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超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法测定养殖水中丁香酚和异丁香酚

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分析试验室 2022年第9期41卷 1083-1088页

作者：王强王旭峰赵东豪黎智广张英霞黄珂中国水产科学研究院南海水产研究所农业农村部水产品加工重点实验室广州510300

建立了超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)测定养殖水中丁香酚和异丁香酚。水体样品经过丹磺酰氯(DNCL)快速衍生化处理后,采用ThermoAccucore C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm)对衍生物进行分离,以乙腈和0.1%甲酸水... 详细信息

建立了超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)测定养殖水中丁香酚和异丁香酚。水体样品经过丹磺酰氯(DNCL)快速衍生化处理后,采用ThermoAccucore C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm)对衍生物进行分离,以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,Q-TOF-MS采用正离子全信息串联质谱扫描模式(MS~E)进行数据采集分析。结果表明,丁香酚和异丁香酚在0.1~20μg/L质量浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数(r)大于0.995,水体中的加标回收率分别为83.2%~102%和91.8%~104%,相对标准偏差均小于15%,检出限分别为0.02和0.05μg/L,定量限分别为0.05和0.1μg/L。该方法适用于水产养殖水中丁香酚和异丁香酚的快速测定。

关键词：超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱丹磺酰氯养殖水丁香酚异丁香酚

化学发光酶免疫分析法检测水产品中残留的麻醉剂丁香酚

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分析测试学报 2022年第3期41卷 354-360页

作者：王强王旭峰赵东豪张英霞黄珂中国水产科学研究院南海水产研究所农业农村部水产品加工重点实验室广东广州510300

将丁香酚(Eul)与4-溴丁酸叔丁酯进行衍生化反应,合成了半抗原4-(4-烯丙基-2-甲氧基-苯氧基)-丁酸(Eul-4-Tbl)。通过偶联载体蛋白并免疫动物后获取丁香酚多克隆抗体,建立了丁香酚的间接竞争化学发光酶免疫分析方法(ic-CLEIA)。水产样品... 详细信息

将丁香酚(Eul)与4-溴丁酸叔丁酯进行衍生化反应,合成了半抗原4-(4-烯丙基-2-甲氧基-苯氧基)-丁酸(Eul-4-Tbl)。通过偶联载体蛋白并免疫动物后获取丁香酚多克隆抗体,建立了丁香酚的间接竞争化学发光酶免疫分析方法(ic-CLEIA)。水产样品经乙腈提取,Oasis PRiME HLB固相萃取小柱净化后用于测定。结果表明,ic-CLEIA的最佳反应条件为:包被原质量浓度为0.125μg/mL,抗体稀释40000倍,抗体反应时间为30 min,药物稀释液为PBS。该方法的半抑制浓度(IC_(50))为1.28μg/L,检测线性范围为0.25~6.43μg/L,检出限(LOD,IC_(10))为0.11μg/L。样品中丁香酚的加标回收率为76.6%~108%,相对标准偏差(RSD)为5.9%~12%,测定结果与液相色谱-串联质谱法具有良好的相关性(r=0.9904),可用于水产品中麻醉剂丁香酚残留的快速测定。

关键词：丁香酚麻醉剂化学发光酶免疫分析多克隆抗体水产品

超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法测定养殖水中的丁香酚和异丁香酚

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分析试验室 2022年

作者：王强王旭峰赵东豪黎智广张英霞黄珂中国水产科学研究院南海水产研究所农业农村部水产品加工重点实验室

建立了超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF-MS）测定养殖水中的丁香酚和异丁香酚。水体样品经过丹磺酰氯（DNCL）快速衍生化处理后，采用Thermo Accucore C18色谱柱（100mm × 2.1 mm，2.6 μm）对衍生物进行分离，以乙... 详细信息

建立了超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF-MS）测定养殖水中的丁香酚和异丁香酚。水体样品经过丹磺酰氯（DNCL）快速衍生化处理后，采用Thermo Accucore C18色谱柱（100mm × 2.1 mm，2.6 μm）对衍生物进行分离，以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，Q-TOF-MS采用正离子全信息串联质谱扫描模式（MSE）进行数据采集分析。结果表明，丁香酚和异丁香酚在0.1～20 μg/L质量浓度范围内具有良好的线性关系，相关系数（r）大于0.995，水体中的加标回收率分别为83.2%～102%和91.8%～104%，相对标准偏差均小于15%，检出限分别为0.02 μg/L和0.05 μg/L，定量限分别为0.05 μg/L和0.1 μg /L。该方法适用于水产养殖水中的丁香酚和异丁香酚的快速测定。

