检索结果-南通市图书馆

作者：王娟中国协和医科大学

学位级别：硕士

背景：慢性阻塞性肺疾病(Chronic obstructive pulmonary disease, COPD)的发病率、患病率及死亡率均较高。对COPD危险人群,特别是吸烟者,识别早期的气流受限有利于疾病的早期发现。筛查问卷具有简单、经济、有效等优点,其应用能弥补目... 详细信息

背景：慢性阻塞性肺疾病(Chronic obstructive pulmonary disease, COPD)的发病率、患病率及死亡率均较高。对COPD危险人群,特别是吸烟者,识别早期的气流受限有利于疾病的早期发现。筛查问卷具有简单、经济、有效等优点,其应用能弥补目前肺功能检查不能广泛应用的缺点。COPD筛查问卷目前还比较少见,国际呼吸道组织推荐了适用于40岁以上吸烟人群的基于症状的COPD筛查问卷(17分为截断点),其灵敏度和特异度较高,但其在我国吸烟者中筛查有效性的相关研究尚未见报道。目的：对国外发展的基于症状的COPD筛查问卷进行汉化和性能测定,探讨中文版基于症状的COPD筛查问卷是否适合我国吸烟人群COPD的初步筛查,是否还需要对问卷进行相应的调整。方法：本研究为方法学研究。分两个部分进行,第一部分为问卷的初步测定,包括问卷的汉化,表面效度、内容效度和可接受性的测定。第二部分为问卷的正式施测,便利选取北京市两家三级医院肺功能室40岁以上的吸烟者,以支气管舒张试验后FEV1／FVC级进行修改后发现,若仍以17分为截断点,问卷筛查效度的各指标均好于未修改前,其灵敏度、特异度、阳性似然比、阴性似然比、正确诊断指数、阳性预测值、阴性预测值等分别为89.3%、71.6%、3.14、0.15、0.609、68.1%、90.9%。ROC分析曲线下面积为0.921;经比较各截断点下的指标发现修改后问卷的最佳截断点为17.5(18)分。结论：中文版基于症状的COPD筛查问卷是一简单、有效的筛查工具,对于40岁以上吸烟人群的筛查其有效性较好。在我国吸烟人群中使用,该筛查问卷需要做一定的调整,不改变问卷中各条目的情况下建议最佳截断点应为19分;但若以我国体重指数分级做出条目的调整后,该问卷的筛查能力进一步提高,建议此时筛查问卷的最佳截断点为18分。

关键词：慢性阻塞性肺疾病筛查问卷效度截断点

超声心动图在左向右分流型先天性心脏病合并肺动脉高压的诊断及评估中的作用

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超声心动图在左向右分流型先天性心脏病合并肺动脉高压的诊断及评...

作者：逄坤静中国协和医科大学

学位级别：硕士

目的运用超声心动图研究先天性心脏病合并肺动脉高压(PH)的心脏结构及血流动力学特点，对比右心导管结果，探讨超声心动图分级标准。方法选择先天性心脏病—室间隔缺损(VSD)及动脉导管未闭(PDA)合并不同程度肺动脉高压患者60例，经胸... 详细信息

