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桃树重要害虫为害特点及其寄生蜂研究进展

中国生物防治学报 2025年第1期41卷 231-250页

作者：孙星星王凡蒋颖洁张礼生中国农业科学院植物保护研究所/农业农村部天敌昆虫重点实验室/植物病虫害综合治理全国重点实验室北京100081 中国农业科学院上海兽医研究所/农业农村部动物生物风险防控(北方)重点实验室上海200241 江苏沿海地区农业科学研究所盐城224300

桃树是我国重要的果树资源之一,其生长发育及果实产量受到众多害虫的影响。寄生蜂作为关键的生物防治因子,在有效控制如桃蚜、桃蛀螟、桃小食心虫等害虫时发挥了重要的作用。本文针对已发表的文献进行全面综述,重点讨论了桃树的重要害... 详细信息

桃树是我国重要的果树资源之一,其生长发育及果实产量受到众多害虫的影响。寄生蜂作为关键的生物防治因子,在有效控制如桃蚜、桃蛀螟、桃小食心虫等害虫时发挥了重要的作用。本文针对已发表的文献进行全面综述,重点讨论了桃树的重要害虫及其为害特点、相关寄生蜂资源研究进展及寄生蜂在害虫综合控制中的应用,共梳理了21种对桃树具有显著经济影响的害虫(包括螨类),列出20科194种在桃树害虫生物防治中具有关键影响的寄生蜂。本文也总结了当前在桃树害虫寄生蜂研究方面存在的问题,并对未来研究方向提出展望,旨在为桃树害虫管理策略的改进和桃园生物多样性保护提供更深入的理论支撑。

关键词：桃树寄生蜂重要害虫危害特点生物防治

血吸虫新抗原基因SjMF4的克隆、表达及功能分析

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第12期35卷 1099-1104页

作者：张亮程国锋付志强金亚美冯新港苑纯秀蔡幼民中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所、农业部动物寄生虫学重点实验室中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所、农业部动物寄生虫学重点实验室上海200232 上海200232 林矫矫

根据东方田鼠天然抗日本血吸虫病的现象 ,首次利用东方田鼠健康血清结合羊抗小鼠IgG3抗体免疫筛选日本血吸虫 (中国大陆株 )成虫cDNA表达型文库 ,获得两个阳性克隆 ,采用RACE技术对其中一cDNA片段进行扩增 ,获一含ORF的基因片段。序列... 详细信息

根据东方田鼠天然抗日本血吸虫病的现象 ,首次利用东方田鼠健康血清结合羊抗小鼠IgG3抗体免疫筛选日本血吸虫 (中国大陆株 )成虫cDNA表达型文库 ,获得两个阳性克隆 ,采用RACE技术对其中一cDNA片段进行扩增 ,获一含ORF的基因片段。序列分析表明该基因为一日本血吸虫新基因 ,命名为SjMF4 (SchistosomajaponicumMicrotusfortis 4 ,SjMF4 )。利用ExPASy的ScanProsite软件对此基因编码的蛋白质结构和功能域进行了分析。把该基因克隆到原核表达载体pET 2 8a(+) ,Western印迹显示表达产物具有良好的抗原性。又构建了真核表达质粒pcD NA3 SjMF4重组DNA疫苗 ,小鼠实验表明可诱导一定的保护作用。

关键词：东方田鼠日本血吸虫 SjMF4 保护作用

日本血吸虫中国大陆株抱雌沟蛋白编码基因的克隆和表达

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2002年第3期34卷 311-317页

作者：金亚美林矫矫冯新港张亮吴祥甫周元聪蔡幼民中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所、农业部动物寄生虫学重点开放实验室

根据曼氏血吸虫抱雌沟蛋白基因SmGcp序列和日本血吸虫编码抱雌沟蛋白保守区的基因片段SjGcp1分别设计三对引物 ,以日本血吸虫中国大陆株成虫mRNA为模板 ,用RT PCR法扩增出大小为 1949bp的基因片段。经序列分析推断该基因片段含编码日本... 详细信息

