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多结节多中心性肝细胞肝癌的临床病理特征及预后

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中华普通外科杂志 2010年第10期25卷 792-796页

作者：李仕来黎乐群彭涛苏铭广西医科大学第一附属医院急诊科南宁530021 广西医科大学第一附属医院肝胆外科南宁530021

目的分析多结节多中心性肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的临床病理特征及其预后.方法本组患者62例,其中多结节组42例;单结节组16例;门静脉癌栓组4例.正常对照组5例.正常对照肝组织5例,来自肝移植供肝及肝外伤切除组织... 详细信息

目的分析多结节多中心性肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的临床病理特征及其预后.方法本组患者62例,其中多结节组42例;单结节组16例;门静脉癌栓组4例.正常对照组5例.正常对照肝组织5例,来自肝移植供肝及肝外伤切除组织.对各例组织线粒体DNA（mitochondrial DNA,mtDNA）D-Loop区进行测序,结合临床病理资料分析.结果 42例多结节癌组中有20例各结节的mtDNA D-Loop区序列存在差异,可能为多中心（multicentric occurrence,MO）起源,22例中各结节的mtDNA D-Loop区序列完全相同,可能为单中心（即肝内转移,intrahepatic metastasis,IM）起源;而单结节组16例及门静脉癌栓组4例肿瘤各部位样本的mtDNA D-Loop区序列完全相同,为相同细胞克隆起源.HBeAg（P=0.008）、肿瘤大小（直径之和）（P=0.029）、肿瘤位置（P=0.040）、肝硬化（P=0.011）、门静脉及镜下癌栓（P=0.023）、主瘤的分化程度（Edmondson分级）（P=0.027）等因素是协助区分多结节性肝癌细胞克隆起源的重要指标;HBeAg（＋）、肿瘤直径之和≤7 cm、肿瘤结节分别位于不同半肝、肝硬化、门静脉及镜下无癌栓和/或主瘤的病理分化程度为高、中分化者,MO发生的比例较高.MO组无瘤生存时间明显长于IM组的无瘤生存时间（21.6±4.2）个月vs.（8.7±2.5）个月（P=0.031）;MO组生存时间明显长于IM组的生存时间（29.6±4.7）个月vs.（14.6±2.9）个月（P=0.034）.在多因素分析中,IM/MO是患者术后无瘤生存时间（P=0.012）和生存时间（P=0.011）的独立影响因素.结论 HBeAg、肿瘤大小、位置、肝硬化、癌栓、分化程度等因素是协助鉴别IM和MO起源的重要指标;HBeAg（＋）、肿瘤直径之和≤7 cm、肿瘤结节分别位于不同半肝、肝硬化、门静脉及镜下无癌栓和/或主瘤的病理分化程度为高、中分化者,MO发生的比例较高.多中心性来源肝癌的疗效及预后较单中心来源伴肝内转移组为好.

关键词：癌,肝细胞序列分析预后

新型冠状病毒肺炎疫情防控期间智能医学专家共识

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中华实验外科杂志 2020年第2期37卷 393-398页

