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microRNA-639调控舌鳞状细胞癌上皮间质转化的实验研究

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中华口腔医学研究杂志（电子版） 2015年第1期9卷 15-19页

作者：武东辉王友元范松林钊宇李劲松广州市海珠区口腔医院口腔颌面外科 510220 中山大学孙逸仙纪念医院口腔颌面外科广州510120

目的探讨微小RNA(miR)-639对转化生长因子β1(TGF-β1)所诱导的舌鳞状细胞癌(TSCC)细胞上皮-间质转化(EMT)的调控作用。方法应用TGF-β1刺激上皮型SCC9、CAL27细胞,诱导形成相对应的间质型细胞SCC9 TGF-β1、CAL27 TGF-β1。通过实时荧... 详细信息

目的探讨微小RNA(miR)-639对转化生长因子β1(TGF-β1)所诱导的舌鳞状细胞癌(TSCC)细胞上皮-间质转化(EMT)的调控作用。方法应用TGF-β1刺激上皮型SCC9、CAL27细胞,诱导形成相对应的间质型细胞SCC9 TGF-β1、CAL27 TGF-β1。通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)、Western blot检测EMT的标记物,通过芯片检测得到一组差异性表达的miRNA,通过实时荧光定量PCR验证芯片检测结果。选取发生EMT的TSCC细胞中低表达的miR-639为研究对象,通过脂质体介导分别将miR-639的反义核苷酸(miR-639 ASO)和miR-639的拟似物(miR-639mimics)转染上皮型和相对应的间质型细胞,采用实时荧光定量PCR检测转染前后两株细胞中miR-639的表达变化,通过Transwell实验检测各组细胞侵袭、迁移能力差异。两组间均数的比较采用Student′s t检验,P实验组miR-639的表达明显上调或下调,阴性对照组与空白对照组中miR-639的表达无明显变化。Transwell实验检测转染miR-639 ASO后上皮细胞的侵袭迁移能力显著升高(P<0.05),并且可以诱导细胞发生EMT;转染miR-639 mimics后诱导所形成的间质型TSCC细胞的侵袭迁移能力显著降低(P<0.05),同时可逆转EMT。结论miR-639 mimics对TGF-β1所诱导形成的的间质型TSCC细胞具有调控作用,转染miR-639 mimics可逆转EMT并能有效地抑制间质型细胞SCC9 TGF-β1的侵袭迁移能力。

关键词：微小RNA-639 转化生长因子β1 上皮-间质转化肿瘤,鳞状细胞舌肿瘤

早期结外鼻型NK／T细胞淋巴瘤同期放化疗疗效分析

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中华肿瘤防治杂志 2012年第5期19卷 378-381页

作者：杨勇张玉晶孙颖高远红黄莹刘孟忠夏云飞中山大学肿瘤防治中心放疗科华南肿瘤学国家重点实验室广东广州510060 重庆市肿瘤医院放疗科重庆400030

目的:探讨ⅠE～ⅡE期结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤同期放化疗的疗效,并进一步分析其可行性。方法:回顾分析18例早期结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤患者,以序贯化放疗50例为对照。18例同期放化疗患者中诱导化疗+同期放化疗+辅助化疗3例,诱导化疗+同... 详细信息

目的:探讨ⅠE～ⅡE期结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤同期放化疗的疗效,并进一步分析其可行性。方法:回顾分析18例早期结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤患者,以序贯化放疗50例为对照。18例同期放化疗患者中诱导化疗+同期放化疗+辅助化疗3例,诱导化疗+同期放化疗13例,同期放化疗+辅助化疗1例,单纯同期放化疗1例,全组放疗中位剂量54Gy。结果:诱导化疗后的总缓解率为50.0%(8/16),治疗结束后为100.0%(18/18)。同期放化疗组与对照组的5年总生存率分别为80.8%和54.3%(χ2=3.66,P=0.05),5年无进展生存率(PFS)分别为75.8%和43.3%(χ2=6.13,P=0.01),5年局部控制(LC)率分别为94.1%和56.7%(χ2=6.32,P=0.01)。同期放化疗过程中出现Ⅲ～Ⅳ度骨髓抑制率为27.8%(5/18),Ⅲ度口腔黏膜反应率为16.7%(3/18),Ⅲ度咽喉反应率为5.6%(1/18),其余不良反应均为Ⅰ～Ⅱ度,Ⅲ～Ⅳ反应经对症处理后未影响下一步治疗。结论:同期放化疗是早期结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤安全、有效的治疗方法,相对其他接受放疗患者有提高局部控制率和生存时间的趋势,其毒副反应可以耐受。

