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基于化学生物信息学方法探讨黄芪通过调节能量代谢发挥“补气”功效的物质基础和分子机制

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中国现代应用药学 2023年第14期40卷 1906-1916页

作者：后叶虎邱璐靳晓杰张敏林佳刘伟魏本君姚娟李亚玲刘永琦甘肃中医药大学甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究重点实验室兰州730000 甘肃中医药大学药学院兰州730000 甘肃中医药大学敦煌医学与转化教育部重点实验室兰州730000

目的阐释黄芪发挥“补气”功效调节能量代谢的物质基础和生物学机制。方法 TCMSP数据库及文献检索收集黄芪潜在活性成分,SEA数据库进行基于结构相似性的靶点预测,GeneCards、OMIM、TTD数据库获取能量代谢靶点。Cytoscape软件构建黄芪... 详细信息

目的阐释黄芪发挥“补气”功效调节能量代谢的物质基础和生物学机制。方法 TCMSP数据库及文献检索收集黄芪潜在活性成分,SEA数据库进行基于结构相似性的靶点预测,GeneCards、OMIM、TTD数据库获取能量代谢靶点。Cytoscape软件构建黄芪调节能量代谢靶点蛋白-蛋白相互作用网络图,并进行GO和KEGG富集分析。黄芪全成分与关键靶点进行分子对接和层次聚类分析评估靶点-成分亲和力,采用CCK-8法、流式细胞术、ATP试剂盒检测黄芪代表性化合物对H9C2心肌细胞、GES-1胃上皮细胞能量代谢的影响,并进行结合模式分析。结果网络药理学结果显示,黄芪调节能量代谢潜在作用靶点有126个;GO和KEGG富集分析表明,黄芪调节能量代谢可能与氧化还原过程、蛋白及酶合成的基因表达有关。其中,SIRT1及PPARγ是参与能量代谢调节的关键靶点。分子对接及层次聚类显示黄芪成分对SIRT1及PPARγ具有较好的靶向性,结合分子对接打分值筛选出3个代表性化合物进行体外实验验证;槲皮素、山奈酚能够促进H9C2心肌细胞、GES-1胃上皮细胞能量代谢。结合模式分析表明,槲皮素、山奈酚与SIRT1、PPARγ之间具有较好的结合能力。结论本研究通过中医药化学生物信息学方法初步阐释了黄芪调节能量代谢的物质基础和生物机制,为黄芪通过“补气”发挥行滞通痹功效的中医内涵提供了科学依据。

关键词：黄芪补气能量代谢化学生物信息学

基于脂质组学探究越鞠丸对抑郁小鼠的治疗作用

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中国实验方剂学杂志 2025年第1期 85-94页

作者：张振涛苏丹李惠珍宋永贵徐焕华赖美茜子艾志福江西中医药大学江西省中医药管理局抑郁症中医证候动物模型重点研究室中药药效(防治精神障碍脑疾病)评价江西省中医药管理局重点研究室

目的：基于脂质组学研究越鞠丸对抑郁小鼠血清、前额叶皮层、海马区脂质代谢的影响，探讨其改善脂质代谢防治抑郁的可能途径。方法：7周龄的C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、越鞠丸组（3.6 g·kg-1）和氟西汀组（10 mg·kg-1），采... 详细信息