关键词：超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱丹磺酰氯养殖水丁香酚异丁香酚

三文鱼来源副溶血性弧菌的血清分型、毒力基因及耐药性研究

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中国食品卫生杂志 2022年第6期34卷 1250-1256页

作者：古小莉李惠青徐瑞文柯常亮陈洁文黄珂中国水产科学研究院南海水产研究所农业农村部水产品加工重点实验室农业农村部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室广东广州510300

目的对2019年广州市售三文鱼中副溶血性弧菌的血清型、毒力基因分布及耐药特征进行研究,为防控因食用三文鱼引起副溶血性弧菌食源性疾病提供数据支持。方法根据GB 4789.7—2013方法对90份广州市售三文鱼样品进行副溶血性弧菌分离、定量... 详细信息

目的对2019年广州市售三文鱼中副溶血性弧菌的血清型、毒力基因分布及耐药特征进行研究,为防控因食用三文鱼引起副溶血性弧菌食源性疾病提供数据支持。方法根据GB 4789.7—2013方法对90份广州市售三文鱼样品进行副溶血性弧菌分离、定量及血清分型,分离株的鉴定及耐药性分析采用全自动微生物鉴定仪分析,通过PCR扩增对毒力基因进行检测。结果90份三文鱼样品中,有16份检出副溶血性弧菌,总检出率为17.78%,阳性样品污染量范围为3.6~93 MPN/g,其中批发市场的检出率(27.50%)最高。MPN计数阳性管分离得到的72株副溶血性弧菌经血清凝集共分出11个O群血清型,分型率为80.56%,其中O11、O9和O6群为主要血清型,占51.39%,其他血清型分布较分散。72株副溶血性弧菌均含有tlh基因,且均未检测到trh和tdh基因。药敏分析发现,全部分离株对碳青霉烯类、单酰胺环类、氨基糖苷类、喹诺酮类和硝基呋喃类等5类18种抗生素敏感。分离株对氨苄西林高度耐药,耐药率达97.22%,少数分离株对哌拉西林(1.39%)和复方新诺明(5.56%)耐药。6.94%的分离株同时对2种抗生素耐药,未出现多重耐药。结论广州市售三文鱼受到副溶血性弧菌污染程度较高,分离株的血清型呈多样化,主要为非致病株,但具有一定程度的耐药,存在危害健康的潜在风险。

关键词：三文鱼副溶血性弧菌血清型毒力基因耐药性

分子印迹固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法测定水产品中15种硝基咪唑类药物及其代谢物残留

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分析试验室 2023年第11期42卷 1435-1441页

作者：王旭峰王强张英侠黄珂中国水产科学研究院南海水产研究所农业农村部水产品加工重点实验室农业农村部渔业环境及水产品质量监督检验测试中心(广州)广州510300

建立了分子印迹固相萃取(MISPE)-超高效液相色谱串联质谱法(MISPE-UPLC-MS/MS)测定水产品中15种硝基咪唑类药物(NMZs)及其代谢物多残留分析方法。样品经乙酸乙酯提取,采用优化的MISPE条件富集净化。以甲醇和水作为流动相梯度洗脱,Kinete... 详细信息

建立了分子印迹固相萃取(MISPE)-超高效液相色谱串联质谱法(MISPE-UPLC-MS/MS)测定水产品中15种硝基咪唑类药物(NMZs)及其代谢物多残留分析方法。样品经乙酸乙酯提取,采用优化的MISPE条件富集净化。以甲醇和水作为流动相梯度洗脱,Kinetex C18色谱柱分离。电喷雾电离正离子(ESI+)模式扫描,多反应监测(MRM)模式测定,内标法定量。在质量浓度0.1~100 ng/mL范围内,各目标药物呈良好的线性关系,相关系数(r)≥0.998。方法的检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为0.1~0.3μg/kg和0.3~0.8μg/kg。阴性样品中平均加标回收率为83.6%~118%,相对标准偏差为2.7%~10%。该方法已应用于市售水产品基质中NMZs及其代谢物多残留测定。