关键词：淋巴瘤/放射疗法淋巴瘤/化学疗法同期毒副反应疗效

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人阴道黏膜干细胞的筛选与培养(英文)

中国组织工程研究与临床康复 2008年第38期12卷 7591-7594页

作者：翁慧男王沂峰刘风华广州医学院第三附属医院妇产科广东省广州市510150

背景:目前国内外学者已经从人类或啮齿类等动物的皮肤、毛囊、角膜、口腔黏膜、肠道黏膜、牙齿断端、唾液腺等上皮组织中成功分离出干细胞,并应用于组织创伤修复的实验中,但人阴道黏膜干细胞的分离和应用的实验较少。目的:探讨人阴道黏... 详细信息

背景:目前国内外学者已经从人类或啮齿类等动物的皮肤、毛囊、角膜、口腔黏膜、肠道黏膜、牙齿断端、唾液腺等上皮组织中成功分离出干细胞,并应用于组织创伤修复的实验中,但人阴道黏膜干细胞的分离和应用的实验较少。目的:探讨人阴道黏膜干细胞的分离、筛选与适合的体外培养方法。设计:以细胞为对象的观察基础实验。单位:广州医学院第三附属医院(原广州市第二人民医院)妇产科。材料:实验于2004-10/2005-08在中山大学中山眼科中心实验室完成。实验室级别:卫生部眼科学重点实验室、广东省眼科视觉科学重点实验室、广东省教育厅眼科视觉科学重点实验室、广东省"五个一科教兴医工程"重点实验室。孕2周健康成年雌性昆明小鼠,由广州中医药大学实验动物中心提供。无细菌与病毒感染的患者的阴道黏膜标本5份,由广州医学院第三附属医院(原广州市第二人民医院)妇科提供。方法:采用胰酶、胶原酶混合消化法获得阴道黏膜细胞。将丝裂酶素C处理的小鼠成纤维细胞作滋养层细胞。采用Ⅳ型胶原快速黏附法筛选人阴道黏膜干细胞,并采用免疫细胞化学方法鉴定。将所筛选的人阴道黏膜干细胞与原代人阴道黏膜细胞分别用采用碘化丙啶一步荧光染色法、流式细胞仪分别检测其细胞周期。以4组方法体外培养原代人阴道黏膜干细胞:滋养层细胞+上皮细胞完全培养液、滋养层细胞+DMEM/F12(3∶1)、无滋养层细胞+上皮细胞完全培养液、无滋养层细胞+DMEM/F12(3∶1)。培养至12d,比较各组CK19、CK10阳性细胞比例、克隆形成率与凋亡前能传代的次数。主要观察指标:①所筛选的人阴道黏膜干细胞与原代人阴道黏膜细胞的G0/G1细胞比例、CK19、CK10阳性细胞的比例。②比较4种不同方法培养人阴道黏膜干细胞的CK19、CK10阳性的细胞比例、克隆形成率以及能传代的次数。结果:所筛选的人阴道黏膜干细胞与原代人阴道黏膜细胞的G0/G1细胞比例、CK19、CK10阳性的细胞比例均有统计学差异(P<0.05)。其中采用滋养层细胞+上皮细胞完全培养液培养人阴道黏膜干细胞12d,其克隆形成率与CK19阳性细胞比例最高,CK10阳性细胞比例最低,体外培养人阴道黏膜干细胞能稳定传15代以上。结论:①Ⅳ型胶原快速黏附法可有效筛选人阴道黏膜干细胞。②滋养层细胞+上皮细胞完全培养液为体外培养原代人阴道黏膜干细胞的较佳方法。

关键词：干细胞阴道黏膜细胞培养

SOX8通过Wnt/β-catenin通路调控舌鳞癌肿瘤干细胞样特性及顺铂诱导的上皮-间质转化的研究

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SOX8通过Wnt/β-catenin通路调控舌鳞癌肿瘤干细胞样特性及顺铂诱...

