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二氢青蒿素诱导乳腺癌细胞凋亡的分子机制初探

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中华肿瘤防治杂志 2009年第14期16卷 1051-1054页

作者：顾洪涛毛海婷张玲温培娥许晓群李翠玲阴海鹏山东省医学科学院基础医学研究所山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室山东省现代医用药物与技术重点实验室山东济南250062 山东大学齐鲁医院临床基础研究所山东济南250012

目的:研究二氢青蒿素(DHA)对乳腺癌细胞系T47D的增殖、凋亡作用的影响,初步探讨其抗癌作用的分子机制。方法:以乳腺癌细胞T47D为研究对象,观测不同浓度和作用时间的DHA对T47D细胞的作用,MTT噻唑蓝比色法检测对细胞的增殖抑制作用,分别P... 详细信息

目的:研究二氢青蒿素(DHA)对乳腺癌细胞系T47D的增殖、凋亡作用的影响,初步探讨其抗癌作用的分子机制。方法:以乳腺癌细胞T47D为研究对象,观测不同浓度和作用时间的DHA对T47D细胞的作用,MTT噻唑蓝比色法检测对细胞的增殖抑制作用,分别PI单染及Annexin-V双染法流式细胞术分析细胞周期分布和早期凋亡率的变化,RT-PCR和蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白的表达。结果:DHA对T47D细胞有增殖抑制作用且呈剂量和时间依赖性,DHA作用24、48和72h的IC50值分别为60.03、33.86和17.18μmol/L;流式细胞仪检测细胞阻滞于G0/G1期,随药物剂量增大(20、40和60μmol/L),G0/G1期比例逐渐增高(42.76%、49.71%和63.01%),S期比例降低(48.45%、42.41%和30.98%);Annexin-V双染法示早期细胞凋亡率呈明显剂量依赖性升高〔(20.81±0.68)%、(30.90±0.73)%、(45.32±2.17)%(n=3)〕;RT-PCR检测显示,DHA作用后细胞凋亡诱导因子BimmR-NA的表达量升高;蛋白质印迹法检测DHA作用48h凋亡相关蛋白tbid和Caspase-8表达增强,且呈一定剂量依赖关系。结论:DHA能显著抑制人乳腺癌细胞T47D生长,影响细胞周期,诱导细胞凋亡,其分子机制可能与促使Bim、tbid和Caspase-8表达增强的内源性凋亡途径有关。

关键词：乳腺肿瘤青蒿素细胞凋亡

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碱裂解法快速提取虫草属真菌DNA研究

时珍国医国药 2016年第4期27卷 995-997页

作者：王茜侯飞侠王艺璇叶茂彭成沈才洪国锦琳成都中医药大学中药材标准化教育部重点实验室中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地四川成都611137 泸州老窖博士后科研工作站四川泸州646606

目的探索一种适用于虫草属基因组DNA快速提取的方法。方法在无液氮条件下使用碱裂解法提取虫草DNA,使用ITS通用引物进行PCR扩增。考察了提取液配方、煮沸时间对DNA提取的影响以及中和剂Tris-HCl用量对PCR扩增的影响。利用优化的提取方... 详细信息

目的探索一种适用于虫草属基因组DNA快速提取的方法。方法在无液氮条件下使用碱裂解法提取虫草DNA,使用ITS通用引物进行PCR扩增。考察了提取液配方、煮沸时间对DNA提取的影响以及中和剂Tris-HCl用量对PCR扩增的影响。利用优化的提取方法提取了虫草属5种虫草并用ITS通用引物进行PCR扩增。结果 80μl 0.5 mol/L Na OH进行提取,加入160μl 0.1 mol/L Tris-HCl中和,离心即可在10min内提取出虫草属真菌的DNA,PCR扩增能获得清晰目的条带。结论优化的碱裂解法可用于虫草属DNA的快速提取。

关键词：虫草属 DNA快速提取碱裂解法 PCR

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海南栽培肾茶中1个新的桉烷型倍半萜

中国中药杂志 2019年第1期44卷 95-99页

作者：陈惠琴张荣荣梅文莉蔡彩虹盖翠娟于旭东戴好富中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室海南海口571101 海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室海南海口571101 海南大学农学院海南海口570228

