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鸡传染性贫血病毒对SPF鸡的致病特性及其排毒规律研究

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畜牧兽医学报 2024年

作者：冯笑艳胡明雪林雨萌高宏雷于海波刘长军祁小乐张伟张艳萍高玉龙中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家禽类实验动物资源库

旨在了解鸡传染性贫血病毒（CAV）对SPF鸡的致病性、排毒规律及水平传播能力。本研究将CAV JL17/1204株经腹腔接种和同居接触感染1日龄及28日龄SPF鸡，在感染后3 d（dpi）、5 dpi、7 dpi、9 dpi、11 dpi、14 dpi、21 dpi、28 dpi、42 dp... 详细信息

旨在了解鸡传染性贫血病毒（CAV）对SPF鸡的致病性、排毒规律及水平传播能力。本研究将CAV JL17/1204株经腹腔接种和同居接触感染1日龄及28日龄SPF鸡，在感染后3 d（dpi）、5 dpi、7 dpi、9 dpi、11 dpi、14 dpi、21 dpi、28 dpi、42 dpi、56 dpi、84 dpi和112 dpi，感染组和同居组分别采集3只鸡的抗凝血并剖检，以检测其贫血、胸腺萎缩情况；每个时间点另采集每组20只鸡的咽拭子和肛拭子通过PCR方法进行排毒检测。临床观察结果显示，1日龄感染组和同居组鸡的死亡率分别为50.0%和10.0%，死亡时间为12～15 dpi；28日龄感染组和同居组鸡感染后无死亡。剖检结果显示，各组发病鸡出现胸腺萎缩和/或贫血症状，1日龄感染组和同居组发病率分别为100.0%和20.0%；28日龄感染组和同居组发病率分别为10.0%和8.0%。排毒检测结果显示，1日龄感染组鸡呼吸道和消化道分别从3 dpi、5 dpi开始排毒，1日龄同居组呼吸道和消化道排毒期分别为同居后5～84 d和7～42 d；28日龄感染组呼吸道和消化道排毒期分别为感染后3～9 dpi和5～14 dpi；28日龄同居组呼吸道和消化道排毒期分别为同居后5～9 d和5～42 d。结果提示CAV对1日龄SPF鸡致病性强，感染后可诱导鸡死亡、胸腺萎缩和/或贫血等致病特征，对28日龄SPF鸡致病性明显减弱；接种和同居感染后均经呼吸道和消化道排毒，可诱导同居接触感染鸡发病甚至死亡，表明CAV具有较强的水平传播能力。本研究结果系统阐明了CAV感染致病特征和排毒规律，为鸡群科学开展CAV的净化提供了理论指导和科学依据。

关键词：鸡传染性贫血病毒 SPF鸡致病特性排毒规律水平传播

5株H6N3亚型禽流感病毒的分子特征及遗传演化分析

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中国家禽 2024年

作者：陈源崔鹏飞施建忠邓国华陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室国家禽类实验动物资源库

为了解H6N3亚型禽流感病毒（AIV）的遗传演化特点，试验对2023年采集自广东、湖北两地的活禽交易市场禽类咽喉拭子及泄殖腔拭子进行病原分离鉴定，并对分离的H6N3亚型AIV进行全基因组序列测定，进一步分析其遗传演化情况和特殊分子标记... 详细信息

为了解H6N3亚型禽流感病毒（AIV）的遗传演化特点，试验对2023年采集自广东、湖北两地的活禽交易市场禽类咽喉拭子及泄殖腔拭子进行病原分离鉴定，并对分离的H6N3亚型AIV进行全基因组序列测定，进一步分析其遗传演化情况和特殊分子标记。结果显示：共分离到5株H6N3亚型AIV，且均为新型重配病毒，可分为2种基因型，其中4株湖北分离株属于基因1型，NA基因进化支相对独立，其余基因片段与分离于我国家禽的H3N2、H3N3、H3N8、H6N6亚型AIV有着较近的亲缘关系；1株广东分离株属于基因2型，与多种不同亚型野鸟源病毒高度同源；5株分离株HA蛋白的裂解位点序列仅有一个碱性氨基酸，符合低致病性禽流感病毒（LPAIV）的特征；4株湖北分离株的NA基因全长仅有1 365 bp，其编码的NA蛋白出现茎部缺失；部分分离株HA蛋白获得A138S突变，一株病毒的PB2蛋白获得I292V突变。综上所述，分离的5株H6N3亚型AIV为新型重配病毒，部分分离株获得哺乳动物适应性突变，应加强对H6亚型AIV的流行病学监测。