关键词：分子印迹固相萃取液相色谱串联质谱法硝基咪唑类药物水产品

同位素稀释/超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法测定牛蛙中50种兽药残留

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食品安全质量检测学报 2023年第1期14卷 187-195页

作者：王强王旭峰蔡楠关婉琪黄珂中国水产科学研究院南海水产研究所农业农村部水产品加工重点实验室广州510300

目的建立同位素稀释/超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(ultra performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry, UPLC-Q-TOF-MS)测定牛蛙中50种兽药残留的分析方法。方法样品用0.2%甲酸乙腈提取,经快速滤过型净化(multi-plug filtration cleanup,m-PFC)固相萃取柱处理,采用Phenomenex Kinetex C_(18)色谱柱分离,以0.1%甲酸乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,目标物在正离子全信息串联质谱扫描方式(mass spectrometry, MS^(E))下检测,内标法定量。结果 50种兽药在各自的质量浓度范围内线性关系良好,相关系数大于0.995,检出限为0.5~1.0μg/kg,加标回收率为79.4%~112.1%,相对标准偏差为3.7%~13.1%。结论该方法前处理简单、结果准确,适用于牛蛙中50种兽药残留的快速检测。

关键词：同位素稀释超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法快速滤过型净化牛蛙兽药

罗非鱼鱼皮酶解物及其硒螯合物的结构与抗氧化特性

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水产学报 2023年第8期47卷 175-188页

作者：冯文静相欢胡晓李来好陈胜军邓尚贵浙江海洋大学食品与药学学院中国水产科学研究院南海水产研究所农业农村部水产品加工重点实验室

为了高值化利用罗非鱼副产物资源以及为酶解物-硒螯合物的产业化提供理论依据，本实验以罗非鱼鱼皮胶原蛋白(TSC)为原料，用4种蛋白酶对其进行酶解，分别获得了酸性蛋白酶酶解物(TSCAc)、木瓜蛋白酶酶解物(TSCP)、菠萝蛋白酶酶解物(TSCB... 详细信息

为了高值化利用罗非鱼副产物资源以及为酶解物-硒螯合物的产业化提供理论依据，本实验以罗非鱼鱼皮胶原蛋白(TSC)为原料，用4种蛋白酶对其进行酶解，分别获得了酸性蛋白酶酶解物(TSCAc)、木瓜蛋白酶酶解物(TSCP)、菠萝蛋白酶酶解物(TSCB)、碱性蛋白酶酶解物(TSCAl)，以Na2SeO3为硒源，制备并筛选出硒螯合量最高的酶解物，测定酶解物及其硒螯合物的紫外光谱、荧光光谱、红外光谱、表面疏水性，并对酶解物及其硒螯合物的抗氧化性与抗氧化稳定性进行分析。结果显示，TSCAl的水解度(DH)最高(18.2%)，其与硒螯合后的硒螯合量最高(153.5 mg/g)，硒螯合率最高(23.7%)，小分子量(500～1 000 u)的含量最高。其与硒螯合后，紫外光谱吸收峰强度增大，荧光光谱吸收峰由波长419.8 nm红移到422.0 nm且荧光强度减弱，疏水性在螯合后降低，表明TSCAl与硒螯合生成了新的物质。推测酰胺键、氨基的氮原子、羧基的氧原子可能参与了与硒的螯合反应。研究表明，碱性蛋白酶酶解物-硒螯合物(TSCAl-Se)具有良好的抗氧化性，其在不同温度、pH值以及经胃消化后皆具有稳定的抗氧化活性。本研究制备了一种新型罗非鱼鱼皮胶原蛋白酶解物-硒螯合物，为研究和开发硒元素膳食补充剂及抗氧化剂提供了理论依据。

关键词：罗非鱼鱼皮胶原蛋白硒酶解物螯合物结构抗氧化

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不同干燥方式对卵形鲳鲹鱼片风味的影响

水产学报 2022年第7期46卷 1188-1200页

作者：吴燕燕陈茜石慧魏涯王悦齐上海海洋大学食品学院中国水产科学研究院南海水产研究所农业农村部水产品加工重点实验室

为探究不同方式干燥卵形鲳鲹鱼片的风味差异，实验选取冰鲜卵形鲳鲹为原料，采用热风干燥、热泵干燥和冷冻干燥3种方式干制卵形鲳鲹鱼片，分别测定并分析其TBA值、呈味核苷酸含量、游离氨基酸含量和挥发性风味物质等指标。结果显示，干... 详细信息