运用多种色谱技术,对海南栽培肾茶地上部分的化学成分进行分离,并根据波谱数据结合理化性质共鉴定了6个单体化合物的结构,分别为1-dehydroxy-1-oxo-rupestrinol (1),N-反式阿魏酰酪胺(2),丹参素甲酯(3),咖啡酸(4),咖啡酸甲酯(5)和咖啡... 详细信息

运用多种色谱技术,对海南栽培肾茶地上部分的化学成分进行分离,并根据波谱数据结合理化性质共鉴定了6个单体化合物的结构,分别为1-dehydroxy-1-oxo-rupestrinol (1),N-反式阿魏酰酪胺(2),丹参素甲酯(3),咖啡酸(4),咖啡酸甲酯(5)和咖啡酸乙酯(6),其中化合物1为新的倍半萜类化合物,化合物2和3为首次从肾茶中分离得到。活性测试结果显示,化合物2～4呈现不同程度的α-葡萄糖苷酶抑制活性。

关键词：肾茶桉烷型倍半萜 α-葡萄糖苷酶

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金橘抗氧化活性谱效关系

食品工业 2022年第7期43卷 111-116页

作者：邓华明黄华花陈景海王晓莹广东岭南职业技术学院护理与健康学院广州510663 厦门医学院药学系/厦门市中药生物工程重点实验室/福建省中药精加工与健康产品开发重点研究室厦门361023 厦门大学附属妇女儿童医院厦门市妇幼保健院中药房厦门361003

以金橘为研究对象,建立金橘抗氧化活性的谱效关系,为揭示其抗氧化活性物质基础提供参考。分别采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法和2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基清除法测定不同产地8批金橘样品的抗... 详细信息

以金橘为研究对象,建立金橘抗氧化活性的谱效关系,为揭示其抗氧化活性物质基础提供参考。分别采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法和2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基清除法测定不同产地8批金橘样品的抗氧化活性,结合前期指纹图谱研究,运用灰色关联度分析法(GRA)和偏最小二乘回归分析法(PLSR)考察金橘抗氧化活性的谱效关系。结果表明,8批金橘样品对DPPH自由基清除的IC_(50)为0.30~2.60 mg/mL,对ABTS自由基清除的IC_(50)为1.34~6.25 mg/mL。灰色关联度分析表明,24个共有峰与DPPH清除能力的关联度大于0.65的依次为X_(2)>X_(1)>X_(9)>X_(14)>X_(6)>X_(12)>X_(19)>X_(11)>X_(10)>X_(16),与ABTS清除能力的关联度大于0.8的依次为X_(19)>X_(2)>X_(16)>X_(20)>X_(17)>X_(23)>X_(22)>X_(24)>X_(21)。偏最小二乘回归分析表明,24个共有峰与DPPH清除能力VIP>1的依次为X_(19)>X_(2)>X_(9)>X_(12)>X_(10)>X_(1)>X_(14)>X_(5),与ABTS清除能力VIP>1的依次为X_(2)>X_(19)>X_(10)>X_(8)>X_(1)>X_(14)>X_(11)。因此,X_(2)、X_(19)所代表的化合物可能是其抗氧化活性的药效物质基础。

关键词：金橘抗氧化活性谱效关系灰色关联度分析法偏最小二乘回归分析法

慢性HCV感染患者外周血CD81、CD4表达的观测

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山东大学学报（医学版） 2010年第9期48卷 89-92,96页

作者：程广霞张玲刘靓雯冯照雷李翠玲山东省医学科学院基础医学研究所山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室山东省现代医用药物与技术重点实验室济南250062 济南市传染病医院检验中心济南250021

目的研究慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染患者外周血CD81、CD4的表达,探讨CD81对患者机体免疫系统的调节作用。方法选择HCV感染患者55例(感染组),健康对照25例(健康对照组),采用流式细胞术检测其外周血CD81、CD4的表达水平,ELISA法检测血清... 详细信息

