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发生发育小鼠肾输尿管芽分支的形态特点

解剖学报 2023年第5期54卷 593-598页

作者：顾玲张萍宋科昕李娜陈虹宇张婕丛敬翟效月中国医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室沈阳110122 锦州医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室辽宁锦州121001 沈阳市第四人民医院干诊科沈阳110082 沈阳医学院基础医学院组织学胚胎学教研室沈阳110034

目的通过对输尿管芽树状结构三维追踪,结合形态学分析及测量,探讨输尿管芽分支模式及其末端诱导肾单位发生的数量。方法取胚胎期及生后多时间点小鼠肾脏各3只,制备石蜡和树脂连续切片,显微图像摄取并配准,计算机辅助输尿管芽追踪并可视... 详细信息

目的通过对输尿管芽树状结构三维追踪,结合形态学分析及测量,探讨输尿管芽分支模式及其末端诱导肾单位发生的数量。方法取胚胎期及生后多时间点小鼠肾脏各3只,制备石蜡和树脂连续切片,显微图像摄取并配准,计算机辅助输尿管芽追踪并可视化,计数其分支数及单个分支所诱导的肾单位数量。此外,石蜡切片进行HE染色用于生肾区与输尿管芽形态学观察,Claudin-7免疫组织化学染色标记输尿管芽,测量输尿管芽分支末端的数量及反映其密度的输尿管芽间距。结果输尿管芽树状分支三维可视化显示,起始的两主叉分支构成肾髓质,而皮质和生肾区分支茂密,输尿管芽分支末端间距越来越小。单个输尿管芽末端诱导肾单位数量由胚胎14.5 d的1个到胚胎17.5 d的2个,偶见3个。结论三维可视化显示输尿管芽树状分支呈区域复杂性,提示不同区域分子驱动不同的分支模式;而输尿管芽末端在生肾区的密度随肾脏发生发育而增加,与生肾区厚度减少相一致,而出生后分支末端的消失也反映了与肾单位祖细胞逐渐耗竭相一致。

关键词：肾脏输尿管芽分支肾单位数量发生发育三维可视化小鼠

SUMO化修饰对卵母细胞染色体非整倍性的影响

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中国医学科学院学报 2019年第3期41卷 419-424页

作者：任艳萍柳琼友雷小灿遵义医科大学基础医学院组织胚胎学教研室

卵母细胞染色体非整倍性是流产和新生儿出生缺陷的主要原因之一,主要源于以下2个方面:(1)Cohesin蛋白复合物丢失导致的姐妹染色单体过早分离型卵母细胞非整倍性;(2)纺锤体动力异常导致完整姐妹染色体对分离异常的非分离型卵母细胞非整... 详细信息

卵母细胞染色体非整倍性是流产和新生儿出生缺陷的主要原因之一,主要源于以下2个方面:(1)Cohesin蛋白复合物丢失导致的姐妹染色单体过早分离型卵母细胞非整倍性;(2)纺锤体动力异常导致完整姐妹染色体对分离异常的非分离型卵母细胞非整倍性。SUMO化修饰作为一种蛋白质翻译后修饰途径,参与了细胞增殖、分化、凋亡以及周期调控等众多生理调控过程。在卵母细胞中,SUMO化修饰既可调节Cohesin蛋白复合物在染色体上的定位,影响过早分离型卵母细胞非整倍性;同时可调节纺锤体动力学,影响非分离型卵母细胞非整倍性。因此,SUMO化修饰对卵母细胞染色体非整倍性具有重要作用,但尚不清楚是通过修饰哪些底物影响卵母细胞非整倍性,其具体分子机制还有待进一步研究。本文从SUMO化修饰对卵母细胞中Cohesin蛋白复合物的作用及其对微管动力学的影响两方面,探讨了SUMO化修饰在姐妹染色单体过早分离型和非分离型卵母细胞非整倍性中的作用。

关键词：卵母细胞减数分裂染色体非整倍性 SUMO化修饰

发生发育小鼠肾小球毛细血管袢形态计量学特征

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解剖学报 2021年第5期52卷 784-788页

作者：宋科昕张婕王恺悦邢佳符园园邓思琪邹宇顾玲翟效月中国医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室沈阳110122

目的根据肾脏发生发育规律,探讨毛细血管袢期肾小球(cap G)中毛细血管的体积密度变化规律。方法取发生发育多时间点的胚胎及生后早期小鼠肾脏,制备石蜡切片,采用内皮细胞标记物CD34免疫组织化学染色,结合体视学网格系统,测量CD34阳性表... 详细信息