目的运用超声心动图研究先天性心脏病合并肺动脉高压(PH)的心脏结构及血流动力学特点，对比右心导管结果，探讨超声心动图分级标准。方法选择先天性心脏病—室间隔缺损(VSD)及动脉导管未闭(PDA)合并不同程度肺动脉高压患者60例，经胸超声心动图测量双心室前后径(LVD、RVD)及左右径(LVT、RVT)，双心室左右径比值(RVT／LVT)，右室前壁厚度(RVAW)，多普勒测量室水平／动脉水平分流速度(FLV)等多项参数。全部患者3日内完成右心导管检查。根据导管所测的全肺阻力(TPR)将肺高压分级为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级，每级20例，分析不同程度PH的心脏结构及血流动力学特点，总结超声心动图对PH的分级标准。结果 Ⅰ级PH表现为动力型肺动脉高压，左心明显增大，右心不大，右室壁不厚，分流为较高速左向右分流;Ⅱ级PH逐渐表现出阻力型肺高压特点，左室同缩至轻度增大甚至正常大小，右心开始增大，RVT／LVT约为2／3—1，右室壁增厚，左向右分流变为低速，可出现舒张期右向左分流。Ⅲ级TPR严重增高，肺血流量显著减少，左心内径开始缩小，右心明显增大，RVT／LVT≥1，右室壁明显增厚，分流为右向左为主双向分流。全部指标中，RVAW(r=0.89)、RVT／LVT(r=0.84)、FLV(r=-0.73)与全肺阻力相关性最好，且各组间有显著差异(p＜0.01)。结论：通过对心脏结构及血流动力学分析，超声心动图能够准确反映肺动脉高压的阶段和程度，为临床分级提供可靠依据。

关键词：先天性心脏病肺动脉高压分级超声心动图先心病全肺阻力

北京市三甲医院与社区医院门诊流程各环节患者满意度差异的研究

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北京市三甲医院与社区医院门诊流程各环节患者满意度差异的研究

作者：张鹏中国协和医科大学

学位级别：硕士

第一章目的本研究旨在通过调查北京市三甲医院(以下简称大医院)和社区医院门诊各环节服务的患者满意度,比较两组医院各环节患者意度是否存在差异,从而达到以下的研究目的: 1)评价两组医院门诊各环节服务对患者就医流向是否产生影响。 2... 详细信息

第一章目的本研究旨在通过调查北京市三甲医院(以下简称大医院)和社区医院门诊各环节服务的患者满意度,比较两组医院各环节患者意度是否存在差异,从而达到以下的研究目的: 1)评价两组医院门诊各环节服务对患者就医流向是否产生影响。 2)为指导患者选择就诊医院提供依据。 3)为医院改善门诊流程和服务提供参考和建议。方法本研究采用定量研究和定性研究相结合的研究方法,对北京市6所医院,196例患者的就诊过程进行现场调查。医院入选标准为:北京市城八区内有52家三级甲等医院与137家社区卫生服务中心(不含中国人民解放军和中国人民武装警察部队所属医院)随机选择大医院和社区医院各3所。患者入选标准为:采用便利随机的方法,选择从2007年5月20日至6月31日到入选的6所医院治疗咳嗽或流涕症状的患者,要求患者为北京市城区常住居民,经过培训的调查员(2人)与质控员(1人)为一组,负责一所医院,在选择研究对象时由调查员保证年龄层次、性别、就诊时间比例均衡,由质控员负责检查。调查员全程跟踪记录患者就诊过程,通过问卷调查患者基本情况,通过满意度调查表测量门诊各项服务的满意度,在此基础上比较大医院与社区医院门诊各环节患者满意度的差异。本研究选择大医院与社区医院医疗水平差异不大的常见病和多发病患者作为研究对象,并在患者离开门诊前进行满意度调查,此时医疗效果尚未出现,因此能够排除不同医院医疗服务的差异对研究结果产生的影响。结果研究发现6所医院门诊流程设置基本相似。大医院患者对门诊挂号、候诊就诊、医技检查、交费取药等服务环节的满意度和总体满意度均低于社区医院,患者对大医院的信任度低于社区医院(P＜0.05)。被调查对象选择大医院主要考虑因素为:离家近(47.4%),定点或指定医院(46.4%),医疗水平高(39.2%);选择社区医院主要考虑因素为:离家近(75.8%),定点或指定医院(33.3%),服务态度好(24.2%),流程合理,环节少(23.2%)。结论大医院门诊服务各环节非医疗服务的患者满意度均低于社区医院,虽然并不表示大医院门诊服务实际质量低于社区医院,但说明在患者选择就诊医院时,社区医院的门诊服务对患者正面影响较大。同时也说明大医院门诊流程还有待完善,服务质量需要继续提高。社区医院比大医院各环节患者满意度高。但调查中发现,本研究所调查的到大医院就诊的患者中有39.2%是因为不信任社区医院的医疗技术而选择大医院。因此应继续加大宣传,促进社区卫生服务的发展,引导常见病、多发病患者在社区就医,从而缓解大医院门诊压力。本研究调查的到大医院和社区医院的就诊患者,分别有46.4%和33.3%是由于受公费医疗必须在指定医院就医的限制,只能选择固定医院就诊,因此制定灵活政策和措施,方便患者选择自己满意和信赖的医院就医。同时也能够促进不同类型的医院提高服务,发挥所长,吸引患者就诊。