关键词： H6N3 禽流感病毒活禽交易市场分子特征基因重配

H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶蛋白在昆虫细胞中的表达与鉴定

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中国家禽 2024年

作者：张洁崔鹏飞张元成邢鑫王丛丛颜成王燕陈源朱春成缪葭皓陈素娟邓国华陈化兰扬州大学兽医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室国家禽类实验动物资源库

研究旨在利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统制备H5N1亚型禽流感病毒（AIV）的神经氨酸酶（NA）蛋白。试验为获得具有良好反应原性的NA蛋白，将H5N1亚型AIV(DK/YN/S4469/2022)密码子优化后的N1基因插入载体pFastBac1，构建的重组转移载体pFa... 详细信息

研究旨在利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统制备H5N1亚型禽流感病毒（AIV）的神经氨酸酶（NA）蛋白。试验为获得具有良好反应原性的NA蛋白，将H5N1亚型AIV(DK/YN/S4469/2022)密码子优化后的N1基因插入载体pFastBac1，构建的重组转移载体pFastBac1-N1转化至DH10Bac感受态细胞，经过蓝白斑筛选获得阳性重组杆粒rBacmid-N1，然后将重组杆粒转染至sf9昆虫细胞，获得N1亚型重组杆状病毒。结果显示：N1重组蛋白在sf9昆虫细胞中正确表达，并且该重组蛋白具有良好的反应原性，能够与N1蛋白单克隆抗体3F3发生特异性反应，其仅能识别N1亚型鸡血清，特异性较好。研究成功制备了N1重组蛋白，为NA蛋白表达方法提供参考并为临床血清样品的N1抗体检测方法的建立奠定基础。

关键词：禽流感病毒杆状病毒表达系统 N1蛋白血清抗体

腺病毒载体介导编辑chNHE1基因对J亚群禽白血病病毒抗性研究

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中国家禽 2024年

作者：王震陈运通魏天悦陈洪岩王旭光高玉龙夏长友孟庆文新疆农业大学动物科学学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室国家禽类实验动物资源库

鸡Na+/H+离子交换蛋白-1（chNHE1）是J亚群禽白血病病毒（ALV-J）的细胞受体，是ALV-J感染的细胞靶点。为了探索鸡抗禽白血病的育种目标，试验构建了定点编辑chNHE1基因的CRISPR/Cas9腺病毒系统，并对编辑后细胞抗ALV-J感染能力进行评... 详细信息

鸡Na+/H+离子交换蛋白-1（chNHE1）是J亚群禽白血病病毒（ALV-J）的细胞受体，是ALV-J感染的细胞靶点。为了探索鸡抗禽白血病的育种目标，试验构建了定点编辑chNHE1基因的CRISPR/Cas9腺病毒系统，并对编辑后细胞抗ALV-J感染能力进行评价。结果显示：使用CRISPR/Cas9腺病毒载体介导的ssODNs同源重组方案可以在chNHE1中引入突变，其中36%单克隆细胞株存在W38缺失；T37缺失的细胞对ALV-J感染具备极显著的抗性；W38缺失的细胞对ALV-J感染具有完全抗性，同时具有E35A替换、P36缺失、T37缺失的细胞对ALV-J感染也具有完全抗性。研究表明，CRISPR/Cas9腺病毒载体可以有效地编辑鸡DF-1细胞，W38缺失或E35A替换P36、T37缺失都可以使DF-1对ALV-J感染具有抗性，该方案为培育抗ALV-J感染的基因编辑鸡提供技术储备。

