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电针“肠病方”对急性溃疡性结肠炎大鼠NLRP3炎性小体和肠黏膜屏障的影响

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中国针灸 2024年第4期44卷 441-448页

作者：蒋子文武荣林徐慧超王海军董爱爱冀来喜山西中医药大学第二临床学院太原030619 成都中医药大学针灸推拿学院

目的:观察电针“肠病方”对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的急性溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠黏膜屏障和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响,探讨电针“肠病方”治疗UC的作用机制。方法:将32只SPF级健康雄性SD大鼠随机分成空... 详细信息

目的:观察电针“肠病方”对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的急性溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠黏膜屏障和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响,探讨电针“肠病方”治疗UC的作用机制。方法:将32只SPF级健康雄性SD大鼠随机分成空白组、模型组、西药组和电针组,每组8只。除空白组外,大鼠饮用5%DSS溶液7 d制备UC模型。造模后,西药组予美沙拉嗪混悬液(200 mg/kg)灌胃;电针组予针刺双侧“天枢”“上巨虚”和“中脘”穴,同侧“天枢”与“上巨虚”连接电子针疗仪电极,予疏密波,频率10 Hz/50 Hz,每次干预20 min。两组均每日1次,干预3 d。每天观察各组大鼠一般情况。干预后,计算大鼠疾病活动指数(DAI)评分;HE染色法观察大鼠结肠组织形态;ELISA法检测血清促炎性细胞因子[白细胞介素(IL)-18、IL-1β]含量;Western blot法检测大鼠结肠组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)蛋白表达;免疫荧光法检测结肠组织闭锁连接蛋白-1(ZO-1)、闭锁蛋白(Occludin)阳性表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠一般状况较差,体质量增长缓慢,结肠长度缩短(P0.05)。与空白组比较,模型组结肠黏膜形态破坏,腺体排列紊乱,隐窝萎缩,有明显的炎性细胞浸润;与模型组比较,西药组和电针组大鼠结肠黏膜形态相对完好,腺体与隐窝结构得到了恢复与改善,炎性细胞浸润减少。结论:电针“肠病方”对DSS诱导的急性UC具有显著的改善作用,可能是通过调节NLRP3炎性小体和肠黏膜屏障相关蛋白的表达,从而减轻溃疡性结肠炎的症状。

关键词：溃疡性结肠炎电针针刺肠病方 NLRP3炎性小体肠黏膜屏障

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肝郁气滞型失眠实验动物模型复制方法及评价概述

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中医杂志 2024年第14期65卷 1496-1503页

作者：张认真叶钰娟魏玉婷马翠严兴科甘肃中医药大学针灸推拿学院甘肃省兰州市730000

梳理近年来中医肝郁气滞型失眠病证结合动物模型的研究资料,从实验动物选择、造模方法、模型评价方面进行总结,以期为肝郁气滞型失眠实验模型的规范化制备和干预机制研究提供参考。实验动物选择方面,肝郁气滞型失眠模型中大鼠、小鼠因... 详细信息

梳理近年来中医肝郁气滞型失眠病证结合动物模型的研究资料,从实验动物选择、造模方法、模型评价方面进行总结,以期为肝郁气滞型失眠实验模型的规范化制备和干预机制研究提供参考。实验动物选择方面,肝郁气滞型失眠模型中大鼠、小鼠因其睡眠模式与人类较为相似而常用于睡眠模式的研究;斑马鱼因基因同源性高而适用于早期发育中睡眠模式的研究;猕猴、普通狨猴和食蟹猴则因具有与人类更接近的生理和行为特性,被用于高度复杂的睡眠障碍研究。造模方法方面,电刺激法、慢性束缚及慢性情绪应激法各有其特点和应用场景,而慢性夹尾刺激复合腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)法结合了物理和化学两种刺激,以模拟人类失眠的复杂机制,能较全面地模拟肝郁气滞型失眠的病理状态。评价指标方面,脑电图(EEG)和肌电图(EMG)监测、巴比妥类药物协同睡眠实验是评价肝郁气滞型失眠动物模型最常用且科学的方法,能够提供直观、连续的睡眠状态监测;巴比妥类药物协同睡眠实验可以反映模型动物对睡眠调节药物的敏感性和响应性;而以方测证评价法的引入将中医的治疗和诊断原则与现代科学研究相结合,为证候模型的评价提供了新思路。