关键词：就诊过程就诊时间就诊费用患者满意度

维持性血透患者照顾者负荷现状及其影响因素的分析

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维持性血透患者照顾者负荷现状及其影响因素的分析

作者：张维娜中国协和医科大学

学位级别：硕士

研究目的:描述维持性血透患者主要照顾者的负荷现状并分析影响负荷的重要因素。研究方法:本研究采用描述性研究方法。于2006年10月～2007年5月便利抽取北京市两所三级甲等医院三个血透中心的符合入选标准的维持性血透患者和其主要照顾... 详细信息

研究目的:描述维持性血透患者主要照顾者的负荷现状并分析影响负荷的重要因素。研究方法:本研究采用描述性研究方法。于2006年10月～2007年5月便利抽取北京市两所三级甲等医院三个血透中心的符合入选标准的维持性血透患者和其主要照顾者各172例。主要采用肾病患者生活质量量表(KDQOL-36)对维持性血透患者的生活质量进行调查;采用照顾者负荷量表(CBI)对其主要照顾者的负荷进行调查;采用自行设计的问卷对维持性血透患者(包括社会人口学特征和临床特征)和主要照顾者(包括社会人口学特征、提供的照顾时间、自觉健康状况、是否需要帮助、接受的社区服务等)进行调查。运用SPSS12.0进行多元线性回归找出照顾者负荷的重要影响因素。研究结果:(1)99.4%的主要照顾者存在负荷,总负荷平均分为38.92±19.69分,其中时间依赖性负荷最重,其次为发展受限性负荷、身体性负荷。(2)多元线性回归结果显示,主要照顾者负荷的重要影响因素依次为以下十个:照顾者提供的照顾时间、患者的生活质量评分、患者的血红蛋白、照顾者的性别、照顾者利用社区资源情况、照顾者与患者的关系、照顾者的教育程度、照顾者的民族、患者的血肌酐、照顾者有无宗教信仰。十个因素能解释总变异的65.5%。结论:维持性血透患者主要照顾者负荷的发生率较高,建议医务工作者应着重关注患者的营养状况和生活质量,加大社区资源的投入,减少照顾者的照顾时间,重点关注负荷较高的女性照顾者,从而减轻维持性血透患者主要照顾者的负荷。

关键词：维持性血透患者主要照顾者负荷影响因素

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16排螺旋CT用于高危胸痛诊断的研究

16排螺旋CT用于高危胸痛诊断的研究

作者：王浩中国协和医科大学

学位级别：硕士

本研究针对急症高危胸痛诊断,在分析、研究了冠脉,肺动脉和主动脉CTA检查技术特点的基础上,采用16排螺旋CT,以一次性增强扫描方式实现冠脉,肺动脉和主动脉CTA三项检查。获得了高危胸痛诊断所需要的冠脉,肺动脉和主动脉的清晰显示。为急... 详细信息

