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免疫学技术实验教学改革初探

中国免疫学杂志 2014年第3期30卷 404-405页

作者：杜冰任华祁灵江文正钱旻华东师范大学生命科学学院上海200241

免疫学技术的应用最早可以追溯到我国北宋时期。人们尝试采用人痘苗接种的方式预防天花。随着生物学技术的发展，免疫学技术早已脱离了经验时期转入到现代免疫学时期，与疾病的诊断、预防和治疗密切相关，成为生命科学研究中最为重的实... 详细信息

免疫学技术的应用最早可以追溯到我国北宋时期。人们尝试采用人痘苗接种的方式预防天花。随着生物学技术的发展，免疫学技术早已脱离了经验时期转入到现代免疫学时期，与疾病的诊断、预防和治疗密切相关，成为生命科学研究中最为重的实验技术涉及到生物学研究的各个方面，与实际应用联系紧密。免疫学作为生命科学发展的前沿学科，以其研究的深度和应用的广度成为沟通生物学基础和临床研究的重桥梁。

关键词：免疫学技术实验教学改革生物学技术生命科学生物学基础北宋时期实验技术科学研究

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上海郊区农田泽蛙种群动态和肥满度状况初探

四川动物 2007年第2期26卷 424-427页

作者：王晓黎王晶琳姜海瑞薛文杰徐宏发华东师范大学生命科学学院上海200062

2005年4～10月，采用样线法，对上海郊区农田泽蛙（Rana limnocharis）非蛰眠期的种群数量和肥满度进行了研究。逐月共捕获泽蛙371只，对不同月份和不同年龄组泽蛙的体长、体重和肥满度进行数据分析。结果表明上海郊区泽蛙的肥满度随不... 详细信息

2005年4～10月，采用样线法，对上海郊区农田泽蛙（Rana limnocharis）非蛰眠期的种群数量和肥满度进行了研究。逐月共捕获泽蛙371只，对不同月份和不同年龄组泽蛙的体长、体重和肥满度进行数据分析。结果表明上海郊区泽蛙的肥满度随不同月份和不同年龄呈现显著性差异。种群在繁殖前的5月份肥满度最高，8月份肥满度最小。肥满度Kwl值随泽蛙年龄的增加而增大，K值随泽蛙年龄的增大而减小。2龄泽蛙的肥满度增幅最大。上海郊区泽蛙的年度种群数量波动呈双峰型，峰值在7月和9月。Kwl值比K值更加敏感。

关键词：泽蛙种群肥满度重/长指标

壬基酚对鲫鱼(Carassius auratus)的雌激素效应研究

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环境科学研究 2004年第3期17卷 60-61,70页

作者：周忠良李康于静孙竹筠华东师范大学生命科学学院上海200062

实验研究了环境雌激素4-壬基酚(NP)对鲫鱼(Carassiusauratus)的剂量-效应关系。雄性鲫鱼腹腔注射不同剂量的17β-雌二醇(E2)(质量分数分别为0 01,0 10,1 00mg kg(注射剂量鱼体重,下同))和4-壬基酚(NP)(质量分数分别为1,10,50,100,200mg... 详细信息

实验研究了环境雌激素4-壬基酚(NP)对鲫鱼(Carassiusauratus)的剂量-效应关系。雄性鲫鱼腹腔注射不同剂量的17β-雌二醇(E2)(质量分数分别为0 01,0 10,1 00mg kg(注射剂量鱼体重,下同))和4-壬基酚(NP)(质量分数分别为1,10,50,100,200mg kg),用ELISA方法测定鲫鱼血浆中卵黄蛋白原含量。结果显示,与对照相比,在注射后14d内,0 01mg kgE2处理组和1 00mg kgNP处理组鲫鱼血浆卵黄蛋白原含量没有显著差异;其他各处理组在注射后8d,血浆卵黄蛋白原含量显著升高(P<0 05),且与暴露浓度呈依赖关系;注射后14d,10,50,100和200mg kgNP处理组的含量依次是对照组的10,59,340和435倍。研究表明,NP对鲫鱼具有明显的雌激素效应。

关键词： 4-壬基酚鲫鱼卵黄蛋白原

新型肝癌标志CA125及其靶向毒素在肝癌生物治疗中的作用研究

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中国免疫学杂志 2014年第3期30卷 342-346页

作者：范鸣滕云飞虞丽平任华何苗壮钱旻杜冰华东师范大学生命科学学院上海200241

目的:对实验室已构建的新型免疫毒素IAB-TAT-BH3在肝癌靶向治疗中的作用进行初步评价。方法:首先通过免疫组化技术对人肝癌组织芯片中CA125的表达进行检测,同时利用RT-PCR、Western blot和流式细胞术从RNA和蛋白水平对肝癌细胞中CA125... 详细信息

