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基于COI条形码的市售蝉蜕及其混淆品DNA分子鉴定研究

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中草药 2024年第6期55卷 2057-2065页

作者：张欢欢徐金娣周静贾聪玲吴啟南郭梦斐沈纪晨伍城颖李松林毛茜南京中医药大学附属中西医结合医院中药质量研究室江苏南京210028 江苏省中医药研究院/中国中医科院江苏分院中药代谢组研究室江苏南京210028 南京中医药大学药学院江苏南京210023

目的利用COI序列对中药材蝉蜕Cicadae Periostracum及其混淆品进行DNA条形码鉴定研究,为蝉蜕药材的快速准确鉴定提供新的技术手段。方法收集全国市售蝉蜕药材、基地自采蝉蜕及其混淆品总45份样本,同时采集江苏徐州黑蚱养殖基地不同树种... 详细信息

目的利用COI序列对中药材蝉蜕Cicadae Periostracum及其混淆品进行DNA条形码鉴定研究,为蝉蜕药材的快速准确鉴定提供新的技术手段。方法收集全国市售蝉蜕药材、基地自采蝉蜕及其混淆品总45份样本,同时采集江苏徐州黑蚱养殖基地不同树种中蝉卵样品5份作为对照。提取DNA,进行PCR扩增及双向测序,测序结果采用DNAMAN和SnapGene进行拼接校对,运用MEGA11.0进行比对分析,计算种内及种间Kimura 2-Parameter(K2P)遗传距离并构建邻接法(neighbor-joining,NJ)系统发育树。结果黑蚱种内遗传距离远小于种间最小遗传距离,NJ树结果显示,黑蚱蝉蜕样品全部聚集为独立的一支,支持率为99%。混淆品样品分别聚集为单独的一支,支持率均大于90%,表明基于COI序列的DNA条形码技术可以有效鉴别蝉蜕药材真伪。结论应用COI序列作为DNA条形码能够准确有效地鉴别蝉蜕及其混淆品。

关键词：蝉蜕混淆品 DNA条形码 COI序列分子鉴定

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溃疡性结肠炎中医诊疗指南(2023)

中医杂志 2024年第7期65卷 763-768页

作者：中华中医药学会《溃疡性结肠炎中医诊疗指南》项目组李军祥唐旭东王化虹董筠张北平刘兆兰不详北京中医药大学东方医院中国中医科学院北京中医药大学第一医院江苏省中医院广东省中医院北京中医药大学循证医学中心

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是世界难治性疾病之一。我国UC的发病率呈逐年升高趋势[1]。与未患UC人群相比,UC患者结直肠癌患病风险可高出2.4倍[2]。目前现代医学常用的治疗药物以氨基水杨酸制剂、糖皮质激素、免疫抑制剂、生... 详细信息

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是世界难治性疾病之一。我国UC的发病率呈逐年升高趋势[1]。与未患UC人群相比,UC患者结直肠癌患病风险可高出2.4倍[2]。目前现代医学常用的治疗药物以氨基水杨酸制剂、糖皮质激素、免疫抑制剂、生物制剂等为主,但以上药物存在疗效不稳定、停药后易复发、长期使用易出现不良反应及药物依赖等问题[3-4]。中医药治疗UC在稳定病情、改善症状、预防复发、提高患者生存质量等方面均具有优势[5],但中医药干预UC尚缺乏规范性的指导和建议。原《溃疡性结肠炎诊疗指南》[6]发布于2011年,因编写年代较早,许多内容已不能满足当今诊疗活动的需要,同时原指南缺乏规范的循证医学证据和专家推荐意见。

关键词：诊疗活动溃疡性结肠炎预防复发患病风险中医药治疗糖皮质激素药物依赖推荐意见

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经典名方中卷柏的本草考证

中国实验方剂学杂志 2024年第7期30卷 31-39页

作者：陆一南孟静陈阳阳詹志来杨成梓福建中医药大学药学院福州350122 中国中医科学院中药资源中心北京100700

通过查阅历代本草、医籍、方书并结合近现代研究资料,笔者对卷柏药材的名称、基原、产地、传统品质评价、采收加工、炮制等方面进行了系统的本草考证,以期为相关经典名方的开发与利用提供参考依据。经考证可知,历代本草均以“卷柏”为... 详细信息