本研究针对急症高危胸痛诊断,在分析、研究了冠脉,肺动脉和主动脉CTA检查技术特点的基础上,采用16排螺旋CT,以一次性增强扫描方式实现冠脉,肺动脉和主动脉CTA三项检查。获得了高危胸痛诊断所需要的冠脉,肺动脉和主动脉的清晰显示。为急症高危胸痛的诊断提供了准确、方便的检查手段。至今尚未见到以16排螺旋CT进行本项工作的报道。目的:通过一次CT扫描检查同时完成冠状动脉、主动脉和肺动脉CTA检查,探讨16排螺旋CT在高危胸痛诊断中的应用价值。方法:本研究中的病例为天津市第四中心医院的住院及急诊胸痛患者共38人。其中,男21例,女17例,年龄47-76岁。临床症状胸痛、胸闷憋气、心前区不适等。应用TOSHIBA AQUILION 16排螺旋CT,先行胸部CT平扫,然后利用回顾性心电门控技术行胸部CT增强扫描。扫描范围自主动脉弓上至膈下。肘静脉注射碘海醇(350mg I/ml)120-140ml和生理盐水40ml。应用surestart造影剂跟踪技术,于主动脉弓选择兴趣区,在造影剂注射后,当CT值提高110-120Hu开始扫描。以右冠中段层面作为预览平面重建R-R间期各时相图像。应用VR、CPR等方法观察冠脉情况,应用电影显示、VR、MIP等方式观察肺动脉情况,应用MPR、CPR、VR等方式重建并观察主动脉情况。结果:38例患者一次检查均可清晰显示肺动脉段以上分支、胸主动脉及冠状动脉左右主干及主要分支。共发现冠状动脉狭窄34例,肺动脉栓塞4例,主动脉夹层2例。共显示冠状动脉247支,其中发现狭窄47支。肺动脉4-5级分支应用MIP、VR及电影显示均可清晰观察,共发现肺动脉栓塞4例。结论:16排螺旋CT一次动脉期增强扫描显示肺动脉、胸主动脉及冠状动脉,对胸痛病因的诊断及鉴别诊断具有重要意义。不仅为急性高危胸痛的临床诊断提供了一种无创可靠的检查方式,并且具有广泛的社会效益及良好的经济效益。

关键词： 16排螺旋CT 高危胸痛冠状血管主动脉夹层

氢质子磁共振波谱在高苯丙氨酸血症的临床应用研究

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氢质子磁共振波谱在高苯丙氨酸血症的临床应用研究

作者：王琨蒂中国协和医科大学

学位级别：硕士

目的高苯丙氨酸血症(Hyperphenylalaninemia，HPA)是一种常染色体隐性遗传性代谢疾病。未经治疗的HPA患者多表现为智力低下和惊厥发作。氢质子磁共振波谱(H magnetic resonance spectroscopy，HMRS)是一种可对脑组织生化代谢物质进行... 详细信息