关键词：失眠肝郁气滞病证结合动物模型综述

心俞穴位埋线联合曲美他嗪对大鼠心肌梗死后能量代谢影响的研究

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海南医学院学报 2024年

作者：邰萱黄小楼韦雪兰穆泉洁杨珣张婷吴高鑫贵州中医药大学针灸推拿学院贵州中医药大学第一附属医院针灸科

目的观察心俞穴位埋线联合曲美他嗪对大鼠心肌梗死(MI)后能量代谢的影响方法以经典左前降支冠脉结扎术建立MI大鼠模型，将造模成功的大鼠随机分为模型组、埋线组、西药组、联合组，假手术组单开胸不结扎。术后第2天开始干预，并于术后7... 详细信息

目的观察心俞穴位埋线联合曲美他嗪对大鼠心肌梗死(MI)后能量代谢的影响方法以经典左前降支冠脉结扎术建立MI大鼠模型，将造模成功的大鼠随机分为模型组、埋线组、西药组、联合组，假手术组单开胸不结扎。术后第2天开始干预，并于术后7d、28d两个时间点观察。苏木精-伊红（HE）染色观察心肌组织病理形态；生化检测测定心肌组织ATP含量和血清中游离脂肪酸（FFA）浓度；Westernblot法检测心肌组织AMPK、GLUT4蛋白表达。结果与假手术组比较，术后7d、28d的模型组心肌细胞肿胀、排列紊乱并可见明显点状炎性细胞浸润，心肌细胞横截面积和血清FFA浓度增大、心肌ATP含量和AMPK、GLUT4蛋白表达降低(均P<0.05)。术后7d和28d时，与模型组比较，3个治疗组的心肌细胞形态、排列及炎症细胞浸润程度均有不同程度的改善，心肌细胞横截面积和血清FFA浓度均不同程度减小、心肌ATP含量和AMPK、GLUT4蛋白表达均不同程度增加(均P<0.05)，其中联合组疗效比埋线组和西药组更明显(P<0.05)。与术后7d的各治疗组比较，术后28d各治疗组心肌ATP含量和AMPK、GLUT4蛋白表达均增大（均P＜0.05），其中联合组的改善效应最明显（P<0.05）。结论心俞穴位埋线联合曲美他嗪可进一步发挥对MI后心肌的保护作用，两者联合应用具有协同增效的作用，其作用机制可能是通过增加心肌组织AMPK和GLUT4蛋白的表达，可降低血清FFA浓度和增加心肌ATP含量来改善MI后心肌能量代谢紊乱，进而改善心肌细胞肥大，促进心肌损伤修复。

关键词：心俞穴位埋线曲美他嗪联合应用心肌梗死能量代谢

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针灸治疗溃疡性结肠炎结局指标的分析

中国针灸 2024年

作者：叶香吟周园芳周俊吕晓松孙睿睿梁繁荣何伟重庆市江津区中医院针灸科成都中医药大学针灸推拿学院

目的：明确针灸治疗溃疡性结肠炎（UC）的关键结局指标。方法：检索中国期刊全文数据库（CNKI）、万方数据知识服务平台（Wanfang）、维普数据库（VIP）、中国生物医学文献数据库（CBM）、PubMed、EMbase、The Cochrane Library、Web of... 详细信息

目的：明确针灸治疗溃疡性结肠炎（UC）的关键结局指标。方法：检索中国期刊全文数据库（CNKI）、万方数据知识服务平台（Wanfang）、维普数据库（VIP）、中国生物医学文献数据库（CBM）、PubMed、EMbase、The Cochrane Library、Web of Science（WOS）数据库收录的针灸治疗UC的随机对照试验（RCT），检索时限为建库至2023年3月20日。提取文献基本信息、干预措施、结局指标相关内容，分析主、次要结局指标设置，各类指标的使用频次、组合使用情况，并归纳针灸治疗UC的RCT指标域。结果：共纳入215个RCT，涉及结局指标54个，包括中医病证、症状/体征、理化检测、生活质量、远期预后、安全性事件6类，使用频次排前三的依次为临床疗效评价、针灸不良反应、主要症状评分。其中仅3篇文献明确报告了主、次要结局指标，180篇文献同时使用了两类结局指标，仅3篇文献具体描述了观察指标评价时点，明确报告疗效评定标准参考来源的126篇文献涉及的参考标准达57个。结论：目前针灸治疗UC的RCT，结局指标未形成统一标准，主、次要结局指标有待明确，临床疗效评价标准不一，对患者生活质量、随访、安全性事件关注较少，应注重构建以客观内镜评分为主，以症状/体征改善、生化检查等为辅的结局指标集。

