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Ⅰ型神经纤维瘤病的基因治疗策略与前景

中国修复重建外科杂志 2024年第1期38卷 1-8页

作者：郑婷婷朱倍瑶王智超李青峰上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海交通大学医学院附属第九人民医院Ⅰ型神经纤维瘤病诊疗中心

目的总结Ⅰ型神经纤维瘤病（neurofibromatosis type 1,NF1）基因治疗策略和相关研究进展。方法查阅近年来国内外关于NF1基因治疗的文献，对NF1基因结构、功能及其突变进行分析，并从转基因治疗和基因编辑两方面对基因治疗策略进行深... 详细信息

目的总结Ⅰ型神经纤维瘤病（neurofibromatosis type 1,NF1）基因治疗策略和相关研究进展。方法查阅近年来国内外关于NF1基因治疗的文献，对NF1基因结构、功能及其突变进行分析，并从转基因治疗和基因编辑两方面对基因治疗策略进行深入总结。结果 NF1是由抑癌基因NF1基因突变引起的常染色体显性遗传肿瘤性疾病，因神经纤维瘤蛋白功能受损而致病，临床表现复杂，目前尚无法根治。NF1的基因治疗策略仍处于研究和开发阶段。现有NF1转基因疗法主要是在神经纤维瘤蛋白缺陷的细胞中构建并表达Ras-GTP酶激活蛋白相关结构域基因片段，证实了NF1基因治疗的可行性；未来研究方向主要聚焦于使用拆分载体递送系统，增加单一载体的运载量，以及开发新的递送系统用于靶向递送全长NF1 cDNA。此外，新一代基因编辑工具在NF1等单基因遗传病的治疗领域应用潜力巨大，但效率和安全性尚需进一步验证。结论基因治疗，包括转基因和基因编辑两大技术，有望成为NF1患者重要的新型治疗手段。

关键词：型神经纤维瘤病 NF1基因转基因治疗基因编辑

甲状腺眼病球后组织不同肌群受累差异的原因初探

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中华内分泌代谢杂志 2024年第3期40卷 242-247页

作者：宋诗涵张曹旭李润钏张悦吴枫瑶宋怀东沈勤周慧芳上海交通大学医学院附属第九人民医院眼科上海200011 上海交通大学医学院附属第九人民医院内分泌科上海200011

目的甲状腺眼病患者球后组织不同部位的眼外肌受累严重程度不同,但机制不明。本研究旨在探究不同部位眼外肌中促甲状腺激素受体(thyroid stimulating hormone receptor,TSHR)表达的差异与眼外肌受累程度不同之间的关系。方法分离大鼠的... 详细信息

目的甲状腺眼病患者球后组织不同部位的眼外肌受累严重程度不同,但机制不明。本研究旨在探究不同部位眼外肌中促甲状腺激素受体(thyroid stimulating hormone receptor,TSHR)表达的差异与眼外肌受累程度不同之间的关系。方法分离大鼠的球后组织中的内直肌、外直肌、上直肌和下直肌,通过免疫荧光和荧光定量PCR检测TSHR在4条眼外肌的表达水平。收集斜视手术患者的眼外肌组织,通过荧光检测TSHR的表达及其表达的细胞类型。结果荧光定量PCR结果显示,TSHR在大鼠球后组织内直肌中的表达明显高于外直肌、上直肌和下直肌(内直肌对外直肌,P=0.012;内直肌对上直肌,P=0.015;内直肌对下直肌,P=0.013),但胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1,IGF-1R)无差异。双色免疫荧光结果显示,TSHR与肌卫星细胞的分子标志PAX7共表达,且大鼠和人的内直肌中的表达明显高于另外三条眼外肌。结论TSHR在内直肌肌卫星细胞中特异性高表达,可能是甲状腺眼病内直肌最容易受累的原因。

关键词：甲状腺眼病促甲状腺激素受体内直肌外直肌

肠瘘合并严重腹腔感染患者早期肠内营养支持治疗的安全性评估

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中华胃肠外科杂志 2024年第3期27卷 241-246页

作者：谢天陈晨杨栋梁王文越陈芬何一宁王鹏飞李幼生上海交通大学医学院附属第九人民医院普通外科一科上海200011 上海交通大学医学院附属第九人民医院临床研究中心上海200011