重组人乳铁蛋白对口腔癌KB细胞增殖及凋亡影响的研究

第十四次中国口腔颌面外科学术会议

作者：林钊宇李劲松谢舒乐范松陈伟雄李群星潘国凯张汉卿中山大学孙逸仙纪念医院口腔颌面外科广东省恶性肿瘤表观遗传和基因调控重点实验室

研究目的:探究SOX8蛋白调控舌鳞癌肿瘤干细胞样特性及顺铂诱导的上皮-间质转化的分子机制。研究方法:建立舌癌顺铂耐药株,通过qPCR、WB、Transwell、流式细胞术、小鼠成瘤模型和球囊培养等方法检测敲低SOX8对舌鳞癌顺铂耐药株化疗耐药... 详细信息

研究目的:探究SOX8蛋白调控舌鳞癌肿瘤干细胞样特性及顺铂诱导的上皮-间质转化的分子机制。研究方法:建立舌癌顺铂耐药株,通过qPCR、WB、Transwell、流式细胞术、小鼠成瘤模型和球囊培养等方法检测敲低SOX8对舌鳞癌顺铂耐药株化疗耐药性、舌癌耐药细胞EMT和肿瘤干细胞样特性的影响。通过qPCR,Western Blot、荧光素酶及CHIP等实验证实SOX8对Wnt/β-catenin的调控作用。研究结果:与亲本细胞相比,舌鳞癌顺铂耐药细胞发生EMT变化,且获得更强的肿瘤干细胞特性。在顺铂耐药株中敲低SOX8可抑制顺铂诱导的EMT、肿瘤干细胞样特性和化疗耐药性。SOX8可结合在wnt通路受体FZD7的启动子区,增强Wnt/β-catenin通路的活性,进而调控舌鳞癌EMT变化,化疗耐药性和肿瘤干细胞特性。敲除SOX8抑制了舌鳞癌顺铂耐药株皮下成瘤的能力,增强了对顺铂的敏感性,抑制了裸鼠的肺转移及EMT。SOX8在化疗不敏感的舌鳞癌标本中高表达,与患者化疗不敏感性和淋巴转移率密切相关,且SOX8高表达患者预后差。研究结论:SOX8可启动wnt通路受体FZD7的转录而激活Wnt/β-catenin通路,并促进舌鳞癌EMT变化且增强其肿瘤干细胞样特性,使得舌鳞癌获得耐药性。

关键词：舌鳞状细胞癌 SOX8 化疗耐药 Wnt/β-catenin通路肿瘤干细胞样特性

来源： cnki会议评论

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口腔医学 2018年第9期38卷 785-790页

作者：肖莉张继斌李宝霞广州市番禺区中心医院口腔科广东广州511400 中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤国家重点实验室广东广州510600

目的研究重组人乳铁蛋白(recombinate human lactoferrin,rh LF)对人口腔KB细胞增殖及凋亡的影响,为口腔癌患者提供新的有效治疗途径提供参考。方法采用CCK-8法检测不同浓度(0、12.5、25、50、100、200μg/m L)的rh LF分别处理KB细胞24... 详细信息