关键词：溃疡性结肠炎针灸随机对照试验结局指标指标域

基于“在筋守筋、在骨守骨”理论探析高树中教授治痹特色

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中华中医药学刊 2024年第4期42卷 204-207页

作者：李笑颜孟宁宁闫文丽马玉侠山东中医药大学针灸推拿学院山东济南250355

总结高树中教授基于“在筋守筋、在骨守骨”理论治疗痹证特色。“在筋守筋、在骨守骨”出自《灵枢·终始》,高教授认为病位在筋骨之痹,病变脏腑涉及肝脾肾,治疗应守筋守骨。临证针刺以局部解结消灶为主,远近配穴,重视三阳经取穴,穴少而... 详细信息

总结高树中教授基于“在筋守筋、在骨守骨”理论治疗痹证特色。“在筋守筋、在骨守骨”出自《灵枢·终始》,高教授认为病位在筋骨之痹,病变脏腑涉及肝脾肾,治疗应守筋守骨。临证针刺以局部解结消灶为主,远近配穴,重视三阳经取穴,穴少而精;强调针法操作,巧施针法,随咳进针,活动患处;针刺宜深内而久留,意在刺至病所;常用砖熨法、麦麸熨法,配合引经药,引药至病所。刺熨方药结合,药廉效佳,法活机圆,内外合治,效如桴鼓,为临床治疗痹证开拓思路。

关键词：在筋守筋,在骨守骨高树中痹证治疗特色

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基于IL-17F/IL-17RC信号通路及M1小胶质细胞探讨“三法三穴”推拿手法即刻镇痛作用的机制

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北京中医药大学学报 2024年第1期47卷 116-123页

作者：陈金平刘志凤于天源王厚融张英琦官乾徐亚静杨震杰萨出拉张润龙张汉钰刘家玥孙佳伟北京中医药大学针灸推拿学院北京100029 北京中医药大学东直门医院北京医院

目的通过观察“三法三穴”推拿手法对轻型慢性压迫性损伤(minor CCI)模型大鼠脊髓背角中白细胞介素-17F(IL-17F)、白细胞介素-17受体C(IL-17RC)、核转录因子-κB激活剂1(Act1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)及M1型小胶质细胞表达... 详细信息

目的通过观察“三法三穴”推拿手法对轻型慢性压迫性损伤(minor CCI)模型大鼠脊髓背角中白细胞介素-17F(IL-17F)、白细胞介素-17受体C(IL-17RC)、核转录因子-κB激活剂1(Act1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)及M1型小胶质细胞表达的影响,探讨推拿对周围神经病理性疼痛的即刻镇痛机制。方法将36只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、推拿组,12只/组,结扎右侧坐骨神经复制minor CCI模型。推拿组使用按摩推拿手法模拟仪在大鼠患侧殷门、承山、阳陵泉依次进行点法、拨法、揉法,假手术组及模型组仅抓握束缚,干预1次。采用机械痛实验与冷板实验评价即刻干预后大鼠对机械刺激、冷刺激的反应情况;采用蛋白质印迹法检测各组大鼠脊髓背角中IL-17F、TRAF6的蛋白表达情况;采用实时荧光PCR(RT-PCR)法检测各组大鼠脊髓背角中IL-17F、IL-17RC、Act1、TRAF6的mRNA表达情况;采用免疫荧光法检测各组大鼠脊髓背角中M1型小胶质细胞平均荧光强度。结果行为学结果显示,干预前,与假手术组比较,模型组、推拿组大鼠机械缩足反射阈值(PMWT)降低,冷敏阈值升高;推拿手法干预后,与模型组比较,推拿组大鼠PMWT升高,冷敏阈值降低;与干预前比较,干预后推拿组大鼠PMWT升高,冷敏阈值降低(均P推拿组大鼠上述指标mRNA表达均降低(均P推拿组大鼠IL-17F、TRAF6蛋白表达降低(均P推拿组大鼠CD40平均荧光强度减弱(均P推拿手法干预1次,其机制可能是通过抑制脊髓背角中IL-17F、IL-17RC、Act1、TRAF6的表达及M1型小胶质细胞的活化实现的,从而有即刻镇痛的作用。