目的：基于脂质组学研究越鞠丸对抑郁小鼠血清、前额叶皮层、海马区脂质代谢的影响，探讨其改善脂质代谢防治抑郁的可能途径。方法：7周龄的C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、越鞠丸组（3.6 g·kg-1）和氟西汀组（10 mg·kg-1），采用慢性不可预知刺激诱导抑郁模型，造模3周后，各给药组按剂量灌胃相应药液，空白组和模型组小鼠给予等体积去离子水灌胃，1次/d，持续2周。给药结束后，通过糖水偏好实验、旷场实验、悬尾实验、强迫游泳实验等神经行为学指标评价越鞠丸的抗抑郁作用；生化检测小鼠血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）含量；基于超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱质谱法（UPLC-LTQOrbitrap MS）对小鼠血清、前额叶皮层、海马区进行脂质组学分析；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠胃组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、核糖体蛋白S6激酶（S6K）、磷酸化（p）-mTOR、p-S6K蛋白的表达情况。结果：与空白组比较，模型组小鼠糖水偏好率和旷场中心运动时间显著减少（P<0.01），悬尾不动时间和强迫游泳不动时间显著增加（P<0.01），血清TC、TG、LDL-C、HDL-C、AST和ALT水平明显升高（P<0.05,P<0.01）；与模型组比较，越鞠丸组小鼠的糖水偏好率和旷场中心运动时间显著增加（P<0.01），悬尾不动时间和强迫游泳不动时间显著减少（P<0.01），血清TC、TG、LDL-C、AST和ALT水平明显降低（P<0.05,P<0.01）。脂质组学分析显示，越鞠丸对抑郁小鼠的血清、前额叶皮层、海马区的脂质代谢均有明显影响，差异脂质代谢物主要富集于甘油磷脂代谢、鞘脂信号和糖基磷脂酰肌醇-锚定蛋白生物合成等通路上，其中又以甘油磷脂的代谢通路最为显著。Western blot结果显示，与空白组比较，模型组小鼠胃组织中p-mTOR/mTOR和p-S6K/S6K的表达水平显著升高（P<0.01）；与模型组比较，越鞠丸组小鼠胃组织中p-mTOR/mTOR和p-S6K/S6K的表达水平显著降低（P<0.01）。结论：越鞠丸对脂质代谢的干预是其发挥抗抑郁效应的潜在途径之一，可能与胃中脂质代谢上游mTOR/S6K信号通路的调控相关。

关键词：越鞠丸抑郁症脂质组学神经行为学血脂哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/核糖体蛋白S6激酶(mTOR/S6K)信号通路

加味当归贝母苦参丸对H22肝癌荷瘤小鼠抑瘤及T细胞免疫调节作用

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中国实验方剂学杂志 2024年第12期30卷 87-96页

作者：马晓洁刘犇王磊李海龙李亚玲李长天舍雅莉甘肃中医药大学第一临床医学院兰州730000 甘肃中医药大学敦煌医学与转化教育部重点实验室甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究省级重点实验室兰州730000

目的:探讨加味当归贝母苦参丸对H22肝癌荷瘤小鼠抑瘤及T细胞免疫调节作用,为加味当归贝母苦参丸联合免疫检查点抗体治疗肝癌提供依据。方法:建立H22肝癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组、顺铂组、加味当归贝母苦参丸低、中、高剂量组(4、8... 详细信息

目的:探讨加味当归贝母苦参丸对H22肝癌荷瘤小鼠抑瘤及T细胞免疫调节作用,为加味当归贝母苦参丸联合免疫检查点抗体治疗肝癌提供依据。方法:建立H22肝癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组、顺铂组、加味当归贝母苦参丸低、中、高剂量组(4、8、16 g·kg^(-1)·d^(-1)),连续给药14 d,第15天处死小鼠。给药第0、4、8、12、15天测量肿瘤体积;称取瘤重、计算胸腺指数和脾指数;将脾脏淋巴细胞与H22肝癌细胞共培养,细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测肿瘤细胞增殖抑制率;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测脾脏和肿瘤组织中程序性细胞死亡蛋白-1(PD-1)、淋巴细胞活化基因-3(LAG-3)mRNA的表达情况;免疫组织化学法(IHC)检测脾脏和肿瘤组织中CD4^(+)、CD8^(+)T细胞数量及PD-1、LAG-3蛋白的表达情况。结果:给药后第8天,各给药组肿瘤体积较模型组均有不同程度下降,第15天肿瘤体积和瘤重均较模型组显著降低(P实验依据。

关键词：加味当归贝母苦参丸肝癌淋巴细胞活化基因-3(LAG-3) 程序性细胞死亡蛋白-1(PD-1) 肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)

黄芪汤对重离子辐射(12C^6+)所致大鼠放射性脑损伤的保护作用

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辐射研究与辐射工艺学报 2020年第6期38卷 38-47页

作者：颜春鲁安方玉刘永琦苏韫张利英李佳蔚王彩霞王统香王国文李孟翰甘肃中医药大学兰州730000 甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究省级重点实验室兰州730000 敦煌医学与转化教育部重点实验室兰州730000

探讨黄芪汤对受12C^6+离子束照射后大鼠大脑中Bax、Bcl-2与Caspase-3表达的影响。无特定病原体(Specific pathogen free,SPF)级Wistar大鼠50只随机分为正常对照组,单纯辐照模型组,黄芪汤高、中、低剂量组,每组各10只。常规饲养7 d后,黄... 详细信息

