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利用实时定量PCR对瘤胃甲酸甲烷杆菌定量方法的建立与应用

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中国农业科学 2006年第1期39卷 161-169页

作者：赵玉华王加启中国农业科学院畜牧研究所反刍动物营养研究室中国农业科学院畜牧研究所反刍动物营养研究室北京100094

目的解决传统微生物评价方法存在的弊端,寻找快速、准确、灵敏的瘤胃微生物评价的新方法。方法利用实时定量PCR技术,以16SrDNA为靶序列,建立了瘤胃甲酸甲烷杆菌(Methanobacteriumformicicum)的分子定量方法。结果采用本文所设计的引物... 详细信息

目的解决传统微生物评价方法存在的弊端,寻找快速、准确、灵敏的瘤胃微生物评价的新方法。方法利用实时定量PCR技术,以16SrDNA为靶序列,建立了瘤胃甲酸甲烷杆菌(Methanobacteriumformicicum)的分子定量方法。结果采用本文所设计的引物、探针以及相应的PCR反应体系,检测极限可达到30拷贝(15个甲酸甲烷杆菌),与传统检测方法相比要更为迅速、灵敏。采用实时定量PCR技术所测得的细菌数量与采用传统的最大或然数记数法所测的细菌数量具有很高的相关性(r=0.957,P所建立的方法对利鲁杂交肉牛和荷斯坦奶牛瘤胃液中甲酸甲烷杆菌进行了定量检测。结果表明,利鲁杂交肉牛瘤胃液中的甲酸甲烷杆菌浓度是荷斯坦奶牛的5.6倍。结论利用实时定量PCR技术建立的瘤胃甲酸甲烷杆菌的分子定量方法能够准确反映瘤胃微生物数量的变化。

关键词：实时定量PCR 瘤胃甲酸甲烷杆菌定量

短链脂肪酸介导的肠骨轴在骨代谢中的研究进展

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食品科学 2025年第2期46卷 260-267页

作者：张萱杨雪李新科孟璐王加启郑楠中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部奶及奶制品质量安全控制重点实验室北京100193 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部奶产品质量安全风险评估实验室(北京)北京100193

随着全球老龄化加剧,骨质疏松症等与年龄相关的骨骼代谢疾病发病率不断上升,寻求安全有效的治疗干预方法至关重要。目前肠道微生物及其代谢产物调节骨代谢已成为研究的热点。短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)如乙酸、丙酸和... 详细信息

随着全球老龄化加剧,骨质疏松症等与年龄相关的骨骼代谢疾病发病率不断上升,寻求安全有效的治疗干预方法至关重要。目前肠道微生物及其代谢产物调节骨代谢已成为研究的热点。短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)如乙酸、丙酸和丁酸等,能够通过肠-骨轴发挥骨形成和骨吸收的调节作用,对骨稳态调节具有一定的积极作用,并能改善炎症性骨丢失。本文综述SCFAs通过内分泌、免疫、改善营养吸收等途径调控骨代谢稳态,以期为老年代谢性骨病的预防和治疗提供科学依据。

关键词：肠-骨轴短链脂肪酸肠道微生物骨代谢骨质疏松症

共享奶业国际成果提高牛奶质量安全——第一届“奶牛营养与牛奶质量”国际研讨会成功召开

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畜牧兽医学报 2009年第5期40卷 I0001-I0004页

作者：彭华周凌云中国农业科学院北京畜牧兽医研究所反刍动物营养研究室

2009年5月5日-7日,由中国农业科学院北京畜牧兽医研究所主办的第一届'奶牛营养与牛奶质量'国际研讨会居北京隆重召开.

关键词：国际研讨会牛奶质量奶牛营养质量安全畜牧兽医研究所中国农业科学院奶业共享

基于微滴式数字PCR检测牛病毒性腹泻病毒方法的建立及初步应用

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农业生物技术学报 2025年第1期33卷 190-199页

作者：刘芯怡李丹秦刚陈俊贞付强史慧君新疆农业大学动物医学学院新疆草食动物新药研究与创制重点实验室天康生物制药有限公司新疆巴楚县畜牧兽医站中国农业科学院西部农业研究中心

牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)是引起犊牛(Bos sp.)病毒性腹泻的主要病原之一，导致犊牛免疫力降低，患病率和死亡率升高。目前对BVDV常用的检测方法存在灵敏度较低、容易出现假阳性等状况。本研究基于微滴式数... 详细信息

牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)是引起犊牛(Bos sp.)病毒性腹泻的主要病原之一，导致犊牛免疫力降低，患病率和死亡率升高。目前对BVDV常用的检测方法存在灵敏度较低、容易出现假阳性等状况。本研究基于微滴式数字PCR(droplet digital PCR, ddPCR)技术，建立BVDV精准检测技术。首先针对BVDV 5'UTR基因保守序列区域设计引物和探针，合成BVDV 5'UTR基因并构建质粒标准品。使用BVDV质粒标准品分别建立实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, qPCR)和ddPCR检测方法，并优化其反应参数和条件，分析其灵敏度、特异性和重复性，并进行了临床应用。结果显示，本研究建立的qPCR方法中，最佳引物和探针浓度分别为300和500 nmol/L，标准曲线呈良好的线性关系，最低检测下限为1×10～4 copies/μL，具有良好的特异性和重复性。建立的ddPCR方法中，最低检测下限为0.64 copies/μL，比qPCR灵敏性高15 625倍，该方法具有良好的特异性和重复性。临床检测了82份样品，ddPCR检出率为15.58%,qPCR检出率为14.63%。本研究建立的ddPCR方法比qPCR方法更加灵敏、高效、特异且重复性良好，为BVDV鉴别诊断提供了技术支持。

关键词：牛病毒性腹泻病毒(BVDV) 微滴式数字PCR(ddPCR) 实时荧光定量PCR(qPCR) 灵敏性特异性重复性

共享奶业国际成果提高牛奶质量安全——第一届“奶牛营养与牛奶质量”国际研计会成功召开

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中国畜牧兽医 2009年第5期 219-222页

作者：彭华周凌云中国农业科学院北京畜牧兽医研究所反刍动物营养研究室

基于奶牛个体体况的精细饲养方案的设计与实现

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农业工程学报 2005年第10期21卷 118-123页

作者：熊本海钱平罗清尧吕健强中国农业科学院畜牧研究所北京100094 中国农业科学院农业信息研究所北京100081

在“奶牛精细养殖技术平台”上,通过应用RF ID、PDA、无线局域网等技术,进行奶牛个体体况信息采集,将采集的数据与系统预先设置的主要养分预测模型、泌乳奶牛泌乳曲线模型等结合,按个体计算出符合筛选条件的奶牛的日营养需要量,然后对... 详细信息

在“奶牛精细养殖技术平台”上,通过应用RF ID、PDA、无线局域网等技术,进行奶牛个体体况信息采集,将采集的数据与系统预先设置的主要养分预测模型、泌乳奶牛泌乳曲线模型等结合,按个体计算出符合筛选条件的奶牛的日营养需要量,然后对相同生产或生理阶段的奶牛,采用相同的精补料类型,以及相同的粗饲料原料,由系统按线性规划原理批量优化依个体体况不同而异的日粮配方。计算结果表明,主要从几种原料的不同用量上,体现日粮的个体差异性,从而实现基于奶牛个体的精细饲养。此外,研究还指出,制约个体日粮的科学性主要取决于采集的奶牛个体信息是否完整,所采用的养分预测模型是否科学,所采用的饲料成分和营养价值数据是否反映饲料的真值等。

关键词：奶牛信息采集精细养殖日粮配方

低磷浓度下原代培养肉鸡鸡胚十二指肠上皮细胞对磷吸收及相关转运载体表达的研究

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动物营养学报 2019年第9期31卷 4186-4193页

作者：吕娜吕林廖秀冬张丽阳罗绪刚中国农业科学院北京畜牧兽医研究所矿物元素营养研究室

本试验旨在研究低磷浓度下原代培养肉鸡鸡胚十二指肠上皮细胞对磷吸收及相关磷转运载体的表达。试验采用单因子完全随机设计,设0(对照组)、0.5、1.0、2.0和4.0 mmol/L 5个不同磷浓度组,每组6个重复,孵育时间为87 min。结果表明:不同磷... 详细信息