根据曼氏血吸虫抱雌沟蛋白基因SmGcp序列和日本血吸虫编码抱雌沟蛋白保守区的基因片段SjGcp1分别设计三对引物 ,以日本血吸虫中国大陆株成虫mRNA为模板 ,用RT PCR法扩增出大小为 1949bp的基因片段。经序列分析推断该基因片段含编码日本血吸虫抱雌沟蛋白基因的完整阅读框 ,与SmGcp碱基一致性为 85 % ,其理论推测氨基酸组成与曼氏血吸虫抱雌沟蛋白的一致性为 83.7%。将上述扩增的基因片段克隆到表达载体pET2 8c(+)中 ,在大肠杆菌BL2 1中获得表达 ,融合表达产物分子量约为 80kD。利用日本血吸虫成虫抗原免疫血清对该表达产物进行Western印迹检测 ,在预测位置出现了明显的识别条带 ,说明该编码日本血吸虫中国大陆株抱雌沟蛋白基因的表达产物具有抗原性

关键词：日本血吸虫抱雌沟蛋白基因克隆基因表达

日本血吸虫期别差异表达基因文库的构建及分析

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生物化学与生物物理进展 2005年第11期32卷 1038-1046页

作者：苑纯秀冯新港林矫矫李浩陆珂石耀军傅志强刘金明蔡幼民中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海市动物生物技术研究中心上海200232

为从期别差异表达基因分析入手研究血吸虫的生长发育机制,应用抑制性消减杂交(suppressedsubtractivehybridization,SSH)技术首次构建了日本血吸虫尾蚴、虫卵和成虫的期别差异表达基因文库.经消减效率分析和三种文库克隆的EST的期别差... 详细信息

为从期别差异表达基因分析入手研究血吸虫的生长发育机制,应用抑制性消减杂交(suppressedsubtractivehybridization,SSH)技术首次构建了日本血吸虫尾蚴、虫卵和成虫的期别差异表达基因文库.经消减效率分析和三种文库克隆的EST的期别差异性鉴定,表明所建文库质量较高,为在整个基因组水平分离血吸虫的差异表达基因提供了重要材料.由三个文库选择257个插入片段大于500bp的克隆测定了EST序列.同源性分析结果表明257个EST代表182种血吸虫基因,其中有22种为血吸虫已知基因,有128种为血吸虫已知EST,有32种为新发现的血吸虫基因.对EST编码蛋白的功能预测结果显示:尾蚴消减文库的基因多与运动、能量代谢、转录调节及致病性相关;虫卵消减文库的基因可能参与信号转导、细胞粘附、蛋白质和碳水化合物的代谢以及抗氧化反应;成虫消减文库的基因多参与蛋白质的合成、转运及分解代谢,参与虫体的运动等.大规模分离、分析血吸虫期别差异表达基因将对从分子水平去解读血吸虫的生长发育机制,筛选高效疫苗候选抗原、药物靶标及诊断制剂有重要意义.

关键词：日本血吸虫期别差异表达基因文库

日本血吸虫中国大陆株肌动蛋白编码基因的克隆和表达

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生物化学与生物物理学报 2000年第5期32卷 545-549页

作者：朱建国林矫矫冯新港吴祥甫周元聪蔡幼民中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室!上海200232 中国科学院上海生物化学研究所上海200031中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室!上海200232中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫

根据曼氏血吸虫肌动蛋白基因SmAct2设计一对引物 ,以日本血吸虫中国大陆株成虫mRNA为模板 ,用RT PCR法扩增出一大小为 1131bp的基因片段。测序后分析序列推断该片段为编码肌动蛋白基因的完整阅读框基因 ,与SmAct2碱基同源性为 92 %。将... 详细信息