目的评估肠瘘合并严重腹腔感染患者早期肠内营养支持治疗(EEN)的安全性。方法采用回顾性队列研究的方法。收集2017年1月1日至2020年1月1日期间,在上海交通大学医学院附属第九人民医院普通外科一科收治的204例肠瘘合并严重腹腔感染患者... 详细信息

目的评估肠瘘合并严重腹腔感染患者早期肠内营养支持治疗(EEN)的安全性。方法采用回顾性队列研究的方法。收集2017年1月1日至2020年1月1日期间,在上海交通大学医学院附属第九人民医院普通外科一科收治的204例肠瘘合并严重腹腔感染患者的临床资料。以入重症监护室(ICU)48 h内是否成功实施肠内营养支持治疗(EN),将患者分为EEN组和延迟EN(DEN)组。主要研究指标为180 d病死率;次要研究指标为腹腔出血、感染性休克、腹腔开放、血流感染、机械通气和连续性肾脏替代治疗(CRRT)事件发生率。采用logistic回归对死亡危险因素进行分析。结果两组患者在入ICU时血液学及人口学资料比较差异无统计学意义(均P>0.05)。但EEN组患者感染性休克[31.2%(15/48)比15.4%(24/156),χ^(2)=4.99,P=0.025]、CRRT[27.1%(13/48)比9.0%(14/156),χ^(2)=8.96,P=0.003]和180 d病死率[31.2%(15/48)比7.7%(12/156),χ^(2)=15.75,P<0.001]比例显著高于DEN组患者(均P<0.05)。多因素回归分析显示,年龄越大(OR=1.082,95%CI:1.027~1.139,P=0.003)、急性生理学及慢性健康状况评分(APACHEⅡ评分)越差(OR=1.189,95%CI:1.037~1.363,P=0.013)、C反应蛋白水平越高(OR=1.013,95%CI:1.004~1.023,P=0.007)和EEN(OR=8.844,95%CI:1.809~43.240,P=0.007)为肠瘘合并严重腹腔感染患者死亡的独立危险因素。结论EEN可导致肠瘘合并严重腹腔感染患者的不良事件发生,增加死亡风险。此类患者的EEN需审慎实施。

关键词：肠瘘腹腔感染危重症医学营养治疗肠内营养支持治疗,早期

肝硬化失代偿期门静脉高压症病理生理及分子机制改变的研究进展

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第3期44卷 379-384页

作者：樊强吴广博赵劲博郑磊罗蒙上海交通大学医学院附属第九人民医院普外科上海201999

多种病因引起的肝硬化可导致门静脉高压症。处于肝硬化失代偿期的门静脉高压症患者预后显著不佳。由多种并发症引起的患者内环境紊乱通常会演变为肝内外器官功能衰竭。对于由不同病因引起的肝硬化,在早期尚可应用一些缓解药物,但目前关... 详细信息

多种病因引起的肝硬化可导致门静脉高压症。处于肝硬化失代偿期的门静脉高压症患者预后显著不佳。由多种并发症引起的患者内环境紊乱通常会演变为肝内外器官功能衰竭。对于由不同病因引起的肝硬化,在早期尚可应用一些缓解药物,但目前关于肝硬化失代偿期门静脉高压症患者疾病进展的机制尚不明确,也缺乏针对疾病进展的有效治疗方案。因此,揭示肝硬化失代偿期门静脉高压症的病理生理机制,以及寻找治疗疾病的有效药物靶点,成为当前研究的重点。该文总结了在肝硬化失代偿期肝内外器官衰竭的病理生理改变,简述了肝内血管阻力、门静脉系统、心血管系统及炎症介质等相关细胞分子调节机制。通过全面分析肝硬化失代偿期门静脉高压症的病理生理发展进程,能够更好地理解引起病情恶化或缓解的潜在细胞分子机制,有助于提高疾病的诊断准确性和对疾病分期的正确把握。此外,发现阻断疾病恶化的药物治疗靶点将指导临床工作者更好地应对难治性门静脉高压症,改善患者预后。

关键词：肝硬化门静脉高压症病理生理机制治疗靶点

121例头颈部丛状神经纤维瘤手术治疗患者的回顾性研究

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中华整形外科杂志 2024年第2期40卷 169-178页