探讨黄芪汤对受12C^6+离子束照射后大鼠大脑中Bax、Bcl-2与Caspase-3表达的影响。无特定病原体(Specific pathogen free,SPF)级Wistar大鼠50只随机分为正常对照组,单纯辐照模型组,黄芪汤高、中、低剂量组,每组各10只。常规饲养7 d后,黄芪汤高、中、低剂量组用黄芪汤(剂量分别为18 g/(kg·d)、9 g/(kg·d)、4.5 g/(kg·d))灌胃2周,正常对照组和单纯辐照模型组用等量生理盐水灌胃。从第7天起除正常对照组外,其余各组大鼠脑组织给予4 Gy 12C^6+离子束单次照射,辐照后第7天称量各组大鼠的体重,10%水合氯醛(3 mL/kg)麻醉各组大鼠后股动脉采血处死大鼠。计算各组大鼠的脑系数,HE染色法及TUNEL染色法观察脑组织病理学形态改变,并计算神经细胞凋亡率,实时荧光定量PCR法测定各组大鼠脑组织Bcl-2、Bax和Caspase-3的基因表达,Western-Blot法检测各组大鼠脑组织Bcl-2、Bax和Caspase-3的蛋白表达。单纯辐射模型组体重和脑系数均降低,脑组织存在大量凋亡细胞,脑组织Bcl-2的基因表达和蛋白表达均降低,Bax和Caspase-3的基因表达和蛋白表达均升高(p系数升高,黄芪汤高剂量组体重、脑组织Bcl-2的基因表达和蛋白表达均升高(p<0.05或p<0.01);而黄芪汤中、高剂量组脑组织细胞凋亡率明显降低,Caspase-3的基因表达和蛋白表达均显著降低,高剂量组Bax的基因表达和蛋白表达均显著降低(p<0.01)。病理组织学检查发现单纯辐射模型组大鼠脑组织稀疏,细胞数量明显减少且间隙增大;黄芪汤高剂量组脑组织稀疏,脑细胞数量减少及间隙增宽等情况较单纯辐射组明显好转,但未完全恢复正常。黄芪汤对12C^6+离子束辐射所致的Wistar大鼠脑损伤具有较好的保护作用,其抗辐射作用可能主要是通过抑制大鼠脑组织Bax、Caspase-3的表达和促进其脑组织Bcl-2的表达来实现的。

关键词：黄芪汤 12C^6+离子束脑损伤凋亡蛋白

中药配方颗粒与饮片治疗慢性阻塞性肺病的疗效比较及影响因素的Logistic回归分析

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中草药 2023年第9期54卷 2889-2897页

作者：吴迪王小乐杨勤军杨程丁焕章石孟瑶高雅婷童佳兵李泽庚安徽中医药大学中医学院安徽合肥230038 江西中医药大学附属医院江西南昌330006 安徽省教育厅重点实验室中医药防治肺系重大疾病重点实验室安徽合肥230031 安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230031 新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038

目的探讨中药配方颗粒和饮片汤剂治疗慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的临床疗效差异及相关影响因素。方法采用回顾性分析的方法,以2017年1月—2021年12月诊断为COPD的病例为研究对象,依据使用中药剂型的... 详细信息

目的探讨中药配方颗粒和饮片汤剂治疗慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的临床疗效差异及相关影响因素。方法采用回顾性分析的方法,以2017年1月—2021年12月诊断为COPD的病例为研究对象,依据使用中药剂型的不同分为颗粒组和饮片组,采用倾向性评分对两组患者年龄、性别等混杂因素进行匹配。比较两组病例的中医证型、用药特点、中药费用及相关疗效指标差异,采用单因素及多因素Logistic回归分析研究影响疗效的主要因素。结果倾向性评分匹配后,颗粒组和饮片组各94例,两组患者的一般情况、中医证型、用药特点未见显著性差异。治疗后,颗粒组和饮片组总有效率分别为92.6%和87.2%,但差异无统计学意义;与治疗前相比,两组患者肺功能指标第1 s用力呼气容积(forced expiratory volume in one second,FEV_(1))、用力肺活量(forced vital capacity,FVC)、FEV_(1)/FVC,相关炎症指标白细胞计数(white blood cell,WBC)、中性粒细胞百分比(neutrophilic granulocyte percentage,NEU-P)、嗜酸性粒细胞计数(eosinophils,EOS)、淋巴细胞计数(lymphocyte,LYM)、超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)及血气分析指标均有所改善(P肺功能指标、炎症指标及缺氧状态的改善程度相当(P>0.05);但颗粒组平均中药费用明显高于饮片组(P肺功能是COPD疗效的独立影响因素,且发挥显著的正向影响关系。结论中药配方颗粒与饮片治疗COPD的临床疗效无显著性差异,二者均安全有效,值得推广应用。肺功能是影响疗效的关键因素,通过中医特色肺康复技术改善患者肺功能对提高疗效至关重要。