作者：陆林张加尧谢卯邵增务刘国辉郭晓东郭征季国忠冯世庆刘璠蕫为人周跃侯志勇徐波吕国华周东生桑宏勋王黎明邱冰叶川张元智海涌尹宗生曹晓建陈学明黄伟王俊文雷青汤欣朴成哲吴星火刘融段昱宇胡建中吕红斌陆声董健朱悦何庆向荣艾合买提江·玉素甫高飞黄玮谢毅徐松刘松相刘娟钟胜杨帆胡勇陈惟蒨孟祥飞丁焕文陈孝平裴国献叶哲伟华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科武汉430030 空军医科大学西京医院骨科西安710016 南京医科大学第二附属医院消化内科 210011 天津医科大学总医院骨科 300052 南通大学附属医院骨科 226001 南方医科大学国家级虚拟仿真实验教学中心广州510320 中国人民解放军陆军军医大学新桥医院骨科重庆400037 河北医科大学第三医院骨科石家庄050051 天津医科大学肿瘤医院乳腺癌诊治中心 100191 中南大学湘雅二医院脊柱外科长沙410008 山东省立医院骨科济南250021 南方医科大学深圳医院骨科深圳518110 南京医科大学数字医学重点实验室 211166 贵州省骨科医院骨科贵阳550007 贵州医科大学附属医院骨外科贵阳550001 内蒙古医科大学附属医院骨科呼和浩特010059 首都医科大学附属北京朝阳医院骨科北京100069 严安徽医科大学第一附属医院关节外科合肥230022 江苏省人民医院骨科南京210029 首都医科大学附属北京潞河医院骨科北京101149 重庆医科大学附属第一医院骨科 400042 武汉市第四医院骨科 430033 长沙市第三医院骨科 410015 大连医科大学附属第一医院骨科 116011 沈阳医学院附属中心医院骨科 100191 武汉科技大学附属普仁医院骨科 430081 湖北中医药大学中医学系武汉430065 中南大学湘雅医院脊柱外科长沙410008 中南大学湘雅医院运动医学科长沙410008 云南省第一人民医院骨科昆明650032 复旦大学附属中山医院骨科上海200032 中国医科大学附属第一医院骨科沈阳110001 成都市第三人民医院危重医学科 610031 南开大学医学院天津300071 新疆医科大学第一附属医院骨科乌鲁木齐830054 武汉大学计算机学院 430072 华中科技大学人工智能与自动化学院武汉430074 华中科技大学同济医学院附属协和医院影像科武汉430030 香港大学神经工程与临床电生理实验室 999077 澳门仁伯爵综合医院骨科 999078 国家超级计算天津中心 300457 广州市第一人民医院骨科 510180 华中科技大学同济医学院附属同济医院肝胆外科武汉430030 南方科技大学医院骨科深圳518055

新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019,COVID-19)的爆发已被世界卫生组织(WHO)宣布为国际关注的突发公共卫生事件。由于该病毒具有较强的传染性,已在中国多个地区流行。到目前为止,已有多个国家报告了新型冠状病毒(Severe Acute ... 详细信息

新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019,COVID-19)的爆发已被世界卫生组织(WHO)宣布为国际关注的突发公共卫生事件。由于该病毒具有较强的传染性,已在中国多个地区流行。到目前为止,已有多个国家报告了新型冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染病例,全球流行成为大概率事件。笔者系统地收集整理了全国多地抗疫一线在智能医学应用方面的经验,并结合目前国内外关于抗击新冠肺炎疫情防控原则的最新文献和循证医学证据,制订本专家共识,重点介绍在新冠肺炎疫情防控期间,智能医学在预防、预警、监控、隔离、治疗等方面的应用,为新冠肺炎的防控及治疗提供参考。

关键词：冠状病毒感染肺炎智能医学专家共识

通过线粒体DNA D-Loop区序列分析鉴别多结节性肝细胞性肝癌细胞克隆起源

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中国普外基础与临床杂志 2010年第6期17卷 567-572页

作者：李仕来黎乐群彭涛苏铭广西医科大学第一附属医院急诊科南宁530021 广西医科大学第一附属医院肝胆外科南宁530021

目的探讨通过线粒体DNA(mtDNA)D-Loop区序列分析鉴别多结节性肝细胞性肝癌(肝癌)细胞克隆起源的可行性。方法实验组为多结节肝癌组,标本来自广西医科大学第一附属医院肝胆外科2004年4月至2007年8月期间连续收治的42例共112个结节性HCC... 详细信息