作者：王薇顾熠辉朱倍瑶谭好朱子骋顾斌胡晓洁杨军王智超李青峰上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海200011 上海交通大学医学院上海200025

目的:头颈部丛状神经纤维瘤(PNF)的治疗是临床难题,在手术治疗、分类、治疗时机和治疗方法上缺乏共识。通过对头颈部PNF手术治疗患者的临床表现、手术情况、肿瘤复发情况、治疗满意度及生活质量改变的分析,为进一步形成共识提供依据。方... 详细信息

目的:头颈部丛状神经纤维瘤(PNF)的治疗是临床难题,在手术治疗、分类、治疗时机和治疗方法上缺乏共识。通过对头颈部PNF手术治疗患者的临床表现、手术情况、肿瘤复发情况、治疗满意度及生活质量改变的分析,为进一步形成共识提供依据。方法:通过病历查阅及电话随访的方式,回顾性分析2012年5月至2022年7月上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科因头颈部PNF进行手术治疗的Ⅰ型神经纤维瘤病(NF1)患者资料。完整收集、统计分析患者的临床资料,采用电话随访方式对患者和(或)家属的术后即刻满意度、远期手术满意度,以及标准化生活质量问卷HRQol和PlexiQol进行调查。根据治疗前后生活质量改变和远期手术满意度,将患者分为手术获益组及非获益组,使用单因素及多因素logistic回归分析远期手术获益患者的临床特点。结果:有完整记录的头颈部NF1入院手术患者共计512例,随访时筛选病史及影像学明确为NF1相关PNF,并取得有效随访的121例患者纳入研究。男70例,女51例,年龄(25.60±12.85)岁,范围7~63岁,其中≤18岁的患者41例,>18岁的患者80例。瘤体以侵袭性生长为主,62.81%(76/121)患者表现出临床功能障碍。41.32%(50/121)患者接受了多次手术治疗,121例患者总计进行了215次手术。手术目的包括改善外观及功能修复,术后并发症发生率为6.05%(13/215)。末次术后随访时间为(51.41±27.66)个月,42.15%(51/121)患者表示术后瘤体有复发。对术后即刻效果比较满意及非常满意的患者占76.03%(92/121),但在远期随访时满意率降至46.28%(56/121)。≤18岁的患者家属对手术造成的瘢痕不满意比例更高,且有更强的再次手术意愿。瘤体复发与否和手术获益密切相关( OR=2.32, P18岁患者( OR=3.49, P=0.004),并且7~12岁年龄段患者的末次术后复发率最高,达到68.42%(13/19);男性患者的复发概率显著低于女性( OR=0.40, P=0.026)。结论:头颈部PNF患者临床表现复杂,临床诊疗应注重充分的术前评估、积极的多学科诊疗协作和综合应用包括手术及靶向药物的治疗方法,以提高安全性及有效性,减少瘤体复发。

关键词：神经纤维瘤丛状 Ⅰ型神经纤维瘤病头颈部肿瘤肿瘤复发

肺癌恶性胸腔积液来源肿瘤细胞的小鼠PDX模型构建及实验验证

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第4期44卷 435-443页

作者：王梦婷陈怡楠轩辕欣阳袁海花上海交通大学医学院附属第九人民医院肿瘤科上海201999

目的·构建肺癌患者恶性胸腔积液(malignant pleural effusion,MPE)肿瘤细胞来源的肿瘤异种移植(patientderived tumor xenograft,PDX)模型,并进行实验验证。方法·从基因表达综合数据集(Gene Expression Omnibus,GEO)下载人肺癌伴MPE单细胞转录组测序公共数据GSE131907和人肺癌实体瘤单细胞转录组测序公共数据GSE203360,对数据进行聚类、差异基因本体功能富集分析,明确应用MPE建模的可行性。同时收集肺癌患者的MPE样本,经离心、裂解红细胞等富集细胞操作后,将其植入非肥胖型糖尿病重症联合免疫缺陷(non-obese diabetic/severe combined immunodeficient,NOD/SCID)小鼠皮下,待移植瘤生长至1000 mm³时进行瘤体传代及保存。对稳定传代移植瘤进行组织病理学检测,通过苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,H-E染色)观察细胞组织形态,免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测肺癌标志物表达情况。结果·经单细胞数据分析发现MPE中肿瘤细胞的增殖功能更强,提示MPE中肿瘤细胞PDX建模或具备更佳成瘤效果;共收集35例肺癌MPE样本,成功构建13例PDX模型,成功率达37.14%;在组织病理学检测中,H-E染色可见移植瘤组织细胞异型性明显,IHC检测显示细胞角蛋白7(cytokeratin 7,CK7)、甲状腺转录因子1(thyroid transcription factor-1,TTF1)和天冬氨酸蛋白酶A(Napsin A)等肺癌标志物均呈阳性表达。结论·通过富集肺癌患者MPE中的肿瘤细胞,成功构建了更为简便高效、可实时动态建模的PDX模型。该模型保留了肺癌患者肿瘤细胞的恶性特征及蛋白表达特性,为肺癌伴MPE患者的基础研究和临床用药指导提供了重要的实验模型工具。

