重组人乳铁蛋白对口腔癌KB细胞增殖及凋亡影响的研究

作     者：肖莉 张继斌 李宝霞 XIAO Li;ZHANG Jibin;LI Baoxia

作者机构：广州市番禺区中心医院口腔科广东广州511400 中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤国家重点实验室广东广州510600 

出 版 物：《口腔医学》 (Stomatology)

年 卷 期：2018年第38卷第9期

页      面：785-790页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：广东省科技计划(2013B021800049) 

主　　题：口腔癌 重组人乳铁蛋白 凋亡 

摘      要：目的研究重组人乳铁蛋白(recombinate human lactoferrin,rh LF)对人口腔KB细胞增殖及凋亡的影响,为口腔癌患者提供新的有效治疗途径提供参考。方法采用CCK-8法检测不同浓度(0、12.5、25、50、100、200μg/m L)的rh LF分别处理KB细胞24、48、72 h后对细胞增殖的影响;Immunofluorescence及Western blotting方法检测rh LF处理前后DNA损伤相关蛋白γ-H2AX的表达。并分别用0、50、200μg/m L的rh LF处理KB细胞,14 d后观察其对集落克隆形成的影响;0、200μg/m L rh LF处理KB细胞48 h后,收集细胞并使用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测rh LF处理前后线粒体膜电位的变化。Annexin VPI染色检测rh LF对口腔癌KB细胞凋亡的影响;Western blotting检测0、50、200μg/m L的rh LF处理口腔癌KB细胞48 h后Parp、Caspase-3的表达情况。结果 rh LF处理KB细胞的增殖有显著的抑制作用。Immunofluorescence结果显示rh LF处理后γ-H2AX的表达明显增加,Western blotting结果也显示rh LF处理后γ-H2AX的表达成浓度依赖性增加。rh LF抑制KB细胞集落克隆的形成;JC-1荧光检测结果表明红绿荧光的相对比例降低,这种红绿荧光的相对比例降低提示膜电位下降;0、50、200μg/m L的rh LF处理口腔癌KB细胞48 h的凋亡率为2.02%、7.60%、48.07%;同时rh LF刺激口腔癌KB细胞能诱导Parp、Caspase-3的激活。结论 rh LF能显著抑制KB细胞的增殖并且诱导其细胞凋亡,其机制与线粒体凋亡途径的激活应激有关。