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基于CRISPR/Cas13a的新型冠状病毒核酸免扩增可视化快速检测研究

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中华检验医学杂志 2024年第6期47卷 658-666页

作者：赵楠齐永李巍毛颖清刘文婧韩一芳张迩馨徐应佳吕瑞辰蒋宇欣赖玉珍李佳萌沈万鹏宋悦李越希南京医科大学公共卫生学院南京211100 东部战区疾病预防控制中心南京210018 中国药科大学基础医学与临床药学院南京210009 中国药科大学药学院南京210009 中国药科大学南京210009

目的基于规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas13a)的特异性识别切割与非特异性的“反式切割”活性,建立易操作、检测限低、特异性好的核酸免扩增可视化快速检测方法—基于CRISPR/Cas13a的新型冠状病毒核酸免扩增快速检... 详细信息

目的基于规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas13a)的特异性识别切割与非特异性的“反式切割”活性,建立易操作、检测限低、特异性好的核酸免扩增可视化快速检测方法—基于CRISPR/Cas13a的新型冠状病毒核酸免扩增快速检测技术。方法参照新型冠状病毒的基因序列,利用生信技术筛选并设计合成多个新型冠状病毒特异的crRNA(CRISPR RNA),以体外转录的通用ssRNA(单链RNA)靶标建立检测技术并优化检测体系,以新型冠状病毒假病毒核酸标准物来评价方法检测限。收集临床样本,其中阳性样本应包含不同的新型冠状病毒变异株,阴性样本包括其他的常见呼吸道病原体(甲型流感病毒/乙型流感病毒、人类副流感病毒、肺炎克雷伯菌等)临床样本。分别用实时荧光定量PCR(qPCR)、数字PCR及本研究建立的免扩增可视化快速检测技术,对各种样本进行检测,分析评价新建立技术的灵敏度和特异度。采用四格表确切概率法针对荧光定量PCR、数字PCR与本技术检测结果进行统计学分析,采用双侧检验,P临床样本对所建立的检测技术进行敏感度和特异度分析,利用相关公式及SPSS22软件计算分析,该检测技术的敏感度98.5%(66/67),特异度100%(46/46),本研究建立的基于CRISPR/Cas13a的新型冠状病毒免扩增可视化快速检测技术检测结果与金标准qPCR检测结果差异无统计学意义(P=1)。结论本研究成功建立了一种基于CRISPR/Cas13a的新型冠状病毒核酸免扩增可视化快速检测技术,该技术流程简单、操作便捷,对操作环境要求低,检测限接近qPCR,有较强的现场检测应用潜力。

关键词：基因编辑新型冠状病毒核酸检测

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肿瘤原位疫苗研究进展

药学研究 2024年第6期43卷 521-528,567页

作者：卓烙伊杨勇中国药科大学基础医学与临床药学学院江苏南京211198

肿瘤疫苗被认为是一种有前景的肿瘤免疫治疗方式,但肿瘤自身的高异质性和高突变率极大地限制了传统肿瘤疫苗的开发。相比传统肿瘤疫苗,肿瘤原位疫苗直接将患者的肿瘤灶自身变为“抗原工厂”,具有全身毒性低、生物利用度高、个性化程度... 详细信息

肿瘤疫苗被认为是一种有前景的肿瘤免疫治疗方式,但肿瘤自身的高异质性和高突变率极大地限制了传统肿瘤疫苗的开发。相比传统肿瘤疫苗,肿瘤原位疫苗直接将患者的肿瘤灶自身变为“抗原工厂”,具有全身毒性低、生物利用度高、个性化程度强、时间经济成本小等多种优点,具有巨大的治疗潜力和临床转化价值。肿瘤原位疫苗通过诱导肿瘤局部发生免疫原性细胞死亡,促进肿瘤抗原及免疫激活介质的释放,启动或重启机体被沉默的“肿瘤-免疫循环”,并进一步诱导产生肿瘤特异性的免疫记忆。本文聚焦于肿瘤原位疫苗,对其抗肿瘤作用机制,具有关键临床结果的具体策略进行了详细介绍,揭示肿瘤原位疫苗的应用潜力与挑战,为肿瘤原位疫苗的设计提供理论参考。

关键词：肿瘤原位疫苗免疫治疗

微泡超声造影剂生物分析方法及药代动力学研究进展

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中南药学 2024年第8期22卷 2070-2076页

作者：陈梓欣陈西敬赵娣中国药科大学基础医学与临床药学学院临床药理研究中心南京211198

微泡超声造影剂是一类能够显著增强医学超声检测信号的药物,常用于心脏、肝脏、肾脏等部位的超声检查。优化对比增强成像、提高诊断效率需要对体内微泡造影剂的药代动力学有全面了解。本文归纳总结了微泡超声造影剂常用生物分析方法及... 详细信息

微泡超声造影剂是一类能够显著增强医学超声检测信号的药物,常用于心脏、肝脏、肾脏等部位的超声检查。优化对比增强成像、提高诊断效率需要对体内微泡造影剂的药代动力学有全面了解。本文归纳总结了微泡超声造影剂常用生物分析方法及其药代动力学进展,系统阐释微泡超声造影剂在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程,以期能够为微泡类药物的研究提供参考。