本试验旨在研究低磷浓度下原代培养肉鸡鸡胚十二指肠上皮细胞对磷吸收及相关磷转运载体的表达。试验采用单因子完全随机设计,设0(对照组)、0.5、1.0、2.0和4.0 mmol/L 5个不同磷浓度组,每组6个重复,孵育时间为87 min。结果表明:不同磷浓度对十二指肠上皮细胞中磷吸收率有显著影响(P0.05)。不同磷浓度对十二指肠上皮细胞中NaPi-Ⅱb、PiT-1和PiT-2蛋白表达无显著影响(P>0.05)。由此可见,随着孵育液磷浓度的增加,细胞磷吸收率增加;当孵育液中磷浓度为4.0 mmol/L时,原代培养肉鸡鸡胚十二指肠上皮细胞可通过下调NaPi-Ⅱb和PiT-1的mRNA表达来调节磷的吸收。

关键词：十二指肠上皮细胞鸡胚磷吸收

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我国畜禽饲料资源中矿物元素含量分布的调查

中国农业科学 2019年第11期52卷 1970-1972页

作者：廖秀冬张丽阳吕林罗绪刚中国农业科学院北京畜牧兽医研究所矿物元素营养研究室

饲料是畜牧业赖以发展的物质基础,饲料成本约占整个畜禽养殖成本的60%—70%。三十多年来,我国饲料工业取得了巨大成就,走过了许多发达国家五十年甚至上百年才走完的历程,实现了世界第一大饲料生产国的飞跃,2018年我国饲料总产量已达2.2... 详细信息

饲料是畜牧业赖以发展的物质基础,饲料成本约占整个畜禽养殖成本的60%—70%。三十多年来,我国饲料工业取得了巨大成就,走过了许多发达国家五十年甚至上百年才走完的历程,实现了世界第一大饲料生产国的飞跃,2018年我国饲料总产量已达2.28亿吨[1]。我国饲料工业的快速发展,有力地推动了我国畜牧经济的发展,改善了人们的物质生活水平。近年来,我国畜禽养殖业规模化、集约化发展迅速,饲料企业的规模和产品结构也发生了较大变化。一些小型饲料企业逐渐被淘汰,规模生产企业占绝对主导地位,配合饲料的比例越来越高,

关键词：畜禽饲料矿物元素饲料资源含量分布

有机锌源的理化特性及其体外瘤胃发酵的稳定性研究

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畜牧兽医学报 2008年第10期39卷 1355-1366页

作者：梁建光吕林罗绪刚刁其玉刘彬中国农业科学院北京畜牧兽医研究所矿物元素营养研究室北京100193 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养国家重点室验室北京100193 中国农业科学院饲料研究所北京100081

进行2个试验，研究有机锌源的理化特性及其体外瘤胃发酵的稳定性。在试验1中，分析了7种有机锌源产品的理化特性。结果表明：有机锌源产品的含锌量和氨基酸组成存在较大差异；所测2种有机锌源产品（ZnPro B和ZnAA B）均具有锌络合物的... 详细信息

进行2个试验，研究有机锌源的理化特性及其体外瘤胃发酵的稳定性。在试验1中，分析了7种有机锌源产品的理化特性。结果表明：有机锌源产品的含锌量和氨基酸组成存在较大差异；所测2种有机锌源产品（ZnPro B和ZnAA B）均具有锌络合物的结构特征；所有有机锌源产品在盐酸、柠檬酸、中性柠檬酸铵缓冲液中的溶解度均在90％以上，在pH2缓冲液中的溶解度为53．92％～98．54％，在水和pH5缓冲液中的溶解度变化范围为6．04％～98．54％；未检测到有机锌源在pH2、0．2mol／LHCl-KCl或pH5、0．1mol／LKH2PO4-K2HPO4缓冲液及去离子水中的可溶部分有络合锌的存在；有4种有机锌源产品属于弱络合强度有机锌源，有1种有机锌源产品属于中等络合强度有机锌源，有2种有机锌源产品属于强络合强度有机锌源。在试验2中，采用6×4析因安排的完全随机设计，用体外瘤胃发酵法评价了不同络合强度有机锌源的瘤胃稳定性。结果表明：不同络合强度有机锌在模拟瘤胃环境下是稳定的，过瘤胃率分别在92％以上，其中又以强络合强度有机锌为最好（99．55％），弱络合强度有机锌（94．85％）次之，中络合强度有机锌（92．16％）相对最低。

关键词：有机锌源化学特性瘤胃稳定性