目的根据肾脏发生发育规律,探讨毛细血管袢期肾小球(cap G)中毛细血管的体积密度变化规律。方法取发生发育多时间点的胚胎及生后早期小鼠肾脏,制备石蜡切片,采用内皮细胞标记物CD34免疫组织化学染色,结合体视学网格系统,测量CD34阳性表达的内皮细胞及其围成的毛细血管占肾小球的体积密度。结果根据肾小球的形态学及足细胞排列形式,将cap G分为早、中、晚3期,cap G中期又分为中早期和中晚期。除cap G早期由于肾小球形状复杂无法测量外,中早期内皮细胞阳性的毛细血管袢的体积密度为(35.95±6.45)%,中晚期为(58.36±6.30)%,cap G晚期体积密度为(79.89±5.21)%,作为对照的成熟期为(93.61±1.96)%。此外,不同发育时间点及相同发育期的肾小球毛细血管袢的体积密度保持恒定。结论肾小球发育过程中反映其有效滤过面积的毛细血管袢占肾小球的比例呈显著递增趋势,该结果为肾小球发育的评估提供了参数依据。

关键词：肾脏发育 CD34 毛细血管袢期肾小球形态计量学免疫组织化学小鼠

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不同早期母婴分离模型对雌性大鼠行为的影响

中国医科大学学报 2021年第11期50卷 986-989,996页

作者：张蕴曦陈鑫钊王家钰赵蓓莹韩芳中国医科大学基础医学院组织胚胎学教研室沈阳110122

目的探索母婴分离3 h(MS180)和15 min(MS15)两种分离方法对雌性大鼠行为的影响,探索跑轮运动是否可以改善母婴分离造成的雌性大鼠行为异常。方法随机将雌性仔鼠分为对照组(Control组)、MS15组和MS180组,在仔鼠出生后2~14 d,将MS15组和MS... 详细信息

目的探索母婴分离3 h(MS180)和15 min(MS15)两种分离方法对雌性大鼠行为的影响,探索跑轮运动是否可以改善母婴分离造成的雌性大鼠行为异常。方法随机将雌性仔鼠分为对照组(Control组)、MS15组和MS180组,在仔鼠出生后2~14 d,将MS15组和MS180组的仔鼠从母鼠身边取出,分别放在单独的饲养笼进行15 min或3 h的母婴分离,操作结束后将仔鼠放回母鼠身边。在仔鼠出生后22~35 d,Control组、MS15组和MS180组均再细分为跑轮运动组和非跑轮运动组,即对照非跑轮运动组(Control+non-RW组)、对照跑轮运动组(Control+RW组)、MS15非跑轮运动组(MS15+non-RW组)、MS15跑轮运动组(MS15+RW组)、MS180非跑轮运动组(MS180+non-RW组)、MS180跑轮运动组(MS180+RW组),其中Control+RW组、MS15+RW组、MS180+RW组大鼠进行每天30 min的跑轮运动。结果旷场实验结果显示,MS15+non-RW组大鼠进入中心的次数显著高于Control+non-RW组(P<0.05),MS180+RW组大鼠进入中心的次数显著高于MS180+non-RW组(P<0.05)。高架十字迷宫实验结果显示,MS180+nonRW组大鼠进入闭合臂的时间显著高于MS180+RW组(P<0.05)。结论跑轮运动能显著纠正MS180引起的雌性大鼠焦虑水平升高,但母婴分离不影响雌性大鼠的记忆行为。

关键词：母婴分离行为学跑轮运动

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发生发育小鼠肾近端小管的三维可视化

解剖学报 2021年第5期52卷 789-794页

作者：丛敬顾玲张婕宋科昕翟效月王效杰沈阳医学院基础医学院组织学胚胎学教研室沈阳110034 中国医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室沈阳110122 沈阳医学院基础医学院解剖学教研室沈阳110034

目的成年肾近端小管(PT)是急性肾小管病变最常累及同时也最易修复的节段,探讨基于三维可视化对发生发育期PT的形态发生进行时空性分析。方法取胚胎期(E)及生后(P)多时间点小鼠肾脏每组各3只,制备5μm石蜡切片,Claudin-2免疫组织化学染... 详细信息

