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卡格列净通过RAS和TGF-β1/Smad途径减轻高血压诱导的心肌肥厚和纤维化

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海南医学院学报 2022年第13期28卷 966-975页

作者：李爱花王青青秦迎春谢亦璘严志强安徽理工大学医学院安徽淮南232001 中山市中医院广东中山528401 上海交通大学闵行校区生命科学与生物技术学院上海市生殖医学重点实验室上海200240 安徽理工大学附属奉贤区中心医院上海201499

目的:研究卡格列净通过肾素血管紧张素系统(RAS)和转化生长因子-β1(TGF-β1)对自发性高血压大鼠(SHR)心室重构的影响。方法:本实验分为正常血压大鼠(WKY)组、SHR组、卡格列净低剂量[SHR-CANA(30 mg/kg)]组及卡格列净高剂量[SHR-CANA(60... 详细信息

目的:研究卡格列净通过肾素血管紧张素系统(RAS)和转化生长因子-β1(TGF-β1)对自发性高血压大鼠(SHR)心室重构的影响。方法:本实验分为正常血压大鼠(WKY)组、SHR组、卡格列净低剂量[SHR-CANA(30 mg/kg)]组及卡格列净高剂量[SHR-CANA(60 mg/kg)]组,每组8例,采用灌胃法给药,1次/d,连续8周。测定血压(BP)、血糖水平,采用超声心动图评价动物心功能,采用组织形态学评价动物左心室细胞面积。实时定量聚合酶链反应和蛋白印记杂交法检测Ⅰ型胶原(Col1a)、Ⅲ型胶原(Col3a)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、TGF-β1、Smad4、肾素、血管紧张素Ⅱ受体1(AGTR1)和血管紧张素Ⅱ受体2(AGTR2)的表达。结果:给药8周后,SHR-CANA(30 mg/kg)组及SHR-CANA(60 mg/kg)组的心脏体重/体重比(HW/BW)、左心室重量/心脏重量比(LVW/HW)、心肌细胞面积与SHR组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与SHR组相比,SHR-CANA(30 mg/kg)组及SHR-CANA(60 mg/kg)组的血压、血糖和体重明显降低。与SHR组相比,SHR-CANA(30 mg/kg)组及SHR-CANA(60 mg/kg)组Col1a、Col3a、MMP2、TGF-β1、Smad4、Renin、AGTR1表达显著下调,AGTR2表达上调。结论:卡格列净可通过调节RAS和TGF-β1/Smad信号通路改善高血压诱导的心脏重构。

关键词：卡格列净心肌肥厚心肌纤维化自发性高血压大鼠

指南解读类文献报告规范的制订指南(RIGHT for INT)

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中国循证医学杂志 2022年第5期22卷 497-507页

作者：周奇邢丹李沁原张静怡罗旭飞杨楠王小琴杨克虎田金徽李慧李博蔡羽嘉靳英辉吕兰婷孙凤尚淑贤袁蓓蓓李江马彬李秀霞袁源智吴蕾王斌姜雷王志稳陈耀龙杜亮兰州大学基础医学院循证医学中心兰州730000 中国医学科学院循证评价与指南研究创新单元 2021RU017兰州大学基础医学院兰州730000 兰州大学健康数据科学研究院兰州730000 北京大学人民医院骨关节科北京100044 重庆医科大学附属儿童医院呼吸科儿童发育疾病研究教育部重点实验室国家儿童健康与疾病临床医学研究中心儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿科学重庆市重点实验室重庆401122 广东省第二人民医院临床流行病与方法学中心广州510317 兰州大学公共卫生学院兰州730000 加拿大麦克马斯特大学Michael G.DeGroote疼痛研究与护理中心汉密尔顿L8S4L8 广东省中医院/广东省中医标准化工程技术研究中心广州510120 首都医科大学附属北京中医医院北京市中医药研究所北京中医药循证医学中心北京100010 四川大学华西医院中国循证医学中心成都610041 武汉大学中南医院循证与转化医学中心武汉430071 中国人民大学公共管理学院中国人民大学卫生技术评估与医药政策研究中心北京100872 北京大学公共卫生学院北京100191 中国医学科学院皮肤病研究所《中华皮肤科杂志》和《国际皮肤性病学杂志英文》编辑部南京210042 北京大学中国卫生发展研究中心北京100191 国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院北京100021 复旦大学附属中山医院眼科复旦大学循证医学中心上海200032 复旦大学附属中山医院厦门医院厦门361015 广东省中医院呼吸与危重症医学科广州510120 浙江大学医学院附属第一医院骨科杭州310006 兰州大学第一医院普外科兰州730000 北京大学护理学院北京100191

