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铁氧还蛋白-NADP还原酶参与的循环电子传递

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1997年第1期29卷 40-45页

作者：叶济宇王颖君中国科学院上海植物生理研究所中国科学院上海植物生理研究所 200032

铁氧还蛋白-NADP还原酶(FNR)的专一抑制剂——肝素在低浓度下可以强烈抑制菠菜类囊体中铁氧还蛋白(Fd)介导的NADP光还原,以及类囊体中Fd/NADP诱导的延迟发光增加。在厌氧和存在DCMU阻断来自光系统Ⅱ电子的情况下,可以观测到由9-氨基吖... 详细信息

铁氧还蛋白-NADP还原酶(FNR)的专一抑制剂——肝素在低浓度下可以强烈抑制菠菜类囊体中铁氧还蛋白(Fd)介导的NADP光还原,以及类囊体中Fd/NADP诱导的延迟发光增加。在厌氧和存在DCMU阻断来自光系统Ⅱ电子的情况下,可以观测到由9-氨基吖啶荧光猝灭所反映的由Fd介导的光系统Ⅰ循环电子传递。肝素强烈抑制这一反应。但对PMS催化的光系统Ⅰ循环电子传递影响较小。此外,利用观测Fd的光下还原表明,肝素不影响光系统Ⅰ到Fd的电子传递。以上结果表明肝素通过抑制FNR活力抑制循环电子传递,支持了FNR参与循环电子传递的设想。

关键词：肝素铁氧还蛋白-NADP还原酶循环电子传递

几种氮化合物对地中海诺卡氏菌U-32氨同化酶的影响

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中国抗生素杂志 1984年第4期9卷 301-306页

作者：倪榴英焦瑞身中国科学院上海植物生理研究所微生物室中国科学院上海植物生理研究所微生物室上海

近年来有关微生物氨同化研究证明,主要同化途径不仅因微生物不同而异,且随所供应氮源的性质与浓度的不同而变动。我们在对力复霉素产生菌U-32的氮代谢研究中指出,当以硫酸铵为唯一氮源时,菌体中具有丙氨酸脱氢酶(ADH)和谷氨酰胺合成酶(... 详细信息

近年来有关微生物氨同化研究证明,主要同化途径不仅因微生物不同而异,且随所供应氮源的性质与浓度的不同而变动。我们在对力复霉素产生菌U-32的氮代谢研究中指出,当以硫酸铵为唯一氮源时,菌体中具有丙氨酸脱氢酶(ADH)和谷氨酰胺合成酶(GS)催化的氨同化途径,而且氨浓度的高低对这两条途径起调节作用。另外,ADH与GS两个酶的活力与力复霉素SV的合成之间有着相关性。在此基础上,本文又进一步研究了U-32在分别以脯氨酸、硝酸钾、丙氨酸、谷氨酸、尿素及谷氨酰胺为唯一氮源时各自的主要氨同化途径,以及这些氨同化酶与力复霉素SV合成之间的关系。实验结果表明,由于氮源不同,各个培养物中的GS和ADH的活力也不同,但它们的(GS)/(ADH)比值与力复霉素SV产量有正相关性,从而为设计提高SV产量的工作指出了一个方向。

关键词： ADH GS 丙氨酸脱氢酶 U-32 氮源力复霉素氮化合物 ⅤA族化合物

盐生杜氏藻甘油-3-磷酸脱氢酶的分离纯化及其特性的研究

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Acta Botanica Sinica 1999年第3期41卷 290-295页

作者：张学武刘承宪中国科学院上海植物生理研究所

利用ＰＥＧ分级，ＤＥＡＥ离子交换层析，ＢｌｕｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ拟亲和层析，ＭｏｎｏＱ离子交换层析等手段，分离纯化盐生杜氏藻（Ｄｕｎａｌｉｅｌａｓａｌｉｎａ（Ｄｕｎａｌ）Ｔｅｏｄ．）甘油三磷酸（Ｇ３Ｐ）脱氢酶（Ｅ... 详细信息