关键词： J亚群禽白血病病毒鸡Na+/H+交换蛋白-1 腺病毒载体 CRISPR/Cas9

副结核分枝杆菌免疫原蛋白的筛选及免疫保护效果评价

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中国农业科学 2024年第6期57卷 1204-1214页

作者：陈凡若张嘉俊鹿萍崔宁崔莹莹崔子寅党光辉刘思国中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/动物疫病防控全国重点实验室

【背景】副结核病(paratuberculosis,PTB)是由副结核分枝杆菌(Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis,MAP)主要引起反刍动物的一种慢性消耗性传染病。患病动物表现为肉芽肿性肠炎和肠道的功能失调、顽固性腹泻、渐进性消瘦、营... 详细信息

【背景】副结核病(paratuberculosis,PTB)是由副结核分枝杆菌(Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis,MAP)主要引起反刍动物的一种慢性消耗性传染病。患病动物表现为肉芽肿性肠炎和肠道的功能失调、顽固性腹泻、渐进性消瘦、营养不良、贫血、嗜睡甚至死亡。PTB给畜牧业造成巨大的经济损失，并且严重威胁公共卫生安全。由于目前临床上对于PTB的检测和控制手段不够完善，现有的PTB疫苗保护效果不佳，并且干扰牛结核病的诊断，因此亟需研发免疫原性强、保护效果佳的疫苗以用于PTB的防控。【目的】通过筛选MAP免疫原蛋白，并对其免疫保护效果进行评价，为PTB的防控提供数据支持。【方法】根据MAP的p22、map1272c、map3531c、map3783、map3701c以及map3527这6个基因，分别构建5种重组质粒，在获得5种重组蛋白基础上，联合MONTANIDE ISA 61 VG佐剂皮下多点注射免疫小鼠，通过IFN-γ ELISPOT试验筛选出最佳免疫原；随后将最佳免疫原和已报道的66NC融合蛋白混合，经皮下多点注射免疫小鼠，在二免3周后用1×108CFU的MAP K-10菌株腹腔感染小鼠。通过IFN-γ ELISPOT试验，抗体监测和细胞因子检测，分析感染后小鼠的体重、肝脏病理学和组织病理学变化及其荷菌数差异，综合评价候选亚单位疫苗的免疫原性和免疫保护效果。【结果】以MAP p22、map1272c、map3531c、map3783以及map3701c为基础成功构建和表达了5种融合蛋白58F、62F、69F、46F和52F，其中免疫58F后产生的IFN-γ水平最高，是更具潜力的候选免疫原，且以融合蛋白组合66NC+58F诱导持久高滴度的IgG、IgM、IgG1和IgG2a水平，诱导特异性的IFN-γ、TNF-α和IL-17A的释放；在保护效果评价中，融合蛋白组合66NC+58F抵抗MAP感染造成的体重下降，显著减轻肝脏的病理损伤，降低MAP在肝脏中的定植。【结论】融合蛋白组合66NC+58F诱导小鼠产生Th1和Th17型免疫反应，对MAP感染有着一定免疫保护作用，是PTB重要的候选亚单位疫苗。

关键词：副结核分枝杆菌亚单位疫苗 58F蛋白免疫评价

敲除CRFK细胞氨基肽酶N对猫传染性腹膜炎病毒复制影响的研究

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中国预防兽医学报 2024年第3期46卷 306-313页

作者：陈晓彤郭慧娟田进王洪峰史鑫琪陈洪岩夏长友王金泉孟庆文新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830000 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室国家禽类实验动物资源库黑龙江哈尔滨150069 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所猪消化道传染病创新团队黑龙江哈尔滨150069

猫氨基肽酶N(fAPN)参与猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的感染过程,为研究f APN对FIPV复制的影响,本研究针对f APN第14外显子设计了1对sg RNA,将sg RNA退火后克隆至p X458质粒中,构建同时含有Cas9蛋白和sg RNA的重组质粒。重组质粒经PCR及测... 详细信息

