动物模型。目的:建立一种可复制、可调控、创伤小、死亡率低、模型更稳定、适用范围广、术后护理时间短的脊髓损伤大鼠模型。方法:将体质量和鼠龄相似的40只SD大鼠随机分为对照组和改良组,每组20只,对照组采用钳夹造模法构建脊髓损伤模型,改良组选用基于压迫法改良的结扎法,在开窗的基础上使用缝线结扎的方法进行脊髓损伤的造模。比较两组大鼠的排尿行为、血尿、脓尿(感染率)、死亡率、脊柱畸形率及术后1,3,5,7 d的BBB运动功能学评分。结果与结论:基于压迫法改良的结扎法建立的脊髓损伤大鼠模型比常规建模方法排尿行为恢复较快、血尿率低、感染率低、死亡率低、脊柱畸形率低,BBB评分结果更集中稳定(1周内均<2分),由此可证明基于压迫法改良的结扎法更适用于脊髓损伤大鼠模型的建立。

关键词：改良脊髓损伤模型钳夹造模法结扎法排尿反射排尿行为脊柱畸形 BBB评分

解剖完全再血管化全动脉冠状动脉旁路移植术与保留全部瓣下结构的二尖瓣置换术治疗冠心病伴中至重度或重度缺血性二尖瓣关闭不全的多中心应用

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中华外科杂志 2025年第1期63卷 58-67页

作者：国科陈绪军郑宝石施超黄克力曹勇廖成全陈景伟林宇柳成信曹劝省申林王振东遵义医科大学附属医院心脏大血管外科遵义华中科技大学同济医学院武汉市第一医院心外科武汉广西医科大学第一附属医院心脏外科南宁蚌埠医科大学第一附属医院心外科蚌埠四川省人民医院心外科成都高州市人民医院心外科高州粤北人民医院心外科韶关茂名市人民医院心外科茂名广东省中医院心外科广州柳州市人民医院心胸外科柳州河南科技大学附属第一医院心外科洛阳重庆医科大学附属第二医院心胸外科重庆临汾市人民医院心脏外科临汾

目的探讨同期解剖完全再血管化全动脉冠状动脉旁路移植术(TACR)与保留全部瓣下结构的二尖瓣置换术(C-MVR)治疗冠心病伴中至重度或重度缺血性二尖瓣关闭不全(IMR)的效果。方法本研究为回顾性多中心病例系列研究。回顾性收集2015年7月至2... 详细信息

目的探讨同期解剖完全再血管化全动脉冠状动脉旁路移植术(TACR)与保留全部瓣下结构的二尖瓣置换术(C-MVR)治疗冠心病伴中至重度或重度缺血性二尖瓣关闭不全(IMR)的效果。方法本研究为回顾性多中心病例系列研究。回顾性收集2015年7月至2024年4月我国13家医院收治的127例同期接受TACR与C-MVR治疗的冠心病伴中至重度或重度IMR患者的资料。男性90例, 女性37例, 年龄(56.5±10.7)岁(范围:33～74岁)。收集患者的围手术期资料及随访期间左心室射血分数、左心室舒张末内径、动脉桥通畅率等参数。采用配对样本t检验或χ2检验对数据进行比较。结果 127例患者中, 67例同期行三尖瓣修复术。术中取带蒂左乳内动脉(LIMA)113支、左桡动脉127支、右桡动脉80支、右乳内动脉(RIMA)110支。远端吻合口数量为(4.2±0.4)个(范围:3～5个)。升主动脉阻断时间与体外循环时间分别为(97.5±23.4)min(范围:90～161 min)与(145.4±19.2)min(范围:101～210 min)。术中死亡1例。21例安装主动脉内球囊反搏以改善左心室射血功能。无患者发生胸骨缺血。除1例术中死亡患者外, 术后其余患者完成随访, 随访时间(64.3±7.5)个月(范围:4～110个月), 期间无重要心脑血管事件发生, 患者均存活。左心室射血分数较术前有改善(55.0%±5.3%比41.0%±15.3%, t=17.23, P<0.01), 心功能纽约心脏病协会分级≤2级者的比例较术前增加[23.6%(30/127)比87.3%(110/126), χ2=103.77, P<0.01], 心绞痛加拿大心血管学会分级≤3级者的比例较术前减少[4.8%(6/126)比78.7%(100/127), χ2=142.19, P<0.01], 左心室舒张末内径较术前减小[(5.70±4.50)cm比(6.10±0.23)cm, t=12.15, P<0.01]。术后(60.5±11.7)个月(范围:6～109个月)行冠状动脉多排CT血管成像检查, 结果显示, LIMA桥通畅率为96.4%(108/112)、左桡动脉桥通畅率为88.9%(112/126), 右桡动脉桥通畅率为93.7%(74/79), 游离RIMA桥通畅率为90.9%(100/110), 各动脉桥之间通畅率的差异无统计学意义(χ2=5.24, P=0.155)。结论 C-MVR与TACR治疗冠心病伴中至重度或重度IMR的中期结果较满意。