目的探讨通过线粒体DNA(mtDNA)D-Loop区序列分析鉴别多结节性肝细胞性肝癌(肝癌)细胞克隆起源的可行性。方法实验组为多结节肝癌组,标本来自广西医科大学第一附属医院肝胆外科2004年4月至2007年8月期间连续收治的42例共112个结节性HCC行根治性手术切除的肿瘤组织。对照组来自同期单结节HCC手术切除组织共20例40个样本,分2个亚组,对照组Ⅰ为16例单结节肝癌的2块不相邻的癌组织;对照组Ⅱ为4例伴有肉眼门静脉癌栓的肝癌患者,取癌组织和癌栓各1块;正常对照组来自同期肝移植供肝或肝外伤切除的肝组织共5例。用PCR结合直接测序的方法检测各样本组织mtDNA D-Loop区的序列,并分析各例癌结节中序列异同情况。结果在42例实验组标本中,共有131个位点发生碱基变异,其中15个位点为点突变,9个位点发生插入,16个位点发生缺失,共出现98个多态性变化,位点总变异率为11.7%(131/1122,1122为mtDNAD-Loop区全长);实验组中有20例各结节的mtDNA D-Loop区序列存在差异,可能为多中心(MO)起源,22例各结节的mtDNA D-Loop区序列完全相同,可能为单中心(即肝内转移,I M)起源。对照组20例中各样本的mtDNAD-Loop区序列完全相同,为相同细胞克隆起源。正常对照组中共有14个位点发生碱基变异,均为多态性,其中NT479A>G为新的多态性。结论 mtDNA D-Loop区序列具有较高的变异率,应用PCR结合直接测序的方法检测该区序列并比较各个癌结节的DNA序列异同,可以快速、简单、有效地为区分I M和MO起源提供参考。

关键词：线粒体DNA D-Loop区多结节性肝癌克隆起源

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多模态融合技术三维重建岩上静脉

解剖学杂志 2021年第S1期44卷 38-38页

作者：吴世源何浩强陈正和牟永告李严兵黄文华钟世镇南方医科大学基础医学院人体解剖学国家重点学科广东省医学生物力学重点实验室广东省医学3D打印应用转化工程技术研究中心广州510515 南方医科大学第三附属医院

广东省医学3D打印应用转化创新平台中山大学肿瘤防治中心影像科中山大学肿瘤防治中心神经外科/神经肿瘤科华南肿瘤学国家重点实验室癌症医学协同创新中心岩上静脉(superior petrosal vein,SPV)是后颅窝手术中常见的路障静脉。

关键词：肿瘤学国家重点实验室岩上静脉肿瘤防治中心后颅窝手术多模态融合神经外科三维重建

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广东鼻咽癌诊治研究重点实验室通过论证

中华医学信息导报 1999年第21期14卷 4-5页

作者：冯世容朱锦柳中山医科大学科研处 510089

设在中山医科大学肿瘤防治中心

关键词：鼻咽癌重点实验室中山医科大学癌流行病学综合治疗高发现场 “九五”国家科技攻关肿瘤防治广东癌易感基因

肝螺杆菌对肝癌细胞侵袭能力的影响及分子机制的初步研究

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肝螺杆菌对肝癌细胞侵袭能力的影响及分子机制的初步研究

作者：张春忙南方医科大学

学位级别：硕士

背景及目的原发性肝癌(以下简称肝癌)是由肝细胞或肝内胆管上皮细胞发生的恶性肿瘤,人类最常见的恶性肿瘤之一,而我国是肝癌的高发国,其中45%发生在我国,是我国一种常见的恶性肿瘤,在消化系统恶性肿瘤中排第三位,仅次于胃癌和食管癌。... 详细信息