关键词：推拿小胶质细胞殷门承山阳陵泉大鼠

白藜芦醇调控Hippo信号通路对卵巢低反应小鼠卵巢保护作用的机制研究

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中国中药杂志 2024年第3期49卷 744-753页

作者：郝健亨常博雅任佳王海军冀来喜成都中医药大学针灸推拿学院四川成都610075 山西中医药大学第二临床学院山西晋中030619

观察白藜芦醇(resveratrol,Res)通过调控Hippo信号通路对卵巢低反应(poor ovarian response,POR)小鼠卵巢功能的保护作用,探析Res抑制卵巢细胞凋亡的可能机制。将筛选后动情周期规律的雌性小鼠随机分成空白组,模型组以及Res低、高剂量组... 详细信息

观察白藜芦醇(resveratrol,Res)通过调控Hippo信号通路对卵巢低反应(poor ovarian response,POR)小鼠卵巢功能的保护作用,探析Res抑制卵巢细胞凋亡的可能机制。将筛选后动情周期规律的雌性小鼠随机分成空白组,模型组以及Res低、高剂量组(20、40 mg·kg^(-1)),每组20只。空白组给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃,模型组以及Res低、高剂量组小鼠给予雷公藤多苷混悬液(50 mg·kg^(-1))灌胃2周,造模完成后,Res低、高剂量组小鼠连续灌胃治疗2周,空白组和模型组给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃,于治疗结束次日对各组雌鼠进行促排操作。最后每组随机选取12只雌鼠进行取材,将每组剩余的8只雌鼠与雄鼠1∶1合笼。采用阴道脱落细胞涂片观察小鼠的动情周期变化,检测小鼠获卵数、卵巢湿重、卵巢指数和妊娠率,通过酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清中抗缪勒管激素(anti-Mullerian hormone,AMH)、促卵泡生成素(follicle-stimulating hormone,FSH)、雌二醇(estradiol,E_(2))、促黄体生成激素(luteinizing hormone,LH)的含量;通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色和脱氧核苷酸转移酶dUTP末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling,TUNEL)染色法观察卵巢组织形态和卵巢细胞凋亡情况;通过免疫组化法检测Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)1和带有PDZ结合基序的转录共激活因子(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,TAZ)的蛋白表达,通过Western blot法检测哺乳动物Ste-20样激酶(mammalian sterile 20-like kinase,MST)1/2、大型肿瘤抑制因子(large tumor suppressor,LATS)1/2、YAP1、TAZ、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2关联X的蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)蛋白表达水平的变化。结果发现,与空白组比较,模型组小鼠动情周期紊乱率升高,卵巢组织各级正常发育卵泡数量减少,闭锁卵泡增多,卵巢颗粒细胞凋亡量提高,获卵数下降,卵巢湿重与卵巢指数降低,血清中FSH和LH含量升高,AMH和E_(2)含量下降,卵巢组织YAP1、TAZ蛋白表达水平降低,MST1/2、LATS1/2和Bax蛋白相对表达升高,YAP1、TAZ和Bcl-2蛋白相对表达降低,合笼后每胎胚胎数显著降低;与模型组比较,Res低、高剂量组小鼠动情周期紊乱率降低,卵泡数量和形态得到不同程度改善,卵泡闭锁量降低,卵巢颗粒细胞凋亡程度得到改善,获卵数升高,卵巢湿重与卵巢指数升高,血清中FSH和LH含量降低,AMH和E_(2)含量升高,卵巢组织YAP1、TAZ蛋白表达水平升高,MST1/2、LATS1/2和Bax蛋白相对表达降低,YAP1、TAZ和Bcl-2蛋白相对表达升高,合笼后每胎胚胎数不同程度升高。综上,Res可以有效抑制小鼠卵巢细胞凋亡,改善卵巢反应性,其机制可能与调节Hippo通路中的关键分子有关。

关键词：白藜芦醇卵巢低反应 Hippo信号通路凋亡

齐刺环跳穴干预坐骨神经损伤大鼠海马IL-1β、IL-6、TNF-α及GFAP表达影响的实验研究

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中华中医药学刊 2024年第6期42卷 81-86,I0015页