目的高苯丙氨酸血症(Hyperphenylalaninemia，HPA)是一种常染色体隐性遗传性代谢疾病。未经治疗的HPA患者多表现为智力低下和惊厥发作。氢质子磁共振波谱(H magnetic resonance spectroscopy，HMRS)是一种可对脑组织生化代谢物质进行检测的新技术，本研究应用HMRS检测HPA患儿的脑苯丙氨酸(Phenylalanine，Phe)浓度，了解血Phe与脑Phe的关系、Phe的血-脑代谢特点及对HPA患儿智力等脑损伤的影响，探讨HMRS在临床应用中的价值和意义。方法对33例HPA患儿进行血Phe的浓度检测，全例血Phe均大于0.12mmol／L(mM)，包括男18例，女15例，年龄33天～13岁，平均2.42±3.07岁。经四氢生物蝶呤负荷试验诊断苯丙酮尿症(Phenylketonuria，PKU)30例、四氢生物蝶呤缺乏症(tetrahydrobiopterin deficiency，BHD)2例和BH反应型苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase，PAH)缺乏症1例。33例中有惊厥史患儿8例，6例为PKU，2例为BHD。全例进行常规磁共振(magneti resonance imaging，MRI)和HM S检查，同时测量血Phe浓度、做智力评定，并对22例大于6个月的患儿的MRI脑白质病变分级，对结果进行分析。结果 1．通过HMRS检测，33例HPA患儿脑Phe浓度(以Phe／Cr的比值表示)范围在0.0640～0.6296，平均0.1606±0.1117。同时的血Phe浓度为0.3804～2.5140mM，平均1.4088±0.5130mM。 ***患儿的血、脑Phe浓度呈正相关关系，r=0.6103(p＜0.01)。 3．全例中有25例患儿存在不同程度的智能发育障碍，其中2例BHD患儿均为极重度智力低下(DQ＜25)，8例合并惊厥史的HPA患儿，有5例为重度以下智力低下(包括2例BHD)。 ***患儿的血、脑Phe浓度与智商无明显的相关关系，r=-0.1015，r=-0.1127(p＞0.05)。22例大于4个月患儿血、脑Phe浓度与智商均呈负相关关系r=-0.5045，r=-0.6471(p＜0.01)。 5．22例大于6个月患儿MRI均可见不同程度的脑白质病变，1级13例、2级5例、3级4例。脑白质病变级别与智商呈负相关关系，r=-0.5738(p＜0.05);脑Phe浓度与MRI白质分级无明显相关r=0.2375(p＞0.05)。 6．多种因素中惊厥病史与智商的相关性最高，脑Phe浓度较血浓度与智商的关系更紧密。结论 HMRS是一种无创性检测脑内代谢物质的新技术，可定量检测HPA患者脑内Phe浓度。本研究发现：HPA患儿的血／脑Phe浓度呈正相关关系，血Phe浓度可以较好地反映脑Phe的浓度水平;大于4个月的HPA患儿血、脑Phe浓度与智商呈负相关关系，脑浓度较血浓度更能反映脑损伤的程度;HPA患儿脑白质病变分级可以反映智力损伤的程度;BHD及合并惊厥者脑损伤更明显。应用HMRS可更有效地指导治疗，并为了解HPA患者脑损伤机制、开拓发掘新的治疗方法提供了客观的依据。

关键词：高苯丙氨酸血症氢质子磁共振波谱苯丙氨酸浓度脑损伤

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综合医院护理质量评价指标体系的初步研究

综合医院护理质量评价指标体系的初步研究

作者：侯小妮中国协和医科大学

学位级别：硕士

现阶段医院的医疗护理质量正面临着巨大的挑战，为了更好的评价医院护理质量，促进护理质量的不断提高，探索得出能够评价和测量现阶段医院护理质量的指标非常重要，本研究旨在对现阶段我国综合医院护理质量评价指标体系进行初步探索。... 详细信息

现阶段医院的医疗护理质量正面临着巨大的挑战，为了更好的评价医院护理质量，促进护理质量的不断提高，探索得出能够评价和测量现阶段医院护理质量的指标非常重要，本研究旨在对现阶段我国综合医院护理质量评价指标体系进行初步探索。目的：初步探索现阶段我国综合医院护理质量评价指标体系应该包括的关键内容。方法：采用Delphi专家函询法，专家函询初问卷是在访谈和回顾大量文献的基础上形成的。研究对全国各地，临床护理管理专家、护理质量管理专家、卫生行政部门分管护理工作的专家共54名进行了函询。结果：经过两轮函询后，形成专家一致性意见，两轮函询的专家回复率分别为81.5％和86.4％，最终形成涵盖要素质量领域、环节质量领域、终末质量领域三领域，包括三级结构的指标体系，其中一级指标5项，二级指标17项，三级指标57项。结论：探索得出了完整的综合医院护理质量评价指标体系应该涵盖的关键内容，为以后进一步探索研究形成具体的综合医院护理质量评价指标体系奠定了基础。