背景及目的原发性肝癌(以下简称肝癌)是由肝细胞或肝内胆管上皮细胞发生的恶性肿瘤,人类最常见的恶性肿瘤之一,而我国是肝癌的高发国,其中45%发生在我国,是我国一种常见的恶性肿瘤,在消化系统恶性肿瘤中排第三位,仅次于胃癌和食管癌。我国是世界上肝癌发生率和死亡率最高的国家,严重威胁着广大患者的健康。流行病学调查研究显示,随着人们生活环境的不断变化,在全世界范围内,肝癌发病率呈逐年上升趋势,目前全世界每年新增50万～100万病例,本病多发于中年男性,男女之比为2-5：1。肝癌的发病与治疗一直是当今医学界研究的热点,随着大量的临床实验及基础试验的深入研究,肝癌在诊断及治疗方面取的重大的进展,但相当多的肝癌发现时已是晚期,目前其临床治疗效果还相当有限。全世界肝癌患者5年生存率不到15%,死亡率为20.73/10万,全球平均每年约有25万人死于肝癌。即使是接受根治手术的病人术后5年内,复发率仍有30%至40%。目前,肝癌的治疗以外科手术为主,治疗肝癌最直接、最有效的手段仍然是肝脏肿瘤切除和肝移植术,辅以放疗、化疗以及其他辅助治疗的综合治疗手段虽然不断取得进展,但总体治疗效果仍不理想,复发与转移是影响肝癌预后的最主要原因。积极寻找肝癌侵袭转移的相关因素,阐明肿瘤转移机制仍是肝脏肿瘤防治研究的重点和难点。肿瘤的转移与其癌细胞的侵袭能力密切相关,我们可通过抑制癌细胞的侵袭来抑制肿瘤的转移。相反,如果人体长期暴露于一种促进细胞侵袭能力的环境中,发生肿瘤转移的可能性就会更高。目前普遍认为肝癌是多因素作用,多基因参与,多阶段发展的疾病,然而其发生和发展的确切机制仍未阐明。我国科研工作者对肝癌进行了长期研究发现,在我国肝癌高发区存在着数十种与肝癌发生有关的因素,其中最主要的原因是乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)感染,肝硬化、黄曲霉素、饮水污染、遗传因素也与肝癌的发病密切相关,此外,某些其他物质如亚硝胺类、偶氮芥类、酒精、微量元素及寄生虫感染均是可疑的致肝癌物质。大量流行病学调查及基础实验证据表明,慢性感染与某些严重疾病的发生发展密切相关,包括癌症。9种传染性病原体已被证实为人类致癌物,每年全世界新增癌症病例中17%由感染所致,尤其是的发展中国家,可以达到26%,而在发达国家所占比例相对较少,为7.2%左右。炎症是肿瘤发生发展过程中的重要组成部份。许多癌症产生于慢性感染和炎症部位。慢性炎症所形成的肿瘤微环境为肿瘤的发生和生长提供了条件,是肿瘤侵袭转移不可缺少的参与者。