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马氏珠母贝L-氨基酸氧化酶基因克隆及表达分析

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上海海洋大学学报 2024年

作者：罗贝林海生王庆恒秦小明曹文红高加龙郑惠娜广东海洋大学水产学院广东海洋大学食品科技学院广东省水产品加工与安全重点实验室

L-氨基酸氧化酶（LAAO）是一种广泛存在于自然界中的免疫蛋白酶，为探究马氏珠母贝LAAO（Pinctada fucata martensii LAAO， PmLAAO）基因序列的特征及其在副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus， Vp）刺激后的表达变化，该研究克隆... 详细信息

L-氨基酸氧化酶（LAAO）是一种广泛存在于自然界中的免疫蛋白酶，为探究马氏珠母贝LAAO（Pinctada fucata martensii LAAO， PmLAAO）基因序列的特征及其在副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus， Vp）刺激后的表达变化，该研究克隆得到了PmLAAO的cDNA全长，其开放阅读框（ORF）长度为1767 bp，共编码588个氨基酸，具有FAD结合域和氨基酸氧化酶的结构域，是氨基酸氧化酶家族的一员。多序列比对结果和系统发育树显示，PmLAAO与双壳类动物的亲缘关系较近，其中，与加州贻贝LAAO具有的相似度最高。qRT-PCR结果显示PmLAAO在鳃、外套膜、闭壳肌、性腺、消化腺中均有表达，在鳃组织中表达水平最高；在Vp刺激后，PmLAAO在鳃组织中的表达水平显著升高，受刺激后48 h表达量最高。这些研究结果为新型免疫蛋白酶LAAO在双壳贝类中的功能活性提供了参考。

关键词：马氏珠母贝 L-氨基酸氧化酶基因克隆实时荧光定量PCR

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华贵栉孔扇贝肠道产细菌素乳酸菌的分离筛选

食品科技 2019年第2期44卷 27-32,39页

作者：罗怡张瀛刘颖徐海珊朱桂媚吴锦燕程玲玲广东海洋大学食品科技学院湛江524088

采用双层牛津杯扩散法,以单核细胞增生李斯特氏菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌和枯草芽孢杆菌为指示菌,测定南海海域华贵栉孔扇贝肠道中分离到的乳酸菌的抑菌活性。对具有抑菌活性菌株的发酵液进行排酸、排过氧化氢实... 详细信息

采用双层牛津杯扩散法,以单核细胞增生李斯特氏菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌和枯草芽孢杆菌为指示菌,测定南海海域华贵栉孔扇贝肠道中分离到的乳酸菌的抑菌活性。对具有抑菌活性菌株的发酵液进行排酸、排过氧化氢实验,及胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶敏感实验以筛选产细菌素菌株,并对细菌素进行温度、酸碱稳定性研究。结果显示:菌株ZY-F2的发酵液对食品中常见的腐败菌、致病菌有良好的抑制作用,蛋白酶酶解实验发现其抑菌物质具有蛋白质性质,初步确定为细菌素。该菌株发酵液经121℃处理15 min后相对抗菌活性为81.54%,且在pH2.0～6.0酸性范围内表现出抑菌活性。根据形态、生理生化鉴定及16S rRNA序列同源性分析,菌株ZY-F2被鉴定为食物魏斯氏菌(Weissella cibaria)。

关键词：乳酸菌细菌素筛选抑菌活性

超高压处理对冷藏鲈鱼片品质及组织结构变化的影响

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高压物理学报 2017年第4期31卷 494-504页

作者：赵宏强吴金鑫张苑怡蓝蔚青刘书成孙晓红谢晶上海海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心上海201306 广东海洋大学食品科技学院广东湛江524088

为研究超高压处理对冷藏鲈鱼片品质及组织结构变化的影响,将新鲜鲈鱼片经不同超高压(200、250、300MPa,保压时间9min)处理后,置于4℃条件下贮藏。分别于0、4、8、11、13、15d进行样品的理化指标(pH值、硬度、持水力、硫代巴比妥酸(TBA)... 详细信息