关键词：综合医院护理质量指标评价 Delphi法

纳米纤维薄膜对人脐静脉内皮细胞生长行为的影响研究

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纳米纤维薄膜对人脐静脉内皮细胞生长行为的影响研究

作者：韩昭昭中国协和医科大学

学位级别：硕士

细胞生长支架是组织工程和再生医学研究领域的一个重要方面,它为细胞的生长和组织的重建与再生提供人造的微环境。因此,如何构建结构上更合理更适用的支架以及如何提高支架的生物相容性是一直以来相关领域中研究的热点和难点。天然细... 详细信息

细胞生长支架是组织工程和再生医学研究领域的一个重要方面,它为细胞的生长和组织的重建与再生提供人造的微环境。因此,如何构建结构上更合理更适用的支架以及如何提高支架的生物相容性是一直以来相关领域中研究的热点和难点。天然细胞外基质分布于细胞外空间,是由细胞分泌的蛋白和多糖所构成的纤维网络结构,对细胞的迁移、增殖和分化等有重要的调控作用。近年来,具有三维结构的纳米纤维支架因其更接近天然的细胞生长微环境而逐渐地受到研究者越来越多的关注。纳米纤维支架的制备方法主要有自组装、相分离和高压静电纺丝。其中高压静电纺丝技术操作简单,可控性强,能够以不同聚合物为原料,制备出连续的、不同取向、不同力学性质的纳米级或亚微米级超细纤维,显示了在仿生天然细胞外基质方面的独特优势。在用于制备纳米纤维支架的生物材料方面,研究者也进行了诸多的尝试,以便制备出具有更高生物相容性的支架。迄今已有多种材料通过电纺丝技术制备成细胞薄膜,主要包括以下几类:天然材料、合成高分子材料、以及复合材料。其中合成高分子材料由于其来源方便,机械性能好,重复性高而成为组织工程研究中纳米纤维薄膜的主要材料,但其组织相容性低于天然材料,缺乏细胞刺激信号。无机/有机复合材料结合了高分子无机材料良好的机械性能和有机材料生物相容性。成为组织工程支架材料的研究热点。碳元素是地球上一切生物有机体的骨架元素组成,具有相对稳定的物理特性以及良好生物相容性。碳纳米管作为一种纳米尺度的新型炭材料,具有的独特空心管状结构和优异的传导性能和力学强度,并且对多种蛋白质分子都有较强的吸附。本课题通过溶液共沉淀方法制备了聚氨酯(PU)与多壁碳纳米管(MWNT)的复合材料(MWNT/PU),采用高压静电纺丝技术构建了PU、MWNT/PU的取向纳米纤维薄膜和无纺纳米纤维薄膜。选用离体时间短、性状与体内相似的人脐静脉内皮原代培养细胞为实验细胞,研究了上述两种化学组成的纳米纤维薄膜对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)生长的引导作用和可能的作用机理。主要研究内容包括:选择优化的控制参数制备电纺丝纳米纤维薄膜,通过扫描电子显微镜对取向纳米纤维薄膜的形貌进行观察;通过MTS试剂盒检测细胞在薄膜上的增殖情况,研究取向纳米纤维薄膜对HUVEC生长的促进作用;通过扫描电子显微镜观察内皮细胞在薄膜上生长的形态;通过激光扫描共聚焦显微镜,观察细胞骨架中肌动蛋白、微管蛋白及纽蛋白纤维的形成情况。此外,通过ELISA方法检测了生长在不同薄膜上的HUVEC分泌组织因子(TF)、浆纤溶酶原激活抑制剂-1(PAI-1)、一氧化氮(NO)的释放量,探讨了纳米纤维结构对HUVEC抗凝血功能的影响;检测了HUVEC细胞在薄膜上生长时Ⅳ型胶原的合成量,探讨了纳米纤维结构对细胞外基质重建的作用。在上述研究的基础上,通过在培养基中添加MEK1/2化学抑制剂U0126观察细胞骨架的形成,探讨了取向纳米纤维薄膜对细胞迁移、骨架发育的影响及可能的信号转导通路。实验结果表明,应用高压静电纺丝技术所制备的取向纳米纤维薄膜具有良好取向,其中的纤维直径为300 nm-500 nm;细胞实验证实,取向纳米纤维薄膜可明显促进HUVEC增殖;在取向纳米纤维薄膜上生长的内皮细胞呈抗凝血表型,此外,与光滑平膜和无规纳米纤维薄膜相比,取向纳米纤维薄膜可以显著促进细胞外基质的合成。细胞骨架观察显示,HUVEC在取向纳米纤维薄膜上沿纺丝方向定向排列生长,且纳米纤维薄膜支持细胞的长时间生长。MEK1/2化学抑制剂U0126对细胞骨架的影响结果显示,细胞对纳米纤维结构底感受可能通过MAPK途径进行信号的放大转导,从而引起细胞的迁移等一系列生物响应。此外纳米纤维的取向和碳纳米管的加入均有利于在薄膜上生长的细胞分泌细胞外基质蛋白,如胶原蛋白,有利于外基质的重建,进而为细胞提供更“友好”的生存环境。