鼻咽癌、胃癌、肝癌、宫颈癌等均是与感染相关且发病率较高的恶性肿瘤,尤其胃癌及肝癌居我国消化系统恶性肿瘤的前3位,因此重视感染因素在癌症发生发展过程中的作用,对于开发恶性肿瘤新的诊疗措施具有重要意义。在这些与肿瘤相关的感染因素中,最主要的是病毒感染,寄生虫和细菌也占一定比例。自1982年Warren等成功分离幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)以来,Hp感染已被国内外很多学者所研究,Hp被认为是世界上感染率最高的细菌之一,其作为慢性胃炎及消化性溃疡主要病因已被许多研究肯定及确认,Hp感染与胃癌的发生也密切相关,并于1994年被列为第1类致癌因子,人类首次将细菌感染与癌症的发生联系在一起。此后,随着对螺杆菌属研究的深入,越来越多的螺杆菌属细菌被鉴定和分离出,迄今已发现20多种。根据定居部位不同,螺杆菌分为胃螺杆菌和肠肝螺杆菌。肝螺杆菌作为肠肝螺杆菌中的一员,属于与肝脏疾病有明确关系的五种肝螺杆菌(幼禽螺杆菌、肝螺杆菌、胆汁螺杆菌、胆囊螺杆菌、犬螺杆菌)之一。1992年,美国国家癌症研究所的Frederick癌症研究发展中心,发现在一项长期的毒理学研究中,作为对照组并无菌饲养的A/JCr小鼠发生原因不明的肝炎和肝脏肿瘤。排除化学及其他致癌因素后,在小鼠肝脏组织中检出一种螺旋状细菌,后经电镜扫描、生化性状鉴定及基因测序证实是一种与Hp有关的新品种螺杆菌,因其与动物肝脏疾病的发生发展密切相关,1994年正式命名为肝螺杆菌(Helicobacter hepaticus,***,Hh)。多项研究表明,Hh可长期定植于啮齿动物的肝脏,引起慢性肝炎、肝癌等病变。Hh主要定植于下消化道,包括盲肠、结肠以及肝胆管系统,目前没在胃内找到。该菌的自然宿主是鼠类,但在人类肝脏组织中也有检出的报道。国内外许多学者利用PCR、DNA序列分析、免疫组化证实了人肝癌组织中确实存在螺杆菌感染,这充分说明螺杆菌能够在人类肝组织中生存。Hh因其诱导引起的肝脏损害的病理特征与人类慢性肝病在许多方面相似,使Hh感染相关疾病的研究成为研究的热点。原发性肝癌的病因及确切分子机制尚不完全清楚,目前认为其发病是多因素、多步骤的复杂过程,且受环境和遗传双重因素影响。自Hp发现以来,许多新螺杆菌属成

关键词：肝螺杆菌肝癌侵袭 Toll受体4

肝切除术后胆漏的危险因素分析及改良美兰试验干预的临床研究-单中心260例分析

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肝切除术后胆漏的危险因素分析及改良美兰试验干预的临床研究-单...