为研究超高压处理对冷藏鲈鱼片品质及组织结构变化的影响,将新鲜鲈鱼片经不同超高压(200、250、300MPa,保压时间9min)处理后,置于4℃条件下贮藏。分别于0、4、8、11、13、15d进行样品的理化指标(pH值、硬度、持水力、硫代巴比妥酸(TBA)值、挥发性盐基氮(TVB-N)值)和微生物指标(菌落总数)测定,并结合低场核磁共振技术表征其水分迁移状态,辅以外观及微观结构观察,进行指标间的相关性分析,以综合评价超高压处理对冷藏鲈鱼片品质及组织结构变化的影响。结果显示:随着贮藏时间的延长,样品的pH值呈先降后升的变化趋势,压力大小与pH值变化正相关,与硬度值、持水力负相关;超高压处理能抑制样品的TBA值、TVB-N值及菌落总数的上升,压力越高,抑制效果越显著。低场核磁共振技术结合持水力数据显示:超高压处理后鱼肉水分迁移变化明显;随着压力的增大,鱼肉样品表面呈乳白色,蒸煮效果显著。观察样品肌肉组织的微观结构得出,经超高压处理后,鱼体肌肉组织变得模糊,肌纤维结构紧致无序,其中300MPa处理组样品呈明显凝胶状。超高压处理能抑制样品的脂肪氧化和微生物生长,但会对样品外观、色泽及持水力产生不利影响。进行指标间的相关性分析得到,TVB-N、TBA值和菌落总数能作为判断鲈鱼鲜度的重要指标。比较各组别间的结果差异性,以250MPa、9min超高压处理的综合评价效果相对较好,能使鲈鱼片的冷藏货架期至少延长4d。

关键词：超高压鲈鱼冷藏品质变化结构变化

液相色谱-串联质谱法测定蔬菜水果中的吡丙醚残留量

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色谱 2009年第4期27卷 421-424页

作者：赵广宇郭德华赵善贞盛永刚邓晓军上海海洋大学食品科技学院上海201306 上海出入境检验检疫局上海200135

建立了测定蔬菜、水果中吡丙醚残留量的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法。样品在醋酸钠缓冲液下用酸性乙腈提取,取1mL提取液用PSA(N-丙基乙二胺)填料净化后,采用CAPCELLPAKC18色谱柱(50mm×2.0mm,3μm)分离,以含0.1%甲酸的乙腈溶... 详细信息

建立了测定蔬菜、水果中吡丙醚残留量的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法。样品在醋酸钠缓冲液下用酸性乙腈提取,取1mL提取液用PSA(N-丙基乙二胺)填料净化后,采用CAPCELLPAKC18色谱柱(50mm×2.0mm,3μm)分离,以含0.1%甲酸的乙腈溶液和含0.1%甲酸的2mmol/L乙酸铵溶液作为流动相进行梯度洗脱,以电喷雾电离三重四极杆串联质谱在正离子多反应监测(MRM)模式下进行测定。吡丙醚在2.5～50μg/L范围内呈线性关系,相关系数为0.9999,在5,50,100μg/kg3个添加水平下的回收率为84.7%～91.5%,相对标准偏差(RSD,n=10)低于10%。该方法操作简便,稳定性和选择性好,灵敏度高(检出限为5μg/kg),适用于蔬菜、水果中吡丙醚残留量的测定。

关键词：液相色谱-串联质谱法吡丙醚水果蔬菜杀虫剂

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漂洗过程中白鲢鱼糜风味物质变化的分析

现代食品科技 2015年第7期31卷 354-360页

作者：马海建施文正付强汪之和上海海洋大学食品学院上海201306

以白鲢为原料,研究了漂洗过程中白鲢鱼糜的呈味核苷酸类物质和游离氨基酸含量的变化,通过电子鼻及气相质谱联用仪(GC-MS)分析了其挥发性成分的变化。结果表明:一次漂洗和二次漂洗后鱼糜中IMP含量显著性减少,三次漂洗后AMP含量显著性减少... 详细信息

以白鲢为原料,研究了漂洗过程中白鲢鱼糜的呈味核苷酸类物质和游离氨基酸含量的变化,通过电子鼻及气相质谱联用仪(GC-MS)分析了其挥发性成分的变化。结果表明:一次漂洗和二次漂洗后鱼糜中IMP含量显著性减少,三次漂洗后AMP含量显著性减少;漂洗过程中一次、二次和三次漂洗后游离氨基酸总量和鲜、甜味氨基酸总量均显著性减少;漂洗过程对白鲢鱼糜的气味有所影响,电子鼻主成分分析(PCA)结果显示二次漂洗和脱水后的两组鱼糜气味相似,其它各组间均能得到有效区分;通过GC-MS分析,未漂洗、一次漂洗、二次漂洗、三次漂洗、脱水后的白鲢鱼糜样品分别检测确认30、27、21、15、18种挥发性物质,主要为己醛、庚醛、壬醛、1-己醇、1-辛烯-3-醇等羰基化合物和醇类。