根据曼氏血吸虫肌动蛋白基因SmAct2设计一对引物 ,以日本血吸虫中国大陆株成虫mRNA为模板 ,用RT PCR法扩增出一大小为 1131bp的基因片段。测序后分析序列推断该片段为编码肌动蛋白基因的完整阅读框基因 ,与SmAct2碱基同源性为 92 %。将其克隆到表达载体 pET2 8a(+)中 ,在大肠杆菌BL2 1中获得了较高量的表达 ,融合表达产物分子量约为 47kD。利用日本血吸虫成虫粗抗原免疫大白兔所得抗血清对该表达产物进行Western印迹检测 ,在预测位置出现了明显的识别条带 ,说明所克隆的基因为编码日本血吸虫中国大陆株肌动蛋白基因。

关键词：日本血吸虫肌动蛋白基因克隆基因表达

柔嫩艾美耳球虫地克株利抗药株与敏感株孢子化卵囊的蛋白质差异分析

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生物工程学报 2005年第3期21卷 435-439页

作者：姜连连黄兵韩红玉赵其平董辉陈兆国中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200232

利用双向电泳技术,对本实验室诱导保存的柔嫩艾美耳球虫地克株利抗药株与敏感株的蛋白质表达图谱进行差异比较和分析,发现两者之间差异有5个蛋白质斑点,利用MALDI_TOF_TOF质谱技术对其中4个差异明显的蛋白质斑点进行分析鉴定,获得4个明... 详细信息

利用双向电泳技术,对本实验室诱导保存的柔嫩艾美耳球虫地克株利抗药株与敏感株的蛋白质表达图谱进行差异比较和分析,发现两者之间差异有5个蛋白质斑点,利用MALDI_TOF_TOF质谱技术对其中4个差异明显的蛋白质斑点进行分析鉴定,获得4个明确的肽质量指纹图谱,通过在NCBInr数据库中检索分析,确定了其中2个蛋白质分别为球虫子孢子表面抗原TA4和热休克蛋白Hsp70 ,另外两种为真核细胞的功能蛋白。上述蛋白的鉴定将对球虫的抗药性产生机理和柔嫩艾美耳球虫地克株利抗药株的分子标志物提供了研究方向。

关键词：柔嫩艾美耳球虫,抗药性,地克株利,蛋白质组

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中国家畜家禽球虫种类概述

中国预防兽医学报 2004年第4期26卷 313-316页

作者：黄兵董辉沈杰韩红玉赵其平中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200232

球虫是严重危害畜禽生长的一类重要寄生性原虫 ,隶属于艾美耳科 (Eimeriidae)的 4个属 ,即艾美耳属(Eimeria )、等孢属 (Isospora )、泰泽属 (Tyzzeria )、温扬属 (Wenyonella ) ,具有显著的宿主特异性。了解我国畜禽球虫种类 ,对做好... 详细信息

球虫是严重危害畜禽生长的一类重要寄生性原虫 ,隶属于艾美耳科 (Eimeriidae)的 4个属 ,即艾美耳属(Eimeria )、等孢属 (Isospora )、泰泽属 (Tyzzeria )、温扬属 (Wenyonella ) ,具有显著的宿主特异性。了解我国畜禽球虫种类 ,对做好球虫病防治工作具有指导意义。作者通过对我国近 5 0年的畜禽球虫调查资料进行整理、汇总 ,列出了发现于我国马、骆驼、牛 (黄牛、水牛、奶牛、牦牛 )、羊 (绵羊、山羊 )、猪、犬、猫、兔、鸡、鸭、鹅、鸽、鹌鹑的球虫 136种 ,其中艾美耳球虫117种、等孢球虫 9种、泰泽球虫 6种、温扬球虫 4种。按宿主分别为马的球虫 1种 ,为艾美耳球虫 ;骆驼的球虫 8种 ,为艾美耳球虫 ;牛的球虫 16种 ,为艾美耳球虫 ;羊的球虫 2 8种 ,为艾美耳球虫 ;猪的球虫 16种 ,其中艾美耳球虫 14种、等孢球虫 2种 ;犬的球虫 3种 ,为等孢球虫 ;猫的球虫 2种 ,为等孢球虫 ;兔的球虫 17种 ,其中艾美耳球虫 16种、等孢球虫 1种 ;鸡的球虫9种 ,为艾美耳球虫 ;鸭的球虫 2 0种 ,其中艾美耳球虫 11种、等孢球虫 1种、泰泽球虫 4种、温扬球虫 4种 ;鹅的球虫 11种 ,其中艾美耳球虫 9种、泰泽球虫 2种 ;鸽的球虫 2种 ,为艾美耳球虫 ;鹌鹑的球虫 3种 ,为艾美耳球虫。