关键词：冠心病冠状动脉旁路移植术缺血性二尖瓣关闭不全全动脉冠状动脉旁路移植术解剖完全再血管化保留全部瓣下结构的二尖瓣置换术多中心研究

腰椎Modic改变和慢性腰痛椎间盘退变的相关性研究

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临床放射学杂志 2025年第1期44卷 150-154页

作者：严俊黄益龙柳晓龙李文智蒋超梅何登飞范广涛周顺繁何波曲靖市第一人民医院医学影像中心 655000 昆明医科大学第一附属医院医学影像科 650032 普洱市人民医院放射科 665000 云南省中医医院放射科 650021 西双版纳傣族自治州人民医院放射科 666199

目的探讨腰椎Modic改变的类型、位置、范围与腰痛椎间盘退变分级之间的相关性。方法多中心前瞻性研究中搜集腰痛患者并进行腰椎MRI扫描、VAS评分及椎间盘退变分级,统计各型Modic改变在腰椎各节段的发病率及分布情况,测量Modic改变最大... 详细信息

目的探讨腰椎Modic改变的类型、位置、范围与腰痛椎间盘退变分级之间的相关性。方法多中心前瞻性研究中搜集腰痛患者并进行腰椎MRI扫描、VAS评分及椎间盘退变分级,统计各型Modic改变在腰椎各节段的发病率及分布情况,测量Modic改变最大垂直累及高度及水平长度。使用ImageJ勾画Modic改变面积并计算Modic改变相对面积,分析Modic改变的位置及范围与VAS及椎间盘退变分级间的相关性。结果Modic改变相对面积与椎间盘退变分级呈轻度正相关(r=0.304,P<0.001),Modic改变相对高度及相对长度与椎间盘退变分级呈弱正相关(r分别为0.122、0.264,P均<0.05);Modic改变Ⅰ型水平长度评分及相对高度与VAS评分呈轻度正相关(r分别为0.342、0.301,P均<0.05),但Modic改变Ⅱ型相对高度及Modic改变Ⅱ型水平长度评分与VAS评分无明显相关性。Modic改变Ⅰ型发病率稍高于Modic改变Ⅱ型(Modic改变Ⅰ型:51.07%,Modic改变Ⅱ型:48.93%),在较低的腰椎节段Modic改变患病率更高(L 5~S 1:47.86%,L 4~L 5:31.82%);在水平位置上,Modic改变累及到前中后部最多,其次为前中部。结论Modic改变面积与椎间盘退变呈正相关;Modic改变Ⅰ型范围与腰痛呈正相关,但Modic改变Ⅱ型与腰痛无明显相关性。

关键词：腰痛 Modic改变椎间盘退变磁共振成像

股骨转子间骨折内固定失效后的全髋关节置换:隐性失血的模型预测

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中国组织工程研究 2025年第21期29卷 4506-4513页

作者：吕晓东古锦瑞高靖宇葛建忠阳泉市第一人民医院关节外科山西省阳泉市045000

背景:股骨转子间骨折在老年人和骨质疏松患者中尤为多见,治疗常需内固定手术来稳定骨折并促愈合。但内固定手术偶可失效,引发骨折不愈合、畸形愈合或再骨折等严重问题。目的:探讨股骨转子间骨折内固定后失效行人工全髋关节置换的效果及... 详细信息

背景:股骨转子间骨折在老年人和骨质疏松患者中尤为多见,治疗常需内固定手术来稳定骨折并促愈合。但内固定手术偶可失效,引发骨折不愈合、畸形愈合或再骨折等严重问题。目的:探讨股骨转子间骨折内固定后失效行人工全髋关节置换的效果及术后隐性失血的影响因素。方法:收集2019年5月至2022年9月于阳泉市第一人民医院治疗且随访资料完整的股骨转子间骨折内固定失效患者86例,采用人工全髋关节置换治疗,记录患者相关临床指标,对患者手术前后的Harris评分、疼痛目测类比评分以及SF-36评分进行对比分析。对全髋关节置换后隐性失血的影响因素进行单变量和多变量Logistic回归分析,建立Logistic回归模型和神经网络模型预测隐性失血,通过绘制受试者工作特征曲线对比2种模型的预测效能和准确性。结果与结论:(1)86例股骨转子间骨折患者在内固定失效后,均通过人工全髋关节置换手术成功治疗;(2)与术前相比,患者在术后3,6,12个月的Harris评分、目测类比评分、SF-36评分及患髋主动活动幅度均显著改善(P 0.05);(4)通过多因素Logistic回归分析,年龄、糖尿病、骨质疏松、假体类型、手术入路、髋关节间隙、总出血量、术中出血量、术后引流量及血红蛋白下降量是全髋关节置换后高隐性失血的危险因素(P <0.05);(5)将影响因素纳入到Logistic回归模型和神经网络模型预测隐性失血,绘制2个模型受试者工作特征曲线的曲线下面积分别为0.882和0.923,灵敏度分别为0.879和0.886,特异度分别为0.854和0.908,约登指数分别为0.733和0.794,准确性分别为0.867和0.897;2个模型的曲线下面积、约登指数和准确性均为神经网络模型更高;(6)提示全髋关节置换在治疗股骨转子间骨折内固定术后失效方面具有显著的临床效果,髋关节活动度恢复较好;年龄、糖尿病、骨质疏松、假体类型、手术入路、髋关节间隙、总出血量、术中出血量、术后引流量及血红蛋白下降量是人工全髋关节置换后高隐性失血风险的重要因素,基于危险因素构建的Logistic回归模型和神经网络模型对隐性失血的预测结果相差不大,神经网络模型更优。

