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刺参TRAF7基因克隆及其响应高温胁迫下的表达特征分析

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渔业科学进展 2025年第1期46卷 149-160页

作者：赵岩峰廖梅杰葛建龙王锦锦王印庚荣小军李彬谭颜廷上海海洋大学水产与生命学院上海201306 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业农村部海洋渔业与可持续发展重点实验室山东青岛266071 青岛海洋科技中心海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室山东青岛266071

肿瘤坏死因子受体相关因子7(tumor necrosis factor receptor associated factor 7,TRAF7)作为一种细胞内蛋白,参与信号转导,并介导宿主应激防御调控过程。为研究TRAF7在刺参(Apostichopus japonicus)高温胁迫中的作用,本研究利用cDNA... 详细信息

肿瘤坏死因子受体相关因子7(tumor necrosis factor receptor associated factor 7,TRAF7)作为一种细胞内蛋白,参与信号转导,并介导宿主应激防御调控过程。为研究TRAF7在刺参(Apostichopus japonicus)高温胁迫中的作用,本研究利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)和实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR),克隆了刺参TRAF7(AjTRAF7)全长cDNA序列,分析了其结构特征和在基因组中的分布,并检测了该基因在刺参不同组织和高温胁迫过程中体壁组织中的表达变化情况。结果显示,AjTRAF7全长2576 bp,开放阅读框(ORF)长1770 bp,5´UTR长345 bp,3´UTR长461 bp,编码589个氨基酸,预测蛋白分子量为65.6 kDa,理论等电点(pI)为7.52。蛋白序列包含1个RING finger结构域、1个Coiled coil结构域和6个WD40结构域,N端包含1个螺旋区域。该基因预测蛋白包含41个丝氨酸磷酸化位点、20个苏氨酸磷酸化位点和3个酪氨酸磷酸化位点,蛋白N端具有3个天冬酰胺糖基化位点。刺参基因组中比对到2个AjTRAF7基因拷贝,第一个拷贝包含18个外显子和15个内含子,第二个拷贝包含17个外显子和14个内含子。系统进化学分析表明,刺参TRAF7氨基酸序列与蝠海星(Patiria miniata)和紫色球海胆(Strongylocentrotus purpuratus)相似性较高,分别为40.58%和38.37%,刺参与蝠海星和紫色球海胆聚在一支。RT-qPCR结果显示,AjTRAF7在健康刺参各组织中均有表达,其在雌性性腺中表达量最高,体腔细胞中表达量次之,在呼吸树、体壁、肠道、雄性性腺和纵肌中表达量依次降低,各组织间表达量差异显著(P<0.05)。在响应高温胁迫的过程中,与对照组相比,体壁组织中AjTRAF7基因表达量在第2天和第4天显著上升(P<0.05),第6天基因表达开始下降。综上,AjTRAF7基因可能参与刺参应对高温胁迫的表达调控过程,相关结果将为解析刺参应对高温胁迫的分子机制提供科学依据。

关键词：刺参 TRAF7 高温胁迫基因克隆表达特征

提取方式对微拟球藻蛋白理化性质和功能特性的影响

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食品工业科技 2025年第1期46卷 87-96页

作者：黄素艳曹荣刘楠孙永周德庆王珊珊上海海洋大学食品学院上海201306 中国水产科学研究院黄海水产研究所山东青岛266071

以微拟球藻粉为原料,分别采用冻融盐析法、酶提辅助法和碱提酸沉法制备冻融蛋白(Nannochloropsis freeze-thawed extraction protein,NFP)、酶提蛋白(Nannochloropsis enzyme-assisted extraction protein,NEP)和碱提蛋白(Nannochloropsis alkali extraction protein,NAP),并对其理化性质和功能特性进行对比分析。结果表明,碱提酸沉法的提取率为18.70%±0.50%,显著高于其他两种提取方式(P研究结果为微藻蛋白资源在食品领域的开发利用提供了一定的理论依据。

关键词：微拟球藻蛋白质碱提酸沉理化性质功能特性

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液相色谱-串联质谱法在双壳贝类麻痹性贝毒检测中的应用及影响因素研究进展

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食品科学 2025年第1期46卷 218-226页

作者：邓宇翔吴海燕徐希震赵辉辉谭志军郑关超中国水产科学研究院黄海水产研究所农业农村部水产品质量安全检测与评价重点实验室山东青岛266071 上海海洋大学食品学院上海201306 中国水产科学研究院黄海水产研究所海水养殖生物育种与可持续产出全国重点实验室山东青岛266071