利用ＰＥＧ分级，ＤＥＡＥ离子交换层析，ＢｌｕｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ拟亲和层析，ＭｏｎｏＱ离子交换层析等手段，分离纯化盐生杜氏藻（Ｄｕｎａｌｉｅｌａｓａｌｉｎａ（Ｄｕｎａｌ）Ｔｅｏｄ．）甘油三磷酸（Ｇ３Ｐ）脱氢酶（ＥＣ１．１．１．８），得到比活为１２．６Ｕ／ｍｇ的电泳纯的酶，并对此酶的生化特性进行了研究。４％～２０％非变性聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测得全酶分子量约为２７０ｋＤ，ＳＤＳＰＡＧＥ表明该酶只有一种分子量约为６５ｋＤ的亚基，据此推测该酶应为同四聚体。酶催化磷酸二羟丙酮（ＤＨＡＰ）还原的最适ｐＨ值为７．５，催化Ｇ３Ｐ脱氢的最适ｐＨ值为１０。该酶对４个底物还原型辅酶Ⅰ（ＮＡＤＨ），二磷酸吡啶核苷酸（ＤＨＡＰ），辅酶Ⅰ（ＮＡＤ），Ｇ３Ｐ的表观Ｋｍ值分别为６３μｍｏｌ／Ｌ，２７２μｍｏｌ／Ｌ，１．５３ｍｍｏｌ／Ｌ，６．５２ｍｍｏｌ／Ｌ。该酶在保存过程中易失活。ＮＡＤＨ能降低酶失活的速度，而ＮＡＤ则不然。低浓度ＮａＣｌ对酶略有保护作用，但高浓度ＮａＣｌ加快酶的失活，且浓度越高效应越明显。

关键词：杜氏藻纯化动力学特性 G-3-P脱氢酶

小麦胚胎分化时营养吸收一种可能方式的细胞学论据

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Acta Botanica Sinica 1999年第4期41卷 373-378页

作者：张伟成严文梅高小彦中国科学院上海植物生理研究所

以光学与电子显微镜术结合荧光标记物示踪，对小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）胚胎分化时胚根鞘的形态结构特征的变化与营养吸收相联系进行了实验观察。发现在分化前期胚根鞘顶端的球状突起处和颈区朝向颖果背面一侧的特... 详细信息

以光学与电子显微镜术结合荧光标记物示踪，对小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）胚胎分化时胚根鞘的形态结构特征的变化与营养吸收相联系进行了实验观察。发现在分化前期胚根鞘顶端的球状突起处和颈区朝向颖果背面一侧的特定位点上出现了结构的变更；外沿局部细胞的衰退瓦解导致这些区段内侧存活细胞分界壁上出现大量残存的胞间连丝。不透膜的荧光物质、分子量达４３ｋＤ的ＦＩＴＣｄｅｘｔｒａｎ可进入球状突起和颈区多处细胞，表明残存胞间连丝仍具有共质传输功能，是分化幼胚摄取外围介质中营养物质的一种方式。分化进程中颈区的短时期局部缺损与随后的修复以及衰退区周围多层细胞胞间通透性的显著增大，既有利于外源物质的适时与大量掺入和在细胞间的快速运转，并仍保持了胚根鞘的结构完整，与分化前期胚胎对养分的大量需求正相适应，显示出胚根鞘的颈区比之球状突起处在营养吸收上占有更重要的地位。

关键词：胞间连丝胚根鞘营养吸收胚胎分化小麦

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解联剂促进BBY膜颗粒电子传递机理的研究

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1996年第2期28卷 187-194页

作者：李荣徐春和王国强中国科学院上海植物生理研究所

透射电镜结果表明，具有ＰＳⅡ理化特征的ＢＢＹ膜颗粒在结构上不具备完整的类囊体膜特征．９－ＡＡ荧光猝灭与毫秒级Ｃｈｌα延迟发光的测定表明，ＢＢＹ膜颗粒在功能上难以形成．光致跨膜质子浓度差．在ＢＢＹ膜颗粒中，解联剂ｇｒａ... 详细信息