目的成年肾近端小管(PT)是急性肾小管病变最常累及同时也最易修复的节段,探讨基于三维可视化对发生发育期PT的形态发生进行时空性分析。方法取胚胎期(E)及生后(P)多时间点小鼠肾脏每组各3只,制备5μm石蜡切片,Claudin-2免疫组织化学染色标记PT,体视学测量PT在肾皮质中体积密度;制备2.5μm连续树脂切片并使之图像化,基于数字追踪和可视化软件展示PT的空间走行,同时测量其长度。结果P1小鼠PT在皮质中的体积密度明显大于胚胎期;随后经历了下降(P3、P5)、上升(P7)开始至稳定的成年水平(P28);E14.5、E17.5和P5小管三维可视化显示,发生发育PT的长度、曲部的盘曲数随小管成熟逐渐增加,但低于成年PT;E14.5、E17.5 PT的基本空间走行与成年相似,而PT起始段的走行及PT直部在髓放线走行的毗邻关系则较成年差异较大;P5部分PT的走行接近成年PT。结论PT的发育,无论是皮质中的体积密度、长度、空间走行,与肾的整体发育一致,始于S小体期,贯穿于胚胎期并延续至生后,止于肾发育成熟(P28)。

关键词：肾脏近端小管发生发育体积密度三维重建小鼠

小鼠致密斑后肾小管与入球微动脉毗邻关系的三维可视化

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解剖学报 2023年第1期54卷 87-91页

作者：邓思琪顾玲王恺悦陈虹宇刘宇杰张婕翟效月中国医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室沈阳110122 中国医科大学附属盛京医院放射科沈阳110801 锦州医科大学护理学院辽宁锦州121001

目的采用微细结构三维可视化技术,建立致密斑后远端小管与入球微动脉的空间走行,定位检测毗邻关系部位的蛋白。方法C57 BL/6小鼠灌流固定取肾,垂直于肾长轴切取组织块,树脂812包埋,从肾被膜到外髓外带,获得720张2.5μm厚的连续切片,通... 详细信息

目的采用微细结构三维可视化技术,建立致密斑后远端小管与入球微动脉的空间走行,定位检测毗邻关系部位的蛋白。方法C57 BL/6小鼠灌流固定取肾,垂直于肾长轴切取组织块,树脂812包埋,从肾被膜到外髓外带,获得720张2.5μm厚的连续切片,通过计算机配准程序将数字化显微图像进行对齐,并采用C语言编辑的追踪程序对小管及血管走行进行三维重建。选取接触部位的组织切片,应用改良的免疫过氧化物酶染色方法检测H+-ATPase和Pendrin。结果通过重建3只小鼠90个肾单位的入球微动脉、远端小管及其延续的连接小管的走行,分析毗邻关系并测量长度,发现小管-入球微动脉密切接触多发生在浅表及中间皮质肾单位,其接触处的小管细胞表达H+-ATPase和Pendrin,是非A-非B型闰细胞。结论致密斑后的小管节段与入球微动脉的接触并非偶然,而是发生于远曲小管末端或(和)连接小管的非A-非B型闰细胞处,提示该部位的接触对致密斑处的管球反馈可能起拮抗作用,从而恢复肾小球滤过率和肾血流量。

关键词：远曲小管连接小管入球微动脉闰细胞三维重建小鼠

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小鼠肾远曲小管三维可视化研究

解剖学报 2018年第5期49卷 636-640页

作者：邓思琪顾玲苗俊珂连洁翟效月中国医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室沈阳110122

目的肾远曲小管(DCT)是肾单位最后一段小管,其与相邻小管的分界及走行的毗邻关系是理解肾形态发生中集合管与肾单位连接方式,以及该段小管参与水盐代谢调节机制的重要结构基础。本实验在肾组织连续切片基础上,采用微细结构三维可视化技... 详细信息

目的肾远曲小管(DCT)是肾单位最后一段小管,其与相邻小管的分界及走行的毗邻关系是理解肾形态发生中集合管与肾单位连接方式,以及该段小管参与水盐代谢调节机制的重要结构基础。本实验在肾组织连续切片基础上,采用微细结构三维可视化技术,建立小鼠肾远曲小管的空间走行。方法 C57/BL/6 J小鼠灌流固定后取肾,垂直于肾长轴切取组织块,树脂812包埋,从肾被膜到肾外髓外带获得2. 5μm厚连续切片720张,获取数字化显微镜图像并通过计算机程序进行配准,追踪来自3只小鼠共90个肾单位远曲小管,观察其空间走行并测量其长度。结果肾远曲小管起始于远端小管致密斑后40~180μm处,上皮由矮柱状或立方陡然变为高柱状,细胞核靠近腔面,走行在皮质迷路其自身的肾小球周围,区域相对独立,末端向被膜方向逐渐移行为连接小管;此处上皮再次变矮,细胞核排列不局限在近腔面。浅层皮质肾单位的远曲小管在回旋返折最高处接触肾被膜1次。远曲小管长度为500~900μm。结论远曲小管较短且盘曲走行,较少与其他小管交错,所以区域较小而独立,可能有助于该节段的吸收功能受激素的精准调节。