通过查阅历代本草、医籍、方书并结合近现代研究资料,笔者对卷柏药材的名称、基原、产地、传统品质评价、采收加工、炮制等方面进行了系统的本草考证,以期为相关经典名方的开发与利用提供参考依据。经考证可知,历代本草均以“卷柏”为其正名,尚有豹足、求股、交时、九死还魂草等别名;历代本草古籍中所载卷柏基原为今卷柏科植物卷柏Selaginella tamariscina;自民国起,垫状卷柏S.pulvinata逐渐作为卷柏药材的另一基原开始使用;古代著录的产地主要为山东、河北、河南、陕西、江苏及四川等地,现今卷柏全国各地均产;垫状卷柏主产于广西、福建、四川、贵州、云南、河北等地;近代以来总结其品质以色绿,完整不碎者为佳;古代记载卷柏药材的采收时间一般为阴历4—7月,清代起扩大到全年均可采收,采收后除去泥沙,剪去须根阴干或晒干;历代炮制方式以制炭、炒焦为主,部分古籍尚载有盐水煮的炮制方法,现已少用。基于考证结果,建议将卷柏S.tamariscina作为卷柏药材基原;因杂质较多,加工时应充分净制,以保证药材清洁;炮制方法可根据处方要求,未注明炮制要求的可选用生品,作止血药使用时建议选择制炭品。

关键词：卷柏垫状卷柏本草考证学名沿革品质评价产地变迁炮制方法

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瑞香狼毒贝壳杉烷型二萜类合成酶功能表征

中国中药杂志 2024年第9期49卷 2410-2421页

作者：谭洪虎夏梦苏平黄璐琦南京中医药大学药学院江苏南京210023 中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700

ent-柯巴基焦磷酸合酶(ent-copalyl diphosphate synthase,CPS)与ent-贝壳杉烯合酶(ent-kaurene synthase,KS)的连续催化是植物以香叶基香叶基焦磷酸(geranylgeranyl pyrophosphate,GGPP)为底物开启赤霉素生物合成路径的关键步骤。该研究通过分析与挖掘瑞香狼毒的转录组数据,成功克隆得到赤霉素途径的2个关键二萜合酶基因SchCPS和SchKS。二者完整开放阅读框分别为2595、1701 bp,编码864、566个氨基酸残基,生物信息学分析预测其相对分子质量分别为97.9、64.6 kDa,理论等电点为5.61、6.12,均为亲水性蛋白。序列比对及系统发育树显示,SchCPS蛋白含有CPS基因家族保守的LHS、PNV及DxDD基序,归类于TPS-c亚家族;SchKS蛋白含有KS基因家族保守的DDxxD、NSE/DTE和PIx基序,归类于TPS-e亚家族。功能验证结果表明,SchCPS可催化GGPP质子化并环化成ent-CPP,SchKS则作用于ent-CPP去磷酸化并再次环化生成贝壳杉烯。该文首次从瑞香狼毒中克隆获得SchCPS与SchKS全长基因,并完成功能验证,不仅丰富了现有的CPS和KS基因库,也为瑞香狼毒中更多活性成分基因的克隆与生物合成途径解析奠定了基础。

关键词：瑞香狼毒贝壳衫烷二萜合酶功能鉴定生物信息学

骨免疫学视角下绝经后骨质疏松症防治新靶点:MΦ-BMSCs串扰

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中国骨质疏松杂志 2024年第5期30卷 732-738页

作者：李琰刘宁齐保玉王旭孙传睿章轶立魏戌中国中医科学院望京医院北京100102 南京中医药大学中西医结合学院江苏南京210023

绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)是以骨量下降、骨结构破坏、易发生骨折为特征的代谢性骨病。PMOP已严重威胁女性健康,制约社会经济发展。近年来雌激素缺乏引起PMOP相关机制研究取得进展,但仍未得到充分阐明。骨免... 详细信息

绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)是以骨量下降、骨结构破坏、易发生骨折为特征的代谢性骨病。PMOP已严重威胁女性健康,制约社会经济发展。近年来雌激素缺乏引起PMOP相关机制研究取得进展,但仍未得到充分阐明。骨免疫学研究显示PMOP病理过程伴随着慢性炎症和免疫系统的参与。巨噬细胞(macrophage,MΦ)是重要的免疫细胞,被报道在骨稳态和再生中发挥作用。巨噬细胞的耗竭能加重OVX小鼠的骨丢失,减少骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)数量,降低BMSCs成骨分化能力。巨噬细胞的缺失对骨形成的影响似乎超过了其对破骨细胞活性的影响,MΦ与BMSCs之间的串扰可能在这一环节发挥着重要作用。本文基于骨免疫学理论对MΦ-BMSCs串扰和PMOP的相关性进行综述,旨在为PMOP的防治研究提供新思路。