目的研究重组人乳铁蛋白(recombinate human lactoferrin,rh LF)对人口腔KB细胞增殖及凋亡的影响,为口腔癌患者提供新的有效治疗途径提供参考。方法采用CCK-8法检测不同浓度(0、12.5、25、50、100、200μg/m L)的rh LF分别处理KB细胞24、48、72 h后对细胞增殖的影响;Immunofluorescence及Western blotting方法检测rh LF处理前后DNA损伤相关蛋白γ-H2AX的表达。并分别用0、50、200μg/m L的rh LF处理KB细胞,14 d后观察其对集落克隆形成的影响;0、200μg/m L rh LF处理KB细胞48 h后,收集细胞并使用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测rh LF处理前后线粒体膜电位的变化。Annexin VPI染色检测rh LF对口腔癌KB细胞凋亡的影响;Western blotting检测0、50、200μg/m L的rh LF处理口腔癌KB细胞48 h后Parp、Caspase-3的表达情况。结果 rh LF处理KB细胞的增殖有显著的抑制作用。Immunofluorescence结果显示rh LF处理后γ-H2AX的表达明显增加,Western blotting结果也显示rh LF处理后γ-H2AX的表达成浓度依赖性增加。rh LF抑制KB细胞集落克隆的形成;JC-1荧光检测结果表明红绿荧光的相对比例降低,这种红绿荧光的相对比例降低提示膜电位下降;0、50、200μg/m L的rh LF处理口腔癌KB细胞48 h的凋亡率为2.02%、7.60%、48.07%;同时rh LF刺激口腔癌KB细胞能诱导Parp、Caspase-3的激活。结论 rh LF能显著抑制KB细胞的增殖并且诱导其细胞凋亡,其机制与线粒体凋亡途径的激活应激有关。

关键词：口腔癌重组人乳铁蛋白凋亡

西妥昔单抗联合同期顺铂化疗加调强放疗局部晚期鼻咽癌的安全性研究

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中华放射肿瘤学杂志 2012年第3期21卷 201-204页

作者：陈春燕赵充高黎郎锦义潘建基胡超苏金风王仁生谢丛华林桐榆卢泰祥华南肿瘤学国家重点实验室中山大学肿瘤防治中心放疗科广州510060 华南肿瘤学国家重点实验室中山大学肿瘤防治中心化疗科广州510060 中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院肿瘤研究所放疗科四川省肿瘤医院和研究所放疗中心福建省肿瘤医院放疗科复旦大学附属肿瘤医院放疗科贵州省肿瘤医院肿瘤科广西医科大学附属第一医院放疗科武汉大学中南医院放化疗科

目的通过开放性、多中心临床研究探讨西妥昔单抗联合同期顺铂化疗加调强放疗（IMRT）局部晚期鼻咽癌的安全性。方法100例Ⅲ～Ⅳh期初治鼻咽癌患者入组，IMRT处方剂量鼻咽原发灶66．0～75．9Gy，颈部阳性淋巴结60～70Gy；同期顺铂化疗剂... 详细信息

目的通过开放性、多中心临床研究探讨西妥昔单抗联合同期顺铂化疗加调强放疗（IMRT）局部晚期鼻咽癌的安全性。方法100例Ⅲ～Ⅳh期初治鼻咽癌患者入组，IMRT处方剂量鼻咽原发灶66．0～75．9Gy，颈部阳性淋巴结60～70Gy；同期顺铂化疗剂量80mg／m^2（每3周）；西妥昔单抗首剂400mg／m^2（放疗前，第1周），其后250mg／m^2（每周）。按不良反应常见术语标准3．0版评价这一联合方案的不良反应。结果全组患者治疗依从性良好。鼻咽原发灶大体肿瘤体积实际中位剂量为69．96Gy，颈部阳性淋巴结大体肿瘤体积为68Gy。同期顺铂中位剂量为133mg／疗程；西妥昔单抗中位起始剂量为690mg，中位维持剂量为410mg／周。治疗期间主要不良反应为痤疮样皮疹、口腔黏膜炎以及放射性皮炎，其中1级放射性皮炎及〉2级口腔黏膜炎分别占58％、90％，2％患者出现4级口腔黏膜炎。骨髓抑制较为轻微，仅分别有8％、4％和5％患者出现〉2级中性粒细胞减少、血小板降低和贫血。结论西妥昔单抗联合同期顺铂化疗加调强放疗局部晚期鼻咽癌的患者依从性好，不良反应可耐受。