关键词：微泡超声造影剂药物代谢动力学生物分析方法

集中带量采购政策对注射用喹诺酮类药物处方行为和细菌耐药性影响分析

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中南药学 2024年第4期22卷 1080-1086页

作者：过佳月刘金春张海霞陈大宇中国药科大学基础医学与临床药学学院南京鼓楼医院药学部南京210008 南京鼓楼医院药学部南京210008 南京鼓楼医院南京市临床药学中心南京210008 中国药科大学基础医学与临床药学学院南京210009

目的研究集中带量采购政策对注射用喹诺酮类药物使用情况的影响和细菌耐药情况的变化。方法提取南京鼓楼医院2017年1月—2019年10月和2020年1月—2022年10月注射用喹诺酮类药物的使用数据,采用中断时间序列模型分析集采政策对其产生... 详细信息

目的研究集中带量采购政策对注射用喹诺酮类药物使用情况的影响和细菌耐药情况的变化。方法提取南京鼓楼医院2017年1月—2019年10月和2020年1月—2022年10月注射用喹诺酮类药物的使用数据,采用中断时间序列模型分析集采政策对其产生的影响;基于集采政策相关的调查问卷分析本院医务人员对政策的看法及产生相应行为的原因;利用相应时间段细菌耐药率、检出量进行相关性分析。结果第三批集采政策实施后,莫西沙星使用量呈下降趋势;第五批集采政策实施后,莫西沙星和环丙沙星的使用量呈上升趋势,且相较于对照组变化存在显著性差异;左氧氟沙星使用量呈持续下降趋势。问卷调查显示,喹诺酮类药物作为替代药优先选择,与第五批集采后喹诺酮类药物使用量的上升一致。喹诺酮类药物耐药率受政策影响不明显,与喹诺酮类药物用量无高度相关性。结论喹诺酮类药物在第三批集采政策实施后使用量下降,在第五批实施后也未出现异常增长现象。相关病原菌耐药率与药物使用量无高度相关性,政策对耐药率变化的影响还需长期监测。

关键词：集中带量采购政策喹诺酮类药物中断时间序列分析耐药率

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啮齿类动物致癌性试验统计学方法的使用现状

药物评价研究 2024年第2期47卷 444-449页

作者：杨兆红叶润泽霍桂桃王三龙中国食品药品检定研究院国家药物安全评价监测中心药物非临床安全评价研究北京市重点实验室北京100176 中国药科大学基础医学与临床药学学院江苏南京211198

啮齿类动物致癌性试验是新药研发中非临床安全性评价的重要组成部分。致癌性试验周期较长、数据量大,其统计学方法选用的合理性、科学性将可能影响试验结果的结论。首先介绍了目前致癌性试验常用的生存分析和肿瘤发生率统计方法;其次,... 详细信息

啮齿类动物致癌性试验是新药研发中非临床安全性评价的重要组成部分。致癌性试验周期较长、数据量大,其统计学方法选用的合理性、科学性将可能影响试验结果的结论。首先介绍了目前致癌性试验常用的生存分析和肿瘤发生率统计方法;其次,汇总了生存分析和肿瘤发生率统计方法的选用情况;最后,通过比较申报方、美国食品药品监督管理局审评方和美国国家毒理学项目中心在统计学方法选用的差异,分析和讨论了这些差异的来源和影响,并总结了致癌性试验统计分析设计思路。希望通过对以上内容的汇总和分析,能够为新药非临床致癌性试验提供参考。

关键词：药物非临床安全性评价致癌性试验美国食品药品监督管理局国家毒理学计划中心生存分析肿瘤发生率

妊娠期肝内胆汁淤积症患者的肠道菌群变化及微生物疗法的研究进展

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药学与临床研究 2024年第2期32卷 149-153页

作者：郭小慧梅洪梁张源张海霞南京大学医学院附属鼓楼医院药学部南京210008 中国药科大学基础医学与临床药学学院南京210009 南京临床药学中心南京210008

妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)是一种多发于妊娠晚期的疾病,严重影响着母婴结局,其病因和发病机制目前尚不清楚。血清胆汁酸水平是ICP诊断的主要临床依据,肠道菌群在胆汁酸的合成和代谢中起关键作用,肠道菌群及其代谢产物与ICP密切相关。... 详细信息

妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)是一种多发于妊娠晚期的疾病,严重影响着母婴结局,其病因和发病机制目前尚不清楚。血清胆汁酸水平是ICP诊断的主要临床依据,肠道菌群在胆汁酸的合成和代谢中起关键作用,肠道菌群及其代谢产物与ICP密切相关。微生物疗法如益生菌的使用可改善肠道微生物群,可作为治疗ICP的新思路。本文就ICP患者胆汁酸变化与肠道菌群之间的关系进行综述,分析肠道菌群与ICP发生发展的关系,发现某些特定菌种(如大肠杆菌志贺菌属、拟杆菌、双歧杆菌以及乳酸杆菌等)与ICP的发展密切相关,并总结益生菌改善胆汁淤积的研究进展,以期为ICP的临床治疗和管理提供新思路。