麻痹性贝毒(paralytic shellfish poison,PSP)是危害最大、分布最广的海洋生物毒素,给人类健康、渔业经济及海洋环境带来巨大威胁。双壳贝类是消费者摄入PSP的主要来源,随着PSP中毒事件频发,全球对双壳贝类中PSP检测技术的要求越来越高... 详细信息

麻痹性贝毒(paralytic shellfish poison,PSP)是危害最大、分布最广的海洋生物毒素,给人类健康、渔业经济及海洋环境带来巨大威胁。双壳贝类是消费者摄入PSP的主要来源,随着PSP中毒事件频发,全球对双壳贝类中PSP检测技术的要求越来越高。本文首先介绍PSP理化性质,其次从前处理提取净化、仪器条件、基质效应、方法验证方面对液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)法在双壳贝类中PSP检测中的优劣势进行总结,经对比分析发现,目前1%乙酸已成为LC-MS/MS检测技术中最常用的PSP提取试剂,石墨化炭黑填料和亲水相互作用液相色谱分别更适用于净化、分离双壳贝类中PSP提取物,影响基质效应的因素主要为内源性干扰如磷脂、蛋白质等,外源性干扰如检测方法中有机物和聚合物残留等杂质。本文重点分析LC-MS/MS研究发展趋势,以期为双壳贝类中PSP的检测提供参考,也为贝类养殖产业绿色发展及政府监管提供技术支持。

关键词：麻痹性贝毒双壳贝类液相色谱-串联质谱法影响因素

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青岛典型潮间带贝类的种类组成与群落特征

渔业科学进展 2025年第1期46卷 15-29页

作者：原大山刘志鸿马培振孙秀俊周丽青李转转徐东吴彪海水养殖生物育种与可持续产出全国重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所山东青岛266071 青岛海洋科技中心海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室山东青岛266237 上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心上海201306

为了解青岛沿岸潮间带贝类优势种、群落结构等资源状况,本研究分别于2022年5月(春季)和2022年10月(秋季)对青岛沿海基岩海岸、砂质海岸、粉砂淤泥质海岸以及砂质和基岩混合海岸类型的8个典型站位的潮间带贝类资源进行调查,比较、分析了... 详细信息

为了解青岛沿岸潮间带贝类优势种、群落结构等资源状况,本研究分别于2022年5月(春季)和2022年10月(秋季)对青岛沿海基岩海岸、砂质海岸、粉砂淤泥质海岸以及砂质和基岩混合海岸类型的8个典型站位的潮间带贝类资源进行调查,比较、分析了各站位贝类物种组成、优势度和香农–威纳多样性指数、丰富度指数、均匀度指数等群落结构参数,并采用相似性系数聚类和非度量多维排序方法进行群落聚类分析。结果显示,青岛沿海潮间带共鉴定出贝类40种,沧口发现的贝类物种数最多,达到18种,金口最少,仅发现6种;各调查站位的优势种组成存在差异,且同一站位贝类优势种的种类和优势度随季节的变化而不同,春季优势种主要是短滨螺(Littorina brevicula)、砂海螂(Mya arenaria)和矮拟帽贝(Patelloida pygmaea)等,秋季优势种主要是长牡蛎(Crassostrea gigas)、凸壳肌蛤(Musculista senhousia)和菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)等;春季和秋季的多样性指数范围分别为0.85~1.84和0.66~2.00,丰富度指数分别为0.86~1.97和0.62~2.96,均匀度指数分别为0.41~0.84和0.31~0.98,多样性指数和丰富度最高的3个站位为前桃园、鳌山卫和沧口;春秋两季各站位群落聚类结果有所不同,红石崖和金口始终分别为单独一支,沧口和王哥庄始终聚为一类,前桃园和鳌山卫始终聚为一类。研究发现,底质类型对青岛潮间带贝类组成和群落结构特征具有较大影响。本研究查明了青岛不同底质潮间带的贝类资源状况,为青岛潮间带贝类资源的开发、保护和生态修复提供了基础资料。

关键词：潮间带底质群落结构多样性优势种

贻贝肽对厚壳贻贝稚贝生长发育及微生物群落结构的影响

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渔业科学进展 2025年第1期46卷 115-126页

作者：林倩李政杨金龙马蕃梁箫上海海洋大学水产与生命学院科技部海洋生物科学国际联合研究中心上海201306 上海市水产动物良种创制与绿色养殖协同创新中心上海201306 中国-葡萄牙星海“一带一路”联合实验室上海200120