关键词：鼻咽肿瘤/放射疗法化学疗法靶向治疗不良反应

高等院校口腔医学生临床技能培养与竞赛经验总结

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中国高等医学教育 2019年第7期 31-32页

作者：于依霖李佳润滕伟中山大学附属口腔医院广东省口腔重点实验室广东广州510055

由中山大学光华口腔医院主办的首届'华南杯'口腔医学生临床技能邀请赛邀请了全国12所口腔高等院校参赛,为历年来参与院校数量最多的口腔临床技能大赛。现根据比赛项目和培训内容,就选拔选手、培训教官等和不足之处等方面总结,愿为日后... 详细信息

由中山大学光华口腔医院主办的首届'华南杯'口腔医学生临床技能邀请赛邀请了全国12所口腔高等院校参赛,为历年来参与院校数量最多的口腔临床技能大赛。现根据比赛项目和培训内容,就选拔选手、培训教官等和不足之处等方面总结,愿为日后同类比赛主办和选手培训提供借鉴,达到以赛促学、以赛促教、以赛促建的目的。

关键词：口腔医学教育临床技能大赛临床实践

低氧诱导胶质瘤细胞上皮间质转化及差异表达的长非编码RNA的筛选

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广东医学 2019年第4期40卷 477-482页

作者：唐尚鸿宋磊谢舒乐李群星林钊宇惠州市中心人民医院儿科广东惠州516001 徐州医科大学第二附属医院口腔科江苏徐州221000 中山大学孙逸仙纪念医院广东省恶性肿瘤表观遗传与基因调控重点实验室广东广州510120

目的探索低氧诱导条件下神经胶质瘤细胞发生上皮间质转化相关的长非编码RNA与其侵袭转移的关系。方法通过芯片检测低氧诱导前后胶质瘤细胞的长非编码RNA的表达差异。通过qRT-PCR验证芯片结果的准确性以及上皮间质转化相关基因的表达变... 详细信息

目的探索低氧诱导条件下神经胶质瘤细胞发生上皮间质转化相关的长非编码RNA与其侵袭转移的关系。方法通过芯片检测低氧诱导前后胶质瘤细胞的长非编码RNA的表达差异。通过qRT-PCR验证芯片结果的准确性以及上皮间质转化相关基因的表达变化。通过转染敲低长非编码RNA的表达水平。通过蛋白免疫印迹检测蛋白水平的表达变化。通过侵袭迁移实验检测侵袭迁移能力的变化。结果低氧诱导神经胶质瘤细胞可发生上皮间质转化,芯片检测发现多个差异表达的长非编码RNA,长非编码RNA HOTTIP在低氧诱导后表达升高最为明显(P<0.01),降低其表达水平后可逆转其上皮间质转化的过程,并显著降低侵袭迁移能力(P<0.01)。结论长非编码RNA HOTTIP的表达升高可能与低氧诱导所发生的上皮间质转化以及增强的侵袭迁移能力密切相关。

关键词：低氧诱导上皮间质转化长非编码RNA 侵袭迁移

TBL教学模式在口腔修复美学临床实习教学中的应用

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中国高等医学教育 2021年第12期 89-90页

作者：浩志超王晓东梁国斌杨凌中山大学附属口腔医院广东省口腔重点实验室广东广州510055

目的:探讨以团队为基础的教学方法(Team-Based Learning,TBL)在口腔修复美学临床实习中的教学效果。方法:将学生随机分为TBL实验组和LBL对照组,通过理论测试及问卷调查的方式评估教学效果。结果:实验组学生成绩高于对照组(P<0.001),学... 详细信息

目的:探讨以团队为基础的教学方法(Team-Based Learning,TBL)在口腔修复美学临床实习中的教学效果。方法:将学生随机分为TBL实验组和LBL对照组,通过理论测试及问卷调查的方式评估教学效果。结果:实验组学生成绩高于对照组(P口腔美学临床实习中采用TBL教学可增强学生学习和团队协作能力,提高教学效果。

关键词： TBL教学教学反馈口腔修复学