作者：田辉马铁明辽宁中医药大学针灸推拿学院辽宁沈阳110847

目的通过观察齐刺环跳穴对坐骨神经损伤大鼠海马白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-alpha, TNF-α)及胶质纤维酸性蛋白(Glial Fibrillary Acidic Protein, GFAP)表达的影响,探讨齐刺环跳穴治疗坐骨神经痛的中枢镇痛机制。方法 60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、齐刺组、单刺组及药物组,每组12只,采用钳夹法制备大鼠坐骨神经损伤模型。造模第2天开始进行针刺及药物干预,连续14 d。观察各组大鼠干预前后坐骨神经功能指数(Sciatic nerve Function Index, SFI)、热缩足反射潜伏期(Paw Withdrawal Latency, PWL)的变化,ELISA法检测海马组织IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达水平,实时定量PCR法及免疫组化法检测海马组织GFAP表达水平。结果干预前,与假手术组比较,其余各组大鼠PWL值、SPI值显著降低(P<0.01),与模型组比较,齐刺组干预后大鼠PWL值、SPI值显著改善(P<0.01)。ELISA法、RT-PCR法及免疫组化检测结果显示,模型组、齐刺组、单刺组、药物组IL-1β、IL-6、TNF-α、GFAP表达较假手术组显著升高(P<0.01);与模型组相比,齐刺组、单刺组、药物组IL-1β、IL-6、TNF-α、GFAP表达显著下降,齐刺组表达低于单刺组及药物组(P<0.01)。结论齐刺环跳穴缓解坐骨神经痛的镇痛机制可能与下调海马炎症因子表达,抑制星形胶质细胞活化,从而降低中枢痛觉敏化程度有关。

关键词：坐骨神经功能指数热缩足反射潜伏期白细胞介素-1β 白细胞介素-6 肿瘤坏死因子-α 胶质纤维酸性蛋白

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齐刺环跳穴干预坐骨神经损伤大鼠脊髓背角炎症因子及胶质原纤维酸性蛋白表达影响的实验研究

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中华中医药学刊 2024年第5期42卷 28-32,I0014,I0015页

作者：田辉陈怡然马铁明辽宁中医药大学针灸推拿学院辽宁沈阳110847

目的通过观察齐刺环跳穴对坐骨神经损伤(Sciatic nerve injury,SNI)大鼠脊髓背角炎症因子及胶质原纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic arotein,GFAP)表达的影响,探讨齐刺环跳穴治疗神经病理痛(Neuropathic pain,NP)的镇痛机制。方法6... 详细信息

目的通过观察齐刺环跳穴对坐骨神经损伤(Sciatic nerve injury,SNI)大鼠脊髓背角炎症因子及胶质原纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic arotein,GFAP)表达的影响,探讨齐刺环跳穴治疗神经病理痛(Neuropathic pain,NP)的镇痛机制。方法60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、齐刺组、单刺组及药物组,每组12只,采用钳夹法制备大鼠坐骨神经损伤模型。造模第2天开始进行针刺及药物干预,连续14 d。观察各组大鼠干预前后热缩足反射潜伏期(Paw with⁃drawal latency,PWL)的变化,治疗结束后取损伤处坐骨神经,苏木素伊红(HE)染色观察神经形态;取腰3~5脊髓节段ELISA法检测白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)蛋白表达水平,实时定量PCR法及免疫组化法检测GFAP表达水平。结果治疗前,与假手术组比较,各组PWL指数降低(P<0.01),与模型组比较,齐刺组治疗后显著改善(P<0.01)。HE染色,模型组神经纤维排列紊乱,齐刺组、单刺组及药物组神经纤维在数量及排列紊乱程度等方面均有改善,齐刺组改善最为明显。ELISA法、RT-PCR法及免疫组化检测,模型组、齐刺组、单刺组、药物组IL-1β、IL-6、TNF-α、GFAP表达较假手术组显著升高(P<0.01);与模型组相比,齐刺组、单刺组、药物组IL-1β、IL-6、TNF-α、GFAP表达显著下降,齐刺组表达低于单刺组及药物组(P<0.01)。结论齐刺环跳穴缓解坐骨神经痛的镇痛机制可能与下调脊髓背角炎症因子表达,抑制星形胶质细胞活化,降低中枢痛觉敏化程度有关。

关键词：坐骨神经损伤神经病理痛热缩足反射潜伏期胶质原纤维酸性蛋白