目的研发指南解读类文献的报告规范,以期更好地帮助指南解读者报告指南重要信息。方法RIGHT for INT课题组参考EQUATOR网站推荐的报告规范制订方法,确定了3个阶段的制订流程:第一阶段,通过邮件和微信的途径招募多学科的专家,根据职能划... 详细信息

目的研发指南解读类文献的报告规范,以期更好地帮助指南解读者报告指南重要信息。方法RIGHT for INT课题组参考EQUATOR网站推荐的报告规范制订方法,确定了3个阶段的制订流程:第一阶段,通过邮件和微信的途径招募多学科的专家,根据职能划分成核心制订小组、共识专家组及秘书组3个小组;第二阶段,采用文献调研和头脑风暴的方法收集初始条目;第三阶段,通过德尔菲调查和专家意见咨询,形成最终的RIGHT for INT清单。结果通过核心小组头脑风暴讨论和文献回顾,共收集40个初始条目。经过德尔菲调查和专家意见咨询过程(两轮均为17位专家,回复率均为100%),最终形成27个条目的RIGHT for INT清单。结论RIGHT for INT报告清单为指南解读者提供了撰写指南解读类文章的详细指导。

关键词：临床实践指南指南解读报告规范国际实践指南报告标准

教育精准扶贫中随机干预实验的中国实践与经验

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华东师范大学学报（教育科学版） 2020年第8期38卷 1-67页

作者：史耀疆张林秀常芳刘涵唐彬高秋风关宏宇聂景春杨洁白钰李英汤蕾岳爱茹彤陕西师范大学教育实验经济研究所西安710119 联合国环境署国际生态系统管理伙伴计划、中国科学院地理科学与资源研究所生态系统网络观测与模拟重点实验室北京100101

20世纪中后期以来,教育研究与经济学、医学、心理学、计算机科学等学科的交叉融合不断加深,随机干预实验作为跨学科研究方法的典型,已逐步成为国际上制定发展政策的关键环节,尤其是在教育和社会政策研究领域。2003年起,反贫困行动实验室... 详细信息

20世纪中后期以来,教育研究与经济学、医学、心理学、计算机科学等学科的交叉融合不断加深,随机干预实验作为跨学科研究方法的典型,已逐步成为国际上制定发展政策的关键环节,尤其是在教育和社会政策研究领域。2003年起,反贫困行动实验室(The Abdul Latif Jameel Poverty Action Lab,JPAL)和贫困行动创新组织(Innovations for Poverty Action,IPA)已在全球44个国家开展了近300项教育领域的随机干预实验评估研究,实证研究结果也被广泛应用于南亚、非洲和拉丁美洲等地区发展中国家政府的教育决策中。J-PAL的创始人也因其对全球减贫发展的贡献荣获2019年诺贝尔经济学奖。虽然国际上已有大量研究验证了随机干预实验在促进教育产出、改善贫困群体收入方面的积极作用,但中国教育精准扶贫领域的随机干预实验研究却鲜为人知。对2007年至2019年10月间公开发表的有关30多项教育精准扶贫随机干预实验研究的学术论文进行系统分析,可以发现,这些研究主要集中在以下四个领域:教师与教育、信息技术与教育、营养健康与教育和儿童早期发展。这四大领域的研究以中国农村贫困地区人力资本代际陷阱为主线,探索了低成本且可行的解决农村贫困地区教育及相关问题的有效途径,总结了中国农村贫困地区教育领域随机干预实验研究的发展历史、现状和实践经验,为农村教育实践者提供了可操作的办法,为农村教育决策者提供了基于数据的实证支撑,也为国家教育精准扶贫制度设计者提供了经过随机干预实验验证的有效策略。此外,本文还对如何在不开展随机干预实验的情况下使用准实验方法为教育精准扶贫政策的制定提供可靠的实证依据进行了拓展介绍。