关键词：绝经后骨质疏松症骨免疫学巨噬细胞间质干细胞串扰

基于网络药理学和巨噬细胞活性探讨五加皮治疗类风湿关节炎的作用机制

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中国免疫学杂志 2024年

作者：李俊霖钱怡云杨迎刘萍韦敏南京中医药大学江苏省中国科学院植物研究所

目的：通过网络药理学和细胞实验揭示五加皮（AC）治疗类风湿关节炎（RA）的作用机制。方法：文献检索确定AC化学成分，TCMSP和SwissADME数据库获取活性成分和靶点，利用GeneCards、DrugBank数据库检索RA疾病靶点，取AC与RA的交集靶点... 详细信息

目的：通过网络药理学和细胞实验揭示五加皮（AC）治疗类风湿关节炎（RA）的作用机制。方法：文献检索确定AC化学成分，TCMSP和SwissADME数据库获取活性成分和靶点，利用GeneCards、DrugBank数据库检索RA疾病靶点，取AC与RA的交集靶点，运用STRING 11.5 数据库和Cytoscape 3.7.2 软件构建蛋白相互作用网络，CytoNCA筛选核心靶点，再进行GO和KEGG富集分析，使用AutoDockTools和PyMOL软件将AC活性成分与核心靶点进行分子对接。通过CCK-8、ELISA、RT-qPCR实验验证AC治疗RA的作用机制的相关靶点。结果：获得AC与RA交集靶点55个，核心靶点有CDK2、PPARG等；GO富集分析显示主要涉及细胞内受体信号通路、信号转导、凋亡等生物学过程；KEGG富集分析发现与RA治疗相关的信号通道主要为JAK-STAT、PI3K-Akt和MAPK信号通路等；分子对接表明AC活性成分与关键靶点结合紧密；CCK-8实验结果显示AC活性成分对RAW264.7细胞无毒性；ELISA结果显示AC活性成分能调节炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-10的表达水平；RT-qPCR结果显示槲皮素(Quercetin， Que)和山奈酚(Kaempferol， Kae)均可影响CDK2的mRNA表达，异贝壳杉烯酸(Kaurenoic acid， KA)、芝麻素（Sesamin， Ses）分别影响PPARG、MCL1的mRNA表达，从而调控细胞因子的释放，发挥抗炎作用。结论：AC中Que、Kae、KA和Ses通过作用于CDK2、PPARG、MCL1等靶点，干预JAK-STAT、PI3K-Akt、MAPK等信号通路，发挥治疗RA的作用。

关键词：网络药理学五加皮类风湿关节炎分子对接炎症因子

药食两用资源姜的产业发展现状与提质增效策略

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中国中药杂志 2024年第11期49卷 2853-2862页

作者：严辉郭盛张振宇赵秋龙周桂生杨健段金廒南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/国家中医药管理局中药资源循环利用重点研究室江苏南京210023 中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700

我国是药食两用特色资源植物姜Zingiber officinale栽培的起源地,具有悠久的栽培生产和应用历史。随着科技进步不断开发挖掘姜类产品的健康、美容等价值,有力地推动了姜上下游产业的规模扩张和质量提升,当前我国已形成了以中国南北两大... 详细信息

我国是药食两用特色资源植物姜Zingiber officinale栽培的起源地,具有悠久的栽培生产和应用历史。随着科技进步不断开发挖掘姜类产品的健康、美容等价值,有力地推动了姜上下游产业的规模扩张和质量提升,当前我国已形成了以中国南北两大区域为代表的种质资源丰富、产品门类多样的姜产业集群,发展成为全球最大的姜资源原料和加工产品的生产国和出口国。该文对目前姜种质资源现状、生姜生产现状、姜类产品市场价格及姜类产品质量控制研究现状进行综述;并综合联合国粮食及农业组织(FAO)、联合国国际贸易数据库、中国姜网及中国产业信息网等统计数据,对世界和我国姜产品的市场波动与走势进行讨论,分析国际和国内姜产业发展利用现状,并结合课题组对我国姜主产地的实地考察和调研情况进行分析和预判,提出姜产业切实有效的提质增效主要对策措施,以期为相关部门研究制定姜产业发展规划和生产布局提供参考,帮助姜产业从业者应对挑战,为推动姜产业的提质增效和高质量发展提供借鉴。