透射电镜结果表明，具有ＰＳⅡ理化特征的ＢＢＹ膜颗粒在结构上不具备完整的类囊体膜特征．９－ＡＡ荧光猝灭与毫秒级Ｃｈｌα延迟发光的测定表明，ＢＢＹ膜颗粒在功能上难以形成．光致跨膜质子浓度差．在ＢＢＹ膜颗粒中，解联剂ｇｒａｍｉｃｉｄｉｎＤ（短杆菌肽〕和ＮＨ４Ｃｌ仅在低ｐＨ值时对ＰＳⅡ电子传递有所促进，ｐＨ６．０时促进尤为显著。两种解联剂促进的数值和对ｐＨ值的依赖特征基本一致，表明两者促进机制相同．综上所述，我们推测，解联剂在ＢＢＹ膜颗粒中并不促进跨越类囊体模的质子运转，而只是加速膜上微区内的质子转移，从而促进相关的电子传递。

关键词： BBY膜颗粒 PSII电子传递质子转移解联剂

耐低钾水稻的根质膜ATPase和H^+分泌特性

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Acta Botanica Sinica 1998年第6期40卷 521-526页

作者：林葵李琳徐坤颜季琼焦新之中国科学院上海植物生理研究所

对耐低钾和不耐低钾的水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）“威优４９”和“远诱１号”的根原生质膜ＡＴＰａｓｅ性质的研究表明，这两种水稻的质膜ＡＴＰａｓｅ活性的最适ｐＨ均为６０，均在底物ＡＴＰ浓度为３ｍｍｏｌ／Ｌ时达到最... 详细信息

对耐低钾和不耐低钾的水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）“威优４９”和“远诱１号”的根原生质膜ＡＴＰａｓｅ性质的研究表明，这两种水稻的质膜ＡＴＰａｓｅ活性的最适ｐＨ均为６０，均在底物ＡＴＰ浓度为３ｍｍｏｌ／Ｌ时达到最大反应速度，Ｋｍ值均在０．８５左右。Ｋ＋对这两种水稻的质膜ＡＴＰａｓｅ活性均具有促进作用。当介质中［Ｋｍ］≤５０ｍｍｏｌ／Ｌ时随［Ｋ＋］的增大，对耐低钾品种根质膜ＡＴＰａｓｅ活性的促进作用明显大于不耐低钾品种；当介质［Ｋ＋］在１００～２００ｍｍｏｌ／Ｌ之间时，Ｋ＋对两种水稻品种质膜ＡＴＰａｓｅ活性的刺激效应的差别减小。这两个水稻品种的基础Ｈ＋分泌没有明显差别，但钾刺激的Ｈ＋分泌存在差异，Ｋ＋对耐低钾品种Ｈ＋分泌的刺激效应大于不耐低钾品种。抑制剂实验表明在耐低钾和不耐低钾的水稻品种中，Ｋ＋刺激的根质膜ＡＴＰａｓｅ活性，Ｋ＋刺激的Ｈ＋分泌和Ｋ＋吸收之间存在着紧密的联系。对Ｋ＋刺激的质膜ＡＴＰａｓｅ活性和Ｈ＋分泌的抑制会减少根对Ｋ＋的吸收量。推测耐低钾水稻的质膜ＡＴＰａｓｅ和Ｈ＋分泌对Ｋ＋更为敏感，特别是在低浓度Ｋ＋存在时，可能是耐低钾水稻更能利用低浓度Ｋ＋、在低钾环境中能更好生长的一个原因。

关键词：质膜ATPase H^+分泌 K^+吸收耐低钾水稻

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渗透震扰对杜氏盐藻细胞蛋白质磷酸化的影响

Acta Botanica Sinica 1998年第2期40卷 126-131页

作者：陈思学李琳焦新之中国科学院上海植物生理研究所

杜氏盐藻（Ｄｕｎａｌｉｅｌａｓａｌｉｎａ（Ｄｕｎａｌ）Ｔｅｏｄ．）细胞可溶性蛋白提取液中含有对Ｃａ２＋有一定依赖性的蛋白激酶。体内磷酸化实验进一步说明细胞质Ｃａ２＋浓度对蛋白磷酸化有影响。加入Ｃａ２＋和ＭｏＯ－４显著... 详细信息