关键词：随机干预实验农村教育农村贫困地区教育精准扶贫

青光安Ⅱ号方对DBA/2J小鼠视网膜中Rho/ROCK相关因子的影响

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海南医学院学报 2022年第13期28卷 976-981页

作者：时健彭俊姚小磊孙嘉桧李银鑫彭清华湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410208 广西中医药大学第一附属医院广西南宁530022 中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室湖南长沙410208

目的:观察青光安Ⅱ号方对DBA/2J小鼠视网膜中RhoA mRNA、ROCK mRNA、Caspase-3mRNA及Bcl-2 mRNA转录的影响。方法:使用48只DBA/2J小鼠随机平均分成模型组、青光安Ⅱ号汤剂组、青光安Ⅱ号有效组分低、中、高浓度组及阳性对照组(益脉康分... 详细信息

目的:观察青光安Ⅱ号方对DBA/2J小鼠视网膜中RhoA mRNA、ROCK mRNA、Caspase-3mRNA及Bcl-2 mRNA转录的影响。方法:使用48只DBA/2J小鼠随机平均分成模型组、青光安Ⅱ号汤剂组、青光安Ⅱ号有效组分低、中、高浓度组及阳性对照组(益脉康分散片组)6组,同时使用8只C57BL/6J小鼠作为空白组,DBA/2J小鼠喂养到38周后形成青光眼模型,干预4周后,采用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time,PCR)检测DBA/2J小鼠视网膜中RhoA mRNA、ROCK mRNA、Caspase-3 mRNA及Bcl-2 mRNA的转录情况。结果:干预4周后,在RhoA mRNA、ROCK mRNA和Caspase-3 mRNA的转录中,与空白组相比,其它6组的相对表达量均升高,模型组、益脉康分散片组及青光安Ⅱ号方有效组分低浓度组有统计学差异(P<0.05);与模型组相比较,其它6组的相对表达量均低于模型组,其中RhoA mRNA转录中的青光安Ⅱ号方汤剂组和青光安Ⅱ号方有效组分高浓度组有统计学差异(P<0.05);ROCK mRNA和Caspase-3 mRNA的转录中,模型组与青光安Ⅱ号方有效组分中、高浓度组统计学有差异(P<0.05);在Bcl-2 mRNA转录中,与空白组比较,其它6组相对表达量均下降,模型组、青光安Ⅱ号方汤剂组和青光安Ⅱ号方有效组分低浓度组统计学有差异(P<0.05);青光安Ⅱ号方有效组分中、高浓度组的Bcl-2 mRNA的相对表达量均高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:高浓度青光安Ⅱ号方可能是通过抑制Rho/ROCK信号通路而减弱了视网膜神经节细胞(RGCs)中Caspase-3的转录,激活了Bcl-2的表达,从而减弱了RGCs的凋亡。

关键词：青光安Ⅱ号方 DBA/2J小鼠 Rho/ROCK信号通路 Caspase-3 mRNA Bcl-2 mRNA

真皮多能干细胞复合血浆构建真皮再生模版及移植观察

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第15期13卷 2813-2817页

作者：柯昌能唐世杰易先锋朱镇森汕头大学医学院附属第二医院烧伤整形科广东省汕头市515041

背景:要实现组织工程皮肤生物学功能重建,应从重建功能正常的真皮入手,使之成为汗腺、血管、神经和脂肪再生的场所。目的:以真皮多能干细胞为种子细胞构建真皮再生模版,观察其移植后的成活状态。设计、时间及地点:单因素设计,重复观察,... 详细信息