关键词：纳米生物医学碳纳米管纳米纤维支架细胞生长信号通路

TMEV、Ect、LCMV、POLY和PVM病毒免疫血清制备及ELISA等检测方法的研究

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TMEV、Ect、LCMV、POLY和PVM病毒免疫血清制备及ELISA等检测方法...

作者：谢军芳中国协和医科大学

学位级别：硕士

实验动物病毒检测是保证实验动物质量和动物实验结果的重要手段,国家标准中规定的实验动物病毒血清学检测方法主要为IFA,IEA和ELISA。目前,这些方法分散在我国为数不多的实验室中,阳性对照血清主要来自自然感染的动物血清,质量控制不严... 详细信息

实验动物病毒检测是保证实验动物质量和动物实验结果的重要手段,国家标准中规定的实验动物病毒血清学检测方法主要为IFA,IEA和ELISA。目前,这些方法分散在我国为数不多的实验室中,阳性对照血清主要来自自然感染的动物血清,质量控制不严密,检测结果存在较大误差。本实验室成熟的病毒血清学检测方法有IFA、IEA,因此,在原有检测基础上,制备免疫质量控制血清,建立ELISA检测体系,实现一种病毒多种检测方法间的比对研究。同时,建立病原PCR检测方法,加强病毒检测水平,进一步完善实验室检测体系。实验选择5种病毒:小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV)、鼠痘病毒(Ect)、淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)、多瘤病毒(POLY)和小鼠肺炎病毒(PVM),均为清洁级和SPF级实验动物必须排除的病原体。本研究通过制备组织毒,免疫BALB/c小鼠,待抗体滴度达到峰值时,采血收集免疫血清,制备了TMEV、Ect、LCMV、POLY、PVM标准化血清。IFA、IEA评价血清的敏感性和特异性。IFA及IEA法检测上述免疫血清效价依次分别为1:640、1:320,1:640、1:320,1:1280、1:640,1:640、1:640,1:640、1:320。本研究制备同批次大量免疫血清,敏感性高、特异性好,均可作为实验动物病毒检测中的标准质控血清使用。本研究建立了TMEV和痘苗病毒ELISA检测方法。用TMEV和痘苗病毒感染BHK-21细胞,制备病毒特异抗原,确定包被抗原和标准阳性血清的最佳工作浓度;并进行敏感性、特异性、重复性和稳定性实验。包被抗原和标准阳性血清的最佳工作浓度分别为2.5μg/mL和1:200,检测灵敏度为1:3200,与小鼠肺炎病毒、小鼠肝炎病毒、仙台病毒、呼肠孤病毒-Ⅲ型均无交叉反应,批内、批间特异抗原和正常抗原的变异系数均小于10%,将TMEV和痘苗病毒抗原包被的酶标板,置37℃进行加速破坏性保存实验,2d相对偏差均小于20%。TMEV和痘苗病毒ELISA检测方法和赠送ELISA试剂盒比较:相对敏感性依次为100%、92.9%,符合率依次为90.48%、93.3%。本研究建立的TMEV和痘苗病毒ELISA检测方法重复性、稳定性好,敏感性和特异性强,可用于TMEV抗体和Ect抗体的检测。同时,进行病原学检测方法的尝试,针对LCMV和POLY分别建立了巢式RT-PCR和PCR检测方法。利用巢式RT-PCR,扩增LCMV病毒RNA GP基因上长度为149bp的片段,克隆测序后,经BLAST在线比对分析证实,其核苷酸序列与Genebank中LCMV GP基因序列的同源性为99.32%;利用PCR扩增POLY病毒DNA基因上602-874之间的长度为272bp的片段。本研究初步解决目前实验动物病毒检测方法单一,缺乏比对,质量控制血清来源混乱、小批次不标准、不规范等问题,为进一步增强我国实验动物病毒检测方法研究,提高检测基础水平提供思路。