为探究不同方式干燥卵形鲳鲹鱼片的风味差异，实验选取冰鲜卵形鲳鲹为原料，采用热风干燥、热泵干燥和冷冻干燥3种方式干制卵形鲳鲹鱼片，分别测定并分析其TBA值、呈味核苷酸含量、游离氨基酸含量和挥发性风味物质等指标。结果显示，干燥后的卵形鲳鲹鱼片中TBA值与K值均显著上升，其中冷冻干燥鱼肉的TBA值仅比冰鲜鱼片增加1.6倍，但热泵干燥和热风干燥则分别增加了5.5和4.5倍。干燥后鱼肉中的总游离氨基酸含量及味精当量较冰鲜卵形鲳鲹鱼片显著降低，其中热风干燥鱼肉的味精当量则下降了50.83%。热泵干燥鱼肉中苦味氨基酸含量和鲜味氨基酸含量分别占总氨基酸含量的19.11%和7.37%，而冷冻干燥组鱼肉中甜味氨基酸相对百分含量最高，为53.62%。3种干燥方式中，热泵干燥卵形鲳鲹的味精当量最高，为4.47谷氨酸钠(MGS)/100 g，表明热泵干燥卵形鲳鲹鱼片的鲜味程度最高。就挥发性风味成分而言，热泵干燥鱼肉酯类和酮类较多，其主要呈现果香味和焙烤坚果味；热风干燥中烃类和芳香类的相对含量约占70%，醛类和酯类相对含量达20%；而冷冻干燥中烃类与芳香类相对含量占到90%以上，醛类和酯类相对含量不足8%，其风味较淡。研究表明，3种干燥方式的卵形鲳鲹鱼片均具有较好的食用品质，其中热泵干燥使鱼肉中的鲜味更为明显，而冷冻干燥能有效抑制和延缓鱼肉脂肪的氧化，更适合应用于脂肪含量较高的鱼肉中。本研究结果可为卵形鲳鲹轻便干燥食品加工提供技术参考。

关键词：卵形鲳鲹热风干燥热泵干燥冷冻干燥呈味核苷酸游离氨基酸挥发性成分

广东沿海养殖牡蛎中副溶血性弧菌的污染状况、毒力基因及耐药性分析

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海洋环境科学 2022年第6期41卷 865-871页

作者：古小莉徐瑞文李惠青段星星张安凯黄珂中国水产科学研究院南海水产研究所农业农村部水产品加工重点实验室农业农村部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室广东广州510300

对广东沿海养殖牡蛎中副溶血性弧菌的污染状况、毒力基因携带情况和耐药特征进行研究。结果显示,320份牡蛎中副溶血性弧菌检出率为18.8%,不同季节和不同地区差异显著;分离得到60株副溶血性弧菌,均检出tlh基因,未检出tdh和trh基因;26种... 详细信息

对广东沿海养殖牡蛎中副溶血性弧菌的污染状况、毒力基因携带情况和耐药特征进行研究。结果显示,320份牡蛎中副溶血性弧菌检出率为18.8%,不同季节和不同地区差异显著;分离得到60株副溶血性弧菌,均检出tlh基因,未检出tdh和trh基因;26种药敏分析发现,分离株普遍对氨苄西林耐药,耐药率为83.3%,对哌拉西林、四环素和呋喃妥因等8种抗生素的耐药率介于1.67%~11.7%。所有菌株对头孢泊肟、亚胺培南、阿米卡星等12种抗生素敏感;分离株的多重耐药率为3.33%,其中1株菌出现耐受7种抗生素的多重耐药。结果表明,广东沿海养殖牡蛎的副溶血性弧菌污染程度在不同地区及季节存在显著差异,分离株的致病风险较低并呈现不同程度的耐药性,其中惠州地区养殖牡蛎中副溶血性弧菌污染及耐药程度相对较高。

关键词：牡蛎副溶血性弧菌污染毒力基因耐药性