背景:要实现组织工程皮肤生物学功能重建,应从重建功能正常的真皮入手,使之成为汗腺、血管、神经和脂肪再生的场所。目的:以真皮多能干细胞为种子细胞构建真皮再生模版,观察其移植后的成活状态。设计、时间及地点:单因素设计,重复观察,于2006-01/06在中山大学眼科中心国家重点实验室和中山大学动物中心进行。材料:6周龄BALB/c裸鼠10只,由中山大学动物中心提供。人皮肤多能干细胞来源于接受瘢痕整形手术患者的正常皮肤,由汕头大学医学院附属第二医院烧伤整形科提供。人O型血浆为大连制药有限公司产品。方法:取10mL人O型血浆,与生理盐水、氨甲环酸混匀后,添加1×105个经5-Brdu标记的人皮肤多能干细胞克隆,振荡致细胞团均匀分布在血浆中,再滴加氯化钙,放置37℃培养箱30min后成凝胶状,然后加入含胎牛血清、B27的DMEM/F12培养液,培养四五天细胞融合成片,吸干凝胶表面水分,使之成膜状,即为真皮模版。裸鼠麻醉后,背部制作全层皮肤缺损创面,然后植入真皮模版,覆盖创面。主要观察指标:真皮模版移植后观察血管化程度,创面上皮化后免疫组织化学检测模版中5-Brdu标记干细胞的成活状态。结果:人皮肤多能干细胞在血浆中增殖良好,真皮模版为白色生物膜,厚(500±254)μm,真皮模版中部分细胞仍表达nestin。真皮模版植入后,第3天模版下有少量的血管生成,第9天大量细胞迁入模版中。创面上皮化后第1,3周,皮肤组织的表皮和真皮中均可见大量5-BrdU阳性细胞分布。结论:人皮肤多能干细胞接种于血浆中构建的真皮模版移植后,能较快血管化,且真皮模版干细胞在受体组织中能成活下来。

关键词：皮肤多能干细胞组织工程真皮模版血管化

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人阴道黏膜干细胞的筛选与培养(英文)

中国组织工程研究与临床康复 2008年第38期12卷 7591-7594页

作者：翁慧男王沂峰刘风华广州医学院第三附属医院妇产科广东省广州市510150

背景:目前国内外学者已经从人类或啮齿类等动物的皮肤、毛囊、角膜、口腔黏膜、肠道黏膜、牙齿断端、唾液腺等上皮组织中成功分离出干细胞,并应用于组织创伤修复的实验中,但人阴道黏膜干细胞的分离和应用的实验较少。目的:探讨人阴道黏... 详细信息