目的:对实验室已构建的新型免疫毒素IAB-TAT-BH3在肝癌靶向治疗中的作用进行初步评价。方法:首先通过免疫组化技术对人肝癌组织芯片中CA125的表达进行检测,同时利用RT-PCR、Western blot和流式细胞术从RNA和蛋白水平对肝癌细胞中CA125的表达进行系统分析;然后通过Western blot和流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测免疫毒素IABTAT-BH3与肝癌细胞株SMMC-7721的结合能力,最后采用MTT法检测其对于SMMC-7721的靶向杀伤作用。结果:CA125在人类肝癌组织芯片和肝癌细胞株SMMC-7721中呈现高表达;免疫毒素IAB-TAT-BH3对于SMMC-7721具有良好的结合能力,且与两种对照免疫毒素相比,具有更强的细胞杀伤作用,IC50值约0.3μmol/L。结论:膜蛋白CA125是潜在的肝癌分子靶标,靶向CA125的新型免疫毒素IAB-TAT-BH3在体外对肝癌细胞具有一定的特异性杀伤作用,在肝癌靶向治疗上具有潜在的应用前景。

关键词： CA125 分子靶标肝癌靶向治疗

引领学生进入科研前沿的免疫与遗传学实验教学

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中国免疫学杂志 2008年第11期24卷 1043-1045页

作者：孙剑华张红锋吴奇涵钱旻华东师范大学生命科学学院上海200062

学生实践能力的增强是高等教育国际化过程中，本科教育面临的重要挑战之一。以科研为支撑，开展以研究型为基础的探究式学习是提高学生实践能力的有效途径。“生物学实验教学在保证学生掌握基本技能的同时，引领学生进入研究前沿。综合... 详细信息

学生实践能力的增强是高等教育国际化过程中，本科教育面临的重要挑战之一。以科研为支撑，开展以研究型为基础的探究式学习是提高学生实践能力的有效途径。“生物学实验教学在保证学生掌握基本技能的同时，引领学生进入研究前沿。综合实验的设计与实施是实验教学的薄弱环节，科研一线的教师，要将重复性好的实验转换为学生实验。”

关键词：学生实验实验教学科研遗传学免疫实践能力教育国际化探究式学习

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陕西凤县春季林麝生境的初步分析

四川动物 2008年第1期27卷 115-119页

作者：姜海瑞薛文杰王淯胡忠军肖宇徐宏发华东师范大学生命科学学院上海200062

2006年4～5月，在陕西凤县共设置41个20m×20m的样方和14个生态因子，并以此为基础数据，分析结果表明，林麝春季喜欢选择在海拔1700～2100m、灌木盖度、竹子密度、倒木密度、树桩密度、动物干扰程度均较低、坡度≥40°、半阴半阳坡、... 详细信息

2006年4～5月，在陕西凤县共设置41个20m×20m的样方和14个生态因子，并以此为基础数据，分析结果表明，林麝春季喜欢选择在海拔1700～2100m、灌木盖度、竹子密度、倒木密度、树桩密度、动物干扰程度均较低、坡度≥40°、半阴半阳坡、远离人类生产活动、有土质覆盖的生境。其他生态因子郁闭度、隐蔽级、乔木密度、灌木密度均以适中为准。因子分析的结果表明，前7个公共因子的累计贡献率达到76．63％，基本上反映了林麝春季栖息地的特征。在前7个公共闪子巾，占有较高信息载荷系数的变量依次为灌木盖度、树桩密度、乔木密度、活动基底、隐蔽级、人为干扰、竹子密度。

关键词：林麝生境选择因子分析秦岭西麓

利用体内噬菌体展示技术筛选肝癌组织特异性结合肽

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中华肿瘤杂志 2005年第11期27卷 645-647页

作者：杜冰于静周忠良章平郁萌钱旻华东师范大学生命科学学院免疫学实验室上海200062 华东师范大学生命科学学院脑功能基因组学研究所上海200062 澳大利亚CSIRO动物健康研究所

目的筛选人源肝癌组织特异性结合短肽。方法体外培养人源肝癌细胞株BEL-7402,建立荷瘤裸鼠模型。尾静脉注射噬菌体12肽文库至荷瘤裸鼠体内,循环20 m in后回收肿瘤组织中噬菌体,同时取正常对照组织进行噬菌体效价测定和免疫组化观察。将... 详细信息