作者：莫书天广西医科大学

学位级别：硕士

第一部分原发性肝癌行肝切除术后胆漏的危险因素及对患者的影响目的:肝切除术是治疗原发性肝癌(HCC)的重要手段,胆漏是肝切除术后常见的并发症之一。本研究首先通过回顾性分析因HCC行肝切除术患者的临床特征,探索肝切除术后胆漏的危险... 详细信息

第一部分原发性肝癌行肝切除术后胆漏的危险因素及对患者的影响目的:肝切除术是治疗原发性肝癌(HCC)的重要手段,胆漏是肝切除术后常见的并发症之一。本研究首先通过回顾性分析因HCC行肝切除术患者的临床特征,探索肝切除术后胆漏的危险因素、对患者围术期的影响及对肿瘤学预后的影响。方法:获取2012年6月到2018年6月期间,在广西医科大学的第一附属医院行肝切除术并病理诊断为HCC的206例患者的临床资料。探索整体胆漏的发生率,通过logistics单因素和多因素回归分析寻找胆漏的危险因素;采用Kaplan-Meier分析、Cox回归分析,评估肝切除术后胆漏对患者远期预后的影响;通过卡方、U检验和秩和检验比较肝切除术后胆漏患者围术期的影响。结果:在206例行肝切除术的患者中,术后有31例被诊断为胆漏,发生率为15.0%。其中,A级胆漏占38.7%(12/31),B级胆漏占58.0%(18/31),C级胆漏占3.2%(1/31)。logistics单因素分析和多因素分析提示,术中同期行胆囊切除术是胆漏的独立危险因素。术前ALP、DB,术后第一天AST、ALP、DB、涉及S7段的肝脏切除术可能是术后B/C级胆漏的危险因素。Kaplan-Meier分析和Cox回归分析提示术后胆漏未能显著影响患者的远期预后。此外,术后胆漏在围术期会延长患者引流管留置时间,B/C级胆漏会延长患者引流管留置时间、延长住院时间、增加住院费用。结论:(1)胆囊切除术是术后胆漏的独立危险因素;术前ALP、DB,术后第一天AST、ALP、DB,涉及S7段的肝脏切除术可能是术后B/C级胆漏的危险因素;(2)胆漏在围术期会延长患者引流管留置时间,B/C级胆漏会延长患者引流管留置时间、延长住院时间、增加住院费用;(3)术后胆漏对患者远期预后无明显影响。第二部分改良美兰试验干预的临床分析目的:肝切除术后胆漏会增加患者经济压力,围术期管理难度,甚至增加患者死亡率。本部分研究提出一种新型的改良美兰试验,对术中胆漏进行检测,探索改良美兰试验降低患者肝切除术后胆漏的安全性和有效性。方法:以广西医科大学第一附属医院肝胆外科2019年12月到2021年3月间,行肝切除术的54例患者为研究对象,术中行改良美兰试验,统计患者术前一般资料、血生化资料,术中手术时间、出血量、白纱布法检测点数、改良美兰试验检测点数,术后胆漏发生率、血生化资料、并发症、引流管留置时间、住院费用及住院时间,采用倾向性评分(PSM)降低两组基线资料之间的异质性后,采用卡方检验、t检验等评估资料间有无统计学显著性。结果:手术成功54例,无患者死亡及发生严重并发症,仅1例患者发生术后胆漏,发生率为1.9%,为A级胆漏;白纱布法检测胆漏能力(0.24个/例)显著弱于改良美兰试验的检测能力(0.56个/例)(P=0.015);将第一部分患者作为对照组,改良美兰试验组胆漏发生率为1.8%(P=0.017),B/C级胆漏发生率为0%(P=0.016),均显著降低;经PSM后,对照组胆漏发生率为18.5%,B/C级胆漏发生率为9.3%。而美兰试验组胆漏发生率为1.8%(P=0.004),B/C级胆漏发生率为0%(P=0.022),均显著降低;改良美兰试验组和对照组相比,手术时间,手术出血量,术后并发症,引流管留置时间和住院费无显著差异,且改良美兰试验能够有效地减少患者住院时间(P<0.001)。结论:(1)改良美兰试验能够有效降低肝切除术后胆漏的发生率;(2)改良美兰试验检测胆漏能力显著优于白纱布法;(3)改良美兰试验不会增加手术时间,手术出血量,切口感染等围术期并发症发生率、增加引流管留置时间和住院费,还能显著缩短住院时间。