为探究海洋生物活性肽对厚壳贻贝(Mytilus coruscus)生长发育的影响,本研究以厚壳贻贝稚贝为实验对象,通过投喂不同浓度的贻贝肽(0、7、9、10、70和90 mg/L),测定壳长、壳高、湿重等指标,以确定最适贻贝肽浓度,并对投喂前后的稚贝微生... 详细信息

为探究海洋生物活性肽对厚壳贻贝(Mytilus coruscus)生长发育的影响,本研究以厚壳贻贝稚贝为实验对象,通过投喂不同浓度的贻贝肽(0、7、9、10、70和90 mg/L),测定壳长、壳高、湿重等指标,以确定最适贻贝肽浓度,并对投喂前后的稚贝微生物群落进行分析,实验周期为56 d。结果显示,相较于未投喂贻贝肽的对照组,投喂9 mg/L的贻贝肽显著促进稚贝生长,且壳长、壳高和湿重分别提升了27.37%、32.35%和115.49%;同时发现,高浓度贻贝肽(70 mg/L和90 mg/L)对厚壳贻贝稚贝产生了致死效应。通过16S rRNA基因扩增和测序对比分析了28 d和56 d贻贝肽投喂组与未投喂组的厚壳贻贝稚贝微生物组群落结构变化。研究结果显示,投喂9 mg/L贻贝肽改变了稚贝微生物群落结构组成,提高了拟杆菌门(Bacteroidota)和变形菌门(Proteobacteria)的丰度,降低了放线菌门(Actinobacteriota)的丰度;同时,属水平分析发现,贻贝肽投喂组有效增加了鲁杰氏菌属(Ruegeria)、黏着杆菌属(Tenacibaculum)、居海杆菌属(Maribacter)、栖砂杆菌属(Arenibacter)、十八碳杆菌属(Octadecabacter)和希瓦氏菌属(Shewanella)等有益菌的物种丰度,显著减少了红球菌属(Rhodococcus)、气单胞菌属(Aeromonas)等潜在致病菌的丰度。综上,贻贝肽能有效促进厚壳贻贝的稚贝生长发育,并且可以优化厚壳贻贝微生物群落结构,研究成果将为后续开展贻贝肽等海洋生物活性肽对贝类稚贝中间培育以及海水贝类养殖可持续发展提供基础和数据支撑。

关键词：厚壳贻贝生长微生物群落结构贻贝肽

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氨基葡萄糖混合盐的制备

食品工业科技 2002年第4期23卷 48-50页

作者：涂书霞周培根戚晓玉鲁伟上海水产大学食品学院海洋药物研究所上海200090

利用氨基葡萄糖盐酸盐和硫酸镁为起始物制备氨基葡萄糖混合盐。氨基葡萄糖盐酸盐与硫酸镁按摩尔比2∶1在50℃的水相中进行反应,生成一种由质子化氨基葡萄糖和镁离子为阳离子以及氯离子和硫酸根离子为阴离子组成的混合盐,并通过在低温下... 详细信息

利用氨基葡萄糖盐酸盐和硫酸镁为起始物制备氨基葡萄糖混合盐。氨基葡萄糖盐酸盐与硫酸镁按摩尔比2∶1在50℃的水相中进行反应,生成一种由质子化氨基葡萄糖和镁离子为阳离子以及氯离子和硫酸根离子为阴离子组成的混合盐,并通过在低温下加入丙酮使其结晶,经干燥后得到乳白色混合盐晶体。

关键词：药物关节炎风湿病氨基葡萄糖混合盐氨基葡萄糖盐酸盐硫酸镁制备

草鱼不同月龄性腺组织学观察及性别特征基因cyp19a1a和amh的表达分析

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渔业科学进展 2025年第1期46卷 105-114页

作者：祁博李胜杰杜金星肖小芳张东云朱涛雷彩霞刘志军宋红梅上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心上海201306 中国水产科学研究院珠江水产研究所农业农村部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室广东广州510380 湖州师范学院生命科学学院浙江湖州313000

为探讨草鱼(Ctenopharyngodon idella)性腺发生、性别分化及发育规律,本研究对1、2、3、4、5、6、12、24、36和48月龄草鱼性腺组织结构以及性别特征基因cyp19a1a和amh的表达差异进行了分析。组织切片结果显示,2月龄时,首次在生殖嵴中观... 详细信息