关键词：肺癌恶性胸腔积液原代细胞培养患者来源的肿瘤异种移植模型

基于MRI多参数成像的决策树模型在腮腺肿瘤诊断中的价值

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中华放射学杂志 2024年第5期58卷 503-509页

作者：杨功鑫戴晓庆朱凌陶晓峰上海交通大学医学院附属第九人民医院放射科上海200011

目的通过基于MRI多参数成像构建与临床治疗决策密切相关的腮腺肿瘤诊断决策树模型,并验证其在腮腺肿瘤诊断中的临床价值。方法该研究为横断面研究,回顾性收集2018年6月至2022年12月间上海交通大学医学院附属第九人民医院经病理证实的46... 详细信息

目的通过基于MRI多参数成像构建与临床治疗决策密切相关的腮腺肿瘤诊断决策树模型,并验证其在腮腺肿瘤诊断中的临床价值。方法该研究为横断面研究,回顾性收集2018年6月至2022年12月间上海交通大学医学院附属第九人民医院经病理证实的461例腮腺肿瘤患者的MRI数据,包括腮腺良性肿瘤364例、恶性上皮性肿瘤82例、淋巴瘤15例。按病理结果分层随机抽样分为训练集(326例)和验证集(135例)。训练集中良性肿瘤、恶性上皮肿瘤、淋巴瘤分别为256、59、11例,验证集中分别为108、23、4例。基于MRI和临床特征,通过卡方自动交互检测(CHAID)算法建立决策树模型,通过模型分类诊断,并计算对腮腺良性肿瘤、恶性上皮性肿瘤和淋巴瘤的诊断准确度,绘制受试者操作特征曲线,评价对3种肿瘤单独的诊断效能。结果在训练集中,通过CHAID算法得到肿瘤形状、包膜、表观扩散系数和时间-信号曲线类型4个最佳诊断指标,以此建立了决策树模型。该模型对腮腺良性肿瘤、恶性上皮性肿瘤和淋巴瘤的整体诊断准确度,在训练集为90.8%(296/326),在验证集为94.1%(127/135)。对腮腺良性肿瘤、恶性上皮性肿瘤和淋巴瘤进行独立诊断时,训练集的曲线下面积分别为0.964、0.957、0.980,验证集分别为0.958、0.944、0.992。结论基于MRI多参数的决策树预测模型诊断腮腺良性肿瘤、恶性上皮性肿瘤和淋巴瘤具有较高效能。

关键词：腮腺肿瘤磁共振成像决策树

KHSRP通过ANK3调节前列腺癌细胞对雄激素的反应性

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第4期44卷 417-426页

作者：蔡人杰徐明上海交通大学医学院附属第九人民医院肿瘤科上海201999

目的·研究KH型剪接调节蛋白(KH-type splicing regulatory protein,KHSRP)对前列腺癌细胞增殖能力的影响及其下游基因的表达调控,考察KHSRP在前列腺癌由雄激素依赖型向非依赖型转变过程中的潜在作用及机制。方法·通过重组慢病毒感染... 详细信息