猫氨基肽酶N(fAPN)参与猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的感染过程,为研究f APN对FIPV复制的影响,本研究针对f APN第14外显子设计了1对sg RNA,将sg RNA退火后克隆至p X458质粒中,构建同时含有Cas9蛋白和sg RNA的重组质粒。重组质粒经PCR及测序鉴定正确后,瞬时转染猫肾细胞(CRFK)中,24 h后通过流式细胞仪分选带有绿色荧光的单克隆细胞。单克隆细胞经稳定传代培养后,细胞中的绿色荧光消失,对细胞进行PCR和测序,结果显示:3株单克隆细胞在f APN第14外显子有1个碱基的插入,造成移码突变,导致f APN不能正常表达,表明敲除f APN蛋白的CRFK细胞系正确构建,命名为KO-APN14。将FIPV分别感染CRFK细胞及培养20代的KO-APN14细胞,48 h后通过间接免疫荧光试验(IFA)检测FIPV N蛋白的表达;将FIPV分别感染CRFK细胞及KO-APN14细胞,在感染4 h、12 h、24 h、36 h时采用RT-q PCR分别检测FIPV N基因、视黄酸(维甲酸)诱导基因I(RIG-I)、黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)、Toll样受体3(TLR3)、干扰素β(IFN-β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)的转录水平。IFA结果显示:感染FIPV的CRFK细胞出现绿色荧光,未感染FIPV的CRFK细胞、未感染FIPV的KO-APN14细胞及感染FIPV的KO-APN14细胞均无绿色荧光;RT-q PCR检测FIPV感染各细胞后病毒N基因的转录水平,结果显示:与感染FIPV的CRFK细胞相比,感染FIPV的KO-APN14细胞能够极显著抑制FIPV N基因的转录(P所述,f APN是FIPV在侵入细胞及病毒复制过程中发挥重要作用,并在FIPV引起的炎症反应过程中起关键作用。本研究为f APN在免疫炎症反应中作用的研究提供科学依据,并为培育基因编辑抗病育种猫奠定实验基础。

关键词：氨基肽酶N 猫传染性腹膜炎病毒猫肾细胞

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全基因关联分析筛选文昌鸡体尺性状相关分子标记

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中国农业科学 2024年第10期57卷 2046-2060页

作者：骆娜安炳星魏立民文杰赵桂苹海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心) 海南省农业科学院畜牧兽医研究所中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/动物营养学国家重点实验室

【目的】体尺是评价禽类生长特性的主要指标，通过筛选与文昌鸡体尺性状相关的分子标记及候选基因，为解析体尺性状的遗传机制及分子育种提供理论支撑。【方法】利用海南省文昌鸡品系3个世代（n=2 024）群体作为研究对象，测定每只鸡在... 详细信息