关键词：白鲢鱼糜呈味核苷酸游离氨基酸挥发性成分

不同干燥方法对海鳗鱼片几种内源酶活力的影响

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现代食品科技 2015年第8期31卷 254-260页

作者：李佳万金庆邹磊钟耀广上海海洋大学食品学院上海201306

干燥能赋予水产品独特风味,而这些风味物质的形成与内源酶有关。本实验通过检测冰温真空干燥,真空冷冻干燥和热风干燥海鳗鱼片中对滋味起主要作用的内源酶(AMP脱氨酶、酸性磷酸酶、组织蛋白酶B和亮氨酰氨肽酶)活力和其催化形成的滋味物... 详细信息

干燥能赋予水产品独特风味,而这些风味物质的形成与内源酶有关。本实验通过检测冰温真空干燥,真空冷冻干燥和热风干燥海鳗鱼片中对滋味起主要作用的内源酶(AMP脱氨酶、酸性磷酸酶、组织蛋白酶B和亮氨酰氨肽酶)活力和其催化形成的滋味物质(IMP和游离氨基酸)的含量,以探究不同干燥处理对内源酶的影响。结果表明:干燥后AMP脱氨酶、酸性磷酸酶、组织蛋白酶B和亮氨酰氨肽酶潜在活力均降低,真空冷冻干燥鱼片的4种酶活力保存率最高,分别为92.99%、85.58%、65.53%和54.26%,冰温真空干燥次之,热风干燥最低。不同干燥方法鱼片中IMP含量间有显著性差异,冰温真空干燥鱼片含量最高,从最初的174.37mg/100 g(干基)增加到625.08 mg/100 g,且游离氨基酸含量增幅最高,达33.07%。因此,冰温真空干燥的海鳗鱼片,4种酶活力保存较好,滋味物质含量最高。

关键词：冰温真空干燥真空冷冻干燥热风干燥海鳗内源酶活力 IMP 游离氨基酸

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降温曲线法快速检测果蔬冷害

现代食品科技 2015年第12期31卷 370-377,386页

作者：解越张敏朱赛赛梁飞侠袁海涛黄汝国上海海洋大学食品学院上海201306

为了研究不同贮藏温度对黄瓜品质及细胞结构的影响,本试验以申青黄瓜为研究对象,将黄瓜置于2℃、8℃、12℃、20℃下贮藏,每隔2 d测定其感官评分、褐变指数、硬度、电解质外渗率、降温曲线、细胞间隙等指标的变化。结果表明,在2℃下,随... 详细信息

为了研究不同贮藏温度对黄瓜品质及细胞结构的影响,本试验以申青黄瓜为研究对象,将黄瓜置于2℃、8℃、12℃、20℃下贮藏,每隔2 d测定其感官评分、褐变指数、硬度、电解质外渗率、降温曲线、细胞间隙等指标的变化。结果表明,在2℃下,随着贮藏时间的延长,感官评分逐渐减低,10 d时黄瓜品质开始变差,褐变指数逐渐增大,12 d时达到71%,硬度逐渐降低,12 d时部分出现腐烂,硬度相比于0 d时下降了43.88%,此时,电解质外渗率增幅已经达到40%,而12℃和20℃则无明显品质变化。利用果蔬冰点及过冷点测试装置测得黄瓜组织降温曲线,温度越变过程提前,降至过冷点的平均速度提高,不同贮藏时间下黄瓜的冰点基本都在-2℃左右。通过观测黄瓜组织细胞间隙的变化,发现细胞间层厚度逐渐增大,2℃下贮藏10 d,L1达到3.307μm,相应的细胞次生壁厚度逐渐减小,L3达到4.233μm。

关键词：贮藏温度黄瓜降温曲线品质细胞结构

不同方法处理的浒苔的小鼠体内抗氧化活性比较

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现代食品科技 2019年第8期35卷 73-77,12页