关键词：家畜家禽球虫种类

镰形扇头蜱中2个新基因的分离、克隆与序列分析

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中国兽医学报 2006年第2期26卷 155-157,168页

作者：龚海燕周金林周勇志向飞宇中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200232

为了对镰形扇头蜱中的生物活性分子进行相关研究，从中得到有价值的抗蜱候选分子，本试验从已构建的镰形扇头蜱半饱血雌蜱唾液腺cDNA文库中，随机克隆得到100个EST（expressed sequence tag）序列。其中8号和2号序列带有完整的polyA尾... 详细信息

为了对镰形扇头蜱中的生物活性分子进行相关研究，从中得到有价值的抗蜱候选分子，本试验从已构建的镰形扇头蜱半饱血雌蜱唾液腺cDNA文库中，随机克隆得到100个EST（expressed sequence tag）序列。其中8号和2号序列带有完整的polyA尾，根据此2序列设计引物，经5′RACE（rapid amplification of cDNA ends）得到2序列的全长基因，分别命名为RhHp1和RhHp2，RhHp1基因全长1823bp，ORF（开放阅读框）为1521bp，编码区从110～1631bp，编码506个氨基酸。RhHp2基因全长1002bp，ORF为848bp，编码区从31～879bp，编码282个氨基酸。经蛋白序列分析，RhHp1基因预期编码的蛋白与GenBank中所登陆的序列同源性均小于20％，RhHp2与其他序列同源性最高可达50．81％。经RT（reverse transcription）-PCR分析，与其他各发育阶段相比，RhHp1基因在镰形扇头蜱卵中表达量较低；RhHp2基因在镰形扇头蜱若蜱中低度表达，在其他各发育阶段表达量较高。结果表明，RhHp1和RhHp2基因为镰形扇头蜱唾液腺中分离出来的2个新基因，其表达量随着蜱的发育阶段而发生改变。此2个新基因所编码蛋白的结构和具体的分子生物学功能有待深入研究。

关键词：镰形扇头蜱 RhHp1基因 RhHp2基因序列

银染mRNA差异显示法克隆柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)抗药性相关基因

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中国兽医学报 2006年第4期26卷 369-372页

作者：韩红玉姜连连赵其平董辉陈兆国林矫矫黄兵中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200232

以柔嫩艾美耳球虫(E im eria tenella)敏感株、地克珠利抗药株和马杜拉霉素抗药株孢子化卵囊为材料,用银染mRNA差异显示方法筛选和克隆与球虫抗药性相关的基因。首先提取这3个虫株孢子化卵囊的总RNA为模板,用O ligo(dT)12GG为锚定引物和... 详细信息

以柔嫩艾美耳球虫(E im eria tenella)敏感株、地克珠利抗药株和马杜拉霉素抗药株孢子化卵囊为材料,用银染mRNA差异显示方法筛选和克隆与球虫抗药性相关的基因。首先提取这3个虫株孢子化卵囊的总RNA为模板,用O ligo(dT)12GG为锚定引物和2个10碱基随机引物组合进行RT-PCR,产物经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染。分别切取5条差异条带,进行2次PCR扩增,产物回收后与PGEM-T-easy V ector连接转化。经PCR鉴定正确后,再进行斑点杂交试验、序列分析和同源性比较。结果发现,地克珠利抗药株和马杜拉霉素抗药株分离的差异片段中都有2个cDNA片段(可能为新的基因片段),这为克隆全长cDNA和探索球虫抗药性产生的分子机理奠定了一定的基础。

关键词：柔嫩艾美耳球虫抗药性银染mRNA差异显示基因克隆