关键词：姜生产现状姜产业药食两用提质增效

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溃疡性结肠炎中医诊疗指南（2023）

中医杂志 2024年第7期 763-768页

作者：李军祥唐旭东王化虹董筠张北平刘兆兰中国中医科学院北京中医药大学第一医院北京中医药大学东方医院北京中医药大学循证医学中心广东省中医院江苏省中医院中华中医药学会《溃疡性结肠炎中医诊疗指南》项目组

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是世界难治性疾病之一。我国UC的发病率呈逐年升高趋势[1]。与未患UC人群相比，UC患者结直肠癌患病风险可高出2.4倍[2]。目前现代医学常用的治疗药物以氨基水杨酸制剂、糖皮质激素、免疫抑制剂、生...

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是世界难治性疾病之一。我国UC的发病率呈逐年升高趋势[1]。与未患UC人群相比，UC患者结直肠癌患病风险可高出2.4倍[2]。目前现代医学常用的治疗药物以氨基水杨酸制剂、糖皮质激素、免疫抑制剂、生物制剂等为主，但以上药物存在疗效不稳定、停药后易复发、长期使用易出现不良反应及药物依赖等问题[3-4]。

关键词：

基于非靶向肾脏代谢组学技术研究大黄蛰虫丸改善大鼠肾脏衰老的多靶点作用

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中国中药杂志 2024年第11期49卷 3002-3011页

作者：刘思逸刘文杰涂玥何伟明刘欣雨顾奕旻温开智李成娟韩超万毅刚黄煌南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院江苏南京210023 江苏省中医药健康养生技术工程研究中心江苏南京210023 江苏省中医院肾内科江苏南京210029 南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210023 南京大学医学院附属鼓楼医院中医科江苏南京210008 南京中医药大学国际经方学院江苏南京210023

观察传统经方“大黄蛰虫丸(DHZCP)”改善肾脏衰老的效果,并探究其潜在的多靶点作用。将大鼠随机分为正常组、模型组、DHZCP组和维生素E(VE)组。首先建立D-半乳糖(D-gal)诱导的大鼠肾脏衰老模型,而后在造模同期,每天分别给予4组大鼠双蒸... 详细信息

观察传统经方“大黄蛰虫丸(DHZCP)”改善肾脏衰老的效果,并探究其潜在的多靶点作用。将大鼠随机分为正常组、模型组、DHZCP组和维生素E(VE)组。首先建立D-半乳糖(D-gal)诱导的大鼠肾脏衰老模型,而后在造模同期,每天分别给予4组大鼠双蒸水、DHZCP混悬液和VE混悬液。在药物干预第60天末,检测大鼠肾脏衰老和损伤的各项指标,包括肾功能,肾脏组织病理学特征,肾脏衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色特征,肾组织Klotho、细胞周期阻滞蛋白和衰老相关分泌表型(SASP)蛋白表达水平。此外,对于大鼠的肾组织分别进行非靶向代谢组学特征分析,筛选潜在生物标志物,富集代谢通路。最后,进行关键作用靶点信号通路的初步验证。结果显示,DHZCP和VE能明显改善衰老模型鼠的肾功能、肾小管/间质组织病理学特征和SA-β-gal染色程度,上调肾组织中Klotho蛋白表达,下调细胞周期阻滞蛋白和SASP蛋白表达。此外,DHZCP和VE能显著调节衰老模型鼠肾脏内源性代谢物;各组共同影响的差异代谢物有21个,其中有5个差异代谢物在衰老模型鼠中显著增加,经DHZCP和VE干预后显著回调,这些代谢物关联脂质代谢和能量代谢等途径;各组曲线下面积为0.88~1;DHZCP主要影响腺嘌呤核糖核苷酸活化蛋白激酶(AMPK)通路、环鸟苷一磷酸-蛋白激酶G(cGMP-PKG)通路、环腺苷酸(cAMP)通路、磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)通路、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路、自噬通路等;还影响肾素分泌、长寿调节途径、糖尿病心肌损伤以及烟酸和烟酰胺代谢等多条代谢途径。此外,DHZCP和VE能明显上调衰老模型鼠肾组织中AMPK信号通路关键信号分子的蛋白表达。总之,DHZCP和VE在体内能改善衰老模型鼠肾脏衰老和损伤;DHZCP的多靶点作用涉及肾脏内多条信号通路和多条代谢途径;其中,AMPK信号通路可能是其关键作用靶点之一。

关键词：大黄蛰虫丸肾脏衰老非靶向代谢组学作用靶点