目的筛选人源肝癌组织特异性结合短肽。方法体外培养人源肝癌细胞株BEL-7402,建立荷瘤裸鼠模型。尾静脉注射噬菌体12肽文库至荷瘤裸鼠体内,循环20 m in后回收肿瘤组织中噬菌体,同时取正常对照组织进行噬菌体效价测定和免疫组化观察。将回收的噬菌体扩增、纯化,并以此作为起始物进行下一轮筛选。经过3轮体内筛选,得到与肝癌组织或细胞特异结合的肽段。随机挑选噬菌体单克隆进行测序,分析序列同源性后进行体外细胞酶联免疫吸附试验(ELISA)和体内回输实验,验证噬菌体克隆的导向性。结果经过3轮体内筛选,瘤组织中噬菌体的回收率逐步提高,回收量随着输入量的增加迅速增加,而每轮筛选肝组织中的噬菌体回收量始终保持在一个恒定范围,并不随输入量的增加而增加。免疫组化结果显示,第3轮筛选后,瘤组织中的噬菌体得到高水平富集,同时其他组织的非特异性结合降至最低。肝癌细胞特异性结合最强的是A54号单克隆,A67、B2号单克隆次之。B2的导向效果最好,A54次之。通过对噬菌体单克隆的序列分析,初步确定了PSS/PTT基序。结论利用体内噬菌体展示技术,可以成功筛选到与肝癌细胞或组织特异结合的噬菌体肽。

关键词：体内噬菌体展示技术肽库肝肿瘤特异性结合肽

P2Y6稳定干扰乳腺癌细胞系的建立及其增殖能力评价

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第5期28卷 510-513页

作者：杨林立李瑞梅潘新华钱旻杜冰华东师范大学生命科学学院生命医学研究所上海200241

目的:应用shRNA技术,构建P2Y6基因稳定干扰的乳腺癌细胞株,为P2Y6调控乳腺癌发生发展的功能及机制研究奠定基础。方法:以人P2Y6基因为靶序列,设计并合成干扰序列,并将其插入经EcoR I和Age I酶切的PLKO线性化质粒。阳性克隆经EcoRⅠ和Nd... 详细信息

目的:应用shRNA技术,构建P2Y6基因稳定干扰的乳腺癌细胞株,为P2Y6调控乳腺癌发生发展的功能及机制研究奠定基础。方法:以人P2Y6基因为靶序列,设计并合成干扰序列,并将其插入经EcoR I和Age I酶切的PLKO线性化质粒。阳性克隆经EcoRⅠ和NdeⅠ酶切、测序正确后与ps-PAX2、pMD2.G和PLKO重组慢病毒载体共转染293T细胞,包装成完整病毒。病毒经富集后感染乳腺癌细胞BT549,经嘌呤霉素筛选P2Y6稳定干扰的乳腺癌细胞。通过RT-PCR、Western blot等方法检测P2Y6的干扰效率。最后通过MTS实验对P2Y6基因稳定干扰后乳腺癌细胞的增殖能力进行评价。结果:阳性克隆经DNA测序后与预期相符。稳定转染P2Y6shRNA的BT549细胞中P2Y6的mRNA和蛋白表达水平与对照组细胞相比明显下降。P2Y6基因干扰后乳腺癌细胞的增殖能力没有显著变化。结论:成功构建人P2Y6基因表达稳定干扰的乳腺癌细胞株BT549。P2Y6的表达与乳腺癌细胞增殖无明显相关性。

关键词： P2Y6 shRNA 慢病毒增殖乳腺癌细胞

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圈养林麝春季活动节律及时间分配

兽类学报 2008年第2期28卷 194-200页

作者：薛程孟秀祥徐宏发肖宇华东师范大学生命科学学院上海城市化生态过程及恢复生态学重点实验室上海200062 中央民族大学生命与环境科学学院北京100081

2006年春季,使用红外夜间观察记录仪,对崇明东平麝场12只成年林麝(8雌,4雄)的行为进行了24h昼夜连续观察。发现春季林麝的行为有37种,可归并为休息、摄食、运动、社会、维持和排遗6大行为类型,据此,建构了春季林麝的行为谱。根据各行为... 详细信息

2006年春季,使用红外夜间观察记录仪,对崇明东平麝场12只成年林麝(8雌,4雄)的行为进行了24h昼夜连续观察。发现春季林麝的行为有37种,可归并为休息、摄食、运动、社会、维持和排遗6大行为类型,据此,建构了春季林麝的行为谱。根据各行为持续时间比率和频次分析表明,林麝的主要行为为休息;雌麝的摄食行为所占的比率高于雄麝,这是由于春季雌麝妊娠的能量需求较高所致。活动节律呈典型的晨昏双峰型,清晨(4:00～6:00)和傍晚(17:00～19:00)为活动高峰;夜间活动性显著高于白天。

关键词：林麝行为时间分配频次昼夜节律