关键词：中药颗粒剂中药饮片慢性阻塞性肺疾病疗效差异影响因素

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防治辐射旁效应的中药研究进展

中药药理与临床 2024年

作者：陈亚萍卓淇泓张尚祖李洋洋师亮亮王佳伟王帅哲陈琰魏本君张利英甘肃中医药大学甘肃省中医方药挖掘与创新转化重点实验室甘肃中医药大学敦煌医学与转化教育部重点实验室甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究重点实验室

尽管放射治疗是癌症治疗中的重要有效方法之一，但是辐射旁效应的发生阻碍放疗进程、危害预后。辐射旁效应是放疗时辐射靶区域以外的正常组织产生的损伤效应，是二次癌症发生的危险因素，也是临床防治重难点。由于中药具有“多点显效、... 详细信息

尽管放射治疗是癌症治疗中的重要有效方法之一，但是辐射旁效应的发生阻碍放疗进程、危害预后。辐射旁效应是放疗时辐射靶区域以外的正常组织产生的损伤效应，是二次癌症发生的危险因素，也是临床防治重难点。由于中药具有“多点显效、协同增效”的优点，在疾病治疗过程中发挥重要作用，因此本文重点总结了防治辐射旁效应中药复方以及中药有效成分，并且根据辐射旁效应发病机制总结了防治辐射旁效应的潜在中药，为临床防治辐射旁效应损伤提供一定的线索。

关键词：辐射旁效应中药复方中药有效成分

益肺健脾方降低香烟烟雾诱导的人支气管上皮细胞的炎性损伤和黏液高分泌:基于抑制TLR4/NF-κB信号通路

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南方医科大学学报 2023年第4期43卷 507-515页

作者：徐晨李春颖王胜安徽中医药大学研究生院安徽合肥230031 安徽中医药大学第一附属医院老年病中心呼吸内科安徽合肥230031 安徽省中医药科学院中医呼吸病防治研究所安徽合肥230031 安徽省教育厅重点实验室中医药防治肺系重大疾病重点实验室安徽合肥230031

目的探究益肺健脾方通过TLR4/NF-κB信号通路改善人支气管上皮细胞(16HBE)炎性损伤和黏液高分泌的机制。方法将40只SD大鼠随机分为两组:空白血清组、含药血清组,20只/组,对空白血清组和含药血清组大鼠分别以生理盐水、益肺健脾方药液灌... 详细信息

目的探究益肺健脾方通过TLR4/NF-κB信号通路改善人支气管上皮细胞(16HBE)炎性损伤和黏液高分泌的机制。方法将40只SD大鼠随机分为两组:空白血清组、含药血清组,20只/组,对空白血清组和含药血清组大鼠分别以生理盐水、益肺健脾方药液灌胃,末次灌胃后对大鼠进行麻醉并于无菌状态下腹主动脉采血收集益肺健脾方含药血清;自制气体抽吸泵制备香烟烟雾溶液(CSE),刺激人支气管上皮细胞16HBE,并用CCK8法筛选CSE和益肺健脾方含药血清干预慢性阻塞性肺疾病细胞模型的最佳作用浓度以及最佳作用时间;qRT-PCR法检测TLR4基因沉默和过表达对16HBE中TLR4mRNA的表达;Westernblot法和qRT-PCR法检测益肺健脾方对TLR4沉默和过表达后TLR4、NF-κB、MUC5AC、MUC7、MUC8mRNA和蛋白表达的影响;ELISA法检测细胞炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的表达。结果选择20%含药血清作用24h作为益肺健脾方最佳给药浓度及给药时间;与CSE组相比,CSE+含药血清组的TLR4、NF-κB、MUC5AC、MUC7、MUC8mRNA及相应蛋白的表达显著降低;与CSE+含药血清组相比,CSE+siRNA-TLR4+含药血清组的TLR4、NF-κB、MUC5AC、MUC7、MUC8mRNA及相应蛋白的表达降低;与CSE+Lv-TLR4组相比,CSE+Lv-TLR4+含药血清组的TLR4、NF-κB、MUC5AC、MUC7、MUC8mRNA及相应蛋白的表达显著降低;与CSE+含药血清组相比,CSE+Lv-TLR4+含药血清组的TLR4、NF-κB、MUC5AC、MUC7、MUC8mRNA及相应蛋白的表达显著升高(P肺健脾方可干预TLR4/NF-κB信号通路,作用于COPD细胞模型,降低MUC的分泌抑制COPD气道炎症和黏液高分泌,降低与NF-κB信号通路相关的TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8炎症因子的表达,其机制可能与TLR4/NF-κB信号通路的基因及MUC蛋白表达有关。