关键词：胆漏原发性肝细胞癌并发症预后术中检测改良美兰试验白纱布法

瘦素、BDNF及其受体（Trk B）在人结肠癌细胞中的表达与生物学意义

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瘦素、BDNF及其受体（Trk B）在人结肠癌细胞中的表达与生物学意义

作者：康泰河北医科大学

学位级别：硕士

目的:结直肠癌是一种“现代病”–与现代生活方式和饮食类型有关。大量流行病学,特别是移民流行病学研究显示,结直肠癌的发病与能量摄入过多、肥胖、体力活动减少有关。就病因学而言,起决定作用的因素是环境因素而非遗传因素,结直肠癌... 详细信息

目的:结直肠癌是一种“现代病”–与现代生活方式和饮食类型有关。大量流行病学,特别是移民流行病学研究显示,结直肠癌的发病与能量摄入过多、肥胖、体力活动减少有关。就病因学而言,起决定作用的因素是环境因素而非遗传因素,结直肠癌是一个生活方式相关癌。在发展中国家,人们越来越多的采用与癌相关的生活方式包括体力活动减少,饮食“西方化”导致的肥胖是结直肠癌发病率快速上升的重要原因。据预测,我国的结直肠癌发病率和死亡率在今后很长一段时期内将稳步上升,成为最常见、发病率上升最快的恶性肿瘤之一。脂肪组织分泌雌激素、胰岛素和胰岛素样生长因子,还分泌不同的生物活性物质,称作脂肪因子,其中最引人注目的是瘦素（Leptin）和脂联素（Adiponectin）。下丘脑分泌的脑源性神经营养因子（Brain-derived neurotrophic factors,BDNF）作用于白色脂肪组织调节瘦素的合成和分泌,称为BDNF/Leptin轴,酪氨酸激酶受体B（Tyrosine kinase receptor B,Trk B）是BDNF的特异性受体。瘦素的血清浓度与身体脂肪总量和总体重直接相关。我们的前期实验针对瘦素、瘦素受体在结直肠癌组织和正常肠管组织中的表达情况进行了研究,发现瘦素和瘦素受体与结直肠癌密切相关。本研究采用Western blot的方法检测结肠癌细胞株DLD-1中瘦素和BDNF的表达,进一步分析瘦素和BDNF与结直肠癌的关系,同时用酶标仪MTT法观测瘦素和BDNF与结直肠癌细胞增殖生长的关系,探讨可能影响结直肠癌发生、发展的因素,试图为结直肠癌的诊断和治疗提供新的方法和理论依据。方法:1人结肠癌细胞株DLD-1和正常人肠上皮细胞株HIEC均由中山大学肿瘤防治中心（华南肿瘤学国家重点实验室）赠送。将其置于含10%胎牛血清的DMEM培养液,37℃,5%的CO2培养箱中培养。定期更换培养液,显微镜动态观察细胞生长情况,及时传代培养。2蛋白免疫印迹Western blot的方法检测结肠癌细胞株DLD-1和正常肠上皮细胞株HIEC中瘦素、BDNF和Trk B蛋白的表达情况。首先用细胞裂解液裂解细胞,获取蛋白提取液,并用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定总蛋白浓度。其次将蛋白提取液SDS-PAGE电泳,目的是根据分子量大小不同从蛋白提取液中分离出目的蛋白。再次,电转仪中将凝胶上目的蛋白转移到PVDF膜上,PVDF膜封闭后与相应一抗抗体充分孵育,抗原和抗体特异性结合反应。二抗经过辣根过氧化物酶偶联标记,识别结合一抗后与发光液接触可发出荧光。最后X光片压片、曝光、洗片和显影。3酶标仪MTT法检测瘦素和BDNF对结直肠癌细胞增殖生长的影响。体外培养结肠癌细胞株DLD-1,取处于生长对数期活性好的肿瘤细胞,形成细胞悬液后细胞计数并均匀接种于96孔板中,细胞浓度为103个/孔。分别用不同浓度的瘦素、BDNF和（或）氟尿嘧啶（fluorouracil, 5-FU）进行干预处理,培养箱中继续培养,一定时间（24h、48h、72h）后,加入相应MTT和DMSO液,酶标仪570nm波长处测定其OD值。按照下列公式计算肿瘤增殖率和抑制率。肿瘤增殖率=（实验组-对照组）/对照组×100%。肿瘤抑制率=（对照组-实验组）/对照组×100%。4统计学分析采用SPSS 13.0统计软件处理所得数据,各组数据以均数±标准差（±s）表示,定量资料的比较采用单因素多水平方差分析（one-way ANOVA）,以P学意义。结果:1结肠癌细胞株DLD-1高表达瘦素和Trk B,不表达BDNF。正常肠上皮细胞株HIEC不表达瘦素和BDNF,低表达Trk B。2瘦素的肿瘤增殖率随浓度升高而逐渐增高,浓度小于10mol/L时与空白组比较增高不明显（p﹥0.05）,等于或大于10mol/L时与空白组比较显著增高（p﹤0.05）。同一浓度随时间增加,肿瘤增殖率也逐渐上升。等于或大于10mol/L的各浓度,其24h与48h的增殖率相比较差异明显（p﹤0.05）,但48h与72h无显著差异（p﹥0.05）。瘦素减少5-Fu的肿瘤抑制作用,24h、48h和72h均降低5-Fu的肿瘤抑制率,有统计学意义（p﹤0.05）。3 BDNF的肿瘤增殖率随浓度升高而逐渐增高。浓度等于或小于0.05μg/mL时与空白组比较增高不明显（p﹥0.05）,大于0.05μg/mL时与空白组比较显著增高（p﹤0.05）。同一浓度随时间增加,肿瘤增殖率也逐渐上升。24h与48h差异不明显（p﹥0.05）,72h肿瘤增殖率显著高于24h（p﹤0.05）。BDNF也能减少5-Fu的肿瘤抑制作用,24h、48h和72h均明显降低5-F