背景:目前国内外学者已经从人类或啮齿类等动物的皮肤、毛囊、角膜、口腔黏膜、肠道黏膜、牙齿断端、唾液腺等上皮组织中成功分离出干细胞,并应用于组织创伤修复的实验中,但人阴道黏膜干细胞的分离和应用的实验较少。目的:探讨人阴道黏膜干细胞的分离、筛选与适合的体外培养方法。设计:以细胞为对象的观察基础实验。单位:广州医学院第三附属医院(原广州市第二人民医院)妇产科。材料:实验于2004-10/2005-08在中山大学中山眼科中心实验室完成。实验室级别:卫生部眼科学重点实验室、广东省眼科视觉科学重点实验室、广东省教育厅眼科视觉科学重点实验室、广东省"五个一科教兴医工程"重点实验室。孕2周健康成年雌性昆明小鼠,由广州中医药大学实验动物中心提供。无细菌与病毒感染的患者的阴道黏膜标本5份,由广州医学院第三附属医院(原广州市第二人民医院)妇科提供。方法:采用胰酶、胶原酶混合消化法获得阴道黏膜细胞。将丝裂酶素C处理的小鼠成纤维细胞作滋养层细胞。采用Ⅳ型胶原快速黏附法筛选人阴道黏膜干细胞,并采用免疫细胞化学方法鉴定。将所筛选的人阴道黏膜干细胞与原代人阴道黏膜细胞分别用采用碘化丙啶一步荧光染色法、流式细胞仪分别检测其细胞周期。以4组方法体外培养原代人阴道黏膜干细胞:滋养层细胞+上皮细胞完全培养液、滋养层细胞+DMEM/F12(3∶1)、无滋养层细胞+上皮细胞完全培养液、无滋养层细胞+DMEM/F12(3∶1)。培养至12d,比较各组CK19、CK10阳性细胞比例、克隆形成率与凋亡前能传代的次数。主要观察指标:①所筛选的人阴道黏膜干细胞与原代人阴道黏膜细胞的G0/G1细胞比例、CK19、CK10阳性细胞的比例。②比较4种不同方法培养人阴道黏膜干细胞的CK19、CK10阳性的细胞比例、克隆形成率以及能传代的次数。结果:所筛选的人阴道黏膜干细胞与原代人阴道黏膜细胞的G0/G1细胞比例、CK19、CK10阳性的细胞比例均有统计学差异(P<0.05)。其中采用滋养层细胞+上皮细胞完全培养液培养人阴道黏膜干细胞12d,其克隆形成率与CK19阳性细胞比例最高,CK10阳性细胞比例最低,体外培养人阴道黏膜干细胞能稳定传15代以上。结论:①Ⅳ型胶原快速黏附法可有效筛选人阴道黏膜干细胞。②滋养层细胞+上皮细胞完全培养液为体外培养原代人阴道黏膜干细胞的较佳方法。

关键词：干细胞阴道黏膜细胞培养

超声声孔效应增敏兔VX2肿瘤化疗效果的实验研究

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超声声孔效应增敏兔VX2肿瘤化疗效果的实验研究

作者：罗利红南方医科大学

学位级别：硕士

背景：空化效应是指液体中微泡在超声波作用下发生振荡、膨胀、收缩、内爆等变化,产生瞬态高温、高压、冲击波及喷射流等多种能量释放行为。有研究表明,超声击破微泡产生的物理流能使离体肿瘤细胞膜表面产生孔隙,增大细胞膜通透性,从... 详细信息