【目的】体尺是评价禽类生长特性的主要指标，通过筛选与文昌鸡体尺性状相关的分子标记及候选基因，为解析体尺性状的遗传机制及分子育种提供理论支撑。【方法】利用海南省文昌鸡品系3个世代（n=2 024）群体作为研究对象，测定每只鸡在上市日龄的胫长、胫围、体斜长、龙骨长及胸宽等5个体尺性状。采集血液进行鸡“京芯一号”55 K芯片测序及基因分型，使用GEMMA软件与PLINK软件进行全基因组关联分析，鉴定与体尺性状相关的SNP位点和候选基因，通过LD分析鉴定与体尺性状显著相关的单倍型。【结果】表型结果显示，113日龄文昌鸡公鸡平均胫长8.64 cm，胫围0.46 cm，体斜长19.73 cm，龙骨长12.32 cm，胸宽6.81 cm；母鸡平均胫长6.98 cm，胫围0.40 cm，体斜长17.79 cm，龙骨长10.45 cm，胸宽6.24 cm。经过质控后，共保留42 206个SNPs和2 024个个体用于后续研究。使用Plink软件进行PCA主成分分析，结果发现3个世代群体存在一定的分散情况，因此在GWAS关联分析中加入了前3个主成分作为协变量，以校正群体结构对关联分析的影响。GWAS结果研究共鉴定出19个SNPs位点与胫长性状显著或建议性显著相关（P值分别为2.17789E-06和4.35578E-05）,23个SNPs位点与胫围性状显著或建议性显著相关，7个SNPs位点与体斜长性状显著或建议性显著相关，2个SNPs位点与龙骨长性状显著或建议性显著相关，未鉴定出与胸宽性状或建议性显著相关的SNPs位点。通过对显著性位点进行注释，结果共鉴定到16个体尺性状相关的候选基因，包括羧基末端LIM结构域结合蛋白2(LIM domain binding 2,LDB2)、染色体缩合蛋白G(non-SMC condensin I complex subunit G,NCAPG)、序列相似家族184成员B基因（family with sequence similarity 184 member B,FAM184B）、A型钾离子通道调节蛋白4(potassium voltage-gated channel interacting protein 4,KCNIP4)等。通过LD单倍型分析结果显示，GGA4存在3个显著关联的单倍型，对于胫长性状，rs316943436和rs313978573两个位点位于单倍型区块中；对于胫围性状，rs313196946AA、rs316242963、rs315796839、rs313978573、rs734365522共5个位点位于单倍型区块中；对于体斜长性状，只有1个位点（rs313978573）位于单倍型区块中，其中候选基因LDB2和NCAPG在显著的block区块中被注释到。【结论】经GWAS方法筛选出SEPSECS、LGI2、DHX15、KCNIP4、NCAPG、FAM184B、LDB2、CC2D2A作为胫长性状潜在的候选基因；FH、TBC1D1、DTHD1、SEPSECS、LGI2、SOD3、PPARGC1A、KCNIP4、NCAPG、FAM184B、CLRN2、LDB2、TAPT1、CC2D2A作为胫围性状潜在的候选基因，KCNIP4、LDB2、TAPT1、NRXN3作为体斜长性状潜在的候选基因，FAM184B作为龙骨长性状潜在的候选基因。总之，本文确定了LDB2、NCAPG和FAM184B等作为胫长、胫围、体斜长和龙骨长等体尺性状的潜在功能基因。为文昌鸡体尺性能的分子标记辅助选择育种提供理论支撑。

关键词：全基因组关联分析鸡体尺性状胫长胫围

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猪CD1d蛋白多克隆抗体的制备及应用

中国农业科学 2024年第8期57卷 1620-1628页

作者：刘传霞陈欣王晓李雪雯李婷婷翁长江郑君中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/动物疫病预防控制国家重点实验室/国家非洲猪瘟专业实验室/基础免疫创新团队

【目的】制备猪源CD1d的多克隆抗体，为探究猪CD1d蛋白在非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）感染过程中的功能奠定基础。【方法】利用PCR方法扩增了猪CD1d基因，并将其同源重组至pGEX-6p1载体中，构建了原核重组表达质粒pG... 详细信息