作者：董晓静王鹏伍彬威海海洋职业学院食品工程系山东威海264300 广东海洋大学食品科技学院广东湛江524025

本研究比较了三种不同方法处理的浒苔在小鼠体内的抗氧化作用,在衰老模型小鼠灌胃给予浒苔原粉(EO),浒苔多糖(EP),浒苔超声处理粉末(EU-L)低剂量,浒苔超声处理粉末(EU-H)高剂量分别为300 mg/kg·d,100 mg/kg·d,300 mg/kg·d,350 mg/kg... 详细信息

本研究比较了三种不同方法处理的浒苔在小鼠体内的抗氧化作用,在衰老模型小鼠灌胃给予浒苔原粉(EO),浒苔多糖(EP),浒苔超声处理粉末(EU-L)低剂量,浒苔超声处理粉末(EU-H)高剂量分别为300 mg/kg·d,100 mg/kg·d,300 mg/kg·d,350 mg/kg·d,7周后检测其对小鼠血清、肝脏、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)含量的影响。结果表明,浒苔产品对小鼠体重增长无影响;其中,血清中CAT含量由模型组的6.90U/m L提高到EP组8.79U/m L,EU-L组8.31 U/mL,EU-H组9.43 U/mL,与模型组对照差异极显著(p<0.01),EU-H组小鼠血清、肝和脑组织的SOD、GSH-Px、CAT含量均显著高于模型组(p<0.01);给予浒苔产品的四组小鼠MDA含量均低于模型组9.94U/m L,7.88U/mg prot,6.63U/mg prot(p<0.05)。说明,浒苔超声粉高剂量组(EU-H)能够有效提高衰老模型小鼠体内抗氧化酶活性,对衰老小鼠的治愈率达90%以上,效果优于浒苔多糖(EP);而且根据剂量比较,浒苔超声粉(EU)可以剂量依赖性地提高衰老小鼠体内抗氧化能力。

关键词：浒苔抗氧化超氧化物歧化酶

不同囤养阶段雌性中华绒螯蟹体肉脂含量和脂肪酸组成的比较

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现代食品科技 2018年第12期34卷 96-103页

作者：彭静文张艳霞从娇娇王锡昌上海海洋大学食品学院上海201306

以三种规格[一级蟹(120±5.00 g)、二级蟹(100±5.00 g)、三级蟹(80±5.00 g)]雌性中华绒螯蟹为对象,通过索氏抽提法和气相色谱法对不同囤养阶段中华绒螯蟹体肉脂含量和脂肪酸组成进行分析。结果表明:三种规格中华绒螯蟹囤养阶段体肉脂... 详细信息

以三种规格[一级蟹(120±5.00 g)、二级蟹(100±5.00 g)、三级蟹(80±5.00 g)]雌性中华绒螯蟹为对象,通过索氏抽提法和气相色谱法对不同囤养阶段中华绒螯蟹体肉脂含量和脂肪酸组成进行分析。结果表明:三种规格中华绒螯蟹囤养阶段体肉脂含量与对照组比较,呈下降趋势。在囤养阶段,三级蟹体肉脂含量呈下降趋势;二级蟹脂含量先下降后上升,第3阶段达最大;一级蟹脂含量先下降后上升,第2阶段达最大。三种规格中华绒螯蟹囤养第4阶段检测出的脂肪酸种类最低(二、三级蟹(14～22种);一级蟹(10～23种))。饱和脂肪酸(SFA)中主要是棕榈酸(C16:0)和硬脂酸(C18:0);单不饱和脂肪酸(MUFA)中含量最高的是油酸(C18:1),其次是棕榈油酸(C16:1);多不饱和脂肪酸(PUFA)中C18:2ω6、C20:5ω3 (EPA)和C22:6ω3 (DHA)三种脂肪酸含量占主要地位。以FAO/WHO推荐的ω3/ω6比例和EPA+DHA值作为评价指标,三种规格的中华绒螯蟹囤养到第二阶段体肉最适合食用,且一级蟹对人体健康更有利。以油酸的含量作为营养品质评价指标,囤养第2阶段的中华绒螯蟹体肉具有较好的营养品质。

关键词：中华绒螯蟹囤养阶段脂含量脂肪酸