为探讨草鱼(Ctenopharyngodon idella)性腺发生、性别分化及发育规律,本研究对1、2、3、4、5、6、12、24、36和48月龄草鱼性腺组织结构以及性别特征基因cyp19a1a和amh的表达差异进行了分析。组织切片结果显示,2月龄时,首次在生殖嵴中观察到原始生殖细胞,标志原始性腺形成。3月龄时,雌性草鱼性腺中观察到卵巢腔和卵巢小叶。4月龄时,观察到卵原细胞,表明其在3月龄时出现解剖学分化,4月龄时出现细胞学分化。4月龄雄性草鱼在性腺中观察到输精导管,5月龄时观察到精原细胞,表明其在4月龄出现解剖学分化,5月龄出现细胞学分化。12、24、36和48月龄草鱼卵巢分别处于发育的第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期,精巢则分别为发育的第Ⅱ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期。荧光定量结果显示,雌性特征基因cyp19a1a在卵巢中的表达量总体呈先上升后下降再上升的趋势,2月龄时显著上调(P研究结果丰富了草鱼的繁殖生理学资料,也为其性别调控技术研究奠定了基础。

关键词：草鱼性别分化组织切片基因表达

超临界流体萃取高效液相色谱法测定总合草苔虫中草苔虫内酯4含量

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中国药学杂志 2003年第12期38卷 907-909页

作者：孙鹏李玲易杨华张淑瑜汤海峰周大铮第二军医大学药学院海洋药物研究室上海200433

目的　建立超临界流体萃取 (SFE)和高效液相色谱 (HPLC)的联用技术测定总合草苔虫中抗癌活性成分的方法。方法　正交设计法考察了影响草苔虫内酯 4 (bryostatin 4 )超临界流体萃取效率的主次效应及最佳萃取条件 ,并以HPLC定量检测bryost... 详细信息

目的　建立超临界流体萃取 (SFE)和高效液相色谱 (HPLC)的联用技术测定总合草苔虫中抗癌活性成分的方法。方法　正交设计法考察了影响草苔虫内酯 4 (bryostatin 4 )超临界流体萃取效率的主次效应及最佳萃取条件 ,并以HPLC定量检测bryostatin 4。结果　SFE萃取的最佳条件为 :压力 4 0MPa ,温度 4 5℃ ,改性剂量 1mL ,萃取体积 15mL。结论　SFE HPLC可用于检测总合草苔虫中的草苔虫内酯成分 ,该方法快速。

关键词：超临界流体萃取高效液相色谱法测定总合草苔虫草苔虫内酯含量

印度洋中西部和大西洋西部水域大眼金枪鱼的食性比较

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生态学报 2007年第1期27卷 135-141页

作者：朱国平许柳雄周应祺姜文新上海水产大学海洋学院上海200090

根据2004年8月至2005年3月大西洋西部水域及2003年12月份至2004年5月份在印度洋中西部水域金枪鱼延绳钓渔业所获取的大眼金枪鱼数据，对两个诃查区域内的大眼金枪鱼食性进行了研究。结果表明，印度洋中西部水域大眼金枪鱼的食物组成包... 详细信息

根据2004年8月至2005年3月大西洋西部水域及2003年12月份至2004年5月份在印度洋中西部水域金枪鱼延绳钓渔业所获取的大眼金枪鱼数据，对两个诃查区域内的大眼金枪鱼食性进行了研究。结果表明，印度洋中西部水域大眼金枪鱼的食物组成包括沙丁鱼、鱿鱼、乌贼等13个饵料类群，其中主要摄食鱿鱼和沙丁鱼；大西洋西部水域大眼金枪鱼主要摄食沙丁鱼、鱿鱼、虾类等13种饵料类群，主要以沙丁鱼为饵，其次为鱿鱼。印度洋中西部水域大眼金枪鱼空胃率非常高，基本上维持在60％以上；大西洋西部水域大眼金枪鱼空胃率相对较低，基本上都在30％以下。印度洋中西部水域大眼金枪鱼平均饱满指数变化不大，基本上维持在0．40～0．55之间。大西洋西部水域大眼金枪鱼平均饱满指数变化也不太大。印度洋中西部水域大眼金枪鱼各月平均饱满指数高于大西洋西部水域，且各月空胃率高于后者。印度洋中西部和大西洋西部水域大眼金枪鱼Shannon-Weiner多样性指数H’基本上都1．50～2．00之间变化。相同调查月份内，印度洋中西部水域大眼金枪鱼食物Pielou均匀度指数J’均高于大西洋西部水域。

关键词：大西洋西部印度洋中西部大眼金枪鱼食性