关键词：远曲小管空间走行三维重建小鼠

富马酸二甲酯对亚砷酸钠诱发小鼠胰岛MIN6细胞氧化应激损伤的保护作用

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解剖学杂志 2023年第2期46卷 120-125页

作者：赵紫汐王司琪李雪研徐春雪赵曦杨蓓中国医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室沈阳110122 中国医科大学沈阳110122

目的:探讨富马酸二甲酯(DMF)对亚砷酸钠(NaAsO2)诱发小鼠胰岛MIN6细胞氧化应激损伤的保护作用及相关机制。方法:筛选DMF最适处理浓度,将MIN6细胞随机分为正常对照组、NaAsO2组、低剂量DMF预处理+NaAsO2组、高剂量DMF预处理+NaAsO2组。MT... 详细信息

目的:探讨富马酸二甲酯(DMF)对亚砷酸钠(NaAsO2)诱发小鼠胰岛MIN6细胞氧化应激损伤的保护作用及相关机制。方法:筛选DMF最适处理浓度,将MIN6细胞随机分为正常对照组、NaAsO2组、低剂量DMF预处理+NaAsO2组、高剂量DMF预处理+NaAsO2组。MTT法检测细胞活性;TUNEL荧光染色法检测细胞凋亡;DCFH-DA荧光探针法检测活性氧自由基(ROS)水平;免疫细胞荧光法观察细胞内核因子E2相关因子2(Nrf2)定位表达;免疫印迹检测Nrf2蛋白表达水平;Real-time RT-PCR检测Nrf2、血红素加氧酶1(Ho-1)、硫氧还蛋白1(Trx1)、γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚单位(Gclc)、γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶调节亚单位(Gclm)mRNA表达水平。结果:与NaAsO2组比较,DMF预处理可以显著提高MIN6细胞活性,减少细胞凋亡数量,降低细胞内ROS的水平。DMF预处理+NaAsO2组MIN6细胞内的Nrf2 mRNA和蛋白表达明显高于NaAsO2组,特别是细胞核内Nrf2表达显著增多,且呈显著的剂量依赖性。DMF预处理+NaAsO2组MIN6细胞Ho-1、Trx1、Gclc和Gclm mRNA表达亦出现明显增加。结论:DMF可能通过上调Nrf2/ARE信号通路,拮抗亚砷酸钠对胰岛MIN6细胞氧化应激损伤,发挥保护作用。

关键词：富马酸二甲酯亚砷酸钠核因子E2相关因子2 氧化应激 MIN6细胞

在组织学胚胎学PBL教学中早期培养学生对临床的兴趣

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解剖学杂志 2015年第3期38卷 367-369页

作者：梁非韩芳肖冰石玉秀中国医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室

目前,在高校医学教育中,很多院校都开展了教学模式的改革,以探讨适应我国现代教学改革的医学教育模式。基于问题的学习（problem-based learning,PBL）,简称 PBL,于20世纪60年代中后期产生于北美并在后来的教学实践中取得了较快的发展[1... 详细信息

目前,在高校医学教育中,很多院校都开展了教学模式的改革,以探讨适应我国现代教学改革的医学教育模式。基于问题的学习（problem-based learning,PBL）,简称 PBL,于20世纪60年代中后期产生于北美并在后来的教学实践中取得了较快的发展[1]。中国医科大学组织学与胚胎学教研室自2004年起至今在中国医科大学的 CMB03-793,08-935的国际合作 PBL 项目支持下在组织学胚胎学教学中进行教学改革的探索[2],连续10年在10个年级的临床医学专业开展 PBL 教学以培养学生的创新能力,取得了一系列的成果[3-5]。近些年来,我们在基础医学的教育中培养学生对临床的认知和兴趣,在 PBL 教学中进行了新的探索。

关键词：临床医学专业胚胎学教学教学模式早期培养 PBL 组织学学生医学教育模式