杜氏盐藻（Ｄｕｎａｌｉｅｌａｓａｌｉｎａ（Ｄｕｎａｌ）Ｔｅｏｄ．）细胞可溶性蛋白提取液中含有对Ｃａ２＋有一定依赖性的蛋白激酶。体内磷酸化实验进一步说明细胞质Ｃａ２＋浓度对蛋白磷酸化有影响。加入Ｃａ２＋和ＭｏＯ－４显著促进低渗震扰细胞蛋白质磷酸化，而高渗震扰细胞中蛋白磷酸化程度仍低于对照；在没有Ｃａ２＋和ＭｏＯ－４存在时，观察不到渗透震扰对蛋白磷酸化的刺激作用。低渗震扰信号的传导机制可能不同于高渗震扰信号，它很可能通过蛋白磷酸化进一步将信号放大，２４ｋＤ蛋白是杜氏盐藻细胞蛋白激酶最有潜力的作用底物。

关键词：盐藻蛋白质磷酸化杜氏盐藻渗透震扰

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CF0质子传导对两光系统间光能分布的影响

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1996年第6期28卷 678-685页

作者：何向东吴少龙李有则中国科学院上海植物生理研究所

用饱和闪光法测定类囊体中叶绿素荧光猝灭。观察到作用于质子通道ＣＦ０的氯化三苯基锡促进ｑＱ而降低ｑＫ，ＤＣＣＤ无此作用。在解联条件下或在高盐介质中ＴＰＴ对ｑＱ的促进作用消失；在Ｈ２Ｏ→ＰＤｏｘ或Ｈ２Ｏ→ＰＢＱ电子传递系... 详细信息

用饱和闪光法测定类囊体中叶绿素荧光猝灭。观察到作用于质子通道ＣＦ０的氯化三苯基锡促进ｑＱ而降低ｑＫ，ＤＣＣＤ无此作用。在解联条件下或在高盐介质中ＴＰＴ对ｑＱ的促进作用消失；在Ｈ２Ｏ→ＰＤｏｘ或Ｈ２Ｏ→ＰＢＱ电子传递系统中此促进作用方消失；用调制荧光法或低温荧光测定均表明ＴＰＴ增加了两光系统间光能分布的不平衡，有利于光能在ＰＳＩＩ的分布．即ＣＦｏ质子传导具有调节两个光系统间光能分布的功能，而这可能是通过膜上区域化质子对光系统ＩＩ光化学效率的影响来实现的．

关键词： H￣+-ATP酶复合体光能分布叶绿素荧光区域化质子 TPT

豌豆中可与Gro EL抗体发生免疫学反应的热激诱导蛋白

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Acta Botanica Sinica 1998年第10期40卷 933-938页

作者：陈忠苏维埃中国科学院上海植物生理研究所

通过Ｗｅｓｔｅｒｎ印渍方法，发现在豌豆（ＰｉｓｕｍｓａｔｉｖｕｍＬ．）叶存在一种高分子量的蛋白可与ＧｒｏＥＬ抗体发生免疫学反应，它含有两种亚基，分子量分别为６０．４ｋＤ（α）和６５．５ｋＤ（β），具有弱的ＡＴＰａｓｅ... 详细信息

通过Ｗｅｓｔｅｒｎ印渍方法，发现在豌豆（ＰｉｓｕｍｓａｔｉｖｕｍＬ．）叶存在一种高分子量的蛋白可与ＧｒｏＥＬ抗体发生免疫学反应，它含有两种亚基，分子量分别为６０．４ｋＤ（α）和６５．５ｋＤ（β），具有弱的ＡＴＰａｓｅ活性。热激处理后此蛋白的表达升高３～４倍，但外源ＡＢＡ处理并不增加它的表达。用３５Ｓ标记蛋白和氯霉素抑制实验表明，此蛋白可能是在８０Ｓ核糖体上合成的胞质蛋白。

关键词： GroEL Western印渍热激豌豆