背景：空化效应是指液体中微泡在超声波作用下发生振荡、膨胀、收缩、内爆等变化,产生瞬态高温、高压、冲击波及喷射流等多种能量释放行为。有研究表明,超声击破微泡产生的物理流能使离体肿瘤细胞膜表面产生孔隙,增大细胞膜通透性,从而提高细胞药物摄取量,增强药物的细胞毒性作用,促使细胞死亡。该发现引起超声界普遍关注,并尝试将其用于治疗恶性肿瘤。恶性肿瘤的治疗一直是临床工作的重点和难点,化疗是其主要治疗手段之一,但多药耐药(Muti-drug resistance,MDR)的情况频繁发生,使得化疗的总体成功率不高,成为治疗肿瘤的最大障碍。多药耐药是指肿瘤细胞接触了某种抗癌药物后产生了对其他多种未接触过的、结构和作用机理完全不同的抗癌药物的耐药性。有研究表明,多因素致肿瘤细胞对抗癌药物摄取减少是MDR主要的生物化学机制之一。国内外学者尝试通过超声增强离体肿瘤细胞化疗效果并取得初步成果,展示出诱人前景。但在体肿瘤细胞不同于离体肿瘤细胞,前者与微泡之间有微血管及组织间隙隔离;而后者微泡可紧贴离体细胞,微泡被超声击破产生的物理流与离体细胞距离近,作用力大。虽有研究报导,单纯超声也可使离体肿瘤细胞膜表面产生裂隙,增加化疗药的细胞毒性,但单纯超声作用于活体时由于生物体内缺乏自身空化核,通常需要较高声压激励才能产生杀伤作用,可出现损伤周围正常组织等副作用,可控性差。载药微泡是将治疗性药物粘附、结合或镶嵌在微泡被膜层甚至整合在微泡内部,在血液中可减少与其他药物作用或体内酶反应,联合超声辐照可实现靶向药物释放,增加靶区药物浓度,达到治疗病灶的目的。但由于微泡壳上载药的“空穴”受限,载药量少。若增加微泡壁的厚度可提高载药量,又会加大微泡制作工艺的难度。有学者在小鼠后肢皮下建立肝癌模型,观察到靶向超声微泡爆破组的肿瘤伊文思蓝渗出量明显高于单纯超声辐照组,证实靶向超声微泡爆破能增加肝癌毛细血管的瞬间通透性,加大化疗药物在组织间隙的弥散,达到治疗肿瘤的目的。但微泡能否穿越血管壁上的孔隙进入组织间隙并产生二次甚至多次空化还是个未知的问题,并且超声声孔效应能否在活体肿瘤细胞膜上“打孔”,增加细胞膜甚至核膜通透性,增强肿瘤化疗效果的研究也未见报道。目的：本研究利用硝酸镧示踪电镜观察活体VX2肿瘤细胞膜通透性改变,了解超声治疗仪不同声强、脉冲宽度、辐照时间和不同微泡剂量下声孔效应致肿瘤细胞膜及核膜等超微结构改变,能否在细胞膜甚至核膜上产生孔隙,并摸索出增大肿瘤细胞膜通透性的适宜声学参数;在此基础上,进一步探讨超声联合微泡致声孔效应对VX2肿瘤化疗效果的影响。材料和方法： 1.主要实验材料实验仪器：CZ-906A型超声治疗仪,探头直径2.5cm,面积4.9cm2,声强在0.21W/cm2～1.09W/cm2可调,脉冲宽度在1.21ms-6.05ms可调。Philips IU22彩色多普勒超声仪,L9-3高频线阵探头,配有超声造影模式。Hitachi H-600型透射电了显微镜。超声微泡：南方医院药学基地研制的“全氟显”,为冻干人血白蛋白包裹全氟丙烷气体,每支用前加入3ml生理盐水,然后缓慢摇匀制成混悬液备用。所产生的微泡平均直径2.9μm,其中98%实验动物：健康新西兰白兔73只,雌雄不限,体质量2.0-2.5kg,由南方医院实验动物研究中心提供。VX2肿瘤组织匀浆由广州中山大学实验动物中心提供。 2.动物模型制备 2.1超声致微泡声孔效应增强兔VX2肿瘤细胞通透性的适宜声学参数的研究：以0.35ml/kg速眠新Ⅱ注射液及0.25ml/kg阿托品注射液将后肢外侧肌层内荷VX2肿瘤的新西兰白兔肌肉注射麻醉,并建立耳缘静脉通道以注射适量3%戊巴比妥钠,侧卧位固定于实验台上,荷瘤部位及其周围1.5cm处脱毛,充分暴露,碘伏及酒精先后分别消毒两次,无菌条件下取出肿瘤,并迅速剔除周边结缔组织及中央坏死区,将保留的新鲜鱼肉样组织置于无菌生理盐水中,眼科剪将其剪成1mm3的小块,分别接种于45只健康新西兰白兔双侧后肢外侧肌层内,约14天后用于实验。 2.2超声微泡声孔效应增强兔VX2肿瘤化疗效果的实验研究：前与(1)相同,用眼科剪剪成1mm3的小块后分别接种28只健康新西兰白兔右后肢外侧肌层内,约11d后用于实验。 3.实验流程 3.1超声致微泡声孔效应增强兔VX2肿瘤细胞通透性的适宜声学参数的研究：以声强、脉冲宽度、辐照时间、微泡剂量为处理因素将符合实验条件的38只肌层内荷VX2肿瘤新西兰白兔分成四组,依次考察各处理因素。考察某一因素各水平间差别时其他因素的水平固定不变。每一水平重复实验5次。严格设置各处理因素不同水平的条件,辐照时超声探头置于肿瘤体表处,同时经静脉

关键词：声孔效应超声微泡通透性生长抑制 VX2肿瘤