关键词：益肺健脾方慢性阻塞性肺疾病气道炎症黏液高分泌 TLR4/NF-κB

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六味补气方通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD焦亡通路延缓大鼠慢性阻塞性肺疾病的发展

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南方医科大学学报 2024年第11期44卷 2156-2162页

作者：梅莉张璐吴迪丁焕章王新汝张西安卫宇航李泽庚童佳兵安徽中医药大学研究生院安徽合肥230012 安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230031 合肥综合性国家科学中心大健康研究院新安医学与中医药现代化研究所安徽合肥230012 中医药防治肺系重大疾病应用转化安徽省重点实验室安徽合肥230031

目的基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD的细胞焦亡通路,探讨六味补气方治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠的作用机制。方法将40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、六味补气方组、六味补气方+MCC950组(n=10),除对照组外,其余各组大鼠采用烟熏... 详细信息

目的基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD的细胞焦亡通路,探讨六味补气方治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠的作用机制。方法将40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、六味补气方组、六味补气方+MCC950组(n=10),除对照组外,其余各组大鼠采用烟熏联合脂多糖气管滴注以及激素注射法造模,建立COPD模型大鼠,并分别给予六味补气方药物灌胃及合并MCC950腹腔注射。观察各组大鼠的一般情况变化,分析大鼠肺组织病理改变、肺功能、肺泡灌洗液(BALF)吉姆萨染色总细胞及白细胞分类计数、血清中炎症因子IL-6、TNF-α、IL-18及NO水平;qRT-PCR检测大鼠肺组织中焦亡相关蛋白NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18的mRNA表达。结果与对照组相比,模型组大鼠的肺组织病理损伤较重,肺功能下降(P肺组织相关蛋白含量增多(P肺组织病理、肺功能均有改善(P肺组织相关焦亡蛋白含量减少(P肺组织病理、肺功能有改善,但差异无统计学意义(P>0.05);BALF中总细胞数及白细胞分类计数减少(P肺组织相关焦亡蛋白含量较少(P肺组织焦亡,从而降低炎症反应,减轻肺部损伤,延缓疾病的发生发展。

关键词：六味补气方慢性阻塞性肺疾病 NLRP3/Caspase-1/GSDMD 细胞焦亡 MCC950

炎性环境与间充质干细胞自噬相互影响关系的研究进展

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中国药理学通报 2018年第5期34卷 597-600页

作者：李程豪刘永琦骆亚莉伍志伟甘肃中医药大学甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究省级重点实验室甘肃兰州730000 甘肃中医药大学敦煌医学与转化省部共建教育部重点实验室甘肃兰州730000

间充质干细胞可参与多种组织、器官的损伤修复,但损伤修复局部通常有炎症存在,并诱导细胞自噬发生;而自噬作为一种细胞的自我调节机制,不仅能够对炎性环境中的间充质干细胞生理过程进行调节,还能通过细胞对炎性环境进行反向调节。该文... 详细信息

间充质干细胞可参与多种组织、器官的损伤修复,但损伤修复局部通常有炎症存在,并诱导细胞自噬发生;而自噬作为一种细胞的自我调节机制,不仅能够对炎性环境中的间充质干细胞生理过程进行调节,还能通过细胞对炎性环境进行反向调节。该文针对炎性环境与间充质干细胞自噬的相互作用间的反馈调节关系进行综述,为对炎性环境中间充质干细胞的研究及应用提供一定的思路。

关键词：炎性环境炎性因子自噬间充质干细胞反馈调节病原相关分子模式