关键词：股骨转子间骨折内固定失效人工髋关节置换治疗效果隐性失血

组蛋白脱乙酰酶1基因抑制人脐静脉内皮细胞焦亡并减轻动脉粥样硬化及炎性反应

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中国组织工程研究 2025年第25期29卷 5351-5361页

作者：张国安石践宋宝国黄晓燕陕西省人民医院心血管外科陕西省西安市710068 陕西省人民医院陕西省感染与免疫重点实验室陕西省西安市710068

背景:细胞焦亡作为炎症细胞死亡的一种独特形式,在动脉粥样硬化病变的不稳定性中发挥重要作用。目的:探究重组B细胞淋巴瘤2相关蛋白A1(B-cell lymphoma 2-related protein A1,BCL2A1)在动脉粥样硬化中的作用机制。方法:①使用200μg/mL... 详细信息

背景:细胞焦亡作为炎症细胞死亡的一种独特形式,在动脉粥样硬化病变的不稳定性中发挥重要作用。目的:探究重组B细胞淋巴瘤2相关蛋白A1(B-cell lymphoma 2-related protein A1,BCL2A1)在动脉粥样硬化中的作用机制。方法:①使用200μg/mL氧化低密度脂蛋白处理人脐静脉内皮细胞24 h以诱导内皮损伤。随后,分别使用50 nmol/L BCL2A1干扰质粒(sh-BCL2A1)和1.5μg/mL组蛋白脱乙酰酶1基因(histone deacetylase 1 gene,HDAC1)过表达载体(pcDNA-HDAC1)转染人脐静脉内皮细胞,或同时转染pcDNA-HDAC1和BCL2A1过表达载体(pcDNA-BCL2A1)。转染后培养48 h检测BCL2A1和HDAC1的表达水平、细胞活力、细胞焦亡水平以及BCL2A1乙酰化水平。②通过高脂喂养APOE-/-小鼠构建动脉粥样硬化小鼠模型进行体内验证。将500μL BCL2A1和HDAC1慢病毒过表达载体分别或同时尾静脉注射到小鼠体内,检测BCL2A1和HDAC1的表达水平以及小鼠动脉组织损伤情况。结果与结论:氧化低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞中BCL2A1上调,干扰BCL2A1可改善细胞活力并抑制细胞焦亡和炎症反应。此外,氧化低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞中HDAC1下调,通过促进BCL2A1去乙酰化提高了细胞活力及抑制了细胞焦亡和炎症反应。体内实验表明,BCL2A1在高脂喂养的小鼠动脉组织中高表达,而HDAC1低表达。此外,HDAC1通过促进BCL2A1去乙酰化减轻了高脂喂养诱导的ApoE-/-小鼠动脉组织病变。结果表明,HDAC1可能通过BCL2A1去乙酰化来抑制人脐静脉内皮细胞焦亡进而减轻动脉粥样硬化和炎症反应。

关键词：动脉粥样硬化 BCL2A1 HDAC1 乙酰化细胞焦亡

三维重建技术在早期肺癌外科治疗中的研究进展

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中国胸心血管外科临床杂志 2025年第1期 121-128页

作者：龙涛任正兵邵爱中何志成吴卫兵江苏大学附属人民医院心胸外科南京医科大学第一附属医院胸外科

肺癌是全世界范围内死亡率第一的恶性肿瘤。随着我国肺癌CT筛查及早诊早治的开展，越来越多含有磨玻璃成分的早期肺癌患者被发现且亟需治疗，这是对外科医师的巨大挑战。三维重建技术作为一种新兴技术在临床工作中起着非常重要的辅助作... 详细信息

肺癌是全世界范围内死亡率第一的恶性肿瘤。随着我国肺癌CT筛查及早诊早治的开展，越来越多含有磨玻璃成分的早期肺癌患者被发现且亟需治疗，这是对外科医师的巨大挑战。三维重建技术作为一种新兴技术在临床工作中起着非常重要的辅助作用，本文旨在对其作简要介绍，并重点阐述其在早期肺癌筛查、恶性风险评估、围手术期及教学等方面应用中的最新进展。

关键词：三维重建肺癌磨玻璃影电视辅助胸腔镜手术亚肺叶切除术人工智能综述

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