目的研究慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染患者外周血CD81、CD4的表达,探讨CD81对患者机体免疫系统的调节作用。方法选择HCV感染患者55例(感染组),健康对照25例(健康对照组),采用流式细胞术检测其外周血CD81、CD4的表达水平,ELISA法检测血清中白介素2(IL-2)的含量,RT-PCR法检测血清中HCVRNA的含量。结果感染组CD81分子的表达水平与血清中HCVRNA的含量呈正相关(r=0.474,P<0.01)。感染组外周血淋巴细胞中CD81+细胞和CD3+CD4+T细胞中CD3+CD4+CD81+T细胞的数量均高于健康对照组(P<0.01),且二者呈正相关(r=0.581,P<0.01);感染组CD3+CD4+T细胞的数量和血清中IL-2的含量均显著低于健康对照组(P<0.05),且两者呈正相关(r=0.378,P<0.05)。结论 HCV感染后,HCVRNA的持续存在可能促进细胞表面CD81分子的表达;CD81分子高表达的同时,伴随CD3+CD4+T细胞数量降低,且分泌的细胞因子IL-2减少,参与患者机体的免疫调节。

关键词：丙型肝炎病毒白细胞分化抗原81 CD3+CD4+T细胞白细胞介素2 丙型肝炎病毒RNA

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醋莪术饮片质量控制方法的研究

华西药学杂志 2012年第4期27卷 447-449页

作者：廖婉傅超美章津铭傅舒刘芳高飞成都中医药大学药学院中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地四川成都611137 澳门大学中华医药研究院中药质量研究国家重点实验室澳门凼仔999078

目的完善醋莪术饮片的质量控制方法。方法用薄层色谱鉴别醋莪术饮片;检测吸光度、水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇浸出物;测定挥发油的含量;采用HPLC测定醋莪术中姜黄素的含量。结果姜黄素与峰面积的线性关系良好(r=0.9999,n=6),平均加... 详细信息

目的完善醋莪术饮片的质量控制方法。方法用薄层色谱鉴别醋莪术饮片;检测吸光度、水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇浸出物;测定挥发油的含量;采用HPLC测定醋莪术中姜黄素的含量。结果姜黄素与峰面积的线性关系良好(r=0.9999,n=6),平均加样回收率为96.02%(RSD=2.80%,n=6),拟定醋莪术中姜黄素的含量不得少于40μg.g-1;挥发油含量测定的结果明显低于2010年版《中国药典》中醋莪术项下的有关规定。结论采用HPLC法测定醋莪术中姜黄素的方法简便、灵敏、重复性好,能更好地控制其质量。

关键词：醋莪术饮片质量控制姜黄素挥发油

两面针与混伪品及近缘种DNA条形码鉴定研究

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南方农业学报 2014年第1期45卷 12-17页

作者：马新业刘锋詹若挺韩正洲陈蔚文广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室广州510006 华润三九医药股份有限公司研发中心广东深圳518110

【目的】探讨DNA条形码技术对两面针真伪鉴定的可行性,为两面针种质资源的鉴定提供参考。【方法】对两面针及其常见混伪品和同属近缘种(10种31份样品)进行DNA提取、PCR扩增和双向测序,所得序列经CodonCode Aligner软件处理和人工校对,采... 详细信息

【目的】探讨DNA条形码技术对两面针真伪鉴定的可行性,为两面针种质资源的鉴定提供参考。【方法】对两面针及其常见混伪品和同属近缘种(10种31份样品)进行DNA提取、PCR扩增和双向测序,所得序列经CodonCode Aligner软件处理和人工校对,采用TaxonGap法比较rbcL、trnH-psbA和ITS2等3条序列的物种鉴定力大小;选择适用条形码在不同物种样品范围内进行分析,检查种内种间距离变化情况。【结果】ITS2和trnH-psbA两条序列对10个试验物种的鉴定效率均为100.0%,rbcL在实验物种范围内不存在最小种间遗传距离;ITS2序列在样品鉴定范围由12个物种33个数据扩大为33个物种132个数据时,鉴定成功率从100.0%下降至84.8%,种内变异大于种间变异的比例由71.4%上升至90.1%。【结论】ITS2和trnH-psbA序列可作为两面针真伪鉴定的标准条形码,实际应用中应注意确定物种鉴定样品数及种内充分取样。