关键词：妊娠期肝内胆汁淤积症肠道菌群益生菌研究进展

调节性细胞死亡在心肌缺血再灌注损伤中的作用研究进展

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中南药学 2024年第7期22卷 1838-1844页

作者：张思琦郭朝瑞董志强陆程灿赵娣中国药科大学基础医学与临床药学学院临床药理研究中心南京211100 南京医科大学附属江宁医院药学部南京211100

心肌缺血再灌注损伤(MIRI)是心肌梗死患者接受再灌注治疗后产生不良预后的主要原因。调节性细胞死亡(RCD)是一种有序的细胞主动死亡方式,在维系正常生命活动中发挥着至关重要的作用。越来越多的证据表明RCD高度参与了MIRI的发展,可能成... 详细信息

心肌缺血再灌注损伤(MIRI)是心肌梗死患者接受再灌注治疗后产生不良预后的主要原因。调节性细胞死亡(RCD)是一种有序的细胞主动死亡方式,在维系正常生命活动中发挥着至关重要的作用。越来越多的证据表明RCD高度参与了MIRI的发展,可能成为挽救损伤心肌的关键。本文重点关注细胞凋亡、细胞自噬、细胞焦亡、坏死性凋亡以及铁死亡等RCD在MIRI发展过程中的作用,加深对MIRI病理过程的理解,为未来MIRI的临床治疗和药物研发提供参考。

关键词：调节性细胞死亡心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡细胞自噬细胞焦亡坏死性凋亡铁死亡

基于对同情用药认知现状的调研探索在我国开展同情用药研究的思考

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中国食品药品监管 2024年第4期 90-99页

作者：向瑾周姚张庆四川大学华西医院临床试验中心中国药科大学基础医学与临床药学学院艾昆纬医药科技(上海)有限公司临床运营卓越中心

目的:根据中美同情用药经验,调研临床试验从业人员的认知和理解现状,对细化和完善我国同情用药制度体系提出建议,从而更好地满足患者的临床需求。方法:使用自愿抽样、方便抽样等非概率抽样方法,基于现有中美同情用药经验,就同情用药的... 详细信息

目的:根据中美同情用药经验,调研临床试验从业人员的认知和理解现状,对细化和完善我国同情用药制度体系提出建议,从而更好地满足患者的临床需求。方法:使用自愿抽样、方便抽样等非概率抽样方法,基于现有中美同情用药经验,就同情用药的适用条件、申请和审查主体、患者安全管理、审批流程等方面,对临床试验从业人员的认知和理解进行问卷调查。结果:共收集740份有效问卷。调研结果显示,我国临床试验从业人员对我国同情用药的认知程度有待提高。相关企业和机构人员对我国同情用药的认知与理解存在共性和差异。共性主要体现在对同情用药适用人群、“是否可以向药品监管部门提出同情用药申请”的审查主体、严重不良事件报告义务的承担方、同情用药开展地点以及收费问题的认知等方面。差异主要体现在同情用药的药品条件、申请主体、同情用药期间发生不良事件的补偿或赔偿承担方、美国食品药品监督管理局针对紧急情况下单个患者协议和非紧急情况下中等规模患者同情用药的审批流程等方面。结论:现阶段,我国临床试验从业人员对同情用药的了解不足。不同角色的临床试验从业人员对我国同情用药的药品条件、申请和审查主体、患者安全管理以及审批流程等方面的理解差异较大。因此,鼓励加强同情用药相关政策宣传工作,引导更多满足条件的企业开展同情用药计划,让更多潜在患者获益,同时建议针对理解差异较大的内容进一步明确、细化和完善。

关键词：同情用药拓展性临床试验认知现状适用条件申请和审查主体安全管理审批流程

近红外荧光造影剂的临床应用与药代动力学研究进展

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中南药学 2024年第8期22卷 2077-2083页

作者：刘睿婷李涛陈梓欣陈西敬赵娣中国药科大学基础医学与临床药学学院临床药理研究中心南京211198 南京医科大学附属儿童医院肿瘤病区南京210000

快速发展的荧光影像技术促进了荧光造影剂的研究。临床现有的荧光造影剂包括吲哚菁绿、亚甲蓝和5-氨基乙酰丙酸。这些荧光造影剂临床应用广泛,但在体内的荧光成像部位和类型各不相同,可能与给药方式和药代动力学过程相关。目前荧光造影... 详细信息

快速发展的荧光影像技术促进了荧光造影剂的研究。临床现有的荧光造影剂包括吲哚菁绿、亚甲蓝和5-氨基乙酰丙酸。这些荧光造影剂临床应用广泛,但在体内的荧光成像部位和类型各不相同,可能与给药方式和药代动力学过程相关。目前荧光造影剂在临床尤其是特殊人群中的药代动力学研究较少。本文总结了已上市的荧光造影剂的临床应用现状和药代动力学性质,为明确其临床应用方向,优化药物使用提供依据。

关键词：吲哚菁绿亚甲蓝 5-氨基乙酰丙酸近红外荧光成像药代动力学生物分析方法