【目的】制备猪源CD1d的多克隆抗体，为探究猪CD1d蛋白在非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）感染过程中的功能奠定基础。【方法】利用PCR方法扩增了猪CD1d基因，并将其同源重组至pGEX-6p1载体中，构建了原核重组表达质粒pGEX-6p1-CD1d。将重组质粒转化*** BL21(DE3)并用IPTG进行诱导表达，表达的GST-CD1d重组蛋白经SDS-PAGE和Western blot(WB)方法鉴定，SDS-PAGE结果显示约50 ku处有一条明显的条带，该蛋白以包涵体形式表达。然后利用谷胱甘肽琼脂糖亲和层析方法进行蛋白纯化，将纯化的GST-CD1d蛋白与等体积的弗氏完全佐剂混合乳化后，将纯化的蛋白免疫新西兰大白兔，采用颈背部多点皮下注射，免疫剂量为200μg/只，首免后第3周和第5周分别进行二免和三免，均采用弗氏不完全佐剂乳化，方法和剂量与首免相同。三免后第7天，通过耳缘静脉采血分离血清。首免后第7周进行第四次免疫，一周后心脏采血。该抗体经Protein G亲和层析纯化后冻存于-80℃冰箱。通过WB和间接免疫荧光（IFA）鉴定瞬时转染表达的外源CD1d蛋白和猪原代巨噬细胞（PAMs）表达的内源CD1d蛋白的表达与细胞定位情况。同样，制备的CD1d抗体可以将外源瞬时转染表达的CD1d通过IP拉下。为了探究CD1d在ASFV感染早期的情况，将ASFV接种于PAMs，制备ASFV感染0、15、30、60 min的样品，以CD1d为一抗，通过WB检测了CD1d蛋白的表达情况。在HEK293T细胞共转pCAGGS-HA-CD1d和pCAGGS-Flag-CD2v质粒，24 h后收取细胞裂解，加入Flag beads过夜结合蛋白，通过WB检测互作情况染，同时，质粒共转染于共聚焦小皿中的HEK293T细胞，用标签抗体对其进行孵育，选择相应的荧光二抗，通过激光共聚焦显微镜观察CD1d与CD2v在细胞中共定位情况。采用Co-IP验证CD1d与ASFV外囊膜蛋白CD2v的相互作用。【结果】原核表达的GST-CD1d蛋白以包涵体形式表达在感受态细胞中，分子质量约为35 ku；实验兔4次免疫CD1d重组蛋白后采血并分离血清，纯化的抗体经SDS-PAGE检测在45和25 ku处各出现一条特异性条带，分别为CD1d抗体的重链与轻链。以纯化的CD1d蛋白作为免疫原制备的兔抗CD1d抗体包含重链和轻链，且具有较好纯度；该抗体能够通过WB和IFA鉴定瞬时转染的外源以及PAMs内源CD1d蛋白的表达和细胞定位。进一步检测结果显示，ASFV感染PAMs后，CD1d蛋白表达水平明显增加，并且WB和IFA结果显示CD1d与ASFV编码的外囊膜蛋白CD2v存在相互作用和共定位。【结论】通过原核表达技术制备了CD1d的抗体，为进一步探究CD1d蛋白在ASFV感染过程中的生物学功能打下了基础。

关键词： CD1d蛋白原核表达多克隆抗体非洲猪瘟病毒 CD2v蛋白

实验动物弓形虫荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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实验动物科学 2024年第4期41卷 8-14页

作者：罗霆宇李凯丽李昌文陈洪岩夏长友高彩霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室国家禽类实验动物资源库哈尔滨150069

目的建立实验动物弓形虫TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,并对其进行初步应用。方法通过比对美国国家生物技术信息中心(NCBI)发表的弓形虫各毒株序列,选取其529 bp重复序列保守区域设计引物探针,建立弓形虫的荧光定量PCR方法。随后... 详细信息

目的建立实验动物弓形虫TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,并对其进行初步应用。方法通过比对美国国家生物技术信息中心(NCBI)发表的弓形虫各毒株序列,选取其529 bp重复序列保守区域设计引物探针,建立弓形虫的荧光定量PCR方法。随后对方法的特异性和敏感性进行检验;取浓度为10^(6)~10^(2)copies/μL 10倍系列稀释的质粒标准品,每个浓度做3个平行,重复检测3次,计算组内和组间变异系数,评估方法的重复性和稳定性;用建立的荧光定量PCR方法及国标推荐的PCR方法检测14份犬组织样品和66份猪全血样品,以评估此方法在实际应用中的检测能力。结果建立的弓形虫荧光定量PCR方法在10^(8)~10^(1)copies/μL范围Ct值与质粒浓度呈线性关系,标准曲线Slope为-3.285,R^(2)值为1,扩增效率为10^(1).663%。可检测到的弓形虫最低浓度为10^(1)copies/μL;与其他14种实验猪常见病原不发生交叉反应;重复检测10^(6)~10^(2)copies/μL质粒标准品,组内变异系数小于1.21%,组间变异系数小于0.62%。用建立的弓形虫荧光定量PCR方法和国标PCR方法对14份犬组织样品和66份猪全血样品进行检测,结果显示,弓形虫荧光定量PCR方法和国标PCR方法检测的阳性率分别为10%(8/80)和7.5%(6/80),阳性符合率达到100%。结论建立的弓形虫荧光定量PCR方法可以有效地检测弓形虫,为实验动物弓形虫日常监测提供良好的方法。

关键词：弓形虫荧光定量PCR 应用

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