关键词：两面针 DNA条形码 rbcL、trnH-psbA、ITS2序列鉴定效率

黄芩苷发酵转化成黄芩素和千层纸素A的黄芩内生真菌的筛选及鉴定

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中国实验方剂学杂志 2019年第9期25卷 166-171页

作者：马宗敏刘佳段绪红孙国强黄璐琦裴林河北省中医药科学院河北省浊毒证重点实验室石家庄050031 中国中医科学院中药资源中心北京100700

目的:采用现代微生物发酵转化技术开发传统中药——黄芩,从黄芩植株体内筛选可发酵转化黄芩苷的内生真菌,以期替代传统化学方法获得天然药效成分,同时缓解该中药资源紧张的现状。方法:以新鲜黄芩植株为材料,采用马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)... 详细信息

目的:采用现代微生物发酵转化技术开发传统中药——黄芩,从黄芩植株体内筛选可发酵转化黄芩苷的内生真菌,以期替代传统化学方法获得天然药效成分,同时缓解该中药资源紧张的现状。方法:以新鲜黄芩植株为材料,采用马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)平板培养消毒组织块,分离单菌落,黄芩药粉选择性培养法初筛,黄芩苷发酵转化实验复筛,HPLC分析转化产物。结果:从新鲜黄芩植株根部分离得到一株发酵转化黄芩苷的内生真菌R3,该菌在添加0.1%黄芩苷的马铃薯葡萄糖培养液(PDB)中能转化黄芩苷,同时产生黄芩素和千层纸素A共2种产物,于28℃,150 r·min^(-1)培养5 d转化率61.09%,其中黄芩素和千层纸素A的摩尔比3∶5。利用形态分析及显微鉴定并结合分子生物学技术手段,鉴定该菌为青霉菌,定名为Penicillium sp. R3。结论:筛选得到黄芩内生真菌Penicillium sp. R3,该菌能够转化黄芩苷得到活性更强、更易吸收的黄芩素,以及近年来因更多药效不断被发现而备受关注的千层纸素A,具有一定的研究价值与应用价值。

关键词：黄芩苷黄芩素千层纸素A 青霉菌R3 黄芩马铃薯葡萄糖琼脂转化率

新修订《药品管理法》文本中药品标准表述及相关问题探析

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中国药房 2022年第15期33卷 1806-1809页

作者：聂鹤云宋民宪严桂平谢明管咏梅颜冬梅朱卫丰辽宁中医药大学药学院大连116600 江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室南昌330004 江西中医药大学经济与管理学院卫生政策与法规教研室南昌330004

目的对新修订《药品管理法》文本中有关药品标准表述及条款进行梳理分析,探析药品注册标准内涵及其法律定位,以期为《药品管理法》中药品标准相关条款合理适用及有权解释提供参考。方法回顾我国药品标准管理演变历程,解析《药品管理法... 详细信息

目的对新修订《药品管理法》文本中有关药品标准表述及条款进行梳理分析,探析药品注册标准内涵及其法律定位,以期为《药品管理法》中药品标准相关条款合理适用及有权解释提供参考。方法回顾我国药品标准管理演变历程,解析《药品管理法》药品标准法律条文,采用对比及文献研究法,分析有关药品标准的法律表述与内涵。结果与结论新修订《药品管理法》现有条文中对药品标准存在“国家药品标准”“药品标准”“质量标准”等不同表述,省级中药饮片炮制规范法律定位不明确,在药品管理执法实践中可能存在法律规制不足。有必要对有关药品标准表述及条款内容进行有权解释;同时应进一步明确省级中药饮片炮制规范药品标准的法律属性,以促进中药饮片标准化管理。

关键词：药品管理法药品标准药品注册标准表述条款中药饮片