关键词：小鼠脑脊髓炎病毒鼠痘病毒淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒小鼠肺炎病毒多瘤病毒痘苗病毒标准化血清 ELISA PCR

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体温保护对中性粒细胞呼吸爆发功能的影响

体温保护对中性粒细胞呼吸爆发功能的影响

作者：姚允泰中国协和医科大学

学位级别：硕士

目的探讨体温保护对患者中性粒细胞(PMNs)呼吸爆发(RB)功能的影响。方法 32例因肺癌行全麻下侧开胸肺叶切除术患者，ASAⅠ～Ⅲ级，随机分为2组：对照组(C组)和保温组(W组)，每组16例。C组患者术中仅以毛毯等常规保温措施... 详细信息

目的探讨体温保护对患者中性粒细胞(PMNs)呼吸爆发(RB)功能的影响。方法 32例因肺癌行全麻下侧开胸肺叶切除术患者，ASAⅠ～Ⅲ级，随机分为2组：对照组(C组)和保温组(W组)，每组16例。C组患者术中仅以毛毯等常规保温措施行体温保护，W组患者还使用加温毯和输液加温器，以维持术中核心体温不低于术前基础值。除血压、心电图、脉氧饱和度常规监测外，放置肛温和腋温探头行核心和外周体温监测。记录术前、术后寒冷感主诉及观察有无寒颤的情况。所有患者均以咪唑安定、芬太尼、异丙酚和罗库溴胺麻醉诱导后行气管插管，术中以吸入异氟醚和笑气维持麻醉，根据需要追加芬太尼、维库溴胺和咪唑安定，术毕常规拮抗残余肌松作用。术前、术中和术毕采集所有患者静脉血检测血常规，并用“全血法流式细胞仪二氢罗丹明(DHR)分析技术”测定PMNs的RB功能，包括细胞活化率和活性氧(ROS)产量。结果 C组有7例患者术后主诉寒冷感，3例发生术后寒颤。W组则无患者主诉术后寒冷感或发生术后寒颤。C组术中和术毕肛温显著低于术前值，而术中腋温则显著高于术前值。W组术前、术中和术后三个时点的肛温无显著差异，术中腋温显著高于术前值。与C组相比，W组患者术中及术毕的肛温值和腋温值均显著要高。手术应激和麻醉可增加循环中的PMNs，这些PMNs的RB更易被佛波酯(PMA)所诱发，导致两组患者术中、术毕细胞活化率均高于各组术前值。PMA刺激下，术毕W组患者的ROS产量较术前显著增加，且高于C组术毕值。在没有刺激剂的情况下，C组术中PMNs活化率和术中、术毕ROS产量均低于术前值，而W组术中及术毕的PMNs活化率或ROS产量都无显著变化。

关键词：体温保护全身麻醉中性粒细胞呼吸爆发术后寒冷感