关键词：结直肠癌瘦素 BDNF Trk B 增殖 MTT Western blot

肝门部胆管癌肿瘤直径及相关预后指标对患者预后的影响因素分析

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中华消化外科杂志 2018年第3期17卷 266-272页

作者：胡海洁靳艳文林圯昕周荣幸叶辉程南生李富宇四川大学华西医院胆道外科成都610041

目的：分析肝内胆管癌（ICC）临床病理特征及淋巴结转移特点。方法：采用回顾性病例对照研究方法。收集2007年4月至2017年11月国内12家医疗中心收治的1 321例［第二军医大学附属东方肝胆外科医院182例、西安交通大学第一附属医院173例... 详细信息

目的：分析肝内胆管癌（ICC）临床病理特征及淋巴结转移特点。方法：采用回顾性病例对照研究方法。收集2007年4月至2017年11月国内12家医疗中心收治的1 321例［第二军医大学附属东方肝胆外科医院182例、西安交通大学第一附属医院173例、陆军军医大学（第三军医大学）第一附属医院156例、中山大学肿瘤防治中心139例、复旦大学附属中山医院128例、上海交通大学医学院附属新华医院113例、大连医科大学附属第一医院109例、天津医科大学肿瘤医院84例、郑州大学第一附属医院65例、川北医学院附属医院62例、南京大学医学院附属鼓楼医院58例、浙江大学医学院附属第二医院52例］ICC患者的临床病理资料。患者完善相关检查后，根据其临床表现及检查结果，由各医疗中心制订治疗方案，行相应手术等治疗，根据术中检查结合患者实际病情决定手术方式。观察指标：（1）实验室检查及治疗情况。（2）临床病理特征与原发肿瘤位置及直径的关系。（3）淋巴结清扫及淋巴结转移诊断情况。（4）临床病理特征与淋巴结转移的关系。符合正态分布的计量资料以±s表示，组间比较采用t检验；偏态分布的计量资料以M（范围）表示。计数资料比较采用χ2检验。结果：（1）实验室检查及治疗情况：1 321例患者中，HBV阳性202例，占15.586%（202/1 296）；血清AFP阳性（〉20 μg/L）80例，占7.339%（80/1 090）；血清CEA阳性（〉5 μg/L）329例，占26.299%（329/1 251）；血清ALT阳性（〉75 U/L）207例，占16.587%（207/1 248）；血清CA19-9阳性（〉37 U/mL）590例，占49.789%（590/1 185）；血清TBil阳性（〉20 μmol/L）300例，占24.000%（300/1 250）。1 321例患者中，1 206例施行手术治疗，其中肝切除术904例，经导管动脉内化疗栓塞术 193例，经皮经肝胆管引流 72例，内镜逆行胰胆管造影3例，经皮经肝胆管引流＋内镜逆行胰胆管造影3例及其他治疗31例；115例原始手术名称记录缺失。（2）临床病理特征与原发肿瘤位置及直径的关系。①患者临床病理特征与原发肿瘤位置的关系：原发肿瘤位于左半肝患者的CA19-9水平≤37 U/mL、38～200 U/mL、〉200 U/mL分别为227、91、146例，右半肝分别为282、134、137例；原发肿瘤位于左半肝和右半肝合并肝炎患者分别为67例和111例；原发肿瘤位于左半肝和右半肝合并肝内胆管结石患者分别为73例和47例；两者上述指标比较，差异均有统计学意义（χ2=6.710，5.656，12.534，P〈0.05）。进一步分析结果显示：合并肝炎患者ICC发病年龄为（63±10）岁，未合并肝炎患者ICC发病年龄为（59±10）岁，两者比较，差异有统计学意义（t=4.840，P〈0.05）。②患者临床病理特征与原发肿瘤直径的关系：原发肿瘤直径≤3 cm、〉3 cm且≤5 cm、〉5 cm患者CEA水平≤5 μg/L分别为159、250、229例，〉5 μg/L分别为40、65、95例；ALT水平≤75 U/L分别为165、258、286例，〉75 U/L分别为34、57、36例；TBil水平≤20 μmol/L分别为148、242、281例，〉20 μmol/L分别为51、73、43例；有肿瘤卫星灶分别为37、70、131例；两者上述指标比较，差异均有统计学意义（χ2=8.669，6.637，15.129，34.746，P〈0.05）。（3）淋巴结清扫及淋巴结转移诊断情况：904例施行肝切除术的患者中，346例行淋巴结清扫，清扫的淋巴结总数为1 894.0枚，每例患者清扫淋巴结数目为5.5枚，中位淋巴结清扫数目为4.0枚（1.0～26.0枚）；157例发生淋巴结转移，淋巴结转移率为45.376%（157/346），阳性淋巴结数目为393.0枚，每例患者阳性淋巴结数目为2.5枚。346例行淋巴结清扫的ICC患者，术前影像学检查示淋巴结转移114例，其中术后病理学检查结果确诊淋巴结转移64例、淋巴结未转移50例；术前影像学检查示淋巴结未转移232例，其中术后病理学检查结果确诊淋巴结转移93例、淋巴结未转移139例。影像学检查诊断淋巴结转移的灵敏度为40.8%，特异度为73.5%，诊断准确率为58.7%。（4）临床病理特征与淋巴结转移的关系：ICC患者原发肿瘤位置位于左半肝和右半肝淋巴结转移率分别为51.397%（92/179）和39.103%（61/156），原发肿瘤直径≤3 cm、〉3 cm且≤5 cm、〉5 cm淋巴结转移率分别为34.615%（18/52）、42.500%（51/120）、52.980%（80/15

关键词：胆道肿瘤肝门部根治术肿瘤直径生存预后因素