目的·研究KH型剪接调节蛋白(KH-type splicing regulatory protein,KHSRP)对前列腺癌细胞增殖能力的影响及其下游基因的表达调控,考察KHSRP在前列腺癌由雄激素依赖型向非依赖型转变过程中的潜在作用及机制。方法·通过重组慢病毒感染雄激素依赖型前列腺癌LNCaP细胞和雄激素非依赖型前列腺癌DU145细胞,分别构建KHSRP功能性缺失/获得的稳定细胞株,并比较KHSRP在2种细胞之间的功能差异。采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测稳定细胞株中KHSRP、雄激素受体(androgen receptor,AR)及锚定蛋白3(ankyrin 3,ANK3)的表达量。通过细胞增殖实验、平板克隆实验、小鼠成瘤实验等检测KHSRP对LNCaP细胞增殖能力的影响。通过转录组测序(RNA sequencing,RNA-seq)检测KHSRP影响的下游基因,并通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测KHSRP下游基因的mRNA表达量。结合癌细胞系百科全书(Cancer Cell Line Encyclopedia,CCLE)、癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)、基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库,分析研究ANK3和KHSRP在前列腺组织样本中的表达情况以及ANK3在不同前列腺癌细胞株中的表达差异。结果·GEO数据分析结果显示KHSRP在前列腺癌组织中的表达高于良性前列腺组织,提示其与前列腺癌的发生相关。细胞增殖实验、平板克隆实验、小鼠成瘤实验结果显示KHSRP的表达与LNCaP细胞增殖能力呈负相关,提示KHSRP可以抑制前列腺癌细胞的增殖,且KHSRP对LNCaP细胞增殖能力的影响强于对DU145细胞的影响。对LNCaP稳定细胞株的Western blotting和RT-qPCR检测显示KSHRP过表达后LNCaP细胞中AR蛋白质水平下降,但mRNA水平未产生变化,提示KHSRP可以间接调节AR的蛋白质水平。RNA-seq和RT-qPCR结果显示KHSRP与影响AR蛋白稳定性的调节因子ANK3的表达呈正相关,随后的Western blotting证明KHSRP过表达后ANK3蛋白质的表达量明显升高,TCGA数据分析结果进一步说明KHSRP与ANK3的mRNA表达的相关性。根据CCLE和GEO数据,ANK3的表达与前列腺癌的恶性程度也密切相关。结论·KHSRP可能通过ANK3间接调控AR的蛋白稳定性,影响雄激素依赖型前列腺癌细胞的增殖能力,并介导前列腺癌细胞对雄激素反应性的改变。

关键词： KH型剪接调节蛋白(KHSRP) 雄激素受体(AR) 锚定蛋白3(ANK3) 前列腺癌细胞增殖

基于HPLC-QQQ-MS技术探讨炮制对肉苁蓉中5个活性成分的含量影响

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天然产物研究与开发 2024年第1期36卷 86-93页

作者：雷慧博余雅婷韩璐吴岩原永芳俞晓艳上海交通大学医学院附属第九人民医院药剂科上海200011

炮制一般会对中药材的成分及药效产生重要作用,本文为了探讨炮制加工对肉苁蓉成分的影响,建立了同时测定炮制前后肉苁蓉中肉苁蓉苷F、毛蕊花糖苷、毛蕊花糖苷、2′-乙酰基毛蕊花糖苷和松果菊苷的含量的高效液相色谱-串联三重四极杆质谱... 详细信息

炮制一般会对中药材的成分及药效产生重要作用,本文为了探讨炮制加工对肉苁蓉成分的影响,建立了同时测定炮制前后肉苁蓉中肉苁蓉苷F、毛蕊花糖苷、毛蕊花糖苷、2′-乙酰基毛蕊花糖苷和松果菊苷的含量的高效液相色谱-串联三重四极杆质谱法(high-performance liquid chromatography-tandem triple quadrupole mass spectrometry,HPLC-QQQ-MS)的检测方法。采用50%甲醇溶液提取药物粉末,在Agilent Zorbax Eclipse Plus C 18(2.1 mm×150 mm,1.8μm)的色谱柱上,以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,选取负离子多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式,以木通苯乙醇苷为内标成分,以进样量1μL,流速0.3 mL/min,柱温35℃,样品管理器温度8℃于HPLC-QQQ-MS进行同一批次炮制前后肉苁蓉中这五种成分的含量测定。结果显示5种成分在各自范围内线性关系良好,相关系数(r)在0.9929~0.9985之间,平均加样回收率在98.15%~100.2%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)小于4.6%。所建立的研究方法简便准确,可用于肉苁蓉的质量控制,并用于评价炮制对肉苁蓉含量及药效的影响。

关键词：肉苁蓉炮制化学成分含量测定 HPLC-QQQ-MS